TGF-β1对醛糖还原酶在大鼠系膜细胞及Thy-1肾炎中表达的影响

目的 研究转化生长因子β1(TGF- β1)对醛糖还原酶(AR)在大鼠系膜细胞(MsC)及大鼠抗Thy 1肾小球肾炎模型 (ATG)中表达的影响。方法 采用RT PCR和Westernblot技术分别检测TGF β1刺激后体外培养大鼠系膜细胞AR的表达以 及TGF -β1和AR在ATG中的表达;应用免疫组化检测ATG中TGF -β1、AR的表达,并对染色强度进行图像分析。结果 外源 性TGF- β1作用后,大鼠系膜细胞中AR表达升高,并显示出一定的时间与剂量依赖性。ATG中,随着病程的延长,TGF -β1、AR 表达升高,对免疫组化结果进行图像分析显示,二者表达之间具有相关性(r=0.65,P<0.05)。结论 TGF -β1可以上调其相 关反应性基因AR的表达,后者可能参与了肾小球肾炎发生发展的过程。

系统性红斑狼疮合并胸主动脉瘤破裂

报告1例18岁男性系统性红斑狼疮(SLE)患者,死于夹层主动脉瘤破裂。尸检显示主动脉根部至胸主动脉夹层动脉瘤,长17 cm,主动脉滋养血管炎及小血管周围炎。本例与以往文献报告的类似病例共31例的临床资料及病理情况汇总分析,显示长期激素治疗可能在SLE患者主动脉瘤形成中起重要作用,动脉粥样硬化、主动脉炎、滋养动脉炎、高血压等可参与其形成。

乙型肝炎病理

在笔者1981～1990年收集的1 354例肝穿刺标本中(年龄2个月～94岁,几乎涵盖了人类生命的整个年龄段),共检出20种各类肝病,其中肝炎及其相关肝病(肝硬化和肝癌)为920例(68%).

转染Smad3基因的大鼠肾系膜细胞uPA及PAI-1表达的改变

目的:通过对大鼠肾小球系膜细胞(MsC)转染Smad3基因,观察转染阳性细胞克隆尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)及纤溶酶原激活物抑制因子-1(PAI-1)表达的改变,以进一步阐明转移生长因子-β(TGF-β)介导肾小球硬化发生的作用机制。方法:经脂质体介导将含有Smad3重组表达质粒转染大鼠MsC,用G418筛选及RT-PCR,West-ern blot法鉴定;又分别采用RT-PCR与Western blot法,检测转染阳性细胞克隆uPA及PAI-1表达改变。结果:成功建立高表达Smad3的阳性MsC克隆(Th-8,Th-15),并证实其uPAmRNA及蛋白表达明显降低,而PAI-1 mRNA及其蛋白的表达显著增加。结论:TGF-β可能通过上调Smad3而减少组织内uPA的生成和增加PAI-1的合成,从而促进肾小球硬化的进展。

丙型肝炎病理确诊中的难点

肝组织病理学检查是肝病诊断的重要手段之一。肝穿刺活检损伤较小、操作简便,所获病理信息常为某些肝病诊断的金标准,因而在有条件的医院已广为开展。在肝炎的诊断中,肝穿刺活检不仅能从组织病理学角度确定是否为肝炎,判断炎症和纤维化程度,还可通过组织内病原学检测帮助区分或确定病因。一份完整的肝炎病例,特别是慢性肝炎的肝穿刺活检病理报告应该包括病因、炎症活动程度和纤维化进展情况三方面的内容,这样才能确切而全面地反映病情。

