提高甘蓝型油菜游离小孢子产胚率的研究

以 10个甘蓝型油菜基因型为材料进行游离小孢子培养 ,对如何提高可培养的基因型范围和产胚率进行了研究。结果表明 ,严格选择小孢子处于单核晚期的花蕾 ,在低温下分离小孢子 ,并采用含活性碳的NLN固液双层培养基 ,可大大提高产胚的基因型范围及产胚率。在固液双层培养基上 ,10个供试材料中有 7个获得了小孢子胚 ,产胚量最高的达 5 80个胚 /蕾。而在单层液体培养基上 ,仅有 4个基因型得到了胚 ,最高产胚量为 4 8个 /蕾。前者比后者平均产胚率提高 1～ 10倍。在小孢子胚发育至球形和早期鱼雷型阶段时 ,添加新培养液进行振荡培养 ,可提高胚胎发育的同步性 ,畸形胚大大减少。经过这些改进 ,使在含琼脂浓度较高的培养基上培养的子叶形胚直接发育成植株的频率大大提高。

苯磺隆在成都地区诱导甘蓝型油菜雄性不育效果研究

通过苯磺隆、唑嘧磺草胺、精喹禾灵和烟嘧磺隆4种化学药物对甘蓝型油菜骨干自交系99-35和09QB48-54在成都地区的杀雄效果研究表明：当油菜主花序最大花蕾长度约1.50~2.00 mm,用苯磺隆第1次叶面喷施,隔10 d左右再第2次喷施,每次单株受药量15~20 m L,浓度为0.05~0.10μg/m L的苯磺隆时,可诱导群体全不育株率100%,且不产生药害,并能保持整个花期雄性不育;每次单株受药量8~10 m L浓度为0.30μg/m L苯磺隆时,可诱导群体不育株率90%以上,但结实率受到一定影响;0.30μg/m L浓度的苯磺隆涂茎二次,可诱导群体全不育株率91.16%;唑嘧磺草胺、精喹禾灵和烟嘧磺隆在本试验中没有杀雄效果。

人工合成甘蓝型油菜抗根肿病遗传研究初报

以普通甘蓝型油菜品种中油821和人工合成甘蓝型油菜品系HW243配制的6个遗传世代群体（P1，P2，F1，BC1，BC2，F2）为材料，采用病区自然鉴定法，对抗根肿病特性进行了初步的遗传规律研究。结果表明：亲本中油821表现为高度感病，HW243为高度抗病，F1群体为高抗；F2群体发生抗性分离，抗感比为3．082：1，经x^2测定符合3：1比例，概率达0．95～0．99。B1群体亦发生抗性分离，抗感比为1：1．174，经，测定符合1：1比例，概率0．3-0．5；而BC2群体中则金为抗病类型。结果分析表明，人工合成甘蓝型油菜HW243的抗根肿病特性受一对显性基因控制。

内源激素与油菜生长发育的研究进展

油菜的生长发育过程受内源激素的调控,花芽发育方面,主要是赤霉素扮演了促进花芽分化的重要角色;在雄性不育特性方面,生长素、细胞分裂素和脱落酸有重要作用;在角果和种子发育方面,生长素与库强度紧密相关,细胞分裂素水平部分地决定了最终角果数目,同时脱落酸与种子成熟有关;在种子休眠方面,内源脱落酸的含量与油菜种子的休眠有关。从油菜生长发育的这几个方面对油菜内源激素的研究作一概述。

油菜基因工程研究进展

近年来 ,油菜的遗传转化研究日趋成熟 ,用于转化的目的基因趋于多样化 ,如 :品质改良、抗病、抗逆、不育基因等 ;较常用的筛选标记基因是新霉素磷酸转移酶基因 (NPTII) ;目前油菜已建立了子叶、下胚轴、茎段、原生质体培养、小孢子培养的再生体系 ;用于油菜基因转化的方法根癌农杆菌介导法、基因枪法、PEG法、激光微束穿刺法、显微注射法等。

我国油菜品质育种研究的进展与展望

我国自上个世纪80年代初开展油菜品质育种工作以来,取得了令人瞩目的成绩。本文从传统方法育种和现代生物技术育种两方面阐述了我国油菜品质育种工作的成绩和进展状况,包括双低油菜育种、黄籽油菜育种以及和现代生物技术如小孢子培养技术、原生质体融合技术、分子标记技术、转基因技术相结合的优质油菜品质育种状况,并针对我国油菜品质育种工作的前景作出了展望。

