甜菊醇糖苷生物合成关键基因的导入和鉴定分析

甜叶菊(Stevia rebaudiana Bertoni)生产的甜菊醇糖苷因具有高甜度、低热能、不参与人体内代谢兼具保健功能等特点,被誉为最有发展前途的新糖源。从甜叶菊叶片克隆了甜菊醇糖苷生物合成途径中的关键基因SrUGT85C2、SrUGT91D2m和SrUGT76G1,构建植物基因过量表达载体,以单独或组合的形式将这些基因导入到甜叶菊中,获得转基因植株。与野生型对照植株相比,单独导入SrUGT85C2的转基因植株中甜菊醇单糖苷含量提高,总糖苷、莱包迪苷A含量及占比没有明显变化;单独导入SrUGT91D2m的转基因植株中甜菊醇单糖苷含量显著降低,而甜菊醇双糖苷含量显著增加;单独导入SrUGT76G1的转基因植株中,总糖苷含量显著提高,莱包迪苷A含量达到10%以上,比对照提高了2倍,而甜菊糖苷含量减少了一半。3个基因组合同时导入的转基因甜叶菊植株与单独导入SrUGT76G1的转基因甜叶菊植株类似,其总糖苷、莱包迪苷A含量及其占比均显著提高。这些结果为以后通过分子生物学技术来调控甜菊醇糖苷生物合成关键基因的表达,培育莱包迪苷A含量高的高品质甜叶菊新品系提供了理论依据和技术方法。

利用微型离心管提取分析天然橡胶主要成分聚异戊二烯方法的建立

为建立一种快速、准确的从少量样品中提取、分析天然橡胶主要成分聚异戊二烯含量的方法,在已采用索氏提取器提取的基础上,进一步探讨采用2 mL微型离心管的方法提取分析材料(0.5 g以下)中的聚异戊二烯含量。从分别利用微型离心管与索氏提取器提取4种样品分析材料,即顺式聚异戊二烯标准品、多汁乳菇子实体、杠柳枝条、杜仲果翅的提取得率和分子量分布看,2种提取方法的差别不大,再通过每次提取时利用顺式聚异戊二烯标准品建立标准曲线校正,采用2 mL微型离心管微量提取分析测定植物植株、组织材料或真菌子实体、菌丝体中的顺式或反式-1、4-聚异戊二烯橡胶含量的方法可行、结果可信。

宁夏牧场奶牛前三把奶卫生质量检测及优势病原菌生物学特性研究

试验旨在调查宁夏地区大型牧场奶牛挤奶时不同挤奶方式(先弃奶与先药浴)对前三把奶及鲜奶卫生质量的影响,研究前三把奶中优势病原菌的种类及药物敏感性,以期为牧场选择挤奶方式和奶牛乳腺炎的防治提供依据。按照2010版新国标中食品微生物学检验的方法对在宁夏地区6个标准化奶牛场采集的180份奶样进行细菌菌落总数测定、大肠菌群计数和沙门氏菌检验,对优势病原菌进行分离鉴定和药物敏感性试验。试验结果显示,不同挤奶方式下前三把奶的细菌菌落总数和大肠菌群数差异显著(P>0.05),但均低于食品安全国家标准要求的细菌菌落总数:2×10~6CFU/m L,大肠菌群数:1×10~3MPN/m L。沙门氏菌检验均为阴性。挤奶前对乳头不药浴的前三把奶和鲜奶共120份奶样中有94份奶样检出171株优势病原菌,检出率为78.33%,其中金黄色葡萄球菌68株,检出率为39.77%;链球菌39株,检出率为22.81%;大肠杆菌64株,检出率为37.43%。药敏试验结果显示分离出的三种优势病原菌都对阿莫西林-克拉维酸钾和强力霉素高度敏感,金黄色葡萄球菌和链球菌未出现耐药性,大肠杆菌对林可霉素出现耐药。试验证明:不同挤奶方式对奶牛前三把奶细菌菌落总数的影响不明显,前三把奶中第一把奶细菌菌落总数最高,第二、三把奶依次减少;从前三把奶中分离到的优势病原菌与引起奶牛乳腺炎的主要病原菌相吻合,且在药敏试验中病原菌对本地区临床治疗奶牛乳腺炎的常用药物敏感性不高。