人参皂甙Rh_2对耐药乳腺癌细胞P-糖蛋白和基质金属蛋白酶及其诱导物表达的影响

目的观察人参皂甙Rh2对人乳腺癌MCF7/Adr细胞P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)、基质金属蛋白酶诱导物(extracel-lular matrix metalloproteinase inducer,EMMPRIN)和基质金属蛋白酶1(matrix metalloproteinases1,MMP1)、MMP2、MMP9表达的影响。方法采用MTT比色法检测药物对MCF7/Adr细胞的毒性作用;流式细胞仪测定细胞内阿霉素(adriamycin,ADM)的荧光强度;Real time RT-PCR和Western blot检测细胞P-gp、EMMPRIN、MMP1、MMP2和MMP9mRNA和蛋白水平的变化。结果 ADM组与对照组相比,ADM能上调细胞P-gp、EMMPRIN、MMP1、MMP2和MMP9蛋白表达;人参皂甙Rh2能抑制ADM对细胞P-gp、EMMPRIN、MMP1、MMP2和MMP9蛋白和mRNA水平的上调作用。结论人参皂甙Rh2可以有效逆转乳腺癌细胞耐药细胞系MCF7/ADM的耐药性。

胰腺癌组织中Smad7、uPA及PAI-1的表达及临床意义

目的:研究Smad7、uPA及PAI-1在胰腺癌组织及细胞中的表达水平,以阐明Smad7对胰腺癌侵袭和转移的作用机制。方法:构建胰腺癌组织芯片,采用免疫组织化学方法检测Smad7、uPA及PAI-1蛋白表达情况,并与临床病理资料作对照分析。结果:88例胰腺癌组织标本中Smad7、uPA和PAI-1阳性率分别为72.7%,76.1%和71.6%,明显高于正常胰腺组织中的表达水平(P<0.01)。Smad7、uPA和PAI-1蛋白的阳性表达与胰腺癌患者的性别、年龄、肿瘤的位置及大小、组织病理学分级均无关(P>0.05),而与胰腺癌的临床TNM分期及淋巴结转移密切相关(P<0.01)。Smad7、uPA和PAI-1在胰腺癌组织中的蛋白表达均呈正相关(P<0.01)。结论:Smad7、uPA及PAI-1在胰腺癌中共同高表达,Smad7可能通过增强胰腺癌组织内uPA及PAI-1的生成而起到促进胰腺癌进展的作用。

野生型p53基因转染对人HCC-9204细胞端粒酶活性影响

目的 :探讨肿瘤抑制基因 p5 3对人肝癌细胞端粒酶活性及其催化亚单位hTERT (humantelomerasereversetranscriptase)的影响 ,并探讨可能的机制。方法 :用脂质体介导基因转染法将野生型p5 3(wt p5 3)导入端粒酶 /hTERTmRNA阳性、内源性 p5 3突变的HCC 92 0 4人肝癌细胞中 ;用Westernblot鉴定转染效率 ;PCR ELISA、TRAP 银染、原位杂交和RT PCR法检测细胞端粒酶活性和hTERTmRNA表达 ;用流式细胞仪观察细胞凋亡改变。结果 :外源wt p5 3基因转染后HCC 92 0 4细胞端粒酶活性明显受抑 ,hTERTmRNA表达水平下调 ,bcl 2表达减少 ,细胞呈现凋亡改变。结论 :外源wt p5 3基因表达可抑制人肝癌细胞端粒酶活性 ;端粒酶活化、hTERTmRNA表达存在 p5 3依赖性调节途径。

裸小鼠人胃癌肝转移模型的筛选和建立

目的通过筛选建立裸小鼠人胃癌肝靶向高转移模型。方法采用原位移植技术,将组织学完整的MKN-45肿瘤组织块移植至裸小鼠胃壁上,按照胃原位移植→肝转移→皮下扩增→胃原位移植方法进行反复筛选,观察肿瘤原位移植成瘤率、侵袭和转移及形态学特征(光镜、电镜)。结果筛选出一个裸小鼠人胃癌肝靶向高转移模型,将其命名为MKN-45sci,已传至第5代。肿瘤的原位移植成瘤率、肝转移率和腹腔淋巴结转移率皆为100%,部分动物伴发肺、脾、膈等脏器转移及血性腹水。组织病理学和电镜观察结果证明其特征与原肿瘤相似。结论建立的裸小鼠人胃癌肝转移模型完整地再现了胃癌患者的临床过程。

