自制肺炎衣原体单克隆抗体检测其特异性抗原对动脉粥样硬化诊断的临床意义

目的探讨采用自制肺炎衣原体单克隆抗体(Cpn-McAb)检测人外周血单核细胞(PBMC)和冠状动脉瘤标本中肺炎衣原体特异性抗原(Cpn-Ag)的临床意义。方法采用自制Cpn-McAb的直接免疫荧光(DI)法检测颈动脉粥样硬化和健康体检者PBMC中Cpn-Ag及冠状动脉瘤和正常冠状动脉标本中Cpn-Ag的表达。结果颈动脉粥样硬化患者和健康体检者PBMC中Cpn-Ag检测结果间差异有显著性意义(P<0.01);粥样硬化冠状动脉瘤标本和正常冠状动脉标本外膜下和/或斑块内Cpn-Ag检测结果间差异有显著性意义(P<0.01)。冠状动脉瘤标本中有大量Cpn-Ag沉积,分别位于外膜下及粥样硬化斑块内,而正常血管壁中仅有少量沉积(P<0.05)。结论PBMC中的Cpn-Ag的检测可为诊治与该病原体相关的疾病提供依据;Cpn可能是动脉粥样硬化形成的原因之一。

冠状动脉瘤组织中肺炎衣原体特异性抗原的表达

目的探讨肺炎衣原体特异性抗原(Cpn-Ag)表达与冠状动脉瘤之间的关系。方法采用自制肺炎衣原体单克隆抗体的直接微量免疫荧光法检测50例冠状动脉瘤标本和20例正常冠状动脉标本中Cpn-Ag的表达。结果冠状动脉瘤和正常冠状动脉标本中Cpn-Ag的阳性率分别是58.0%(29/50)和15.0%(3/20)。冠状动脉瘤标本中有大量Cpn-Ag沉积,分别位于外膜下及粥样硬化斑块内,而正常血管壁中仅有少量Cpn-Ag沉积,两者具有统计学差异(P<0.01)。结论Cpn-Ag在冠状动脉瘤外膜下有高表达率,Cpn可能是参与冠状动脉粥样硬化形成损害的原因之一。

自制与进口肺炎衣原体单克隆抗体的特性比较

目的:自制肺炎衣原体单克隆抗体(Cpn-McAb)与进口Cpn-McAb的特性比较及临床应用。方法:双向琼脂扩散法鉴定自制Cpn-McAb的效价和IgG亚型,用显色法检测单抗与Cpn-MOMP的免疫反应,然后用异硫氰酸荧光素(FITC)标记纯化的IgG。为了评估Cpn-McAb,用自制和进口Cpn-McAb同时检测外周血标本454例。另外,分别从Cpn特异性抗原(Cpn-Ag)阳性的外周血单核细胞(PBMC)标本(A组)中和Cpn-Ag阴性的对照组(B组)中随机各挑选40例,用PCR检测PBMC中的Cpn-DNA。结果:免疫琼脂扩散结果表明,Cpn单抗为IgG2b亚型,扩散效价为1:128。在1:30工作浓度下,微量免疫荧光检测的结果表明,自制Cpn-McAb与鹦鹉热衣原体有较弱的交叉反应;与沙眼衣原体无交叉反应,特性与进口Cpn-McAb一致。自制Cpn-McAb检测PBMC的Cpn-Ag阳性率为53.3%(242/454),进口Cpn-McAb检测PBMC的阳性率为52.6%(239/454),两种单抗检测同时阳性的标本207例,Kappa值是0.704,根据其判断标准提示两者有较高的一致性。A、B两组Cpn-DNA阳性标本分别为38例和2例。结论:自制Cpn-McAb几乎和进口Cpn-McAb一样有较高的特异性和敏感性,有可能替代进口单抗用于临床Cpn感染的检测,有助于相关疾病的诊治。

肺炎衣原体特异性单克隆抗体的研制及应用

采用肺炎衣原体(Chlamydia pneumoniae,Cpn)TW-183的纯化原体免疫BALB/C雄性小鼠,将小鼠脾脏细胞与SP2/0细胞融合,杂交细胞通过有限稀释法克隆,获得1株稳定分泌Cpn-单克隆抗体(Cpn-McAb)的细胞株,单抗属IgG2b亚型及抗Cpn-MOMP抗体。自制Cpn-McAb与鹦鹉热衣原体原体有较弱的交叉反应;与沙眼衣原体原体无交叉反应,特性与进口Cpn-McAb一致。为了评估Cpn-McAb,用自制和进口Cpn-McAb同时检测外周血单核细胞标本454例,Cpn-Ag阳性率分别为53·3%和52·6%,Kappa值0·714,两者有较高的一致性。结果提示,自制Cpn-McAb几乎和进口Cpn-McAb一样有较高的特异性和敏感性,可替代进口单抗用于临床Cpn感染的检测,有助于相关疾病的诊治。