乌梅等20种中药对胸膜肺炎放线杆菌的体外抗菌活性研究

【目的】观察乌梅Fructus mume等20种中药的体外抗胸膜肺炎放线杆菌Actinobacillus pleuropneumoniae活性．【方法】通过乙醇回流、水煎煮和超声波等方法对20种中药进行提取，采用二倍稀释法测定其对胸膜肺炎放线杆菌的体外抗菌活性；并研究抗菌活性较强的几味中药的体外联合抑菌活性．【结果和结论】乌梅、黄连Rhizoma cop-tidis、诃子Terminalia chebula、秦皮Cortex fraxini、地榆Sanguisorbae officinalis、虎杖Polygonum cuspidatum 6种中药提取物对胸膜肺炎放线杆菌的最小抑菌浓度（ Minimal inhibitory concentration ，MIC）范围是6.25～50.00 mg/mL；大青叶Isatis indigotica、茵陈Artemisia capillaris、甘草Glycyrrhiza uralensis和白鲜皮Dictamnus dasycarpus 4种中药提取物的MIC范围是50.00～100.00 mg/mL；黄柏Phellodendron amurense、杜仲Eucommia ulmoides、金银花Lonicera japoni-ca、柴胡Bupleurum chinense、蒲公英Taraxacum mongolicum、板蓝根Baphicacanthus cusia、栀子Gardenia jasminoides和黄芪Astragalus membranaceus等10种中药提取物的MIC＞100.00 mg/mL．联合抑菌试验结果表明，乌梅、黄连、诃子和虎杖两两联合抑菌指数（FICI）≤1，乌梅、虎杖分别与秦皮的FICI＞2．乌梅、黄连、诃子、虎杖、秦皮、地榆对胸膜肺炎放线杆菌均具有较好的体外抗菌活性；乌梅、黄连、诃子和虎杖两两联合为相加、协同作用；秦皮分别与乌梅、虎杖为拮抗作用．

5味中药对鸡白痢沙门氏菌的体外联合抑菌研究

【目的】探讨诃子、虎杖、紫花地丁、夏枯草和何首乌提取物对鸡白痢沙门氏菌的抑制效果。【方法】采用超声波处理、乙醇回流、水浴加热的方法,提取诃子、虎杖、紫花地丁、夏枯草、何首乌5味中药的有效成分,采用二倍试管稀释法分别测定各中药提取物对鸡白痢沙门氏菌的最小抑菌质量浓度(Minimal inhibitory concentration,MIC)和最小杀菌质量浓度(Minimal bactericidal concentration,MBC),并采用肉汤稀释棋盘法,测定中药提取物对鸡白痢沙门氏菌的联合抑菌效果。【结果】诃子、虎杖、紫花地丁、夏枯草、何首乌提取物对鸡白痢沙门氏菌的MIC、MBC值分别为15.60~62.50,15.60~125.00mg/mL(以生药计算)。虎杖、夏枯草、紫花地丁、何首乌与诃子联合用药时,对鸡白痢沙门氏菌的联合抑菌指数(FICI)均为0.25;虎杖与紫花地丁、夏枯草,紫花地丁与夏枯草联合用药时的FICI为1.25~2;何首乌与虎杖、紫花地丁、夏枯草联合用药时的FICI均大于2。【结论】虎杖、夏枯草和诃子提取物对鸡白痢沙门氏菌具有较强的体外抑菌活性。诃子与虎杖、紫花地丁、何首乌、夏枯草联合应用,其抑菌呈协同作用;虎杖与紫花地丁、夏枯草,紫花地丁与夏枯草联合应用,其抑菌呈无关作用;何首乌与虎杖、紫花地丁、夏枯草联合应用,其抑菌呈拮抗作用。

