"三点分析法"在医学生物化学教学中的应用

生物化学是医学教学中的一门重要专业基础课,知识点密集,内容及深度更新快,教学难度较大.为了在有限学时内达到更好的教学效果,教学方法是很重要的."三点分析法"就是在授课中从"重点、难点、考点"三方面对众多知识点加以分析的教学方法,"教、学、考"相结合,引导学生增强分析能力和自学能力.

生物化学多媒体教学的实施

目的： 探索制作和使用计算机多媒体辅助教学课件的方法， 为教学手段的改革提供依据。方法： 收集资料 （包括各种教材、期刊、图形、声音、视频等） →书写脚本、选定／绘制插图→在应用软件上输入文字、绘制图形、插入扫描图、声音、视频等 →进行编辑、排版、配色、自定义动画和链接→征求意见、具体实施→收集反馈意见、修改完善。结果： 与传统的教学相比， 计算机多媒体辅助教学具有形象、直观、信息量大等优点， 师生对其效果表示肯定。结论： 计算机多媒体辅助教学的实施对促进教学改革，

基于Internet的远程教学系统：生物化学网上课室的建立

Ｉｎｔｅｒｎｅｔ和ＷＷＷ技术的应用为远程教育课件的制作提供了广阔的前景，本文探讨了如何利用Ｉｎｔｅｒｎｅｔ的ＷＷＷ技术研制开发《生物化学》远程教学系统。

检验医学专业双语教学的几点思考

双语教学是检验医学专业教学中的一个重要内容。本文针对检验医学专业的特点,对在检验医学专业中实施双语教学的必要性、存在的问题和对策、以及教学模式进行了初步的思考分析。

开设分子生物学检验技术对实验技能的促进

为适应临床检验诊断学的发展,我院在2003级检验医学专业开设了《分子生物学检验技术》。学生对该课程表现出极大兴趣和热情,实验课中学生们表现尤其积极;比较2003级和2002级学生“基本实验技能考试”成绩,发现2003级学生基本操作、实验理论及技能考核等成绩均比2002级学生好,开设《分子生物学检验技术》课程对检验医学专业学生实验技能有促进作用。

硫氧还蛋白融合表达系统表达的小鼠内皮抑素之纯化和生物学活性鉴定

目的:将硫氧还蛋白融合表达系统表达的小鼠内皮抑素(endostatin)进行纯化并对其生物学活性进行测定.方法:将含有pThioHis-endo重组质粒转化大肠杆菌BL21,经IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)诱导表达重组融合蛋白,SDS-PAGE分析表达产物为包涵体,将包涵体纯化后通过镍柱亲和层析得到纯化的、可溶性的小鼠内皮抑素,经SDS-PAGE分析鉴定.将纯化的蛋白质通过鸡胚尿囊膜血管生成抑制实验和内皮细胞抑制实验对纯化的蛋白质进行生物学活性测定.结果:经SDS-PAGE电泳分析获得了高纯度的小鼠内皮抑素重组融合蛋白,纯度可达95%,得率为0.27g/L.纯化的重组蛋白在体外能抑制鸡胚囊膜血管生成及具有抑制血管内皮细胞增殖的活性,加入重组蛋白内皮抑素5μg组与10μg组血管生成抑制率分别为(22.3±2.0)%和(47.1±4.0)%,P<0.05,和对照组经过方差分析,差异都有显著性意义;内皮细胞抑制实验可见不同剂量重组蛋白内皮抑素对内皮细胞的生长具有抑制作用[抑制率分别为(49.6±4.1)%,(53.2±2.3)%,(55.0±3.6)%,(67.1±5.7)%],经过方差分析和相关性分析,具有剂量依赖效应(r=0.984,P<0.05).结论:用硫氧还蛋白融合表达系统在大肠杆菌中表达的小鼠内皮抑素重组融合蛋白易纯化并具有高活性.

