血根碱的药理作用及其在动物保健中的应用

随着国家全面禁用促生长抗生素以来,植物提取物因其安全、无耐药性等优点,成为动物保健行业中理想的替抗产品。血根碱是一种主要存在于罂粟科植物中的含氮有机化合物,具有抗菌消炎、提高免疫力等作用。本文通过对血根碱的提取方法、主要性质、药理作用及其在动物保健行业中的应用现状进行综述,以期为血根碱在养殖生产中的应用和产品升级提供参考依据。

山东某猪场防疫工作现状及存在的问题

养猪业一直面临着各种疾病的威胁,猪群一旦发病率增高,便会引起企业的经济损失。山东某养猪场采取的早发现和综合防治措施取得了很好的效果,其中某些方面仍然需要改进和提高。本文针对其生产管理流程中存在的问题进行了详细分析,并提出了建议。

高校微生物实验室废弃物处置及安全管理

微生物实验室废弃物合理处置与安全管理是高校实验室安全管理的核心内容,处置不当会造成环境污染或人身伤害,甚至导致社会公共安全事故。分析了微生物实验室废弃物分类与合理处置方法,探讨了废弃物安全管理发展现状及国内高校存在问题,提出了相应策略:制定完善的管理制度,健全废弃物安全管理体系;加强宣传教育与人员培训,提高相关人员的安全意识;加强微生物实验室废弃物处置设施建设;建设微生物实验的虚拟仿真教学项目。

2019-2022年东营市利津县家畜口蹄疫抗体阳性率监测

口蹄疫(foot-and-mouth disease,FMD)是目前危害较为严重的人畜共患病之一,传播迅速且流行广泛。为掌握和预测山东省东营市家畜口蹄疫发生的风险,本研究对2019-2022年东营市利津县口蹄疫抗体阳性情况进行监测。试验采用了口蹄疫A型液相阻断ELISA抗体检测试剂盒和口蹄疫O型抗体液相阻断ELISA检测试剂盒对2019-2022年山东省东营市利津县的猪牛羊商品代养殖场和散养户共计725个养殖场点、11 267份猪牛羊的血清样本进行检测,并从不同年份、不同养殖场类型、不同畜群三个方面进行抗体水平比较分析。结果显示,2019-2022年利津县免疫O型抗体个体合格率和场点合格率分别为91.8%和97.2%,A型抗体个体合格率和场点合格率分别为90.5%和100%。研究表明,利津县口蹄疫整体免疫效果良好,已建立起有效的免疫保护屏障。本研究为评估东营市利津县FMD的防控状况提供了科学依据。

羊种布鲁氏菌Tat系统底物蛋白ErfK的抗原性和免疫原性研究

为分析羊种布鲁氏菌双精氨酸转运系统(twin-arginine translocation system,Tat system)毒力相关底物蛋白L,D-转肽酶ErfK诱导宿主产生的免疫应答情况,首先对布鲁氏菌M28毒株ErfK基因序列(WP_002963714.1)进行生物信息学分析,参考序列设计引物,构建表达载体pET-30a(+)-ErfK,经IPTG诱导表达、亲和层析和镍柱纯化获得目的蛋白;利用SDS-PAGE和Western blot对重组ErfK(rErfK)蛋白进行抗原性鉴定;将rErfK蛋白免疫小鼠,分别在免疫后15、30和45 d收集血清和脾脏,检测蛋白免疫后小鼠的细胞免疫应答和体液免疫应答情况。生物信息学预测结果显示,ErfK蛋白无跨膜结构,为亲水性蛋白,有多个T细胞和B细胞抗原表位;SDS-PAGE和Western blot均可获得25 kDa的蛋白条带,重组蛋白可与布鲁氏菌阳性血清发生反应,证明rErfK有良好的抗原性;小鼠免疫试验结果显示,rErfK组小鼠脾脏CD8^(+)T细胞含量相比PBS组显著上升(P<0.05),且脾脏Th1型细胞因子IL-2、TNF-α、IFN-γ和Th2型细胞因子IL-4转录水平均显著上升(P<0.05),此外,rErfK免疫也能极显著诱导小鼠血清中总IgG和特异性IgG的产生(P<0.01)。上述结果表明,经大肠杆菌表达的布鲁氏菌rErfK蛋白可诱导小鼠产生良好的体液免疫和细胞免疫应答。本研究为基于ErfK蛋白的布鲁氏菌病诊断试剂和亚单位疫苗研发提供了参考依据。

