针刺调控脑缺血再灌注损伤大鼠海马组织miR-301a-5p的表达

目的:通过制备大鼠脑缺血再灌注损伤(CIRI)模型探讨针刺对大鼠缺血侧海马组织miR-301a-5p表达的影响。方法:线栓法制备大脑中动脉闭塞/再灌注(MCAO/R)大鼠模型,利用针刺进行干预。采用改良Garcia评分法检测大鼠神经功能,TTC染色法检测脑梗死体积比,RT-qPCR检测缺血侧海马区miR-301a-5p的表达,并利用在线网站数据库TargetScan8.0、mi-RDB及miRWalk预测miR-301a-5p的靶基因,DAVID数据库对靶基因进行基因本体(GO)分析,HE染色观察细胞病理改变。结果:与MCAO/R组相比,MCAO/R+AC干预组大鼠Garcia评分升高(P<0.05),脑梗死体积减小(P<0.01),缺血侧海马区miR-301a-5p表达量显著增加(P<0.01)。预测miR-301a-5p有交集的靶基因101个,GO分析在生物进程(BP)中发现miR-301a-5p靶基因富集于白细胞介素-6(IL-6)的调控及糖皮质激素反应等相关炎症因子,且在MCAO/R组观察到细胞坏死,炎性细胞浸润,MCAO/R+AC组可见散在的炎性细胞浸润。结论:针刺可降低CIRI大鼠神经功能缺损症状,减少脑梗死体积,其机制可能与激活miR-301a-5p的表达抑制细胞炎症有关。

益气活血中药膏摩治疗脑卒中后气虚血瘀型Ⅰ期SHS的临床效果

目的 观察益气活血中药膏摩治疗脑卒中后气虚血瘀型Ⅰ期肩手综合征(SHS)的临床效果及安全性。方法 本研究选取2023年3月-2024年1月在安徽中医药大学第二附属医院接受治疗的74例脑卒中后气虚血瘀型Ⅰ期SHS患者为研究对象。采用随机数字表法,将患者分为观察组与对照组,每组37例。观察组患者采用中药膏剂(由院内制剂十一味活血酊制作而成)进行膏摩疗法干预;对照组患者选用50 mL生理盐水+100 g黄凡士林搅拌均匀进行膏摩疗法干预。比较2组患者治疗前,治疗2周、4周时中医证候积分、疼痛视觉模拟量表(VAS)评分、手部肿胀程度、肩手综合征评估量表(SHSS)评分、肩关节活动度(ROM)、上肢Fugl-Meye运动功能评定量表(FMA)评分。结果 治疗前,2组患者中医证候积分及VAS评分比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗2周、4周时,2组患者中医证候积分及VAS评分均低于治疗前,且观察组低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗前,2组患者手部排水体积差比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗2周、4周时,2组患者手部排水体积差均小于治疗前,且观察组小于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗前,2组患者SHSS评分比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗2周、4周时,2组患者SHSS评分均低于治疗前,且观察组低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗前,2组患者屈曲、外展、内旋、外旋ROM比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗2周、4周时,2组患者屈曲、外展、内旋、外旋ROM均大于治疗前,且观察组大于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗前,2组患者上肢FMA评分比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗2周、4周时,2组患者上肢FMA评分均大于治疗前,且观察组大于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。在膏摩过程中,2组患者均未发生不良反应。结论 益气活血中药膏摩对脑卒中后气虚血瘀型Ⅰ期SHS患者具有良好的治疗作用,可明显改善患者的临床症状,促进肩关节功能恢复及提高患者上肢运动功能,值得临床推广应用。

