壳多糖酶3样蛋白1在肺癌诊断中的临床价值

目的探讨壳多糖酶3样蛋白1(CHI3L1)在肺癌诊断中的临床价值。方法选取2022年1-12月安徽医科大学第一附属医院北区收治的106例肺癌患者为肺癌组,同期收治的76例肺良性疾病患者作为肺良性疾病组及20例健康体检者作为对照组,采用酶联免疫吸附试验法检测CHI3L1水平,化学发光法检测癌胚抗原(CEA)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)、鳞状细胞癌抗原(SCC-Ag)、胃泌素释放肽前体(ProGRP)水平。结果肺癌组血清CEA、ProGRP、NSE、CYFRA21-1、CHI3L1水平较对照组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。肺癌组血清CEA较肺良性疾病组明显升高,而血清CHI3L1较肺良性疾病组明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。与肺腺癌、肺鳞癌患者比较,小细胞肺癌患者血清NSE、ProGRP水平较高,差异有统计学意义(P<0.05);与肺腺癌、小细胞肺癌患者比较,肺鳞癌患者血清CYFRA21-1水平较高,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,肺癌组Ⅰ~Ⅱ期患者血清NSE、CYFRA21-1、CHI3L1水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。对CEA、ProGRP、NSE、CYFRA21-1、CHI3L1进行多因素Logistic逐步回归分析,发现NSE、CHI3L1对肺癌的发生产生影响。CHI3L1、NSE联合检测诊断肺癌的灵敏度为96.2%,特异度为90.0%,曲线下面积为0.965。结论血清CHI3L1可辅助肺癌的诊断与鉴别诊断,CHI3L1、NSE联合检测有助于临床对肺癌的早期发现,具有良好的临床应用价值。

富血小板血浆凝胶对大鼠分层皮瓣移植效果的影响及机制

目的探究富血小板血浆(PRP)凝胶对SD大鼠背部分层皮瓣移植效果的影响及其作用机制。方法建立SD大鼠分层皮瓣和传统皮瓣模型。将60只SD大鼠随机分为分层皮瓣+富血小板血浆凝胶组(实验组)、分层皮瓣+生理盐水组(对照组)和传统皮瓣+生理盐水组(空白组),每组20只。术中对实验组大鼠使用富血小板血浆凝胶,空白组和对照组使用等量生理盐水。分别于术后6 h、第1天、第3天、第5天记录大鼠皮肤组织层的坏死面积、厚度和超声造影下的显影缺损长度。将大鼠皮肤组织层取材石蜡包埋制片后,HE染色计数炎症细胞、观察炎症浸润情况,免疫组织化学染色观察血管内皮生长因子(VEGF)、血小板源性生长因子(PDGF)和转化生长因子-β(TGF-β)的染色情况,并对染色情况进行评分。结果实验组大鼠皮肤组织层术后第3天和第5天的水肿程度低于对照组,坏死面积小于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。同时,实验组大鼠皮肤组织层术后第1天、第3天和第5天超声造影时的缺损长度相较于对照组明显减小,差异有统计学意义(P<0.05)。苏木精-伊红(HE)染色结果提示,与对照组相比,实验组大鼠皮肤组织层的炎症反应更轻。术后第3天,实验组大鼠皮肤组织层的VEGF、PDGF和TGF-β的免疫组化表达水平较对照组明显增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论富血小板血浆凝胶具有减轻皮瓣的水肿程度,降低炎症反应,上调皮瓣组织中VEGF、PDGF和TGF-β的表达,进而减小分层皮瓣的坏死面积的作用。

11种联合方案对耐碳青霉烯类肠杆菌的体外联合药敏试验

目的 观察头孢他啶/阿维巴坦(CZA)联合氨曲南(ATM),亚胺培南(IPM)、美罗培南(MEM)分别联合头孢他啶(CAZ)、头孢哌酮/舒巴坦(SCF)、阿米卡星(AK)、左氧氟沙星(LEV)和磷霉素(FOS)对产KPC、NDM和IMP的耐碳青霉烯类肠杆菌(CRE)的体外联合药物敏感性。方法 选取从临床标本中分离的38株非重复CRE,采用微量肉汤稀释法测定抗菌药物对菌株的最低抑菌浓度(MIC),棋盘稀释法进行联合药敏试验,计算部分抑菌浓度指数(FIC)判定联合效果。结果 CZA对22株产KPC菌株的MIC均≤4μg/mL,对16株产B类金属酶NDM、IMP菌株的MIC均>128μg/mL,联合ATM后协同率为100%;IPM与MEM分别联合SCF协同率最强,分别为63.2%、68.4%,协同率与相加率之和为100%,IPM联合FOS的协同率与相加率之和最低,为40.5%。在肺炎克雷伯菌(KP)中,IPM与MEM联合SCF协同率均为68%,协同率与相加率之和均为100%,IPM联合FOS的协同率与相加率之和最低,为24%;大肠埃希菌(ECO)中,IPM与MEM联合SCF协同率分别为44.4%、77.8%,协同率与相加率之和为100%,IPM联合FOS的协同率与相加率之和最低,为66.7%。基因型KPC菌株中,IPM与MEM联合SCF协同率分别为72.7%、63.6%,协同率与相加率之和均为100%,IPM联合FOS的协同率与相加率之和最低,为22.7%;基因型NDM菌株中,IPM与MEM联合SCF协同率分别为46.7%、80.0%,协同率与相加率之和为100%,IPM联合FOS的协同率与相加率之和最低,为64.3%。所有联合方案均无拮抗作用。结论 CZA单独或联合ATM对CRE菌株有效。IPM与MEM分别联合其他抗菌药物中,IPM与MEM联合SCF的协同率与相加率之和最高,IPM联合FOS的协同率与相加率之和最低。不是所有联合方案都有效,同一菌株不同联合方案的效果不同,同一联合方案对不同菌株效果也不同,两药间的剂量配比也很重要。