H9N2亚型禽流感病毒跨种间感染传播的风险分析

为深入了解H9N2亚型禽流感病毒的生物学特征,研究对1998年H9N2亚型禽流感病毒流行以来GenBank和GISAID中公开的哺乳动物感染数据进行归纳,对H9N2亚型禽流感病毒的感染和分布情况进行分析。结果显示:中国报告的H9N2亚型禽流感病毒感染人的病例数据最多,占87.21%,且呈增加趋势。中国的75例病例中,以湖北省报告的最多。非人类哺乳动物感染病例涉及10种哺乳动物,包括猪、水貂、貉、雪貂、犬、果子狸、蝙蝠、猫、马和鼠兔,均为陆生哺乳动物,其中有61.4%的感染病例属于猪源。数据库中的大多数H9N2亚型禽流感病毒均含有关键氨基酸位点突变。研究表明,H9N2亚型禽流感病毒跨种间感染传播的风险高,关键氨基酸位点易发生突变,监测H9N2亚型禽流感病毒在哺乳动物中的感染分布至关重要。

山东省部分地区仔猪病毒性腹泻流行病学调查

为了解山东省仔猪病毒性腹泻的流行状况,本研究根据Gen Bank中登录的猪流行性腹泻病毒（PEDV）、猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）及猪轮状病毒（PRo V）序列,分别设计扩增引物,采用RT-PCR方法对2013年10月～2014年10月采集的226份腹泻样品进行检测。结果显示226份病料样品中,PEDV、TGEV及PRo V的阳性率分别为34.96%、2.21%及28.76%,并且不同季节PEDV和PRo V均有感染,表明PEDV和PRo V是引起山东省仔猪腹泻的主要病原,并且山东省PRo V的感染率明显高于全国。规模化猪场与散养户相比,PEDV、TGEV及PRo V 3种病原的检出率明显降低,而且相对于未免疫腹泻二联苗的母猪,免疫母猪生产的仔猪发生腹泻后,该病原的检出率有所降低,表明合理的饲养环境和免疫对该病具有有效的防控作用。

山东五大地方鸡禽白血病病毒主要流行亚型鉴定及其分离株gp85基因的分子特征分析

通过对山东五大地方鸡(寿光鸡、芦花鸡、百日鸡、琅琊鸡、鲁西斗鸡)不同亚型禽白血病病毒(ALV)分离株鉴定及gp85基因序列分析,探究山东五大地方鸡ALV的主要流行亚型及gp85基因分子特征。分别将寿光鸡、百日鸡、芦花鸡的无菌抗凝血和琅琊鸡、鲁西斗鸡的卵白接种CEF培养9~10d,常规方法提取感染细胞的cDNA,用针对J亚型ALV(ALV-J)gp85基因(924bp)的引物和A^J(含囊膜蛋白env基因,2 400bp)的群引物进行PCR扩增、克隆、测序并分析其特点。本研究发现,2009—2011年间,山东五大地方鸡均存在ALV-J感染,5个ALV-J分离株gp85基因之间的相似性为98.4%~99.9%,与原型毒株HPRS-103相似性为97.8%~98.3%;均扩出内源性ALV(ALV-E)片段,与不能产生传染性病毒粒子的ev-1、ev-3、ev-6毒株相似性最高,推测为鸡基因组所携带;同时还发现,琅琊鸡、芦花鸡存在A亚型ALV(ALV-A)的感染。研究结果表明,2009—2011年间的山东五大地方鸡已经普遍存在ALV-J,两大品系中存在ALV-A和ALV-J共感染,同时ALV-E的片段广泛存在,这一结论揭示出山东地方鸡的禽白血病净化工作更加具有挑战性。