20味中药提取物对无乳链球菌的体外抑菌活性研究

【目的】筛选对无乳链球菌Streptococcus agalactiae具有良好体外抑菌效果的中药．【方法】通过乙醇回流、超声波方法提取20味中药的抗菌活性部位，采用试管二倍稀释法测定黄连Coptis chinensis等20味中药提取物对无乳链球菌的最低抑菌浓度（ Minimal inhibitory concentration ，MIC）和最低杀菌浓度（ Minimal bactericidal concentration ， MBC），并评价抗菌活性较强的几味中药的体外联合抑菌效果．【结果和结论】乌梅Prunus mume、黄连、黄芩Scutel-laria baicalensis、虎杖Polygonum cuspidatum和地榆Sanguisorba officinalis 5味中药提取物对无乳链球菌的MIC范围为7.80～31.25 mg/mL．蒲公英Taraxacum mongolicum、茵陈Artemisia scoparia、秦皮Fraxinus rhynchophylla、艾叶Arte-misia argyi、黄柏 Phellodendron chinense、鱼腥草 Houttuynia cordata、紫花地丁 Violae yedoensis 和白头翁 Pulsatilla chinensis 8味中药提取物的MIC范围为62.50～125.00 mg/mL．何首乌Po．multiflorum、苦参Sophora flavescens、穿心莲Andrographis paniculata、杜仲Eucommia ulmoides、连翘Forsythia suspensa、金银花Lonicera japonica和夏枯草Prunel-la vulgaris 7味中药提取物的MIC范围为250.00～500.00 mg/mL．联合抑菌试验结果表明，黄芩、虎杖、地榆和黄连的联合抑菌指数（FICI）≤1，虎杖、黄芩和地榆的FICI＞2．黄连、黄芩、虎杖和地榆对无乳链球菌均具有很强的体外抗菌活性，地榆、黄连为相加作用，黄连、黄芩和虎杖为协同作用，地榆与黄芩、虎杖为拮抗作用．

18味中药提取物体外抗鸭瘟病毒活性的研究

我国传统中药在临床中广泛用于抗病毒疾病的治疗,该研究以18味传统中药为研究对象,希望找到对鸭瘟病毒具有良好抑制作用的中药原料。首先,通过细胞病变观察法(cytopathic effect,CPE)初步筛选了18味中药水提取物和醇提物进行体外抗鸭瘟病毒活性研究,发现当虎杖醇提物质量浓度为0.062 5mg/mL和0.031 3mg/mL,茜草醇提物质量浓度为0.007 8mg/mL时,可抑制鸭瘟病毒引起的鸭胚成纤维细胞病变。进而通过四甲基偶氮唑盐法[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT]进一步研究了虎杖和茜草醇提物的体外抗鸭瘟病毒活性。结果显示:当虎杖质量浓度为0.062 5mg/mL、茜草质量浓度为0.007 8mg/mL时,对鸭瘟病毒的体外抑制率分别为76.50%、48.91%,虎杖醇提物的半数有效质量浓度(50%inhibitory concentration,IC50)为0.022 7mg/mL,茜草醇提物的IC50>0.007 8mg/mL。提示虎杖和茜草醇提物均有不同程度的体外抗鸭瘟病毒活性,其中虎杖效果优于茜草,具有进一步研究的价值。

沙门氏菌分子生物学研究进展

自1885年Sal mon等分离得到猪霍乱沙门氏菌以来,目前已检出沙门氏菌血清型2500余种,我国已有292个血清型报道[1]。沙门氏菌是重要的人兽共患病病原菌之一,本文就沙门氏菌基因组学、鞭毛蛋白。

鸭疫里默氏杆菌病原及其防控关键技术研究

文章回顾了鸭疫里默氏杆菌的病原鉴定、主要抗原、耐药机制等若干基础问题的研究进展,分析了鸭疫里默氏杆菌全基因组测序工作的完成对进一步深入开展致病机理研究和疫苗研发的重要意义。同时,从我国水禽生产的角度对鸭疫里默氏杆菌病的防控关键技术进行了详细阐述。

乌梅等三味具有抑菌活性中药的最佳提取工艺研究

优选乌梅等三味具有抗胸膜肺炎放线杆菌活性中药的有效物质提取工艺。以浸膏得率、最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)为指标,采用正交设计实验,综合考虑溶剂浓度、料液比、提取次数、提取时间、提取温度等影响因素,对三味中药有效物质提取工艺进行优选研究。优选出的最佳提取工艺为:黄连粗粉70%乙醇浓度(8倍量),加热回流提取2次,每次2 h;乌梅粗粉95%乙醇浓度(10倍量),90℃加热回流提取1次,每次8 h;虎杖粗粉60%乙醇浓度(6倍量),90℃加热回流提取3次,每次2 h。最佳提取工艺下,黄连、乌梅和虎杖三种提取物浸膏对胸膜肺炎放线杆菌的MIC值分别为15.60、10.40、15.60 mg/m L,MBC值分别为26.00、18.20、15.60 mg/m L。