阿奇霉素联合左氧氟沙星对不同ST型肺炎克雷伯菌生物膜的抑制和清除作用的研究

目的:研究不同ST型肺炎克雷伯菌生物膜的形成能力及阿奇霉素联合左氧氟沙星对不同ST型菌株生物被膜的抑制和清除作用,旨为预防治疗产生物被膜肺炎克雷伯菌感染提供新思路。方法:随机收集皖南医学院第一附属医院2019年8月至2021年11月从住院患者标本分离的全敏感组肺炎克雷伯菌9株、产超广谱β-内酰胺酶(extended spectrum β-Lactamases,ESBLs)肺炎克雷伯菌19株、耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(carbapenem resistant Klebsiella pneumoniae,CRKP)37株,细菌均采用VITEK MS IVD KB V3.2质谱仪鉴定并使用VITEK 2-compact 60全自动微生物鉴定及药敏系统对细菌进行药敏试验。对各菌株进行多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)分析其同源性;结晶紫染色法进行生物被膜半定量检测,比较不同ST型肺炎克雷伯菌之间生物膜形成能力的差异;选取不同ST型菌株,采用微量肉汤稀释法计算部分抑菌浓度指数(FICI)判断联合效果并选择最佳联合浓度;结晶紫染色法探究阿奇霉素联合左氧氟沙星对不同ST型肺炎克雷伯菌生物膜的抑制及清除效果;激光扫描共聚焦荧光显微镜观察抗菌药物作用前后肺炎克雷伯菌生物膜的结构变化。结果:MLST分型结果显示敏感组肺炎克雷伯菌株有ST86、ST727等8个序列,ESBLs组菌株属于ST15、ST37、ST11等14个序列型,其中ST15占26.32%(5/19);CRKP组菌株属于ST11、ST15、ST656等9个序列型,其中ST11占48.65%(18/37),ST15占27.03%(10/37);ST15(ESBLs)型、ST11(CRKP)型、ST15(CRKP)型肺炎克雷伯菌生物膜均在第5天达到成熟,ST15(ESBLs)组较ST15(CRKP)组产生物被膜能力强,ST11(CRKP)组较ST15(CRKP)组形成生物膜能力强(P<0.01)。阿奇霉素联合左氧氟沙星药敏结果显示对不同ST型肺炎克雷伯菌均具有相加作用;在生物膜形成的抑制及清除试验中,2×MIC阿奇霉素组及联合浓度组均对不同ST型肺炎克雷伯菌生物膜形成具有较强的抑制作用,且联合组的抑制能力优于单药组,抑制率最高可达到89.93%;清除效果均为联合药物组>阿奇霉素>左氧氟沙星,清除率最高为44.79%。结论:不同ST型肺炎克雷伯菌之间生物膜形成能力存在差异,阿奇霉素联合左氧氟沙星对不同ST型肺炎克雷伯菌生物膜具有较好的抑制作用,可在早期联合用药进行抗生物膜菌感染的治疗。

耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌的碳青霉烯酶基因检测和临床分析

目的了解医院耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌(CRE)的临床分布、耐药性分析、携带的碳青霉烯酶耐药基因及患者临床情况。方法收集从临床样本中分离非重复128株CRE菌株,对所有CRE菌株用VITEK2 Compact鉴定仪和基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱仪进行鉴定与复核,进行mCIM和eCIM表型试验、碳青霉烯酶免疫层析法检测酶型和PCR技术检测基因型,用WHONET 5.6软件统计分析CRE临床分布和耐药率。查阅CRE菌株来源患者病历资料。结果mCIM阳性、eCIM阴性82株,mCIM阳性、eCIM阳性22株,m CIM阴性、eCIM不解释24株。免疫层析法检测酶型与PCR检测结果为产KPC菌株82株(78.8%),NDM菌株21株(20.2%),IMP菌株1株(1.0%),未检出VIM和OXA耐药基因。肺炎克雷伯菌主要携带耐药基因KPC(92.8%),大肠埃希菌主要携带耐药基因NDM(91.7%)。主要耐药菌株为肺炎克雷伯菌(72.7%),其次为大肠埃希菌(16.4%),CRE主要分布于神经外科(27.3%),其次为ICU(23.4%),标本类型以痰液标本为主(66.4%),其次为尿液标本(16.4%);对厄他培南、亚胺培南、美罗培南的耐药率分别为100.0%、83.6%和80.5%,头孢他啶/阿维巴坦的耐药率为17.2%,耐药菌株见于产NDM、IMP菌株,但对替加环素耐药率较低(2.5%)。男性70例,女性51例,年龄主要为老年患者,>60岁占53.7%;基础疾病主要见于颅脑疾病,其次为恶性肿瘤、2型糖尿病;抗菌药物使用2种或以上占88.4%;住院天数>14 d占76.9%,抗菌药物使用>14 d占70.2%,患者死亡或自动出院占39.7%。结论CRE菌株主要携带KPC耐药基因,大多分布于神经外科,肺炎克雷伯菌占比最高,以痰标本为主,CRE感染主要见于颅脑疾病,住院时间长,使用抗生素种类多的老年患者,这些结果对于临床加强耐药监测、合理选用抗生素具有重要参考价值。