水蒸气蒸馏法提取中药挥发油的研究进展

目的:针对水蒸气蒸馏法提取挥发油目前存在的挥发油收率低、易乳化、品相差等问题,对提油药材、料液比、提取时间、提取温度、浸泡时长、回流量、冷凝温度及收集温度等影响因素进行了分析讨论,对各类有望提高挥发油收率及质量的辅助提取方法进行归纳总结,并对目前提取收集装置优化技术及挥发油的提取动力学相关研究结果进行研讨,以期为水蒸气蒸馏法提取中药挥发油工艺优化提供多角度的思路。

儿童中药制剂掩味及口感评价方法研究进展

研制适合儿童的药物是治疗儿童疾病的先决条件,尤其是药物的味道。中药的掩味研究,具有很强的挑战性,特别是治疗儿童患者的中药制剂。儿童中药口服固体制剂具有携带方便、便于储存等优点,但往往具有苦味等不良口感,大大降低了儿童对于中药的接受程度,导致服药剂量不准确。掩味技术的应用是改善药物口感最直接的方式,体内及体外口感评价技术对于药物制剂的口感改善起决定性作用。就近年来儿童中药口服固体制剂的掩味技术及口感评价方法进行综述,同时对矫味剂的安全性进行总结归纳,旨在为儿童中药口服固体制剂的掩味研究提供参考。

异紫草酸纯化提取工艺及抗氧化活性研究

探究丹参多酚酸中异紫草酸的最佳分离纯化方法及其体外抗氧化活性。通过MCI Gel色谱柱、LH-20凝胶色谱柱、动态轴向加压制备液相联用分离得到高纯度异紫草酸,并与传统硅胶柱层析法分离效果进行对比。通过·OH清除实验、DPPH自由基清除实验和铁氰化钾还原实验测定异紫草酸的体外抗氧化活性。所建立方法分离得到的异紫草酸纯品归一化法百分含量达到98.7%,传统硅胶柱层析法无法分离得到异紫草酸纯品。异紫草酸对·OH和DPPH的半数清除率浓度(IC50)分别为0.277 mg·mL^(-1)、17.43µg·mL^(-1),其抗氧化能力与浓度剂量呈现依赖关系。MCI-Gel/LH-20凝胶/C18键合填料柱层析法可用于高纯度异紫草酸的分离。异紫草酸具有清除自由基及抗氧化活性,可用于治疗心脑血管疾病药物的开发。

多属性决策在中药研发及生产中的应用

多属性决策是现代决策科学的一个重要组成部分,目前已广泛应用于工程设计、经济、管理和军事等诸多领域。中药具有"多成分、多靶点"的特点,在流通中还有品相等其他质量控制因素,目前已有一些分析手段与其相适应,但均有不足。多属性决策与中药上述特点不谋而合,但它在中药研究体系中的应用相对较少。本文从主观赋权法、客观赋权法、主客观集成赋权法3个方面对目前已有相关文章进行综述,以期为多属性决策在中药研发及生产中的应用提供依据。

固相萃取技术在安神滴丸质量标准研究中的应用及思考

目的:开发安神滴丸样品前处理方法。方法:采用C_(18)固相萃取法。供试品0.5 g,60%乙醇5 ml超声提取,提取液经过C_(18)固相萃取小柱,上样、洗脱流速为1 ml/min。水洗后,40%甲醇洗脱液蒸干、复溶后作为合欢花鉴别项供试品溶液,60%甲醇洗脱液蒸干、复溶后作为炒酸枣仁鉴别项供试品溶液,80%甲醇洗脱液蒸干、复溶后作为三七叶鉴别项的供试品溶液;供试品2 g,60%乙醇10 ml超声提取,提取液经过C_(18)固相萃取小柱,上样、洗脱流速为1 ml/min,水和40%甲醇洗脱后,甲醇洗脱液作为人参皂苷Rb3含量测定供试品溶液。结果:经固相萃取法处理得到的供试品溶液用于安神滴丸合欢花、炒酸枣仁和三七叶的薄层鉴别所开发的薄层鉴别方法专属性及耐用性良好;经固相萃取法处理得到的供试品溶液用于安神滴丸人参皂苷Rb3含量测定所开发的含量测定方法专属性、重复性、准确度、线性、溶液稳定性均良好。结论:C_(18)固相萃取法可用于安神滴丸样鉴别及含量测定的样品前处理。