患呼吸道疾病羊鼻腔及生活环境微生物多样性分析

本研究旨在了解患呼吸道疾病羊鼻腔及其所在羊舍地面表层堆积物的微生物多样性,分析羊患呼吸道疾病与羊生活环境中菌群结构之间的联系,为羊呼吸系统疾病的预防和治疗提供参考。本课题采集宁夏回族自治区银川市某羊养殖场羊鼻腔拭子及羊舍地面表层堆积物,以健康羊鼻腔拭子及健康羊所在羊舍地面表层堆积物为对照,进行16S rRNA基因测序,通过生物信息学技术分析健康羊鼻腔及其生活环境与患呼吸道疾病羊鼻腔及其生活环境中微生物菌群的群落结构及多样性。结果显示:与健康羊鼻腔及其生活环境中微生物相比,患呼吸道疾病羊鼻腔及其生活环境中微生物菌群的多样性和丰富度均降低。健康羊鼻腔与患呼吸道疾病羊鼻腔具有不同的群落结构,二者之间具有极显著的差异(P<0.01),寡养单胞菌属(Stenotrophomonas)是健康羊鼻腔中主要的菌属,莫拉菌属(Moraxella)、伯杰菌属(Bergeyella)和丝状杆菌属(Filobacterium)是患呼吸道疾病羊鼻腔中的优势菌属。此外,支原体属(Mycoplasma)、波氏杆菌属(Bordetella)和曼氏杆菌属(Mannheimia)等细菌性病原在患呼吸道疾病羊鼻腔的相对丰度也明显增加。健康羊所在羊舍地面表层堆积物与患呼吸道疾病羊所在羊舍地面表层堆积物的菌群结构也具有显著差异(P<0.05),厚壁菌门(Firmicutes)是患呼吸道疾病羊所在羊舍地面表层堆积物中的优势菌门。结果提示,患呼吸道疾病羊鼻腔及其生活环境中微生物菌群结构及空间分布发生了显著变化,但羊生活环境中微生物群落结构与羊患呼吸道疾病无直接关联,患呼吸道疾病羊鼻腔中莫拉菌属、伯杰菌属和丝状杆菌属等病原菌相对丰度的增加及微生物菌群失衡可能是导致羊患呼吸道疾病的重要因素。

宁夏某高校大学本科生对流行性感冒预防的认知及行为调查

目的了解本校大学生对流行性感冒知识的掌握程度,引导学生正确认识流行性感冒,为高校今后展开流行疾病防控提供借鉴。方法采用整群抽样的方法,利用网络调查问卷,对宁夏某高校不同学院本科生进行流行性感冒认知及行为调差。结果有效问卷193份,采用自行设计的网上调查问卷进行。统计结果显示绝大多数学生77%了解甲型、乙型流行性感冒是由病毒引起的,但近四成学生没有听说过流感疫苗,在了解流感疫苗的学生中,36%的学生不懂得如何正确接种流感疫苗。通过这次新冠肺炎疫情,绝大多数学生明白主动预防呼吸系统传染病的重要性,但仍有10%的学生对疾病预防掉以轻心。结论高校本科生对流行性感冒认知度较好,大部分人有主动预防的概念,但对疾病相关知识认识不全面,少部分人对疾病预防意识薄弱等问题。因此,学校相关部门需要适度加强流行性疾病的宣传教育,提高同学们对传染性疾病的认知度,并自主采取科学的防控措施预防疾病在学校中的扩大。