甘蓝型油菜BnMYC2基因克隆及对植物抗虫胁迫的研究

为了研究髓细胞组织增生蛋白(Myelocytomatosis protein,MYC2)基因与甘蓝型油菜抗虫性的关系,该研究从甘蓝型油菜恢复系R18中克隆获得BnMYC2基因的cDNA序列,并进行了基因表达及转化模式植物拟南芥的抗虫分析。生物信息学分析表明,BnMYC2基因gDNA不具有内含子结构,cDNA完整开放阅读框(ORF)为1833 bp,编码610个氨基酸,推测BnMYC2基因位于甘蓝型油菜C6染色体上,具有bHLH型转录因子的保守结构域HLH。基因同源性分析结果表明,BnMYC2与拟南芥、甘蓝、萝卜的亲缘关系最近,氨基酸的相似度都在98%以上。组织特异性表达分析显示,BnMYC2在甘蓝型油菜的根、茎、叶、花、授粉后27 d的果荚和授粉后35 d的果荚中均有表达,且授粉后27 d的果荚中的表达水平最高。抗虫胁迫实验的结果显示,过表达BnMYC2拟南芥的抗虫基因VSP2的表达水平显著高于对照,推测甘蓝型油菜BnMYC2基因可能作为重要的调节因子参与虫害胁迫响应;MeJA诱导6 h后,VSP2基因在不同基因型拟南芥的表达量都明显增加,与诱导前相比差异显著,表明BnMYC2正向调控VSP2基因的表达,推测BnMYC2通过调控包括VSP2在内的多个标记基因的表达使植物响应虫害胁迫。

3种筛选NPT-Ⅱ标记转基因油菜方法研究

为获得一种简便的筛选含有NPT-Ⅱ标记基因的转基因油菜种子的方法,对卡那霉素溶液叶片涂抹法、种子浸泡法以及卡那霉素MS培养基筛选3种方法进行研究。结果表明,3种筛选方法的最佳卡那霉素选择压为200mg/L;涂抹叶片法4～5天可以明显识别植株对卡那霉素抗性与否,此法筛选到的4株植株PCR检测全部呈阳性,可靠性达100%;浸泡种子法2～3天可以明显识别植株对卡那霉素抗性与否,此法筛选到的5株植株PCR检测全部呈阳性,可靠性100%;MS培养基筛选法一般10天可以明显识别植株对卡那霉素抗性与否,此法筛选到20株植株,移栽后存活5株,PCR检测3株呈阳性,2株是假阳性植株,可靠性为60%。因此,可以认为卡那霉素涂抹叶片和浸泡种子两种方法是转基因油菜进行大规模、快速的筛选及后代的遗传分析的理想方法。

DPPH法评价抗氧化活性研究进展

植物化合物或植物提取物的抗氧化活性的体外评价是研究功能因子的一个重要方面。1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)法常用于评价化合物或植物提取物的抗氧化活性,但由于没有一个标准化的方法,因而不同实验的结果难于相互比较。本文从DPPH法的原理、测定方法、检测波长、DPPH初浓度、反应时间、清除率计算公式、结果表达、评价指标等几个方面对DPPH法做归纳总结,分析几种外界因素对DPPH法的影响,有助于研究者提高认识,从而准确的开展研究工作。

甘蓝型油菜白花性状的主基因+多基因遗传分析

【目的】对甘蓝型油菜白花性状进行量化观察,研究其数量遗传特性,为育种利用提供理论依据。【方法】利用扫描仪和颜色提取软件对油菜新鲜花瓣进行处理,获得花瓣颜色特征值(CIERGB值),选择能反映花瓣颜色差异的B值,应用植物数量性状主基因+多基因混合遗传模型多世代联合分析方法,对甘蓝型油菜杂交组合(HW243×HZ21-1和HW243×中油821)的P1、P2、F1、B1、B2和F2世代群体进行分析。【结果】甘蓝型油菜白花性状表现为一数量性状,其遗传符合两对加性-显性-上位性主基因+加性-显性-上位性多基因遗传模型,以主基因作用为主,多基因的作用相对较小。两对主基因的加性、显性和上位性效应均具有较大的作用。在F2群体中主基因的遗传率为96.94%和95.83%,多基因遗传率为3.93%和2.47%;在B1群体中主基因的遗传率为54.58%和49.57%,多基因遗传率分别为35.64%和46.9%;在B2群体中主基因的遗传率为98.14%和97.67%,多基因遗传率分别为0.98%和2.06%。【结论】甘蓝型油菜白花性状具有数量性状的遗传特性,其遗传符合两对加性-显性-上位性主基因+加性-显性-上位性多基因遗传模型,以主基因效应为主,多基因效应相对较小。主基因的遗传力较高,受环境影响较小。