γ干扰素对肾小球肾炎大鼠肾组织Smad7和Ⅳ型胶原mRNA表达的影响

目的:研究IFN-γ对Thy1肾炎模型大鼠肾组织Sm ad7及Ⅳ型胶原表达的影响,从而为阐明IFN-γ抗肾纤维化机制及治疗肾纤维化提供理论和实验依据。方法:制备大鼠抗胸腺细胞血清(antithymocyte serum,ATS)肾炎模型,经尾静脉一次注射IFN-γ15万IU/kg,采用Northern b lot及免疫组化检测病变肾组织Sm ad7、Ⅳ型胶原的表达水平。结果:注射IFN-γ的ATS肾炎模型大鼠肾组织内Sm ad7的表达增加,Ⅳ型胶原mRNA的表达明显减少。结论:IFN-γ可能是通过上调Sm ad7表达而抑制肾组织Ⅳ型胶原表达的机制,对肾小球纤维化起抑制作用。

泛素-蛋白酶体途径及意义

泛素-蛋白酶体途径介导的蛋白降解是机体调节细胞内蛋白水平与功能的一个重要机制。负责执行这个调控过程的组成成分包括泛素及其启动酶系统和蛋白酶体系统。泛素启动酶系统负责活化泛素,并将其结合到待降解的蛋白上,形成靶蛋白多聚泛素链,即泛素化。蛋白酶体系统可以识别已泛素化的蛋白并将其降解。此外,细胞内还有另一类解离泛素链分子的去泛素化蛋白酶形成反向调节。泛素-蛋白酶体途径涉及许多细胞的生理过程,其调节异常与多种疾病的发生有关。

灵芝提取物对神经元缺氧复氧损伤的保护作用及其机制的离体研究

目的:研究灵芝提取物(GLE)对原代大鼠皮层神经元氧糖剥夺-再复氧(OGD/R)损伤模型的影响,在细胞水平探讨GLE神经保护作用的机制。方法:新生SD大鼠的皮层神经元原代培养至第7d,用GLE预处理神经元OGD/R模型。选取OGD/R后的0h、3h、6h、12h、24h、48h和72h作为观察点,观察GLE干预后对各个时点的细胞形态学、细胞毒作用、细胞线粒体活性、细胞凋亡率及凋亡相关蛋白表达量的影响。结果:GLE(0.1、1、10mg/L)能明显减少神经元LDH的释放,提高线粒体活性。流式细胞术结果证实了GLE能抑制神经元OGD/R损伤导致的凋亡,这种作用甚至能持续至OGD/R后的72h。GLE(0.1、1、10mg/L)下调caspase-3、caspase-8蛋白的表达,GLE(10mg/L)还能下调caspase-9蛋白表达。结论:GLE对OGD/R诱导的神经元损伤有一定的保护作用,可能是有效防治急性缺血性卒中的神经保护药物。

基质金属蛋白酶-9、磷酸化的促血管生成素受体-2在肌肉血管瘤中的表达及意义

目的:检测肌肉血管瘤血管畸形组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及磷酸化的促血管生成素受体(Tie2)的表达,并探讨其意义。方法:收集肌肉血管瘤标本39例、正常颅面部皮下组织标本10例,采用ABC免疫组化染色检测MMP-9、磷酸化的Tie2的表达。结果:MMP-9、磷酸化的Tie2在肌肉血管瘤组织中的阳性表达远高于在正常皮下组织中的表达,差异具有统计学意义(P<0.01);其表达的强度在不同病程、瘤体大小、部位及浸润程度的病例中无明显差异(P>0.05)。结论:MMP-9、磷酸化的Tie2可能参与肌肉血管瘤发生、发展。