小鼠原始卵泡发育关键时期卵巢中miRNAs的生物学特征及功能分析

为了探究15.5胚龄和17.5胚龄小鼠卵巢中原始卵泡发育相关的miRNAs并解析其生物学功能,试验随机选用8~10周龄40只雌性和8只雄性健康小鼠进行饲养并合笼处理,提取小鼠原始卵泡发育关键时期15.5胚龄和17.5胚龄卵巢组织总RNA,PCR扩增筛选目的片段,高通量测序获得miRNAs,对其进行聚类、相关性、主成分和碱基偏好性分析,按照表达量倍数差异和表达差异显著性筛选差异表达miRNAs,对差异miRNAs进行靶基因预测,最后对获得的靶基因进行GO功能注释和KEGG富集分析。结果表明:经测序筛选共获得25个差异表达的miRNAs,其中上调的miRNAs有11个,下调的miRNAs有14个,差异倍数大于2且上调的miRNAs总共有5个,分别为mmu-miR-3471、mmu-miR-3472、mmu-miR-5132-3p、mmu-miR-3962及mmu-miR-7118-3p;15.5胚龄和17.5胚龄的卵巢样品分别被聚集在两个区域,具有很好的一致性;miRNAs的长度不同,首位碱基的偏好性也不同;miRNAs在不同染色体上的碱基偏好程度也不一样;对筛选到的25个差异miRNAs进行靶基因预测,共获得12665个靶基因;GO功能注释主要获得了与细胞组分或细胞进程有关的GO富集条目,如细胞过程的调节、调节细胞代谢过程、细胞通讯等。KEGG富集分析发现TGF-beta信号通路和磷酸酰肌醇信号通路与卵泡发育密切相关。说明差异miRNAs可能主要通过TGF-beta信号通路和磷酸酰肌醇信号通路参与卵巢中原始卵泡的发育调控。

纳米硒对滩羊生长性能、血液生化及代谢组的影响

本试验旨在探究不同添加水平的纳米硒对滩羊生长性能、血液生化、抗氧化及代谢组的影响。选取3月龄健康育肥公滩羊60只,按体重相近原则随机分为4组,每组15只,每组3个重复,每个重复5只羊:CON组(含硒0.02 mg·kg^(-1) DM,对照组)饲喂基础日粮,Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组(试验组)滩羊在饲喂基础日粮基础上分别添加0.1、0.3和0.5 mg·kg^(-1)纳米硒。预试期10 d,正试期90 d。结果表明:1)滩羊生长性能组间无显著差异(P>0.05)。2)Ⅰ组滩羊的经济效益(190.52元)高于其他组(187.85、174.92、131.01元)。3)试验组滩羊的血清丙氨酸氨基转移酶活性和尿素含量分别为13.75、13.25 U·L^(-1);8.26、8.11、7.52 mmol·L^(-1);显著低于CON组(23.00 U·L^(-1)、10.19 mmol·L^(-1);P<0.05)。4)Ⅲ组滩羊的血清碱性磷酸酶活性(494.75 U·L^(-1))显著高于其他组(262.75、228.00、250.50 U·L^(-1);P<0.05)。5)Ⅱ组血清球蛋白含量、总抗氧化能力和谷胱甘肽过氧化物酶活性(42.48 g·L^(-1)、9.91 U·m^(-1)、183.93 U·m^(-1))显著高于对照组(34.13 g·L^(-1)、4.93 U·m^(-1)、89.53 U·m^(-1);P<0.05)。6)通过血液代谢组学分析共筛选出21种差异显著代谢产物,主要富集的代谢通路有泛酸和辅酶A生物合成、碳水化合物消化和吸收、维生素消化和吸收等。综上所述,饲粮中添加纳米硒可改善滩羊的机体健康状况,提高抗氧化能力,这可能与代谢通路调控有关;本试验中,滩羊饲料纳米硒最适添加量为0.3 mg·kg^(-1)。