JEV入侵BHK-21细胞内吞途径的初步研究

目的利用Real-time RT-PCR技术研究,对乙型脑炎病毒入侵细胞的内吞途径进行初步研究。方法选用氯丙嗪、制霉菌素和细胞松弛素D3种药物分别处理细胞,以分别阻滞网格蛋白介导内吞途径、细胞膜穴样内陷途径和巨胞饮途径,然后进行JEV感染实验,通过Real-time RT-PCR方法测定感染后1h、12h、24h细胞内的病毒拷贝数。结果与仅实施感染实验、未进行药物处理的对照组比较,3种药物处理组的细胞内病毒拷贝数在感染后各时相点均呈现不同程度的下降,在感染1h、12h和24h后,氯丙嗪处理组细胞内病毒拷贝数分别下降了59.58%,53.34%和61.35%;细胞松弛素D组细胞内病毒拷贝数分别下降了23.59%,30.77%和30.14%;制霉菌素组细胞内病毒拷贝数分别下降了35.56%,34.40%和34.40%。结论乙型脑炎病毒主要利用网格蛋白介导内吞途径进入BHK-21细胞。

α-疱疹病毒US5基因及其编码蛋白研究进展

主要对α-疱疹病毒US5基因及其表达的囊膜糖蛋白gJ的特点进行总结,对其在抗细胞凋亡、宿主细胞呼吸链中的氧化磷酸化作用及调节病毒释放的作用进行阐述,以便深入研究α-疱疹病毒对宿主细胞的感染机制,为进一步开展相关研究提供参考。

重组鸭肠炎病毒载体疫苗研究进展

重组病毒载体疫苗是一种以减毒活病毒为载体承载表达其他病原抗原性基因的新型疫苗,能感染宿主细胞、递呈外源基因所表达的抗原蛋白、诱导机体产生体液免疫应答和细胞免疫应答,从而有效地预防多种疾病。鸭肠炎病毒基因组长约160kb,包含多个非编码区和病毒复制非必需区,可携带多个或较大的外源基因,是构建重组活病毒疫苗的理想载体。随着分子生物学研究的不断深入和分子生物学实验技术的飞速发展,对鸭肠炎病毒基因组进行遗传修饰的技术手段已十分成熟,目前已通过这些技术成功构建了多株重组鸭肠炎病毒活载体疫苗。研究表明构建的重组鸭肠炎病毒活载体疫苗可成功抵抗鸭肠炎病毒和其他相应病原的攻击,具有作为重组病毒疫苗载体的潜力,并在未来的禽类新型疫苗研制中发挥重要作用。本文对以鸭肠炎病毒作为载体的重组病毒活载体疫苗的研究进展进行综述,以期为鸭肠炎病毒载体疫苗的研发提供参考。

肠道病毒与宿主固有免疫系统相互作用的研究进展

肠道病毒（Enterovirus,EV）属于小RNA病毒科,为无囊膜、单股正链RNA病毒,包括肠道病毒A-D型、鼻病毒A-C型以及肠道病毒E-J型等共12个属,包含多种人类和动物病毒,如肠道病毒71型（EV-71）、柯萨奇病毒B3（Coxsackievirus B3,CVB3）、脊髓灰质炎病毒（Poliovirus,PV）等[1,2]。

河南永城采煤塌陷复垦区不同复垦年限土壤理化性质的研究

对采煤塌陷区不同复垦年限土壤理化性质的研究，是合理开发和利用沉陷土地资源的基础性研究工作。因此，对河南省永城市煤矿塌陷复垦区复垦l、3、5年和附近正常农田的O～20oln表层土壤样品进行分析，测定了土壤容重、比重、土壤孔隙度、pH和有机质5个指标，比较不同复垦年限的土壤质量。结果表明，复垦1、3、5年后的土壤容重分别为1．81±0．03、1．75±0．02和1．60±0．02g／cm’，土壤比重分别为2．40±0．03、2．70±0．04和2．86±0．02g／cm’，土壤孔隙度分别为22．60％±0．08％、34．93％±0．11％和43．82％±0．13％，土壤pH分别为7．20±0．10、6．90±0．10和7．10±0．10，土壤有机质含量分别为0．32％±0．叭％、0．49％±0．0l％和0．83％±O．02％。复垦后的土壤比重、土壤孔隙度和土壤有机质3个指标逐年升高，土壤容重逐年下降，土壤pH变化不大。永城市采煤塌陷复垦区随着复垦时间的推移，土壤质量逐步提高，但仍未达到塌陷前水平，土壤有机质极其缺乏，建议进行秸秆还田或种植绿肥，增加土壤有机质。