罗布麻提取物对神经元缺氧复氧损伤的保护作用

目的研究罗布麻提取物(Apocynum venetumL.Extract,AVLE)对神经元缺氧复氧损伤的保护作用。方法将培养7天的新生SD大鼠皮层神经元细胞随机分为空白对照组、模型组和AVLE低、中、高浓度组。除空白对照组外,其余各组制作原代培养皮层神经元氧糖剥夺(OGD)再复氧模型,AVLE各浓度干预组分别加入浓度为50μg/ml、500μg/ml、5 000μg/ml的AVLE;分别观察各组OGD复氧后的0h、3h、6h、12h、24h、48h和72h等时间点细胞形态学、细胞毒作用、细胞线粒体活性、细胞凋亡率及凋亡相关蛋白表达量的变化情况。结果与模型组比较,AVLE能明显减少神经元LDH的释放,提高线粒体活性,对OGD神经元的保护呈一定的浓度与时间依赖关系。AVLE能显著抑制OGD神经元的凋亡,有效抑制Bax蛋白的表达,上调bcl-2的表达。结论 AVLE对OGD诱导的神经元损伤有一定的神经保护作用,可能成为新颖有效的防治急性缺血性卒中的神经保护药物之一。

一氧化氮合成酶抑制剂L-NAME对妊娠大鼠心血管自主神经调节的影响

目的:研究慢性一氧化氮合成酶(NOS)抑制剂对妊娠大鼠心率变异性(HRV)、血压变异性(BPV)和压力反射敏感性(BRS)的影响。方法:测定清醒、自由活动状态下一氧化氮合成酶(NOS)抑制妊娠SD大鼠和妊娠对照SD大鼠的HRV、BPV和自发性BRS;静脉注射去氧肾上腺素(5μg/kg)测定压力反射对心率的控制功能(BRSHR)。结果:NOS受抑制的妊娠大鼠与对照组相比,HRV低频成分降低(P<0.05),总的BPV及BPV的极低频成分增加(P<0.05),自发性BRS及BRSHR均明显降低(P<0.05)。结论:NO缺乏引起的心血管自主神经调节的变化是引起妊娠大鼠血压升高的原因之一。

Smad7基因转染人胰腺癌细胞后uPA及PAI-1表达的变化

目的:通过对人胰腺癌细胞BxPC3转染Smad7基因,观察转染阳性细胞克隆尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)及纤溶酶原激活物抑制因子-1(PAI-1)表达的改变,进一步阐明Smad7在胰腺癌侵袭和转移中的作用。方法:经脂质体介导将含有Smad7重组表达质粒转染BxPC3细胞,用G418筛选及RT-PCR、蛋白质印迹法鉴定;又分别采用RT-PCR与蛋白质印迹法检测转染阳性细胞克隆uPA及PAI-1的表达。结果:成功建立高表达Smad7的阳性BxPC3克隆(F-16、F-21),并证实其uPA、PAI-1 mRNA及蛋白表达均显著增加。结论:Smad7可能通过增强胰腺癌组织内uPA及PAI-1的生成而起到促进胰腺癌进展的作用。

新生儿单心室伴永存动脉干1例

1病史 患儿，男，6d，因“少吃、少动2d，呻吟1d”入院。母亲系G1P1，患儿胎龄38“周，于2005年8月30日剖宫产分娩，Apgar评分1min内8～9分，5min内10分，脐带绕颈1周，羊水、胎盘无异常，无窒息抢救史，出生体重3100g。母亲在孕早期曾有病毒感染，口服阿莫西林胶囊1～2粒。父母非近亲婚配，无家族遗传性疾病史。入院查体：反应差，面色苍白，唇周微绀；T35．8℃，双肺呼吸音粗，肝肋下3cm、剑下2cm，脾肋下2cm，足趾端较冷。

人肝细胞毛细胆管表达IL-2Rα的研究及意义

目的了解人肝细胞毛细胆管是否表达IL-2Rα,观察其表达特异性和灵敏度。方法对正常人肝组织、慢性乙型肝炎等不同病种人肝组织进行IL-2Rα标记,通过免疫组织化学染色、免疫荧光化学染色及免疫电镜3种方法观察其表达。结果免疫组化染色法和免疫荧光染色法显示IL-2Rα标记人肝细胞膜毛细胆管面定位正确,无非特异性染色,而肝细胞膜的血窦面、细胞质、细胞核不被IL-2Rα标记。酶标记免疫电镜显示人肝细胞膜毛细胆管面有明显电子致密物沉积。结论人肝组织毛细胆管确实表达IL-2Rα,其特异性和灵敏度均优于CEA(多克隆抗体)。