HPLC法测定复方中药连夏消痞颗粒中黄芩苷的含量

目的:建立HPLC法测定复方中药连夏消痞颗粒中黄芩苷的含量,提升该项目的质量控制标准。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱:Agilent Zorbax Eclipse XDB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:甲醇-0.4%磷酸溶液(47∶53);流速:1.0 ml/min,柱温:30℃,检测波长:280 nm。结果:黄芩苷在0.012 6~0.402 3 mg/ml浓度范围内呈良好的线性关系,回归方程:Y=4×106X+24 569(r=1),平均回收率为102.37%,RSD为1.30%。结论:本方法简便可行,灵敏度高,重复性好,可用于连夏消痞颗粒中黄芩苷的含量测定。

中医药“异病同治”作用的分子生物学新解

中医中药是中国五千年传统文化的瑰宝和精髓,在治疗常见病、多发病和疑难病等方面独具特色和优势,对人类健康和世界文明产生了积极的影响。近年,国家对中医药创新发展再次提出殷切希望和鼓励,要“坚持中西医并重,推动中医药和西医药互相补充,以及发挥中医药在疾病治疗和预防中的特殊作用”。因此,积极发展中医药特色疗法,结合现代技术对中医药的治病机制进行系统的阐明,对中医药的国际化进程以及临床价值的挖掘具有重大的意义。“异病同治”是在中医辨证论治原则指导下产生的具有中医特色、可被现代医学验证并证明的诊疗理念。“异病同治”辨证论治观认为,人体是一个整体,从整体辨证出发,不同的疾病如果发病机理相同,仅疾病表观现象各异,则可以辨为同一证候,治疗上也可采用相同的方法。比如糖尿病视网膜病变、缺血性冠心病和急性高原缺氧病虽发病病位、表观反应皆不同,但其病因病机有着共同的特点,中医学可解读为存在相同的“证”,即均为气血阻滞,气不行血导致的多系统参与的进展式疾病,“气滞”和“血瘀”贯穿疾病的始终,具有一致的证候表现;同时,现代医学研究认为三者具有共同的病理特征,即都是由血供下降、组织缺血缺氧引起的氧化应激和炎症反应、局部组织细胞线粒体供能障碍、局部微循环障碍、病灶部位血液循环障碍等构成的复杂的疾病分子网络。因此,综合中医宏观辨证和西医微观研究,上述三者同为气滞血瘀型的组织缺血缺氧性疾病,按照中医药“异病同治”的理论,可采用活血化瘀、理气止痛的方剂进行治疗。本课题组针对“异病同治”这一中医药特色疗法,以复方丹参滴丸为例,从疾病的病理机制出发,通过构建机体微循环可视化技术、代谢组学技术、蛋白组学技术以及计算网络药理学技术等多种现代研究技术,阐释了复方丹参滴丸在治疗缺血性冠心病、糖尿病视网膜病变以及急性高原缺氧病三个“不同疾病”中的机制和作用,从现代医学分子生物学的角度为中药的“异病同治”提供了新解。