疱疹病毒US10基因及其编码蛋白研究进展

疱疹病毒US10基因位于其基因组的短独特区,是病毒复制的非必需基因,编码病毒的磷酸化衣壳-皮层蛋白或I型跨膜糖蛋白,可通过特异性识别非经典MHC I型分子的HLA-G胞质尾区,来下调HLA-G的表达量并阻断宿主NK细胞对病毒的杀伤,从而参与病毒的免疫逃逸;该蛋白通过与宿主蛋白相互作用而发挥致病作用,也能调节其它病毒蛋白如糖蛋白E(gE)等的表达。对US10结合RNA的能力及在病毒转录后调控、病毒毒力中的作用有待于深入研究。

鸭瘟诊断方法研究进展

鸭瘟是危害养鸭业的严重传染病,由于其发病率和病死率高、传播速度快、与其他病原引起的传染病具有相似之处且常伴随继发感染,临床诊断有一定难度,因此快速准确的诊断方法对鸭瘟的防治具有重要意义。论文从分子生物学诊断和血清学诊断两方面综述了近年来鸭瘟诊断方法的研究进展,包括多种PCR诊断方法、其他分子生物学诊断方法及常用血清学诊断方法,以期为鸭瘟的综合防控提供参考。

黄病毒E蛋白N-糖基化研究进展

糖基化是蛋白质一种重要的翻译后修饰调控机制。在真核细胞中,糖基化的合成主要包括:N糖基化、O糖基化及糖基磷脂酰肌醇锚3种途径。新生肽链合成时或合成后,糖链与肽链中特定序列(Asn-X-Thr/Ser,其中X为除脯氨酸外的任意氨基酸)的天冬酰胺(N)相连接,所以将该糖基化类型称为N连接糖链,又称N糖基化[1]。在真核细胞中,N糖基化的合成在内质网和高尔基体中完成,糖蛋白中N连接聚糖在内质网中将预先生成的寡糖转运至新生肽链的天冬酰胺残基中,再将其转移至高尔基体内进一步修饰,并在高尔基体糖苷酶和糖基转移酶的作用下.

疱疹病毒ICP22蛋白研究进展

疱疹病毒(herpesvirus)是一类有囊膜结构的双链DNA病毒,典型结构由双链DNA基因组、衣壳(capsid)、皮层(tegument)和囊膜(envelope)组成。其家族庞大,迄今共发现了100多种,分为甲型(α)、乙型(β)、丙型(γ)疱疹病毒亚科。疱疹病毒宿主分布极其广泛,可感染两栖类、禽类、哺乳类、灵长类和人类,主要侵害皮肤、黏膜以及神经组织,严重影响着人类及其他动物的健康。感染细胞蛋白22(infected cell protein 22,ICP22)是US1或其同源基因编码的多功能蛋白,可与细胞和/或病毒成分相互作用而广泛发挥作用,如参与病毒潜伏感染期的建立、与RNA聚合酶Ⅱ(RNA polymeraseⅡ, RNA PolⅡ)相互作用影响病毒和宿主基因转录、影响病毒诱导分子伴侣富集域(virus-induced chaperone-enriched, VICE)区域的形成以及子代病毒粒子的核出芽、涉及细胞凋亡、自噬与抗病毒反应等。本文就疱疹病毒US1及同源基因编码蛋白ICP22的研究进展作一综述,以期为深入开展ICP22与病毒和宿主蛋白相互作用参与病毒复制和致病过程中的机制研究提供参考,对动物疱疹病毒、特别是以ICP22作为靶标的新药研究具有一定的参考价值。

疱疹病毒Us3蛋白对细胞骨架影响的研究进展

疱疹病毒（Herpesviridae）是一种双链DNA病毒，分为α、β和γ疱疹病毒亚科，主要由核心（Core）、衣壳（Cap．sid）、间层（Tegument）及囊膜（Envelope）4部分组成。常见的疱疹病毒包括单纯疱疹病毒1型（Herpes simplex virus，HSV-I）、猪伪狂犬病毒（Pseudorabiesvirus，PRV）、牛疱疹病毒（Bovine herpesviruses，BHV）、马立克氏病毒（Marek’Sdiseasevirus，MDV）等。

