芽苗菜中蜡样芽孢杆菌的污染研究

为了控制芽苗菜工厂化生产中蜡样芽孢杆菌的源头污染,实验采用人工污染芽苗菜种子的方式,对芽苗菜生长、收获、储藏等环节进行蜡样芽孢杆菌变化的全程控制;采用电子扫描显微镜对蜡样芽孢杆菌的附着、内化进行观察;采用基质解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)对蜡样芽孢杆菌进行定性鉴定;利用Baranyi Roberts模型建立芽苗菜储藏过程中蜡样芽孢杆菌生长一级模型,并拟合不同温度下生长曲线。实验结果表明,25.3%的芽苗菜不同程度地受到蜡样芽孢杆菌污染,其中8%的阳性样品污染量大于3 logCFU/g,具有食用安全风险;电镜观察发现,蜡样芽孢杆菌污染可内化到种皮内部;伴随芽苗菜生长,蜡样芽孢杆菌的污染在90 h后有2 logCFU/g左右的衰减,但在收割后蜡样芽孢杆菌增长量会超过4.5 logCFU/g。分别在4℃、 15℃、 20℃、 25℃、 35℃贮藏时,蜡样芽孢杆菌会随着贮藏温度及贮藏时间的变化而变化,符合微生物生物特征。芽苗菜具有蜡样芽孢杆菌污染的高风险,从种子就可带入污染,随着芽苗菜生产过程的推进,蜡样芽孢杆菌的数量会先降低再升高,收割后细菌污染会加重,低温保藏可有效控制污染程度。本研究结果为芽苗菜生产过程中的微生物控制建立基础,对其食用风险防控有积极意义。

月桂酰精氨酸乙酯-壳聚糖涂膜对车厘子保鲜效果及保鲜机理的研究

本研究采用壳聚糖(CS)和蒙脱土(MMT)与月桂酰精氨酸乙酯(LAE)复配,比较不同浓度LAE在CS涂膜中对车厘子的失重率、腐烂率、硬度、Vc含量的影响,探索LAE-CS膜对车厘子的保鲜机理。结果显示,LAE-CS涂膜能有效降低车厘子失重率和腐烂率,阻止果实硬度降低,延缓Vc含量下降。最优保鲜配方为:1.0%LAE/0.05%MMT/1.5%CS。LAE-CS涂膜处理能有效降低车厘子在贮藏期的呼吸强度,延缓超氧化物歧化酶、过氧化物酶、苯丙氨酸解氨酶活性的降低,减少丙二醛生成,抑制多酚氧化酶、果胶酶的活性,从而延迟车厘子的腐烂速度,延长保鲜期。

乳铁蛋白胃蛋白酶水解物分离纯化抗菌肽的研究

文章以乳铁蛋白胃蛋白酶水解液为原料,依次用DA201型大孔吸附树脂、Sephadex G-25、Sephadex G-15凝胶树脂对乳铁蛋白抗菌肽进行分离纯化。结果表明,乳铁蛋白酶解原液抗菌活性为MIC _(E.coli)=0.5 mg/mL和MIC_( S.aureus)=0.5 mg/mL;通过大孔吸附树脂的静态吸附、解吸实验,确定分离条件:以85%乙醇溶液为洗脱剂,上样浓度为30 mg/mL,上样流速为2 mL/min,洗脱流速为1 mL/min,分离组分的抑菌活性为MIC _(E.coli)=0.25 mg/mL和MIC _(S.aureus)=0.25 mg/mL。Sephadex G-25凝胶柱分离条件:以去离子水为洗脱剂,洗脱速度为0.25 mL/min,上样浓度为20 mg/mL,上样体积为1 mL,纯化后得到3个主峰,其中组分b的抑菌活性相对较强,MIC _(E.coli)=0.125 mg/mL,MIC _(S.aureus)=0.125 mg/mL。组分b再经Sephadex G-15凝胶过滤色谱分离出2个峰,其中组分b-1具有较强抑菌活性,MIC _(E.coli)=0.125 mg/mL,MIC _(S.aureus)=0.0625 mg/mL。经分离纯化后的乳铁蛋白抗菌肽对E.coli的抗菌活性提高4倍,对S.aureus的抗菌活性提高8倍。

天竺葵组织培养研究进展

对天竺葵组织培养的研究进展进行了综述,包括外植体的选择、培养基的选择、植物生长调节剂的使用、组培条件、褐化和玻璃化的控制等方面内容,分析了目前天竺葵组织培养中存在的问题,并对天竺葵组织培养发展进行了展望。

姜黄提取物对牦牛肌原纤维蛋白抗氧化性及凝胶特性的影响

该研究在羟基自由基氧化体系诱导牦牛肉肌原纤维蛋白(MyofibrillarProtein,MP)氧化过程中加入姜黄提取物,探索姜黄提取物对氧化蛋白理化性质及结构的影响,以及对MP凝胶结构和消化率的影响。研究表明:姜黄提取物质量浓度<200μg/mL时,对氧化MP的羰基、巯基含量,溶解度、持水性等无显著影响(P>0.05);当姜黄质量浓度在200~800μg/mL时,氧化MP的羰基含量下降为7.44 nmol/mg,巯基含量、溶解度、白度、持水性、凝胶强度增大,各含量的最大值分别为41.6 nmol/mg、29.79%、81.37、90.44%、59.32,姜黄提取物对蛋白氧化有明显的抑制作用;但随着浓度继续升高,姜黄提取物中的酚类物质能破坏蛋白分子结构,使凝胶性能受到破坏,姜黄提取物添加后对牦牛肉MP凝胶的体外消化率无显著影响(P<0.05)。姜黄提取物在200~800μg/mL质量浓度范围内在牦牛肉MP氧化中表现出较好的抗氧化活性,为牦牛肉抗氧化提供一定的理论依据。

