凤尾草配方颗粒4个成分含量同时测定及其总黄酮提取工艺优化

目的建立一测多评法同时测定凤尾草配方颗粒中4个成分,并优化其总黄酮提取工艺。方法采用(超高效液相色谱)UPLC法,以野漆树苷为内标物,建立一测多评(Quantitative analysis of multicompounds by single-marker,QAMS)法计算凤尾草配方颗粒中忍冬苷、木犀草素、芹菜素的相对校正因子,考察其耐用性。采用外标法测定凤尾草配方颗粒中4个成分含量,比较一测多评法计算值与外标法实测值的差异。通过单因素实验研究超声时间、乙醇体积分数、料液比、超声功率对凤尾草配方颗粒总黄酮提取率的影响。在此基础上,进行3因素3水平的Box-Behnken实验,优化总黄酮的提取工艺,并进行验证实验。结果7批凤尾草配方颗粒中野漆树苷的含量范围为0.035%-0.056%,忍冬苷、木犀草素、芹菜素的QAMS法含量测定结果范围分别为0.085%-0.167%、0.014%-0.028%、0.004%-0.008%,均与外标法测定结果无显著差异。总黄酮的最佳提取条件为以80%乙醇水、料液比1:20、超声提取40 min,平均提取率为24.46 mg·g^(-1)。结论建立的一测多评法准确可行,基于Box-Behnken响应面法优选的总黄酮提取工艺简单可行,可为凤尾草配方颗粒的质量评价提供参考。

青皮饮片、水煎液、配方颗粒的超高效液相色谱指纹图谱相关性研究

目的建立青皮饮片、水煎液、配方颗粒超高效液相色谱(ultra performance liquid chromatography,UPLC)指纹图谱,并考察其相关性和差异性。方法采用UPLC法测定15批青皮饮片、水煎液、配方颗粒的指纹图谱,并对其进行相似度评价、斯皮尔曼(spearman)相关性分析、聚类分析(cluster analysis,CA)、主成分分析(principal component analysis,PCA)及正交偏最小二乘法判别分析(orthogonal partial least squares discriminant analysis,OPLS-DA)。结果青皮饮片、水煎液、配方颗粒的UPLC指纹图谱均确定了7个共有峰,并指认了辛弗林、芸香柚皮苷、橙皮苷、香蜂草苷、川陈皮素、橘皮素;15批青皮饮片、水煎液、配方颗粒指纹图谱与相应对照指纹图谱的相似度均大于0.890,三者对照指纹图谱的相似度均大于0.970;斯皮尔曼相关性分析结果显示,除橙皮苷外,青皮饮片、水煎液及其配方颗粒的其余6个共有峰均呈现显著的正相关性;CA、PCA及OPLS-DA结果均表明青皮水煎液与配方颗粒更为接近;OPLS-DA筛选出3个VIP值大于1的差异性标志物。结论青皮饮片、水煎液及配方颗粒的主要化学成分基本相同,并且具有较高的相关性,可为青皮配方颗粒的生产及质量控制提供参考。

基于质量源于设计理念和信息熵赋值法优化陈皮配方颗粒喷雾干燥工艺

目的应用质量源于设计理念,建立陈皮配方颗粒喷雾干燥工艺的设计空间并进行验证。方法将浸膏粉的得粉率及芸香柚皮苷、橙皮苷、川陈皮素和橘皮素含量作为关键质量属性,通过信息熵赋值法确定各质量指标的权重系数,并计算综合评分。采用Plackett-Burman试验设计对进风温度、雾化压力、药液温度、进料速度和药液相对密度进行筛选,运用中心点复合设计试验对筛选出的关键工艺参数进行优化,建立工艺设计空间,并选取6个试验点检验模型的预测能力。结果Plackett-Burman试验设计确定了药液相对密度和进料速度为关键工艺参数;中心点复合设计试验方差分析结果显示构建的模型可较好描述关键质量属性和关键工艺参数之间的关系(P<0.01);构建的关键工艺参数优化设计空间为药液相对密度1.04~1.05,进料速度18%~32%。结论在工艺参数设计空间内生产能够保证陈皮配方颗粒品质稳定,利于提高批次间质量均一性,为产业化提供数据支持。