秋水仙碱诱导南丹参多倍体的研究

目的：探讨秋水仙碱诱导南丹参多倍体的方法。方法：将秋水仙碱加入培养基中采用幼苗、叶片和愈伤组织3种不同的外植体进行诱导。结果：经预培养1周的叶片和愈伤组织以15mg·L^-1秋水仙碱处理1周的诱导效果最好，加倍率可达33．33％，且多数为整株加倍。加倍植株叶片较肥厚宽大、皱折增多、色深、根粗壮，气孔比二倍体明显增大，染色体数为8～64条不等。应用过氧化物酶和酯酶同工酶技术比较分析表明，变异植株与未加倍植株同工酶谱存在明显差异。结论：用秋水仙碱诱导南丹参成多倍体植株是有效的，已有部分植株已加倍成为同源四倍体。

利用人工合成甘蓝型油菜创建油菜新种质

为了拓宽甘蓝型油菜的遗传基础,从四川、重庆、云南和西藏部分地区采(收)集了一批白菜型油菜、白菜和白花芥蓝地方品种,包括一部分白菜型油菜野生种和半野生种,通过远缘杂交,人工合成了一批甘蓝型油菜新材料。这批新材料具有丰富的遗传变异,主要包括特长角、大粒、多分枝、矮秆、黄籽、白花、抗病等重要遗传类型,部分材料具有重要的育种及研究利用价值。

湿害胁迫下硒对油菜出苗率及叶绿素含量的影响

本试验模拟大田温害条件，采用漫种处理和5叶期叶面喷施处理，研究了亚硒酸钠对3个甘蓝型油菜杂交种的出苗率和叶绿素含量的影响。结果表明：硒溶液漫种对油菜出苗率影响不显著，但品种和硒浓度之间存在显著（P〈0．05）的互作效应，二者互作有正效应也有负效应。5叶期喷施21—27μg／mL的硒溶液能极显著（P〈0．01）提高湿害胁迫下油菜幼苗的叶绿素含量；不同品种的油莱幼苗对湿害的反应不一样，其中品种09-3的叶绿素含量最高，生长最旺盛。生产上可参考采用浓度21-27μg／mL的硒溶液对遭受湿害胁迫的油菜幼苗进行叶面喷施处理，缓解湿害胁迫对油菜幼苗光合作用的影响，提高幼苗抗湿性。

甘蓝型油菜耐湿性初步评价和主成分分析

以发芽种子缺氧处理后幼苗耐湿性状为指标,初步评价了60份不同来源甘蓝型油菜耐湿性,并对各指标进行主成分分析和二维排序分析。结果表明:种子缺氧处理严重抑制油菜幼苗的生长,不同甘蓝型油菜耐湿性差异明显且存在广泛的遗传变异;相关分析表明,相对活力指数与相对成苗率、相对根长、相对茎长、相对鲜重、相对含水量呈极显著正相关,与电导率呈极显著负相关。主成分分析筛选出幼苗活力因子、幼苗恢复生长因子、细胞膜稳定性因子等3个对耐湿性贡献较大的主成分,它们对耐湿相关信息的累积贡献率达87.33%。根据相对活力指数大小和二维排序一致结果筛选出1份来自重庆和3份来自德国的强耐湿性甘蓝型油菜品种。

表面活性剂silwet-77对floral-dip转化甘蓝型油菜效果的影响

利用表面活性剂silwet-77辅助渗透进行floral-dip转化甘蓝型油菜的结果表明,0.1%以上的高浓度表面活性剂silwet-77处理对植株的结实率存在明显的抑制作用,且转化不稳定。0.05%浓度的silwet-77处理获得的转化率较高,未用silwet-77处理的转化频率明显下降。同一浓度的表面活性剂处理下,6d内每隔1d进行连续3次浸渍处理转化频率优于1、2次处理。对13170粒T1代种子进行Km抗性筛选获得了103株抗性植株,对抗性植株进行GUS组织化学检测表明,目的基因已经导入到甘蓝型油菜中,抗性植株进一步的分子检测和田间性状鉴定正在进行中。