胃泌素类似物的合成及初步生物活性的研究

采用液相合成法合成了６个胃泌素类似物，其中两个（Ⅵ、Ⅶ）未见文献报道。改进了合成中的关键中间体──四肽胃泌素（Ⅶ）的合成工艺，由原来的１５步反应，缩短到１０步，使总收率由原来的１５％提高到３５％。新设计的两个类似物，经狗胃灌流实验测定，均具刺激胃酸分泌的活性，提示：这类（Ⅵ、Ⅶ）化合物有可能为治疗胃肠道疾病的药物设计提供一种新的结构类型。

微生物对壳聚糖纤维的降解

采用活性污泥法研究了壳聚糖纤维的生物降解性能。污泥中的细菌、真菌等微生物能产生壳聚糖酶以及一些非专一性水解酶,它们对壳聚糖纤维有降解作用。浸泡处理壳聚糖纤维的降解作用要比掩埋处理的明显。浸泡在活性污泥泥浆中的纤维6周后质量减少55.9％,绝对强力下降57.6％。结果说明壳聚糖纤维具有良好的生物降解性能。

地塞米松与肝素对HL－60细胞增值和生物大分子合成的影响

用地塞米松（Ｄｅｘ）和肝素（Ｈｅｐ）Ｉｃ６０及Ｉｃ５０低一个剂量，对ＨＬ－６０细胞增殖、生长曲线和分裂指数均有明显的抑制作用，联合应用时抑制作用显著增强；对ＤＮＡ和蛋白质合成抑制作用大于ＲＮＡ，联合应用抑制作用均显著增强，提示两药抑制ＨＬ－６０细胞增殖、分裂和生长可能与它们抑制ＤＮＡ和蛋白质合成有关，亦与抑制ＲＮＡ合成有一定关系。

厚朴酚对大鼠中性白细胞花生四烯酸代谢酶的影响

目的 :研究厚朴酚对花生四烯酸代谢酶活性的影响 ,以阐明其抗炎机理。方法 :以大鼠胸腔白细胞为材料 ,分别用高效液相色谱法和放免方法测定白三烯B4(LTB4)、5 羟二十碳四烯酸 (5 HETE)和 6 酮前列腺素1α的生物合成。结果 :在 5 5～ 13 5 μmol/L的浓度范围内 ,厚朴酚可剂量依赖性地抑制完整中性白细胞中LTB4的生物合成 ,在 10～ 2 0 μmol/L的浓度下可以抑制破碎细胞中 5 脂氧合酶 (5 LO)的酶活性。在浓度低于 10 μmol/L时 ,厚朴酚对破碎细胞中白三烯A4水解酶 (LTA4 H)的活性没有明显的影响 ,但增加其浓度 ,则可以明显地抑制LTA4 H的活性。同时 ,厚朴酚在较高浓度下可以抑制破碎细胞中环氧化酶的活性。结论 :厚朴酚可以抑制花生四烯酸的 5 LO和环氧化酶代谢通路 ,这可能与其抗炎作用机理有关。

猪苓多糖对小鼠腹腔巨噬细胞诱导型一氧化氮合酶活性及mRNA表达的影响

目的:探讨猪苓多糖(polyporuspolysaccharide,PPS)的免疫调节作用和抗肿瘤作用机制。方法:采用Griess反应、荧光法和RT-PCR分别测定不同剂量的PPS作用下小鼠腹腔巨噬细胞的NO生成量、iNOs活性及mRNA表达水平。结果:PPS能使小鼠腹腔巨噬细胞iNOS活性增高,并呈作用剂量依赖关系,PPS能刺激小鼠腹腔巨噬细胞iNOSmRNA表达。结论:PPS刺激小鼠腹腔巨噬细胞NO合成的调节可发生在iNOS的转录水平,从而刺激巨噬细胞NO大量合成与释放。PPS的免疫调节作用和抗肿瘤作用机制可能与PPS刺激巨噬细胞iNOS从头合成从而增加NO生成有关。