干燥方式对小承气汤浸膏粉物理指纹图谱及化学成分的影响

目的考察4种干燥方式对小承气汤浸膏粉物理指纹图谱及化学成分含量的影响,优选合适的干燥方式。方法分别采用喷雾干燥、鼓风干燥、真空干燥、冷冻干燥制备小承气汤浸膏粉,以5个一级指标和9个二级指标构建物理指纹图谱,采用相似度评价、聚类分析(CA)比较其物理指纹图谱的差异,通过计算可压性参数比较4种浸膏粉的压缩成型性。采用HPLC法测定柚皮苷、新橙皮苷、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、和厚朴酚、厚朴酚、大黄酚、大黄素甲醚这9个成分的含量。结果4种干燥方式小承气汤浸膏粉物理指纹图谱相似度范围为0.865~0.950;聚类分析可将4种小承气汤浸膏粉分为2类;喷雾干燥粉具有良好的压缩成型性;4种干燥方式的小承气汤浸膏粉化学成分含量差异无统计学意义(P>0.05)。结论小承气汤采用喷雾干燥所得浸膏粉与采用冷冻干燥所得浸膏粉物理及化学性质基本一致,为该经典名方制剂工艺开发的干燥方式选择提供研究依据。

基于特征图谱及多成分定量的首乌藤饮片与标准汤剂量值传递规律研究

本文建立首乌藤的含量测定方法和指纹图谱评价方法,研究首乌藤饮片到标准汤剂的量值传递规律。收集全国主产地和道地产地具有代表性的20批首乌藤药材,按《中国药典》2020年版规定制备成首乌藤饮片,并按《中药配方颗粒质量控制与标准制定技术要求》制备成首乌藤标准汤剂;采用HPLC建立适用测定含量及指纹图谱方法,以转移率、出膏率及指纹图谱相似度为指标,分析首乌藤饮片到标准汤剂的量值传递规律。结果显示,20批首乌藤标准汤剂出膏率为10.4%~16.1%,均值为12.9%,均位于均值的±30%范围内。除了四川产地的样品外,其余产地首乌藤饮片及其标准汤剂HPLC对照指纹图谱相似度均良好(>0.9),且二者具6个共有峰,并通过对照品指认其中的4个峰分别2,3,5,4-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素、大黄素甲醚。四个已知成分的转移率分别为26.58%~53.07%(2,3,5,4-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷)、12.37%~42.84%(大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷)、3.83%~18.71%(大黄素)、0.35%~4.13%(大黄素甲醚)。本文建立了首乌藤饮片及其标准汤剂含量测定方法和指纹图谱方法,阐明了二者之间的化学成分的量值传递规律,为首乌藤水提物及其配方颗粒质量控制提供参考。

南五味子药材UPLC指纹图谱及一测多评法研究

建立南五味子药材超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱和6种木脂素类成分一测多评法(QAMS),为南五味子药材质量标准提高提供参考。采用UPLC法建立南五味子药材指纹图谱,运用聚类分析(HCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)对指纹图谱进行分析;以五味子酯甲为内参物,建立五味子酯丙、五味子酯乙、安五脂素、五味子甲素和五味子酯丁的一测多评法,并与外标法(ESM)测定结果对比,判断方法的准确性。14批南五味子药材指纹图谱确定了15个共有峰,通过对照品比对指认了其中7个成分,分别为原儿茶酸、五味子酯丙、五味子酯甲、五味子酯乙、安五脂素、五味子甲素、五味子酯丁,其指纹图谱相似度均在0.95以上;通过聚类分析(HCA)和正交偏最小二乘法-判别式分析(OPLS-DA)可以将南五味子药材分为4类,峰1(原儿茶酸)、峰2、峰4、峰6、峰7(五味子酯乙)、峰8、峰9、峰12、峰15共9个成分是导致产地差异性的主要标志物。一测多评法与外标法测定的五味子酯丙、五味子酯乙、安五脂素、五味子甲素和五味子酯丁含量结果无显著差异。所建立的方法简便、可靠,为南五味子药材质量评价提供参考。

UPLC指纹图谱结合多指标成分的广东王不留行质量评价研究

目的建立指纹图谱和多指标成分测定方法评价不同产地广东王不留行药材。方法采用UPLC法建立广东王不留行药材特征图谱和绿原酸、芦丁的测定方法,采用熵权法所得权重作为分辨系数构建广东王不留行的质量评价模型,灰色关联度法计算各指标的相关关联度。结果广东王不留行UPLC特征图谱共确定8个共有峰,指认了其中3个成分新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸。测定了13批不同产地广东王不留行中绿原酸和芦丁。13批广东王不留行药材的相对关联度范围为0.1162~0.8105,不同批次样品之间的质量存在一定的差异,广东肇庆产广东王不留行的质量较优。结论建立的方法可有效评价不同产地广东王不留行的质量,为广东王不留行的药材质量控制提供参考。