人工合成甘蓝型油菜特长角变异系的选育

用中国西藏东部采集的1个白菜型油菜地方品种与云南甘蓝类蔬菜白花芥蓝远缘杂交,人工合成了甘蓝型油菜新材料,从杂种后代中通过系统选育,获得了1个特长角变异系,其主花序中部角果平均长度2 0cm左右,果身长16～18cm ,果喙长3cm左右。从中获得的极端最长角果达31 5cm ,果身长2 6 1cm ,果喙长5 4cm。这是迄今芸苔属植物中很少见到的长角果油菜材料。该材料的平均角果长度大约为普通甘蓝型油菜的3倍左右,遗传已基本稳定,定名为川农特长角。本文报导其选育经过和主要特征特性,并对其育种和研究利用价值作了简要分析。

不同环境下甘蓝型油菜含油量的杂种优势及配合力分析

用6个含油量不同的甘蓝型油菜品系,按照Griffing方法I配制30个正反交组合,加上6个自交系亲本,共36个组合,在四川雅安和安县两个试验点进行随机区组试验,对油菜籽含油量杂种优势及配合力进行分析,并观察环境效应。结果表明:含油量在两个不同环境下大多数组合都具有明显的中亲优势,多数组合表现出超亲优势,含油量杂种优势在不同环境下表现有差异,但出现杂种优势的组合具有较高一致性。含油量的广义遗传力大于90%,狭义遗传力大于70%。各材料间的含油量一般配合力和特殊配合力均存在极显著的差异,配合力也受环境的影响,但在不同环境下配合力的表现总体上一致。含油量反交效应达极显著。分析表明,高含油量杂交油菜选育应以高一般配合力的亲本选配为主。

航天诱变对甘蓝型油菜根尖的细胞学效应

对经卫星搭载的甘蓝型油菜不育系及保持系种子当代(SP1)根尖细胞进行了细胞学研究。结果表明,与未搭载对照相比,航天诱变对多数甘蓝型油菜种子根尖细胞的有丝分裂产生了促进效应,同时使根尖细胞产生了较高频率的染色体畸变和微核。分析表明,通过卫星搭载,甘蓝型油菜种子在细胞学水平上发生了真实的诱变效应。与不育系材料相比,航天搭载对保持系材料有着更强的诱变作用。

甘蓝型油菜花瓣发育过程中类胡萝卜素含量变化

为了解不同颜色花瓣不同时期所含主要类胡萝卜素含量差异及其与花色的关系,将甘蓝型油菜花瓣发育划分为5个时期,采用分光光度法和HPLC法,对不同颜色油菜花瓣中总类胡萝卜素及其中3种主要胡萝卜素(叶黄素、番茄红素和β-胡萝卜素)含量进行测定分析。结果表明:油菜花瓣中总类胡萝卜素含量变化与其花瓣颜色变化一致,表明不同时期花瓣颜色变化与总类胡萝卜素含量变化密切相关;不同颜色花瓣中类胡萝卜素含量不同。黄色花中类胡萝卜素含量最高,白花油菜花瓣中类胡萝卜含量最低;叶黄素和β-胡萝卜素含量随花瓣发育逐渐减少,与总类胡萝卜素含量变化一致,而番茄红素含量变化为先增加后减少;不同颜色花瓣之间,3种类胡萝卜素中差异最大的是番茄红素,其在黄花中含量最高,在白花中含量最少。初步推测,总类胡萝卜素对油菜花瓣颜色的形成具有重要作用,而番茄红素则是花瓣颜色形成的主要影响因素。

航天搭载与NaN_3处理对甘蓝型油菜根尖细胞的诱变效应

【目的】观察太空辐射和叠氮化钠对甘蓝型油菜诱变当代(M1)根尖细胞的细胞学效应。【方法】利用中国"实践八号"卫星搭载和叠氮化钠(NaN3)对甘蓝型油菜种子进行诱变处理,观察处理后根尖细胞的有丝分裂指数、染色体畸变率及微核率的变化。【结果】航天搭载促进有丝分裂,复合处理同航天搭载相比,甘蓝型油菜种子的根尖细胞对有丝分裂有抑制效应。同时,复合处理与两个单处理相比,可使多数甘蓝型油菜产生较高频率的染色体畸变。各处理均能诱导油菜根尖细胞产生较高频率的微核,且以航天诱变产生的最多。NaN3在一定程度上降低了甘蓝型油菜种子经空间搭载后的染色体畸变和细胞微核率,促进了空间诱变损伤修复。【结论】卫星搭载与NaN3处理都使甘蓝型油菜在细胞学水平上发生了真实的诱变效应;不育系与其相应保持系表现出一致的诱变效果。