基于多组学解析布鲁氏菌BvfA对睾丸支持细胞线粒体NADH-泛醌氧化还原酶复合体的影响

【目的】明确布鲁氏菌BvfA对宿主睾丸支持细胞(TM4细胞)的损伤作用,以揭示布鲁氏菌对宿主的致病机制。【方法】利用RNA-Seq双端测序、Label-free蛋白组学技术和LC-MS非靶代谢组学技术分析感染布鲁氏菌S19△bvfA与S19菌株的TM4细胞的组学差异,采用KEGG数据库对差异表达蛋白及差异代谢物通路进行分析,并利用平行反应监测(PRM)对蛋白表达量进行验证。【结果】感染S19△bvfA和S19菌株的TM4细胞差异表达基因共400个,差异表达蛋白共422个,差异代谢产物共271种。多组学联合分析发现,S19△bvfA和S19菌株感染TM4细胞差异表达基因、差异表达蛋白和差异代谢产物共同富集的KEGG通路为内源性大麻素信号通路,在该通路中发现S19△bvfA菌株感染TM4细胞的线粒体NADH-泛醌氧化还原酶复合体(ComplexⅠ)中有20个蛋白表达量下调。PRM验证结果显示,ComplexⅠ中Ndufb11、Ndufa9、Ndufv1、Ndufv2、Ndufs8和Ndufs2蛋白的表达趋势与Label-free蛋白组学技术测定结果一致。【结论】BvfA在布鲁氏菌感染TM4细胞时能引起转录、蛋白质和代谢水平的变化,布鲁氏菌BvfA使睾丸支持细胞线粒体NADH-泛醌氧化还原酶复合体蛋白表达下调。

牛冠状病毒刺突蛋白研究进展

牛冠状病毒(bovine coronavirus, BCoV)是一种能感染牛肠道、呼吸道引起新生犊牛腹泻、成年牛冬季痢疾和各年龄段的牛呼吸道疾病的重要病原体,严重危害着养牛业的发展。刺突(spike, S)蛋白是该病毒主要的结构蛋白和免疫原性蛋白,在病毒初始感染和诱导保护性免疫中发挥重要作用。本文就该病毒刺突蛋白的结构特征、生物学功能及应用研究、免疫原性、变异原因和潜在双受体系统的最新研究进展做一阐述,期望为新型疫苗研制和靶点治疗药物开发提供科学依据,以便制定快速有效的安全防治对策应对预出现的新毒株。

枸杞叶对大鼠生长性能、血清生化与抗氧化指标及血浆代谢组的影响

本试验以大鼠为模式动物,旨在探究枸杞叶对动物生长性能、血清生化与抗氧化指标及血浆代谢组的影响。选取体重相近的健康雄性SD大鼠25只,随机分为5组(每组5个重复,每个重复1只):NC组(对照组)大鼠饲喂基础饲粮,PC组(枸杞果实阳性对照组)大鼠在饲喂基础饲粮的基础上灌服4 g/kg BW的枸杞果实匀浆,LD组、MD组和HD组(枸杞叶试验组)大鼠在饲喂基础饲粮的基础上分别灌服2、4和8 g/kg BW枸杞叶匀浆。预试期7 d,正试期28 d。结果显示:1)LD组大鼠的末重(338.63 g)和平均日增重(6.25 g/d)最高,显著高于NC组、PC组和MD组(P<0.05)。2)随枸杞叶匀浆灌胃剂量的上升,血清白球比降低,且HD组显著低于其他组(P<0.05)。3)LD组血清总抗氧化能力显著高于其他组(P<0.05),且随枸杞叶匀浆灌胃剂量的升高,血清总抗氧化能力显著下降(P<0.05)。4)通过血浆代谢组学分析共筛选出31种差异代谢物,富集的代谢通路主要有花生四烯酸代谢、嘌呤代谢、氨基酸代谢及烟酸和烟酰胺代谢等。综上所述,枸杞叶可提高模式动物大鼠的生长性能,并可能通过花生四烯酸代谢、氨基酸代谢等途径及中间代谢产物调控机体的抗氧化能力与免疫功能。本试验条件下,枸杞叶匀浆灌胃剂量为2 g/kg BW时效果较好。