针刺调控脑缺血再灌注损伤大鼠海马区核心基因circHDAC2表达抗神经损伤的研究

目的探讨针刺对脑缺血再灌注损伤(CIRI)大鼠脑保护作用与海马组织差异表达核心基因、转录网中信使RNAs(mRNAs)功能之间的联系,为针刺调控环状RNAs(circRNAs)抗CIRI后神经损伤研究提供参考。方法将54只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和针刺组,每组18只,后两组采用改良Longa线栓法制备大脑中动脉阻塞再灌注模型,假手术组仅剥离血管,不插线栓。干预期内针刺组捆绑于鼠板并针刺“大椎”“水沟”“百会”穴,均匀捻转刺激1 min,频率为90次/min,15 min后行针1次,共留针30 min,每12 h干预1次,共7次。假手术组、模型组捆绑于鼠板不针刺。改良加西亚(Garcia)评分法检测大鼠神经功能状况,2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法观察脑梗死面积;通过基因芯片技术筛选缺血侧海马组织差异表达基因,整理出模型组/假手术组、针刺组/模型组共同差异表达的环状RNAs(co-DE circRNAs),根据P值、差异倍数(FC)、基因本体(GO)数据库条目富集数量筛选出高表达的核心co-DE circRNAs,分析核心co-DE circRNAs来源基因的GO功能;统计缺血侧海马CA1区尼氏染色阳性细胞数;通过实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)法验证核心co-DE circRNAs表达量,选取表达趋势与芯片结果一致的circRNAs进行竞争性内源RNA(ceRNA)网络预测,对预测网络中的mRNAs进行GO功能富集分析。结果干预前,与假手术组比较,各造模组改良Garcia神经功能评分显著降低(P<0.05);干预后,与假手术组比较,模型组脑梗死面积比显著升高,改良Garcia神经功能评分和CA1区尼氏染色阳性细胞数显著降低(P<0.05);与模型组比较,针刺组脑梗死面积比显著降低,改良Garcia神经功能评分和CA1区尼氏染色阳性细胞数显著升高(P<0.05);组内干预前后比较,针刺组改良Garcia神经功能评分显著升高(P<0.05)。芯片结果显示,模型组下调/针刺组上调、模型组上调/针刺组下调的co-DE circRNAs为23个,根据FC>1.25和GO数据库条目富集数量筛选出核心基因为环状RNA组蛋白去乙酰化酶2基因(circHDAC2)、环状RNA神经营养受体酪氨酸激酶2基因(circNTRK2);GO数据库分析显示,二者富集于神经元的产生、神经系统发育、神经元分化等条目。验证其表达量发现,与假手术组比较,模型组大鼠缺血侧海马组织circHDAC2、circNTRK2表达量均显著下调(P<0.05);与模型组比较,针刺组大鼠缺血侧海马组织circHDAC2、circNTRK2表达量均显著上调(P<0.05)。circHDAC2表达趋势与芯片结果一致,由此对circHDAC2构建相关ceRNA调控网络,调控网络中mRNAs的GO分析主要富集在神经元的产生、神经元分化的调控、轴突引导、神经系统发育、神经元死亡的调节等条目。结论针刺可改善CIRI大鼠改良Garcia神经功能评分与脑梗死面积比,降低缺血侧海马组织的神经元损伤,其作用可能与调控缺血侧海马组织circHDAC2表达以及激发调控网络中mRNA的神经元产生、神经元分化、神经元细胞体功能等有关。

四肢联动训练结合针刺治疗脑卒中偏瘫临床观察

目的:观察四肢联动训练结合针刺治疗脑卒中偏瘫的效果。方法:86例随机分为两组各43例。两组均用针刺治疗,观察组联合四肢联动训练,比较两组平衡功能(BBS)、步行功能(Holden)及独立步行能力。结果:BBS、Holden评分观察组高于对照组,6min步行距离观察组大于对照组,10m步行时间观察组短于对照组(P<0.05)。结论:针刺联合四肢联动训练治疗脑卒中偏瘫,可提高平衡功能和步行功能及独立步行能力,效果较好。

大鼠海马组织circHDAC2/miR-3065/SLC30A3轴参与针刺调节脑缺血再灌注损伤的初步研究

目的:通过对脑缺血再灌注损伤(CIRI)大鼠海马组织环状RNA HDAC2(circHDAC2)表达的研究,探讨针刺抗CIRI的作用机制。方法:SD大鼠随机分为假手术组、模型组、针刺组,每组13只。采用线栓法复制大脑中动脉阻塞再灌注模型。针刺组针刺“大椎”“水沟”“百会”,每次30 min,每隔12 h治疗1次,共7次。干预前后采用改良Garcia评分法评价大鼠神经功能,TTC染色法观察并计算脑梗死面积百分比,基因芯片技术筛选3组大鼠缺血侧海马组织差异表达的环状RNAs(circRNAs),并筛选模型组/假手术组、针刺组/模型组共同差异表达circRNAs(co-DE circRNAs),根据P值、差异倍数(FC)、基因本体(GO)条目富集数量筛选出其中的核心circRNAs,通过实时荧光定量PCR法验证其在缺血侧海马组织的表达水平,根据验证结果构建竞争性内源RNA(ceRNA)预测网络,利用实时荧光定量PCR法验证预测网络中节点中心度高的微小RNA(miRNA)和mRNA的表达水平。结果:干预前,与假手术组比较,各造模组大鼠改良Garcia神经功能评分降低(P<0.01)。干预后,与假手术组比较,模型组改良Garcia神经功能评分降低、脑梗死面积百分比升高(P<0.01);与模型组比较,针刺组改良Garcia神经功能评分升高,脑梗死面积百分比降低(P<0.01)。芯片结果显示:模型组下调和针刺组缺血侧海马组织中上调的co-DE circRNAs为16个,模型组上调和针刺组下调的co-DE circRNAs为7个;根据P值、FC和GO条目富集数量筛选出核心基因circHDAC2和circNTRK2。验证其表达量结果显示,与假手术组比较,模型组大鼠缺血侧海马组织circHDAC2、circNTRK2表达水平下调(P<0.01);与模型组比较,针刺组大鼠circHDAC2、circNTRK2表达水平均上调(P<0.01)。对circHDAC2构建相关ceRNA调控网络,预测结果显示调控网络中包含miRNA12个、mRNA 31个。对调控网络中节点中心度高的miRNA和与神经系统密切相关的mRNA的验证结果显示,与假手术组比较,模型组大鼠缺血侧海马组织miR-29a、miR-29b、溶质载体家族30成员3(SLC30A3)mRNA表达水平下调(P<0.01),miR-3065、巯基丙酮酸硫转移酶(MPST)mRNA表达水平上调(P<0.01);与模型组比较,针刺组大鼠miR-29a、miR-29b、SLC30A3mRNA表达水平上调(P<0.01,P<0.05),miR-3065表达水平下调(P<0.05)。结论:针刺可提高CIRI大鼠的神经功能、降低脑梗死面积,可能与针刺调控海马circHDAC2/miR-3065/SLC30A3轴有关。