阿莫西林胶囊在中国健康人体内的生物等效性研究

目的:研究阿莫西林胶囊在中国健康人体内的生物等效性。方法:以单中心、开放式、随机、双制剂、两周期、两序列交叉试验设计,共48例受试者(空腹试验和餐后试验各24例),口服0.25 g阿莫西林胶囊受试制剂或参比制剂。高效液相色谱—串联质谱(LC-MS/MS)分析方法测定给药后不同时间阿莫西林的血药浓度,并计算主要药代动力学参数,判定两制剂是否等效。结果:空腹试验显示,受试制剂和参比制剂阿莫西林的药物峰浓度(C_(max))分别为(5483.296±1321.102)ng/mL、(5611.291±1659.407)ng/mL,从时间0到t之间血药浓度—时间曲线下面积(AUC_(0-t))分别为(13255.3±1715.7)h·ng/mL、(13115.5±2091.7)h·ng/mL,从0时到无限时间(∞)的血药浓度—时间曲线下面积(AUC_(0-∞))分别为(13329.4±1718.8)h·ng/mL、(13192.7±2107.1)h·ng/mL,达峰时间(T_(max))均为1.38 h。餐后试验显示,受试制剂和参比制剂阿莫西林的C_(max)分别为(4218.072±780.598)ng/mL、(4156.713±877.752)ng/mL,AUC_(0-t)分别为(13073.9±1584.3)h·ng/mL、(12817.8±1575.5)h·ng/mL,AUC_(0-∞)分别为(13166.8±1606.0)h·ng/mL、(12914.8±1587.2)h·ng/mL,T_(max)均为3.00 h。两种试验制剂C_(max)、AUC_(0-t)、AUC_(0-∞)几何均值比值的90%置信区间(CI)均在可接受的生物等效性范围内(80%~125%)。结论:两种阿莫西林胶囊在中国健康志愿者体内吸收速度和吸收程度生物等效。

利妥昔及其生物类似药在生物样品中的定量分析技术进展

利妥昔是当前主要的单抗靶向治疗药物,伴随着越来越多的相关生物类似药临床评价需求,对于开发快速有效的定量方法来分析生物基质中利妥昔及其生物类似药提出了更高要求。本文综述了配体结合法、液质联用技术以及新兴定量技术检测该品种血药浓度的应用,供分析测试人员在开发利妥昔等单抗药物定量方法时参考。

LC-MS/MS法测定人血浆中阿托伐他汀及其代谢物的浓度及在中国健康志愿者中生物等效性研究的应用

目的建立可测定人血浆中阿托伐他汀(ATO)及其代谢物浓度的LC-MS/MS分析方法,并将其应用于人体生物等效性研究。方法血浆中目标成分采用叔丁基甲基醚∶乙酸乙酯(1∶1)萃取,以ATO-d5、邻位阿托伐他汀(o-ATO)-d5、对位阿托伐他汀(p-ATO)-d5为内标,流动相A为2 mmol·L^(-1)乙酸铵水溶液-乙腈-甲酸(900∶100∶1),B为乙腈,梯度洗脱。采用电喷雾离子源,正离子模式,MRM监测,ATO和内标的离子选择通道分别为m/z 559.3→440.1和564.2→445.2。对健康受试者口服相同剂量的氨氯地平阿托伐他汀钙片(5 mg/10 mg)受试制剂或参比制剂后的血药浓度进行定量分析。结果ATO和o-ATO的线性范围为0.150~20.000 ng·mL^(-1),p-ATO的线性范围为0.015~2.000 ng·mL^(-1);ATO和o-ATO的定量下限均为0.150 ng·mL^(-1),p-ATO为0.015 ng·mL^(-1)。此外,批内和批间精密度的RSD均小于15%。32名健康受试者口服5 mg/10 mg氨氯地平阿托伐他汀钙片参与了该研究。受试者空腹和餐后状态下服用氨氯地平阿托伐他汀钙片受试制剂和参比制剂的血浆药物最大浓度(Cmax)、时间-浓度曲线下面积(AUC0~t和AUC0~∞)的几何均值比值的90%置信区间均在80%~125%内,两制剂具有生物等效性。结论该方法准确可靠,重复性好,进样过程简单,可用于人血浆中ATO及其代谢物的浓度测定。