能量与蛋白质水平对静原鸡生长性能、屠宰性能、血液生化指标及代谢组的影响

【目的】研究不同能量和蛋白质水平对育成期静原鸡生长性能、屠宰性能、血液生化及代谢组的影响,为确定育成期静原鸡适宜日粮能量、蛋白质水平提供依据。【方法】选取7周龄静原鸡公鸡540只,随机分为9组,每组6个重复,每个重复10只鸡。采用2因子×3水平试验设计,因子1为日粮能量水平,设有低、中、高能量组,分别为11.28、11.70、12.12 MJ/kg,因子2为日粮蛋白质水平,设有低、中、高蛋白质组,分别为14.00%、15.50%、17.00%,试验期77 d。【结果】①日粮能量、蛋白质水平及交互作用显著影响末重、平均日增重、平均日采食量和料重比(P<0.05,下同),中能量-中蛋白质组(ME-MP组)末重、平均日增重最高,料重比最低;低能量-高蛋白质组(LE-HP组)平均日采食量最低。②日粮能量水平显著影响胸肌率、腿肌率,中能量组胸肌率、腿肌率最高。日粮能量、蛋白质交互作用对屠体率、半净膛率有显著影响,中能量-中蛋白质组(ME-MP组)屠体率、胸肌率、腿肌率最高。③日粮能量水平显著影响尿素含量,中能量组尿素含量最低。日粮蛋白质水平显著影响血糖,高蛋白质组血糖含量最高。日粮能量、蛋白质交互作用显著影响血清总蛋白、白蛋白及游离脂肪酸,中能量-中蛋白质组(ME-MP组)血清总蛋白含量最高、高能量-高蛋白质组(HE-HP组)血清白蛋白含量最高、中能量-高蛋白质组(ME-HP组)游离脂肪酸含量最高。④通过血液代谢组学分析共筛选出16种显著差异代谢物,主要富集在β-丙氨酸代谢、花生四烯酸新陈代谢通路、苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成、初级胆汁酸生物合成、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸降解等通路。【结论】日粮能量、蛋白质水平可显著影响育成期静原鸡公鸡生长性能、屠宰性能,这可能与其通过影响血清生化指标及代谢通路调控有关,能量、蛋白质需要量综合表明中能量-中蛋白质水平适宜于育成期静原鸡公鸡营养需要,其推荐水平分别为11.70 MJ/kg,蛋白质水平为15.50%。

硒砂瓜根系不同生态位细菌群落多样性及结构分析

【目的】分析硒砂瓜根系不同生态位细菌群落结构及多样性,为了解硒砂瓜根系微生物组成规律,挖掘微生物资源,维持硒砂瓜根系土壤健康及微生物生态系统稳定提供理论参考。【方法】采用五点取样法采集根围、根际、根表和根内4个生态位土壤样品,分别标记为SRW、SRJ、SRB和SRN,通过使用Illumina Miseq测序平台对硒砂瓜根系不同生态位细菌群落进行解析,探究硒砂瓜细菌群落Alpha多样性指数,包括Sobs、Shannon、Simpson、Chao1和ACE指数,比较各生态位及内生菌与硒砂瓜根系其他生态位在门和属分类水平上的细菌物种差异,并进行主坐标分析(PCoA)及溯源分析。【结果】土壤中(SRW、SRJ及SRB)细菌群落Sobs、Shannon、ACE和Chao1指数均显著高于内生菌群落(SRN)(P<0.05,下同),多样性即Shannon和Simpson指数排序为SRJ>SRW>SRB>SRN,丰富度即ACE和Chao1指数排序为SRW>SRJ>SRB>SRN。硒砂瓜根系不同生态位细菌类群的优势门均为变形菌门(Proteobacteria)和放线菌门(Actinobacteriota),各生态位变形菌门占比59.59%~84.62%,4个生态位的优势属均为根瘤菌属(AllorhizobiumNeorhizobium-Pararhizobium-Rhizobium)、克雷伯氏菌属(Klebsiella)和固氮菌属(Azotobacter),根瘤菌属占比5.48%~15.68%。PCoA结果显示,硒砂瓜根系不同生态位的群落结构存在显著差异(R2=0.6651,P=0.001)。根系各生态位相对丰度前15的物种中,10个细菌门和8个细菌属的相对丰度存在显著差异。内生菌与硒砂瓜根系其他生态位相对丰度前15的物种中,8个细菌门和5个细菌属的相对丰度存在显著差异。溯源分析结果发现根际细菌群落中有55.70%来源于根围细菌,根表细菌群落中有65.75%来源于根际细菌,根内细菌群落中有90.75%来源于根表细菌,表明硒砂瓜根系不同生态位细菌群落来源之间存在一定相关性。【结论】宁夏硒砂瓜根系不同生态位细菌群落组成丰富,相对丰度有差异且细菌群落来源具有一定相关性,不同生态位对细菌群落具有选择及过滤作用。