山东部分地区肉鸭群鸭圆环病毒血清学调查

为了解鸭圆环病毒(DuCV)在山东地区的流行情况,本研究采用已建立的间接ELISA(iELISA)方法对山东省潍坊和泰安两个地区的17个肉鸭场1 130份血清进行DuCV抗体检测。结果显示,肉鸭场的DuCV抗体个体阳性率为2%～78%,平均为29.91%(338/1130),群体阳性率为100%(17/17)。潍坊地区的抗体阳性率(42.81%)明显高于泰安地区(17.73%),显示DuCV在老养殖区鸭群中污染更加严重。

国家虚拟仿真一流课程的教学研究与实践

国家虚拟仿真一流课程“家禽病毒性传染病疫苗的生产应用虚拟仿真实验”建立虚拟实验场景,仿真仪器设备操作,模拟疫苗生产应用实验过程等,为实验教学提供了一个先进而灵活的环境。通过校内线上线下混合式教学、互联网内线上开放共享、实验空间全天候开放等模式进行实践应用,突破了时间和空间限制,避免了生物安全风险,缩短了实训周期,克服了动物福利困扰。有效提高了培训效果,实现了资源共享和校企人才双培养。

山东省某规模化兔场皮肤真菌病的快速诊断

为了鉴定某规模化兔场发生皮肤真菌病的病原,并为家兔皮肤真菌病的快速检测提供一种分子生物学方法。根据皮肤真菌特异性rDNA序列设计通用引物(5′-CACCGCCCGTCGCTACTAC-3′和5′-TTTCGCT-GCGTTCTTCAT-3′),对已知分离株及其他微生物等进行特异性检测;应用该引物对所采取的种兔患部病料35份和临床健康种兔的样本5份,进行PCR检测并克隆测序。该引物对四种常见病原性皮肤真菌分离菌株扩增出一条在400bp-500bp之间的条带,其中红色毛癣菌和须癣毛癣菌为460bp,犬小孢子菌500bp,石膏样小孢子菌为400bp,但对其它微生物和兔体细胞均未扩增出类似片段,说明具有特异性;对临床35份病料中的33份均扩增出一条460bp条带,为毛癣菌属,与测序结果一致。健康种兔的样品未扩增出类似片段。本研究利用通用引物对家兔皮肤真菌病进行PCR检测并确定其主要病原,具有快速、简便和特异性强等特点,可用于大规模的家兔皮肤真菌病的诊断,并具有重要的公共卫生意义。

不同激素组合对山东白山羊同期发情的比较研究

以山东白山羊为研究对象,应用国产的孕酮阴道海绵栓,结合PMSG/FSH、PG和HCG,将78头受体羊随机分为4组进行同期发情及卵巢排卵研究。结果显示:放栓15 d,同时在去栓前3 d肌注400 IU/只PMSG和去栓前1 d肌注0.1 mg/只PG,鉴定发情后再肌注100 IU/只HCG处理方案效果最好,发情率为84.21%,黄体形成率为75%。同时手术检查卵巢卵泡和黄体形成情况,处理方案中放栓15 d+PMSG+PG+HCG组卵巢上均有多个排卵黄体,并且排卵窝比较明显。该研究所优化的方案为获得高质量的转基因胚胎移植受体羊提供了技术支持。

山东省禽源大肠杆菌中超广谱β-内酰胺酶的基因型检测

为研究山东省禽源大肠杆菌中产超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum b-lactamases,ESBLs)的基因型分布及其对头孢类抗生素的耐药性,分别用针对TEM、SHV、OXA-2、OXA-10、CTX-M-1、CTX-M-2、CTX-M-8与CTX-M-9等8个耐药基因的通用引物对118株禽源大肠杆菌进行了PCR检测,并对其进行了5种头孢类抗生素(头孢拉定、头孢哌酮、头孢曲松、头孢噻肟、头孢噻呋)的药敏试验。结果表明山东省禽源大肠杆菌对5种头孢类抗生素均产生了较高耐药性(54.24%～81.36%),其产ESBLs的耐药基因携带率达到75.42%(89/118),29.66%(35/118)的菌株携带2种产ESBLs基因,11.86%(14/118)的菌株携带3种产ESBLs基因。山东省禽源大肠杆菌中未检测到SHV、CTX-M-2、CTX-M-8与OXA-10基因,TEM、CTX-M-9、CTX-M-1和OXA-2基因的检出率依次为52.54%(62/118)、37.29%(44/118)、28.00%(33/118)和10.17%(12/118)。