肠道菌群对药物代谢动力学的影响及其在仿制药质量与疗效一致性评价中的思考

仿制药占我国化药市场的95%以上,其质量直接关系到国民用药的疗效和安全。以药代动力学参数为终点的生物等效性评价是仿制药质量和疗效一致性评价的重要内容。肠道菌群被认为对药物的药代动力学具有重要影响。本文综述了肠道菌群对药代动力学影响并分析其在仿制药质量与疗效一致性评价中的潜在意义。

人类白细胞抗原基因的遗传变异与药物不良反应的关系

人类主要组织相容性复合体编码的人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)分子是一组高度保守且与抗原识别有关的细胞表面蛋白。HLA基因具有高度基因多态性,构成免疫个体差异的基础,与药物不良反应关系密切,如HLA-A*31:01和HLA-B*15:02基因与卡马西平诱导的严重皮肤不良反应有关,HLA-B*57:01基因与阿巴卡韦诱导的药物超敏反应综合征以及氟氯西林和帕唑帕尼诱导的药物性肝损伤有关;HLA-B*35:01基因可作为中药何首乌肝损伤的潜在分子标志物。小分子药物与HLA分子和T细胞受体相互作用的机制尚不清楚,现有的4种认可度较高的机制假说分别为半抗原学说、药理相互作用学说、改变肽库学说和改变T细胞受体学说。

药用辅料对CYP3A活性的影响及其对仿制药质量和疗效一致性评价的指导作用

药物制剂的处方和工艺是保证药物质量和疗效的基础,药用辅料是药物制剂处方的重要组成部分。部分药用辅料可影响CYP3A的活性,继而可能影响其底物在体内的代谢和生物利用度。在中国和美国,相对生物利用度是仿制药研究的关键内容。我国正在推进仿制药质量和疗效一致性评价。因此,了解药用辅料对CYP3A的影响及其对一致性评价的指导作用具有十分重要的现实意义。

高效液相色谱法测定拉莫三嗪片中的有关物质

目的建立高效液相色谱法测定拉莫三嗪片中的有关物质。方法色谱柱为Kromasil C_(18)柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相A为甲醇,流动相B为0.5%三乙胺溶液(用磷酸调节pH值至4.5),梯度洗脱;检测波长为230 nm;流速为0.8 mL·min^(-1);柱温为40℃;进样体积为20 μL。结果已知杂质与主成分及其他未知杂质均能有效分离,各杂质的线性相关系数均大于0.999,平均回收率在90%~108%。以拉莫三嗪为参比,杂质B、杂质C的校正因子分别为2.7、1.4。结论该方法专属性强、灵敏度高、准确度和重复性好,方法简单、经济,可用于拉莫三嗪片有关物质的检查。

缬沙坦氨氯地平片人体药动学和生物等效性研究

目的研究缬沙坦氨氯地平片在健康受试者体内的人体药动学和生物等效性。方法采用随机、开放、四周期、两序列完全重复交叉设计,72例受试者(空腹和餐后实验各36例)单次口服受试制剂(T)或参比制剂(R)(含缬沙坦:80 mg;氨氯地平:5 mg)后,采用液相色谱-串联质谱技术(liquid chromatography tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)测定人血浆中缬沙坦和氨氯地平浓度。选择Phoenix WinNonlin 8.2计算药动学参数,采用参比制剂校正的平均生物等效性(reference-scaled average bioequivalence,RSABE)或平均生物等效性(average bioequivalence,ABE)方法评价缬沙坦的生物等效性,ABE方法评价氨氯地平的生物等效性。结果空腹和餐后受试者单剂量口服缬沙坦氨氯地平片受试制剂和参比制剂后的平均血药浓度-时间曲线表明本研究受试制剂与参比制剂中缬沙坦、氨氯地平的食物影响与原研药说明书一致。空腹实验缬沙坦C_(max)和AUC_(0-t)的个体内变异系数(coefficient of variation within individuals,CVW)≥30%,用RSABE方法评价两参数的生物等效性,缬沙坦受试制剂和参比制剂C_(max)和AUC_(0-t)的几何均值比(geometric mean ratio,GMR)分别为101.03%、101.86%,且单侧95%置信区间(confidence interval,CI)上限均<0;空腹实验缬沙坦AUC_(0-∞)和氨氯地平C_(max)、AUC_(0-72)以及餐后实验缬沙坦C_(max)、AUC_(0-t)、AUC_(0-∞)和氨氯地平C_(max)、AUC_(0-72)的CVW均<30%,用ABE方法评价各药动学参数的生物等效性,各参数的GMR的90%CI均在80.00%~125.00%等效范围,说明两制剂具有生物等效性。结论缬沙坦氨氯地平片受试制剂和参比制剂药动学参数无明显差异,两制剂生物等效。