宁夏枸杞黄酮类化合物HPLC指纹图谱研究

目的建立宁夏枸杞黄酮类化合物高效液相色谱指纹图谱,为鉴别不同来源的宁夏枸杞提供依据。方法以10个宁夏不同产地的宁夏枸杞主栽品种"宁杞号"样品建立枸杞黄酮类化合物指纹图谱共有模式,采用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"软件进行数据处理,对15个不同来源的枸杞样品进行了分析。结果本研究建立的方法重现性较好;16个特征峰构成了宁夏枸杞黄酮类化合物色谱指纹图谱的特征;不同产地、不同品种的枸杞样品黄酮类化合物组成与量存在差异。结论所建立的枸杞黄酮类化合物的HPLC指纹图谱对不同产地、不同品种枸杞的鉴别具有参考价值。

中国2012—2022年羊群中蓝舌病毒流行的Meta分析

旨在系统评价和分析我国2012—2022年羊群中蓝舌病毒(bluetongue virus,BTV)感染状况,为我国羊群BTV防控提供理论依据。通过检索2012—2022年中国知网(CNKI)、万方、维普、PubMed和ScienceDirect 5个数据库中对中国羊群BTV流行情况研究的文献并进行Meta分析。检索并筛选后共纳入Meta分析的有28篇文献,涉及样本总数为38226头羊,其中9109头羊为BTV阳性。分析显示,我国羊群中BTV的整体流行率为23.8%(95%CI:23.4,24.3),其中绵羊流行率为29.4%(95%CI:14.7,44.1),山羊流行率为25.1%(95%CI:18.6,31.7)。我国各省/市间比较发现,重庆市流行率最高,为34.6%(95%CI:32.0,37.1),其次为云南省和内蒙古自治区。亚组分析发现,我国5大区域BTV流行率存在显著地区差异(P=0.011),中国东部、南部、西部、北部及中部地区流行率分别为6.1%(95%CI:4.3,7.9)、33.8%(95%CI:29.5,38.1)、21.7%(95%CI:17.1,26.2)、21.0%(95%CI:8.3,33.6)及26.6%(95%CI:24.3,28.8)。同时,检测方式和气候类型也是我国羊群中BTV流行的风险因子(P<0.05)。上述分析结果提示,我国羊群中BTV流行率较高并且分布广泛,有必要持续对我国BTV的感染状况进行监测并采取适当的预防措施。

产气荚膜梭菌毒素疫苗研究进展

产气荚膜梭菌是一种引起人类和动物肠道感染和组织坏死的重要食源性病原体,致死因子是其产生的多种外毒素。合理使用抗菌药物及健康养殖需求的增加使疫苗预防更为重要。然而,传统的产气荚膜梭菌外毒素疫苗可能存在效果不稳定及残留毒素和甲醛等问题,引发了人们对这些疫苗安全性的担忧。该文系统介绍了产气荚膜梭菌的传统类毒素疫苗、基因工程重组疫苗及基于反向疫苗学和免疫信息学设计的表位肽疫苗最新研究进展,为研发制备有效、安全的新型产气荚膜梭菌毒素疫苗提供新思路。

高效液相色谱法测定不同产地宁夏枸杞中芦丁和绿原酸的含量

目的建立反相高效液相色谱法同时测定宁夏枸杞中芦丁和绿原酸含量的方法。方法色谱分析条件Shim-packVP-ODS色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,以乙腈-水-乙酸（5∶94.5∶0.5）为流动相A,乙腈∶水∶乙酸（70∶29.5∶0.5）为流动相B,采用梯度洗脱,流速0.5 ml·min^-1,检测波长342 nm,柱温30℃。结果绿原酸和芦丁线性范围均为10～100μg·ml^-1（相关系数分别为r=0.999 5和r=0.999 8）,平均回收率（n=5）分别为98.6%,99.0%;不同产地、不同年份宁夏枸杞样品中芦丁和绿原酸含量存在差异。结论该方法重现性好,适用于同时测定枸杞中芦丁和绿原酸的含量。