鹅不食草药材倍半萜内酯类特征图谱的建立及多成分定量研究

目的采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)建立鹅不食草药材倍半萜内酯类特征图谱,并同时测定4种有效成分的含量,评价不同产地鹅不食草药材质量的差异。方法采用HPLC法进行测定,色谱柱为Waters HSS T3(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为乙腈-0.02%磷酸溶液,梯度洗脱,体积流量为1.0 mL/min,波长为225 nm,柱温为40℃,进样量为10μL;建立20批鹅不食草药材特征图谱,通过对照品比对并结合紫外-3D光谱分析,对共有峰进行鉴定,并对4种成分的含量进行测定;对20批鹅不食草药材倍半萜内酯类特征图谱进行相似度评价及主成分分析(principal component analysis,PCA),利用正交偏最小二乘法—判别分析(orthogonal partial least-squares discrimination analysis,OPLS-DA)寻找不同产地鹅不食草药材的差异性成分。结果鹅不食草药材特征图谱有7个共有峰,指认出其中4个峰,分别为短叶老鹳草素A、山金车内酯C、山金车内酯D和小堆心菊素C;除广西产区的3批样品外,其余17批样品相似度均大于0.95;PCA将20批鹅不食草药材划分为2类,OPLS-DA法确定3个差异标志物,差异显著性排序分别为峰6>山金车内酯C>峰7。广西产区山金车内酯C含量明显高于其它产地。结论该方法能有效地分析不同产地鹅不食草药材质量的差异性,为不同产地鹅不食草药材质量的评价提供参考。

不同产地密蒙花指纹图谱研究

目的:建立UPLC指纹图谱结合化学模式识别以及化学成分分析的密蒙花药材质量评价方法。方法:建立密蒙花药材UPLC指纹图谱,采用化学计量法分析不同产地的密蒙花药材质量差异,采用超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS)对指纹峰进行鉴别。结果:20批密蒙花药材指纹图谱相似度在0.9以上,确定了11个共有峰并得到鉴定,各批样品之间的相似度在0.9以上。聚类分析将20批密蒙花分为3类;主成分分析表明主成分1、2、3是影响密蒙花药材质量的主要因子,OPLS-DA分析筛选出6个差异性标志物。结论:该研究为深入密蒙花药材质量控制研究提供科学依据。

多指标权重分析法结合正交试验优选醋五灵脂炮制工艺

目的:优选醋五灵脂的炮制工艺。方法:建立超高效液相色谱指纹图谱,以醋五灵脂9个共有峰的主成分分析结果及外观性状为综合评价指标,采用正交试验考察米醋用量、电炒锅功率、炒制时间对醋五灵脂炮制工艺的影响,以综合得分为评价依据优选醋五灵脂炮制工艺。结果:醋五灵脂的最佳炮制工艺为每100 g五灵脂使用米醋10 g,电炒锅功率600 W,炒制时长10 min。结论:优选的醋五灵脂炮制工艺稳定可行,可为其饮片质量控制和产业化生产提供参考。

不同产地绵马贯众药材质量研究

目的建立绵马贯众药材超高效液相色谱(UPLC)特征图谱及含量测定方法,对不同产地绵马贯众药材进行综合评价。方法采用UPLC对15批不同产地绵马贯众药材进行特征图谱测定,并结合聚类分析、偏最小二乘法分析对其质量进行评价,同时采用紫外分光光度法进行总黄酮含量测定。结果所建立的特征图谱共确定了21个共有峰,并通过对照品比对指认了其中4个成分。聚类分析及偏最小二乘法分析显示,辽宁省鞍山市、吉林省延边朝鲜族自治州、黑龙江省佳木斯市、吉林省吉林市样品具有一定的一致性,而总黄酮含量测定结果显示,不同产地之间样品含量差异较大。结论建立绵马贯众药材的UPLC特征图谱及总黄酮含量测定方法,可用于全面评价不同产地绵马贯众药材的质量。不同产地绵马贯众样品质量较为接近,但3个产地药材总黄酮含量差异较大。

基于化学计量学分析的不同花期梅花UPLC指纹图谱研究

目的建立不同花期梅花超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱, 为梅花药材的质量研究提供参考。方法采用UPLC法建立梅花药材指纹图谱, 并利用高效液相色谱-高分辨质谱(LC-MS)对共有峰进行指认, 以不同花期梅花药材指纹图谱共有峰峰面积为变量, 进行化学计量学分析, 采用峰面积计算法对不同花期梅花中黄酮和酚酸类成分的变化进行半定量分析。结果不同花期梅花药材指纹图谱均标识出31个共有峰, 并指认出9个成分;聚类分析和主成分分析均将不同花期梅花药材分成3类, 其中花蕾期与盛花期、末花期组间差异较大, 而盛花期与末花期组间差异较小。正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)共筛选出16个VIP>1.0的差异性成分。不同花期酚酸类成分含量依次为花蕾期>盛花期>末花期, 而黄酮类成分含量依次为盛花期>末花期>花蕾期。结论该方法操作简便, 方法可靠, 可为不同花期梅花药材的质量评价提供参考。