基于云架构的慢病患者随访穿戴设备数据采集平台的构建

真实世界数据收集是开展真实世界研究的关键环节,为提高真实世界研究的数据质量,推动真实世界数据研究及应用,构建信息化的数据采集手段尤为必要。本文按照“数字医疗”概念进行设计,融入真实世界研究方法,基于云架构搭建了慢病患者随访穿戴设备数据采集平台,实现慢病患者居家监测数据与电子数据采集系统实时对接,保障数据从产生、传输到存储全过程自动化。该电子平台已实现睡眠障碍患者睡眠监测仪与电子采集系统之间直接的数据交换,有效避免了人工录入所产生的错误,确保真实世界数据真实、准确、完整、可溯源、合规。基于云架构的真实世界数据电子采集平台推动了源数据电子化发展,为慢病真实世界研究提供了新的思路和方法。

抗菌药物静脉给药对血浆氧化三甲胺水平的影响

目的探讨抗菌药物静脉给药对血浆氧化三甲胺(TMAO)水平的影响。方法选取湘南学院附属医院2020年10月至2021年8月收治的合并感染性疾病且静脉使用抗菌药物超过7 d的患者228例(男130例,女98例),采用超高效液相色谱串联质谱法检测抗菌药物治疗前后患者的血浆TMAO水平。分析性别、年龄、抗菌药物种类及用药时长、合并心血管疾病(CVD)对TMAO水平的影响,以及感染性指标(C反应蛋白、白细胞计数、中性粒细胞占比、红细胞沉降率、降钙素原)与TMAO水平的相关性。结果与抗菌药物使用前比较,患者使用7 d时的血浆TMAO水平显著降低(P<0.01),血浆TMAO水平单用β-内酰胺类药物后显著降低(P<0.01),单用喹诺酮类药物后无显著变化(P>0.05);TMAO水平在不同性别患者间无显著差异(P>0.05),且随着年龄的增长总体呈升高趋势;与使用1~7 d及8~14 d比较,使用15~21 d的血浆TMAO水平显著降低(P<0.01);合用与未合用益生菌患者的血浆TMAO水平无显著差异(P>0.05);合并CVD患者的血浆TMAO水平较未合并患者显著升高(P<0.01)。各感染性指标检测值与TMAO水平均无显著相关性(P>0.05)。结论静脉给予抗菌药物能显著降低感染性疾病患者的血浆TMAO水平,且降低程度可能与用药时长及是否合并CVD有关。

6 Hz角膜点燃癫痫动物模型的研究进展

耐药性癫痫是临床上癫痫防治的重大难题。癫痫动物模型是研究癫痫发病机制及筛选抗癫痫药物和探究药物作用机制的有力工具,6Hz角膜点燃癫痫模型是一种优良的耐药性癫痫动物模型,被美国NIH推荐用于评价新药对抗耐药性癫痫的筛选工具。然而,迄今国内外未见6Hz点燃癫痫动物模型的系统报道,现从该模型的发展历史、制作方法、症状表现、致病机制和应用现状等方面进行综述,以期提供一种探究耐药性癫痫发病机制和筛选耐药性癫痫治疗药物的有力工具和标准模型。

可溶性环氧化物水解酶与肝脏疾病

可溶性环氧化物水解酶(soluble epoxide hydrolase,sEH)是一种双功能同型二聚体酶,于1973年被Gill等[1]在研究类似昆虫保幼激素萜类环氧化物的代谢时发现,因其主要定位于细胞可溶性组分而得名。近年来大量研究表明,sEH在心血管疾病、神经系统疾病和代谢性疾病等多种疾病中发挥着重要作用[2-4],已被作为疾病治疗的新靶点而进行研究,且已有sEH抑制剂进入了人体临床试验。本文综述了sEH与肝脏疾病之间的关系,以期为sEH作为肝脏疾病治疗新靶点的研究提供参考。