山东省规模化猪场PRRSV NSP2变异株的感染情况调查

为了解山东省规模化猪场猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)NSP2变异株的感染情况,2010～2011年本研究从山东省未免猪繁殖与呼吸障碍综合征(PRRS)疫苗猪场、免疫进口PRRS弱毒苗猪场和免疫国产PRRS弱毒苗猪场选择20个临床表观健康的规模化猪场,采集830份血清,利用RT-PCR方法对其进行PRRSVNSP2变异株病原学检测。结果表明山东省规模化猪场普遍存在PRRSV NSP2变异株感染,而且临床表观健康的未免疫PRRS疫苗猪场、免疫进口PRRS弱毒苗猪场及免疫国产PRRS弱毒苗猪场中PRRSV NSP2变异株的检出率由高到低,同一猪群中存在PRRSV NSP2变异株野毒和疫苗毒。

畜禽健康养殖与动物福利

当今的畜禽饲养管理方式与动物健康和福利的矛盾日益突出,且存在着许多弊端和问题。文章在分析动物健康养殖与福利提出的背景、健康养殖与动物福利的概念、动物保护及福利的目的意义基础上,提出实现动物保护及福利的要求:善待动物是基本要求;卫生与保健是福利的核心;疫病控制是福利的重要措施;提供合理的营养是福利的重要保障;理性地满足生理需要,维持动物行为;适应动物种类的饲养方法。

山东省樱桃谷鸭群鸭圆环病毒及其混合感染的调查

2006～2007年间,在山东省70个樱桃谷鸭群采集742只鸭样品,对鸭圆环病毒的感染与流行情况调查发现,33.29%感染了鸭圆环病毒;3、4周龄的鸭较2周龄更易感;与DuCV阴性鸭比较,DuCV阳性鸭与鸭Ⅰ型肝炎、鸭疫里默氏杆菌及大肠杆菌的混合感染率较高。有关樱桃谷鸭感染鸭圆环病毒的流行病学调查在国际上为首次报道。

山东省白羽肉鸡规模养殖模式及主要疫病控制现状

山东省是最早开展规模化白羽肉鸡养殖的省份。目前每年出栏白羽肉鸡20亿只左右,占全国的四分之一,出口肉鸡产品约占全国的一半。单一鸡场养殖规模越来越大,鸡场建设水平越来越高,但是随着养殖密度的增加,疾病也相对较多。

动物微生物学实验菌种保藏与管理

菌种保藏的方法有传代培养法、甘油法、干燥法、冷冻真空干燥法及液氮超低温法等,不同方法保藏菌种的种类、时间不同,要根据实际情况选择合适的方法。在实际工作中,对传代培养法进行改良,取得较好效果,同时,采取相应的措施对菌种保藏工作进行管理。

泰安市部分地区产蛋鸡群高致病性禽流感抗体检测分析与防控

为了解泰安地区产蛋鸡群高致病性禽流感的免疫情况及感染风险,本研究采用血凝及血凝抑制试验对从泰安市三个地区共九家规模化蛋鸡场产蛋鸡群采集的144份血清样本进行抗体检测。检测结果显示,144份血清样本中,H5-14亚型抗体滴度在6~12之间,平均滴度8.17,场和样品合格率均为100%;H7-4亚型抗体滴度在4~12之间,平均滴度7.10,场合格率为77.78%,样品合格率95.14%,其中H5-14亚型禽流感的抗体滴度平均值较H7-4亚型高。上述结果表明,泰安部分地区产蛋鸡群高致病性禽流感免疫效果较好,未见抗体水平过高及离散度过大的疑似感染鸡群。但个别鸡场H7亚型抗体水平存在偏低的情况,应加强抗体水平检测,评估鸡群免疫状态及感染风险,以期为疫苗选择及免疫程序制定提供参考依据。

噬菌体疗法及其在畜禽养殖过程中的应用

噬菌体是一种专门裂解细菌的微生物,可作为一种天然的抗菌制剂,具有特异性强、副作用小、无药物残留等特点。本文论述了噬菌体作用机制、疗法及其在畜禽养殖生产上的应用进展。