DA201-C大孔吸附树脂对乳铁蛋白抗菌肽的分离纯化

该研究以吸附量、树脂动态吸附和不同乙醇浓度(体积分数)梯度洗脱为考察指标,优化了DA201-C大孔树脂对超滤处理后的乳铁蛋白抗菌肽溶液(分子质量<3000 Da)分离纯化的工艺条件。静态吸附结果表明,当树脂吸附12 h后,吸附量为479.7 mg/g、吸附率为95.94%;对吸附饱和的树脂使用不同浓度的乙醇静态解吸,结果显示,75%(体积分数)乙醇解吸率达到95.35%。该研究还确定了最优吸附条件:NaCl浓度0.6 mol/L、上样流速1.5 mL/min和上样质量浓度20 mg/mL。以大肠杆菌和金黄色葡萄球菌抑菌率为指标,用不同浓度乙醇对乳铁蛋白抗菌肽进行梯度洗脱,结果表明,75%乙醇洗脱组分抑菌活性最强,对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌率分别达到80.95%和74.42%,与未纯化前相比提高了12.2%左右。对不同洗脱组分的氨基酸分析,结果显示,抗菌肽的疏水性及正电荷性越大,抗菌活性越强。

月桂酰精氨酸乙酯的抗菌活性及对牦牛鲜肉肠贮藏品质的影响

该研究考察了月桂酰精氨酸乙酯(LAE)的抗菌保鲜活性,得出其对大肠杆菌、绿脓杆菌、弗氏柠檬酸杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、英诺克李斯特菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、黑曲霉的最低抑菌浓度(MIC)分别为32,32,64,32,16,16,8,16,32μg/mL。将LAE单独及与乳酸链球菌素(Nisin)、壳聚糖(CS)复配用于牦牛鲜肉肠的保鲜,考察15 d贮藏期内肉肠色差(亮度值L^(*)、红度值a^(*)、黄度值b^(*))、持水性、硫代巴比妥酸值、酸价的变化。结果显示保鲜效果为:对照<LAE(0.1 g/kg)<LAE(0.3 g/kg)<LAE+Nisin<LAE+CS<LAE+CS+Nisin(P<0.05)。最优保鲜配方为0.2 g/kg LAE+5 g/kg CS+0.3 g/kg Nisin,在贮藏15 d时其酸价、红度值、亮度值、硫代巴比妥酸分别为0.423 mg/g、10.86 mg/g、39.05 mg/g、0.702 mg/kg,第15天时仍保持良好品质。结果表明LAE及其复配保鲜可显著抑制牦牛鲜肉肠脂肪氧化酸败,保证肉肠品质,延长贮藏期。

鮰鱼蛋白ACE抑制肽的酶法制备及分离纯化

以脱脂后的鮰鱼肉为原料,采用分步酶解法制备血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽,通过正交试验优化酶解条件。最佳酶解工艺:调节pH为8,温度为37℃,底物浓度为0.17 g/mL,先加胰蛋白酶,酶活/底物量为6 U/mg,水解1 h后再调节pH为9,温度为55℃,再加入碱性蛋白酶,酶活/底物量为6 U/mg,水解4 h。在此条件下,鮰鱼肉蛋白水解度为12.63%,酶解液ACE抑制率为18.7%。分子量分布分析发现酶解产物分子量主要分布在500 Da以下,占多肽的98.23%。酶解产物经超滤(3 000 Da)分离后ACE抑制率提高至35.4%,再用DA201-C大孔吸附树脂脱盐后ACE抑制率为56.6%,最后用葡聚糖凝胶G-15柱层析进行纯化后得到3个组分,组分G2的ACE抑制率为66.9%。经过分离纯化后的ACE抑制肽活性相比原酶解液提高了3.6倍。

抗菌肽TachyplesinⅠ的分子设计、结构与活性分析

本研究旨在抗菌肽TachyplesinⅠ(TPⅠ)的结构活性基础上,重新设计一种全新的抗菌肽TPⅠ-Y4。保持母肽链长与电荷数不变,将序列中形成TPⅠ两个二硫键的4个半胱氨酸用酪氨酸进行替换后得到TPⅠ-Y4。经生物信息学软件分析,与TPⅠ相比,TPⅠ-Y4的热稳定性更好,亲水性更强,同时具有与母肽相似的结构与抗菌活性。化学合成后经圆二色谱检测发现,TPⅠ-Y4在水相及在模拟细胞膜疏水环境的50%三氟乙醇中都表现出β-折叠结构,疏水环境中TPⅠ-Y4的β-折叠含量高于水相,也高于不同环境中的TPⅠ。抑菌试验表明,TPⅠ-Y4对细菌和真菌都有较强抑菌活性,且对细菌的抑菌活性强于TPⅠ。TPⅠ-Y4对小鼠红细胞溶血性降低,并保留了很强的内毒素中和能力,浓度为40μg·mL^(-1)时中和率可达50%以上。TPⅠ-Y4抗菌活性的提高以及溶血活性的降低,可能与β-折叠强形成者酪氨酸的替代有关,进而导致抗菌肽分子中β-折叠结构增强。