短链脂肪酸作为信号分子在肠道炎症中的研究进展

肠道菌群代谢物短链脂肪酸在机体内可作为信号分子,在细胞外激活G蛋白偶联受体,在细胞内抑制组蛋白脱乙酰酶,起抗炎作用。本文就短链脂肪酸的来源、组成、合成、分布,短链脂肪酸作为信号分子在肠道炎症发生发展中的作用及其潜在分子机制进行综述。

中药防治抗精神病药物所致代谢功能异常的研究进展

抗精神病药物是临床上治疗精神类疾病(如精神分裂症)的首选方案,然而却有导致患者代谢功能异常的风险。抗精神病药物所致的代谢功能异常(AIMD)的发病机制尚不明确,可能是多靶点共同导致的结果。中医理论讲求“辨证论治”和“整体观念”,因此中药在防治AIMD等复杂疾病中有独特的优势和作用。本文就近10年中药汤剂、中成药和中药有效成分防治AIMD的研究进行综述,为开展深入的机制研究提供理论依据。

高糖通过mTORC2-PKM2信号通路促进内皮细胞MMP-1的表达

目的:探讨高糖条件下M2型丙酮酸激酶(pyruvate kinase isozyme type M2,PKM2)对内皮细胞基质金属蛋白酶-1(matrix metalloproteinase-1,MMP-1)表达的影响及其机制。方法:用低、中、高浓度(5.5,15.0,30.0 mmol/L)的D-葡萄糖孵育人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)72 h后,采用蛋白质印迹法检测PKM2,p-PKM2 Y105及其上下游分子的表达,检测PKM2四聚体/二聚体状态,结合免疫荧光分析检测PKM2核转位情况。通过使用siRNAs,PKM2抑制剂TEPP-46和哺乳动物雷帕霉素受体(mammalian target of rapamycin,mTOR)抑制剂雷帕霉素研究mTOR复合体,PKM2和MMP-1之间的调控关系。使用免疫共沉淀技术验证mTOR复合体和PKM2的相互作用。结果:高糖上调HUVECs中p-PKM2 Y105,MMP-1,PKM2四聚体,Rictor的蛋白质表达,促进PKM2核转位。沉默PKM2的表达或使用PKM2抑制剂TEPP-46可以阻止高糖引起的MMP-1的蛋白质表达上调。雷帕霉素逆转高糖引起的p-PKM2 Y105和MMP-1的蛋白质表达上调。在高糖情况下,沉默Rictor后p-PKM2 Y105的蛋白质表达下调,而沉默Raptor后p-PKM2 Y105的表达上调。免疫共沉淀结果表明Rictor与PKM2存在直接结合。结论:高糖条件下磷酸化的PKM2促进内皮细胞MMP-1表达,mTORC2参与了高糖诱导的PKM2磷酸化。

氧化三甲胺与炎症性疾病

体内高水平的肠道菌群代谢产物氧化三甲胺(trimethylamine N-oxide,TMAO)能够促进炎症性疾病的发生发展。本文就TMAO与糖尿病、动脉粥样硬化和心力衰竭等炎症性疾病的关系以及TMAO引起炎症性疾病的潜在分子机制予以综述。

UPLC-MS/MS法测定人血浆中20(S)-原人参二醇的浓度

目的:建立测定人血浆中20(S)-原人参二醇(简称为"PPD")浓度的方法。方法:血浆样品经乙腈沉淀蛋白后,以非那雄胺为内标,采用超高效液相色谱-串联质谱法测定。色谱柱为Waters ACQUITY UPLC HSS T3,流动相为5 mmol/L碳酸氢铵溶液-乙腈(梯度洗脱),流速为0.4 mL/min,柱温为40℃,进样量为10μL;离子源为电喷雾离子源,以多反应监测模式(MRM)进行负离子扫描,用于定量分析的离子对分别为m/z 459.40→375.20(PPD)、m/z 371.30→315.30(内标)。同时将该法用于临床样品的测定。结果:PPD检测质量浓度的线性范围为0.25~30.00 ng/mL(r=0.9992),定量下限为0.25 ng/mL;批内、批间RSD均小于10%,相对误差(RE)为-14.61%~12.69%;提取方法和基质效应均不影响PPD的定量测定。人参皂苷CK片100 mg组、人参皂苷CK片200 mg组、人参皂苷CK片300 mg组类风湿性关节炎患者口服相应药物第84天时的平均cmax分别为18.06、30.03、27.00 ng/mL,中位tmax分别为12.0、6.0、12.0 h,平均AUC0-t分别为622.52、668.15、1155.97 ng·h/mL。结论:本研究成功建立了测定人血浆中PPD浓度的方法,且方法灵敏、准确、稳定,操作简便,血浆用量少,可用于临床样本的定量测定。