活血化瘀类中药生物效价检测方法的建立

目的中药质量控制一直是中药现代化的重点和难点,随着中药国际化的进程,FDA也明确提出植物药申报时需提供适于质量一致性评价的生物效价(Bioassay)方法。目前,国际上获批的生物效价方法以均是以计算待测物与标准物质(同质物质)的相对效价值表示,由于中药成分复杂,很难找到同质物质作为标准物质使用,因此目前尚未有复方中药开发相对生物效价方法的报道。本课题组尝试选择适当的中药有效成分为标准物质,以效应曲线的斜率比为计算方法,建立相对生物效价检测方法,拟用于活血化瘀类中药质量生物控制。方法依据美国FDA最新颁布的《Botanical Drug Development Guid⁃ance for Industry》中对植物药生物效价研究提出的要求,针对活血化瘀药物多数具有的抗血小板聚集的作用机制,建立家兔体外抗血小板聚集检测方法,参照USP39中对方法学开发及方法学验证的要点要求,选择纯度高、来源稳定且具有较好的抗血小板聚集活性的中药活性成分丹酚酸B作为标准物质建立相对效价测定方法,并且从线性与范围、重复性、精密度及准确度四个方面对方法进行系统考察。同时开展了第三方实验室的验证研究,对方法的可推广性进行了评估。结果以LOG(剂量)为X轴,抑制率为Y轴,绘制标准物质丹酚酸B量效曲线,显示其呈现较好的线性关系。(y=0.8262x+0.0189,R^2=0.9901),重复性考察RSD=11.9%,日内精密度为10.53%,日间精密度为10.58%,准确度考察,检测丹酚酸B的相对效价值,结果显示6次测定的效价值为1.083±0.129,测定准确度为8.3%,方法满足美国药典USP39以及CFDA颁布的《生物制品质量控制分析方法验证技术一般原则》中对离体效价实验方法对精密度的要求,方法通过验证。将方法推广应用,委托第三方实验室采用该方法对同一检测样本进行检测,检测结果实验室间无统计学差异,提示该方法具有较好的实验室间重现性。两家机构结果均显示加速过期样品效价值较提取物效价值有明显降低(P<0.01),证明方法有较好的区分性。结论经方法优化及方法学验证,所建立的抗血小板聚集生物效价检测方法与活血化瘀作用机制相关,与标准物质丹酚酸B计算出的相对效价值具有较好的精密度、准确度和重现性,可作为生物检测方法,用于活血化瘀类中药的质量控制。

迷迭香酸及咖啡酸的ESI四级杆飞行时间高分辨质谱裂解规律研究

为了研究咖啡酸和迷迭香酸的质谱裂解规律,使用电喷雾-四级杆-飞行时间质谱(ESI-Q-TOF/MS)对咖啡酸和迷迭香酸对照品进行了0~40 eV碰撞能下的二级质谱分析,观察碎片离子丰度变化,以总结二者裂解行为。实验发现咖啡酸在质谱裂解中极易脱羧基形成m/z 135.04碎片离子,高碰撞能下继续裂解脱去水分子或氢自由基;迷迭香酸酯键两端均可断裂,分别形成m/z 197.04、m/z 179.03碎片离子,高碰撞能下这两种碎片离子可进一步裂解生成m/z 123.02和m/z 135.04碎片离子。实验提供了一种使用ESI-Q-TOF/MS研究化合物质谱裂解规律的方法。

基于VBA自定义函数的有机化合物分子式精确质量的批量计算

设计编写一个基于VBA(Visual Basic for Applications)的自定义函数用于在电子表格中批量计算有机分子式的精确质量。使用这个函数,多个有机分子式的精确质量可以在电子表格中通过简单的鼠标拖放快速批量计算,有助于提高有机质谱分析的工作效率。

九味化斑丸化学成分及其治疗银屑病的作用机制分析

目的:系统研究九味化斑丸治疗银屑病的关键成分并对其作用机制进行探讨。方法:基于UPLC‐Q‐TOF/MSE对九味化斑丸的化学成分进行全面分析与鉴定,利用SwissADME平台和TCMSP数据库筛选活性成分,采用网络药理学的方法研究九味化斑丸治疗银屑病的作用机制,采用分子对接技术验证关键成分与靶点蛋白的结合活性。结果:从九味化斑丸中共鉴定出75个成分,其中治疗银屑病的活性成分有木犀草素、黄芩素、黄芩苷、芍药苷和栀子苷等35个。30个核心靶点富集分析结果显示九味化斑丸主要通过调节IL‐17信号通路、TNF信号通路、PI3K‐Akt信号通路、Th17信号通路、MAPK信号通路发挥治疗银屑病的作用。“成分‐靶点‐通路”网络中度值排名靠前的活性成分及靶点有较强的结合活性。结论:初步阐明了九味化斑丸治疗银屑病的有效成分和作用机制,为质量控制提供参考依据。