宁夏地区回族人群2型糖尿病与线粒体基因突变的相关性分析

目的:以随机选取宁夏回族无血缘关系的63例糖尿病患者(糖尿病组)及77例健康个体(正常对照组)为研究对象,调查该人群中线粒体基因突变与2型糖尿病的关系。方法:采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态检测技术(PCR-RFLP)对线粒体基因位点(mtDNA3243、3316、3394、3426、3593)突变类型进行检测,并采用χ2检验,比较mtDNA突变类型在两组间分布的差异,从而得出宁夏地区回族人群2型糖尿病与mtDNA突变的相关性。结果:在糖尿病组与正常对照组中均未发现mtDNA3243、3593、3426位点的突变。在糖尿病组中3316位点(G→A)突变频率为1.587%(1/63),正常对照组中该位点突变频率为3.896%(3/77);糖尿病组中未发现3394(T→C)突变,正常对照组中该位点突变频率为3.896%(3/77)。以上位点的突变频率在两组间经χ2检验,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:宁夏地区回族人群2型糖尿病与mtDNA3243、3316、3394、3426、3593位点的突变均无相关性。

滩羊胎儿成纤维细胞系的建立及其生物学特性研究

【目的】以滩羊胎儿皮肤组织为材料,获得符合体细胞克隆转基因基本要求的供体细胞系。【方法】取滩羊胎儿皮肤组织,采用组织块法分离培养获得滩羊胎儿成纤维细胞,观测其形态和生长情况,鉴定其性别,并对其染色体核型和红色荧光报告基因质粒(pmCherry-N1)转染等生物学特性进行研究。【结果】采用组织块法成功获得了滩羊胎儿成纤维细胞,其细胞群体倍增时间(PDT)约为48h;5代、15代、25代滩羊胎儿成纤维细胞核型分析表明,各代细胞染色体均为2n=54,未见异常;滩羊胎儿成纤维细胞的转染效率较高,约为50%,对最终获得的稳定表达红色荧光蛋白的胎儿成纤维细胞进行核型分析,结果证明遗传物质没有发生变化。【结论】建立了滩羊胎儿成纤维细胞系,为滩羊分子育种奠定了基础。

HLA-DQA1基因多态性与宁夏回族人群类风湿性关节炎的相关性

目的:探讨HLA-DQA1基因多态性与宁夏回族人群类风湿性关节炎(RA)的相关关系。方法:采用多聚酶链反应/限制性片段长度多态性(PCR/RFLP)方法,对61例RA患者和81例健康对照者血样进行HLA-DQA1等位基因分析,寻找相关的基因型。结果:宁夏回族RA患者HLA-DQA1*0301(OR=32.45,P<0.01)和HLA-DQA1*0501(OR=3.11,P<0.01)等位基因显著高于宁夏回族健康人群;宁夏回族健康人群HLA-DQA1*0102(OR=0.19,P<0.01)和HLA-DQA1*0401(OR=0.04,P<0.01)等位基因显著高于宁夏回族RA患者。结论:HLA-DQA1*0301和*0501等位基因可作为宁夏回族RA易感基因的候选基因;HLA-DQA1*0102和*0401等位基因可作为宁夏回族RA保护基因的候选基因。

宁夏汉族人群eNOS基因3个SNP位点与原发性高血压相关性的研究

目的:探讨在宁夏地区汉族人群中eNOS基因3个SNP位点与原发性高血压(EH)的相关性。方法:采用PCR-RFLP方法对204例EH患者及219例健康个体eNOS基因rs2070744(T>C)、rs1800780(A>G)和rs3918181(A>G)共3个SNP位点检测。用χ2检验比较病例组-对照组间基因型频率、等位基因频率的差异,用SHEsis在线分析软件分析单倍型。结果:EH组和对照组间,rs1800780位点基因型频率的分布存在显著性差异(P<0.05)。rs2070744位点及rs3918181位点基因型频率及等位基因频率的分布均无显著性差异(P>0.05)。3个SNP位点共检出8种单倍型,其中单倍型TGA在对照组及EH患者中有统计学差异(P<0.05),且OR(95%CI)为1.549(1.116～2.150)。结论:单倍型TGA的出现可能会增加汉族EH的患病风险。