拉莫三嗪片在中国健康受试者中的生物等效性的研究

目的研究拉莫三嗪片在中国健康受试者中的药代动力学特征,并评价国产拉莫三嗪片受试制剂(T)和原研参比制剂(R)在空腹和餐后条件下的生物等效性及安全性。方法空腹和餐后试验分别入组24例中国健康受试者,空腹试验男性18例,女性6例,餐后试验男性17例,女性7例,采用单中心、随机、开放、单剂量、两制剂两周期两序列交叉的试验设计,受试者单次口服拉莫三嗪片受试制剂或参比制剂50 mg后采集72 h血样,用液质联用法(LC-MS/MS)测定血浆中拉莫三嗪浓度,用WinNonLin 8.1计算主要药代动力学参数并评价2种拉莫三嗪片的生物等效性。结果空腹单次给药拉莫三嗪片受试制剂和参比制剂的C_(max)分别为(910.93±248.02)和(855.87±214.36)ng·mL^(-1),t_(max)分别为0.50(0.25,4.00)和1.00(0.25,3.50)h,t_(1/2)分别为(36.1±9.2)和(36.0±8.2)h,AUC_(0-72 h)分别为(27402.40±4752.00)和(26933.90±4085.80)h·ng·mL^(-1)。餐后单次给药拉莫三嗪片受试制剂与参比制剂的C_(max)分别为(701.62±120.67)和(718.95±94.81)ng·mL^(-1),t_(max)分别为4.00(1.00,5.00)和4.00(0.50,5.00)h,t_(1/2)分别为(44.2±12.4)和(44.0±12.0)h,AUC_(0-72 h)分别为(30253.20±7018.00)和(30324.60±6147.70)h·ng·mL^(-1)。空腹试验和餐后试验受试制剂/参比制剂的拉莫三嗪主要药代动力学参数经对数转换后几何均值比(90%CI)均落在80.00%~125.00%,服用2种拉莫三嗪片均未发生严重不良反应,安全性良好。结论2种拉莫三嗪片在空腹和餐后状态下在中国男性和女性健康受试者体内生物等效、安全。

炎症Caspase调控固有免疫在心血管疾病中的作用

越来越多的证据表明,慢性炎症与高血压、动脉粥样硬化等心血管疾病密切相关。半胱天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)亚型Caspase-1、4、5和11被称为炎症Caspase,通过促进炎症因子的成熟与释放,诱导放大炎症反应,激活固有免疫应答。炎症Caspase作用机制包括两方面,一方面激活模式识别受体NLRP3炎症小体,促进炎症因子白细胞介素1β(IL-1β)和IL-18的剪切成熟,另一方面剪切GasderminD形成具有膜上打孔作用的N端,导致细胞焦亡,促进炎症因子释放。文章就炎症Caspase在心血管疾病中的作用进行综述。

数据库中细菌与人源药物代谢酶的比较及肠道菌群对药物代谢影响的展望

聚焦药物代谢相关的各种数据库和文献,对细菌来源与人源药物代谢酶的相关信息进行整理与分析,比较数据库中细菌与人源药物代谢酶收录信息的异同。结果发现细菌来源药物代谢酶比人源药物代谢酶要多很多(9703 vs 964),但是细菌来源药物代谢酶的数量相较于BRENDA数据库中细菌酶的总体数量却少很多(9703 vs 20835235)。这说明细菌对药物代谢的影响可能被大大地低估,需要进行深入的系统性研究。本文总结了目前研究肠道菌群影响药物代谢的进展及不足,提出研究思路,即通过人工智能对肠道细菌来源蛋白是否具有药物代谢的能力进行预测,用基因编辑与体内外实验等方法进行生物学功能的验证,并建立注释功能完善的肠道菌群与药物代谢相关数据库,为如何深入挖掘肠道菌群对药物代谢影响的研究提供坚实的理论基础。