口服卵黄抗体对杂交鳢弹状病毒(HSHRV)感染的免疫保护效果

为了研究抗杂交鳢弹状病毒(hybrid snakehead rhabdovirus,HSHRV)卵黄抗体的制备方法并评价其免疫保护效果,将杂交鳢弹状病毒经白油乳化制备疫苗,免疫蛋鸡收集高免蛋,采用喷雾干燥方法制备成卵黄抗体粉,以细胞中和试验评估卵黄抗体中和病毒的效果。按照每kg鱼投喂卵黄抗体0.25 g、0.40 g、0.60 g的比例制备低、中、高3种添加剂量的饲料,持续投喂杂交鳢10 d,在口服免疫第4天时以104 TCID50/0.1mL的杂交鳢弹状病毒江门I株(HSHRV-JMI)病毒经腹腔注射对杂交鳢进行攻毒,并记录6 d内各组死亡情况。结果显示,四次免疫后卵黄抗体中和效价达到高峰,为1∶46.8,抗体维持时间为60d。高中低剂量组的存活率分别为64.4%、70.6%、78.5%;相对保护率分别为61.1%、67.9%、76.5%,三者均显著高于非特异性卵黄抗体对照组(P<0.001)。表明杂交鳢弹状病毒能有效刺激卵黄抗体产生,高效价卵黄抗体经口服免疫后可以有效抑制杂交鳢弹状病毒的侵染,显著提高杂交鳢存活率和相对保护率。

艾叶等20种中药对禽多杀性巴氏杆菌的体外抗菌活性

通过乙醇回流、水煎煮和超声波等方法提取艾叶等20种中药的有效成分,采用二倍稀释法测定其对禽多杀性巴氏杆菌（C48-1,血清型A∶1）的体外抗菌活性;并研究抗菌活性较强的几味中药的体外联合抑菌效果.结果显示,艾叶、黄连、黄柏、秦皮、地榆、虎杖6种中药提取物对巴氏杆菌的最低抑菌浓度值（MIC）范围在6.25-50mg/mL;赤芍、何首乌、茵陈、射干、甘草、蒲公英、白鲜皮7种中药提取物的MIC 值范围在50-100mg/mL;金银花、柴胡、板蓝根、夏枯草、穿心莲、知母、苦参7种中药提取物的MIC值大于100mg/mL.联合抑菌试验结果表明,黄连、黄柏、秦皮、虎杖和艾叶的联合抑菌指数（FICI）≤0.5,黄柏、秦皮、黄连和虎杖的联合抑菌指数（FICI）≥2;秦皮、地榆和黄柏的联合抑菌指数（FICI）≥2.通过以上数据可以看出,黄连、黄柏、地榆、艾叶对巴氏杆菌均具有较好的体外抗菌活性;黄连、黄柏、地榆和艾叶为相加、协同作用;地榆和黄柏为拮抗作用.

中药组方“虎诃紫”的急性毒性试验及对鸡白痢的临床疗效

【目的】探讨中药组方"虎诃紫"的毒性及对鸡白痢沙门菌Salmonella pullorum的疗效.【方法】根据兽药研究技术指导原则,对中药组方提取物进行小鼠灌胃急性毒性试验,同时以人工诱发鸡白痢沙门菌的雏鸡感染模型,按高、中、低(4.20、1.62、0.48 g/d)剂量饮水给药,连续7 d,评价中药组方"虎诃紫"颗粒剂的疗效.【结果和结论】急性毒性试验给药剂量大于5 000 mg/kg,小鼠无死亡,即LD50>5 000 mg/kg,对其进行中药组方提取物最大耐受量的测定,其最大耐受量为40 g/kg;高剂量颗粒剂组治愈率和有效率分别是75.0%和83.3%,中剂量颗粒剂组的治愈率和有效率分别是72.7%和81.8%,低剂量颗粒剂组的治愈率和有效率分别为62.5%和75.0%,而感染对照组的死亡率为40%;χ2检验表明"虎诃紫"颗粒剂高、中剂量组与感染对照组的死亡率差异显著(P<0.05).结果表明:中药组方无毒;高剂量组的治愈率、有效率都高于中、低剂量组,高、中剂量组的死亡率都低于感染对照组,说明高、中剂量组对鸡白痢沙门菌的死亡具有一定的保护作用.