碱法提取普洱茶渣膳食纤维的工艺优化

以普洱茶渣为原料,通过碱法提取茶渣中膳食纤维,研究影响因素(碱液浓度、碱解温度、碱解时间和料液比)对普洱茶渣中膳食纤维得率的影响。结合单因素和响应面试验得到最优提取工艺参数为碱液浓度3.35%、碱解温度100℃、碱解时间2.36 h、料液比1∶28(g/mL)。在该条件下,普洱茶渣中膳食纤维的得率为82.26%,较提取前极显著提高(P<0.001)。提取后的茶渣膳食纤维中纤维素、半纤维素、木质素和果胶的含量分别为52.10%、14.20%、15.30%和5.00%,以不溶性纤维为主。

丹参渣和三七渣复合物中膳食纤维的提取工艺及其理化特性

中药植物中含有丰富的纤维资源,对丹参渣和三七渣复合物中的膳食纤维进行提取,能够提高其利用价值,具有广阔的应用前景。本研究采用酶–化学法提取丹参渣和三七渣复合物的膳食纤维(SPRC-DF),通过单因素及L9(34)正交实验得到最优提取工艺为:α-淀粉酶添加量0.07%、NaOH质量分数3.5%、碱解温度90℃、碱解时间4 h,在此条件下总膳食纤维含量为90.68%。随后测得其主要含有纤维素(59.54%)、半纤维素(18.61%)、木质素(11.70%)和果胶(3.27%)。SPRC-DF的持水力为(7.75±0.23)g/g,持油力为(4.58±0.09)g/g,膨胀力为(5.42±0.17)mL/g,阳离子交换能力为(0.12±0.01)mmol/g,胆固醇吸附能力为(14.11±0.43)μg/g(pH 2.0)、(21.13±0.24)μg/g(pH 7.0),葡萄糖吸附能力为(3.41±2.63)μg/g。SPRC-DF的重金属含量符合GB 16740—2014《食品安全国家标准保健食品》中的国家限量标准。SPRC-DF粉体流动性较好,休止角、滑动摩擦角、松装密度、振实密度和压缩度均满足生产加工的输送需求。丹参渣和三七渣复合物中的膳食纤维具有良好的理化特性,适合作为保健食品的原料,本研究为其综合利用提供了理论支撑。

胶态二氧化硅固化中风回语颗粒挥发油的研究

目的 比较三种不同型号胶态二氧化硅(SYLOID FP)固化中风回语颗粒挥发油的特性,并与其现行工艺制备的β-环糊精固化物进行对比分析。方法 三种SYLOID FP以不同比例固化中风回语颗粒挥发油,采用高效液相色谱法(HPLC)测定α-细辛醚含量计算其固化率,优选固化比例,对固化前后SYLOID FP进行粉体学评价,综合考虑各类因素选择一种SYLOID FP作为备选固化辅料对其进行物相表征,并与β-环糊精固化特性进行比较。结果 三种SYLOID FP与中风回语颗粒挥发油的最佳固化比例为4∶1,优选出胶态二氧化硅XDP3050(SYLOID XDP3050)作为备用辅料,SYLOID XDP3050固化物与β-环糊精固化物比较,前者固化率为74.87%,后者固化率为70.92%;在60℃敞口放置8 h加速试验中,前者α-细辛醚损失率为2.55%,后者为6.39%。结论 SYLOID FP与β-环糊精均能较好地固化中风回语颗粒挥发油,前者制备工艺简单,耗时耗材少,具有更高的应用价值,但其吸附原理需进一步探索。

UPLC-Q-TOF/MS法分析加参片提取物入血成分

目的:采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS)法分析加参片提取物入血成分。方法:大鼠灌胃加参片提取物后眼静脉丛采集血液,分析采用Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm);流动相0.1%甲酸水-甲醇;梯度洗脱;流速0.3 mL·min-1。MSE扫描正负离子模式检测。结果:检测到14种入血原型成分,主要来源于丹参、黄芪、香加皮和三七。鉴定出的5种代谢产物分别为咖啡酸的硫酸酯化产物、毛蕊异黄酮葡萄糖苷的葡醛酸结合产物、毛蕊异黄酮的硫酸酯化产物以及隐丹参酮开环断裂而产生的代谢产物。结论:该方法稳定可靠,初步阐释了加参片的药效物质基础,为研究加参片治疗慢性心力衰竭在体内的药效物质提供一定依据。