毛细管胶束电动色谱法测定淫羊藿及其中药制剂中淫羊藿苷的含量

建立淫羊藿及其制剂中淫羊藿苷的毛细管胶束电动色谱分析方法。电泳缓冲液由2 0mmol/L四硼酸钠、4 5mmol/L脱氧胆酸钠、φ =35%乙腈 (pH =8.5)组成 ,以卡马西平为内标 ,工作电压 2 5kV ,检测波长 2 70nm。该方法在 5～ 80mg/L范围内呈线性 ,r =0 .9998,日内、日间RSD1.9%～ 4 .8%。毛细管胶束电动色谱法专一性强 ,精密度高 ,是一种较好的中药有效成分检测方法。

毛细管电泳法分析血清中华法林对映体的浓度

建立了血中华法林对映体的毛细管电泳分析方法。电泳缓冲液由１４０ｍｍｏｌ／Ｌ磷酸盐缓冲液和７ｍｍｏｌ／Ｌ的甲基β－环糊精组成（ｐＨ７．９）。工作电压１３ｋＶ，检测波长２１０ｎｍ。两种对映体Ｓ（－）－华法林及Ｒ（＋）－华法林达到基线分离，在０～５μｇ／ｍｌ范围内呈线性。血中华法林对映体最低检测浓度均为０．０２μｇ／ｍｌ，精密度及回收率均较好。

115例脑卒中患者血清神经元特异性烯醇化酶测定及其意义

目的 研究脑卒中时血清神经元特异性烯醇化酶 (NSE)的变化及与神经功能缺损的关系。方法 脑出血46例 ,脑梗死 6 9例 ,正常对照 2 1例。患者分别在起病 3d内及 2周时采集血标本。血清NSE测定采用酶联免疫分析方法 ,神经功能缺损评定按斯堪的纳维亚卒中量表 (SSS)标准进行。结果 脑梗死、脑出血组 3d内及起病 2周时血清NSE明显高于正常对照组 (均为P <0 .0 0 1) ,并与SSS呈明显正相关 (P <0 .0 0 1)。结论 脑卒中早期血清NSE明显升高 ,血清NSE与SSS之间有明显相关性。

长链非编码RNA AK089560在间质干细胞成骨与成脂分化中的表达

背景:最近研究发现众多长链非编码RNA调控干细胞多潜能性和分化。长链非编码RNA AK089560在干细胞多向分化中的表达变化及作用,目前尚不清楚。目的:观察间质干细胞C3H10T1/2成骨分化与成脂分化过程中AK089560的表达。方法:重组人骨形态发生蛋白2诱导间质干细胞C3H10T1/2成骨分化,碱性磷酸酶染色鉴定早期成骨分化。地塞米松、吲哚美辛和胰岛素三因子联合诱导C3H10T1/2成脂分化,油红O染色鉴定成脂分化结果。采用qRT-PCR检测诱导前后不同时间点AK089560表达的变化。采用RNAfold软件预测AK089560二级结构,UCSC基因组浏览器分析AK089560邻近编码蛋白基因,fancyGENE在线软件构件长链非编码RNA与编码基因关系图。结果与结论:C3H10T1/2经成骨诱导后,70%以上细胞碱性磷酸酶染色阳性;成脂分化诱导后,80%以上细胞油红O染色阳性。qRT-PCR结果显示,长链非编码RNA AK089560在成骨分化与成脂分化第2,4,6天表达均明显下降,成骨分化与成脂分化第2,4,6天与相应时间未分化组相比均差异有显著性意义(P<0.05)。生物信息学分析表明,LncRNA AK089560具有复杂茎环结构,与编码基因Sema3a形成sense overlap关系。结果表明AK089560在间质干细胞成骨与成脂分化中下调表达,提示其可能参与调控间质干细胞多向分化。