合欢花的化学成分及其药理作用的研究进展

合欢花作为安神类中药,药用历史悠久,其化学成分种类多样,且药理活性明显。合欢花中的化学成分包括黄酮类、挥发油类、三萜皂苷类、甾体类及鞣质类等。经现代药理研究表明,合欢花具有抗焦虑、抗抑郁、镇静催眠、保肝、抗氧化和抗肥胖等多种作用,具有较大的潜在药用价值。因此本文通过对合欢花的化学成分和药理作用进行综述,为其临床应用和药效物质基础研究提供依据。

高效液相色谱法测定中风回语颗粒中大黄酚的含量

目的:建立高效液相色谱法测定中风回语颗粒中大黄酚的含量。方法:采用Dimonsil C18色谱柱(5μm,250mm×4.6mm),流动相为0.1%磷酸水-甲醇(20∶80),检测波长为254nm,流速为1mL·min-1,柱温30℃。结果:大黄酚在10.05~160.90μg·mL-1范围内线性关系良好(r=1.0000),精密度、稳定性试验RSD均<0.50%,重复性试验RSD<2.30%,平均加样回收率(n=6)为98.16%,RSD=1.17%。结论:该方法重复性好、准确度高,可用于中风回语颗粒中大黄酚的含量测定。

黄芪蜜炙工艺研究中两种主观赋权方法选择

目的结合“辨状论质”理念及内在成分含量,以黄芪蜜炙工艺为例优选在多指标综合评分优选一种合适的主观赋权方法,确认各指标权重系数。方法分别采用层次分析法、优序图法等主观赋法计算指标权重系数,并结合各自优缺点对比分析。结果层次分析法和优序图法权重系数计算结果有差异,但两者指标权重大小顺序一致,pearson相关系数检验两者具有极强相关。结论层次分析法和优序图法均可运用于黄芪蜜炙工艺研究,需结合实际使用环境对分析方法进行选择,提高工作效率。

三七叶中人参皂苷Rb3及总皂苷质量差异研究

目的:比较不同部位、不同生长年限、不同生长年份的三七叶中皂苷的含量,为三七叶相关产品开发和质量标准升级提供参考。方法:采用HPLC及UV法分别测定人参皂苷Rb3和总皂苷的含量。结果:人参皂苷Rb3及总皂苷主要分布于叶部,在茎和基部仅微量分布。3年生的整体质量优于2年生。不同年份采收的三七叶质量差异较大。结论:不同部位和不同生长年限的三七叶质量差异较大,采收和利用时需注意叶和茎的比例。

阳离子交换固相萃取结合LCMS-IT-TOF的中风回语颗粒化学成分分析

目的:基于阳离子交换固相萃取(PCX-SPE)结合液相色谱-离子阱-飞行时间质谱(LCMS-IT-TOF)技术鉴定中风回语颗粒中的化学成分。方法:样品采用甲醇超声提取,经PCX-SPE小柱分离富集。选用Dimonsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相A为20.02 mmol/L乙酸铵-0.5%乙酸水溶液,流动相B为乙腈,梯度洗脱;体积流量为1 ml/min。联用电喷雾(ESI)离子源,正负离子模式检测,甲醇提取物及阳离子交换固相萃取小柱流出液经LCMS-IT-TOF分析,并对化学成分进行归属。结果:中风回语颗粒甲醇提取物中鉴定出33个化学成分,PCX-SPE分离富集物中鉴定出71个化学成分,并对药材进行了归属。结论:甲醇提取与PCX-SPE柱前处理方式结合LCMS-IT-TOF技术,可以全面分析中风回语颗粒所含的化学成分,初步阐明了中风回语颗粒的物质基础,以期为中风回语颗粒的药效研究及质量控制提供理论依据。