肌肽对叔丁基过氧化氢诱导肝细胞损伤的修复作用

肌肽是一种新型的食品补充剂,具有多种生物活性功能,已广泛应用于保健品、功能饮料、美容等领域,但肌肽对肝损伤修复的研究与应用鲜有报道。该文旨在研究肌肽对肝损伤的修复作用并探究其作用机制。肌肽预处理正常人肝细胞(normal human hepatocyte,L-02)12 h,400 mmol/mL叔丁基过氧化氢(tert butyl hydrogen peroxide,TBHP)处理L-02细胞4 h,细胞计数试剂盒-8检测细胞存活率,试剂盒检测谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate transaminase,AST)、活性氧(reactive oxygen species,ROS)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)水平,流氏细胞术检测细胞凋亡,蛋白印迹定量分析氧化信号通路与凋亡信号通路的相关蛋白表达。结果表明,肌肽预处理显著降低了L-02细胞外液ALT、AST活性,抑制ROS形成,提高细胞内GSH含量,显著抑制L-02细胞凋亡,上调核红细胞2相关因子2(nuclear factor-erythroid 2-related factor-2,Nrf2)、醌氧化还原酶1(quinone oxidoreductase 1,NQO1)、血红素氧合酶1(heme oxygenase-1,HO-1)、B细胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma 2,Bcl-2)的蛋白表达,下调Kelch样ECH关联蛋白1(Kelch like ECH associated protein 1,Keap1)、磷酸化氨基末端激酶(amino-terminal kinases phosphorylation,p-JNK)、胱天蛋白酶3(caspase-3,Cas-3)的蛋白表达。肌肽通过调控Keap1-Nrf2与JNK-Cas-3信号通路有效修复TBHP诱导的肝细胞损伤。

基于铁离子作用结合高效液相色谱在线筛选金花茶花黄酮中抗氧化物质和体内抗氧化活性研究

为了研究金花茶花黄酮的抗氧化效果,首先采用基于铁离子作用结合高效液相色谱的方法在线筛选金花茶花黄酮的抗氧化物质,并用清除DPPH和ABTS自由基方法验证潜在组分的抗氧化效果,其次用时间飞行质谱表征抗氧化物质,最后结合体内抗氧化的方法评估金花茶茶花黄酮抗氧化性活性。通过铁离子作用结合高效液相色谱法快速筛选出9种抗氧化物质,分别为表儿茶素或儿茶素、原花青素二聚体、原花青素三聚体、原花青素四聚体、芹菜素-6-C-葡萄糖-8-C-木糖苷、芦丁、异槲皮素或异槲皮素同分异构体。体内抗氧化研究表明金花茶花黄酮能显著提升大鼠体内过氧化氢酶(60.47±2.8 U/mg)、谷胱甘肽过氧化物酶(649.1±51.5 U/mg)和总超氧化物歧化酶(69.91±4.56 U/mg)含量,降低脂质过氧化物丙二醛(1.83±0.16 nmol/mg)含量,改善大鼠体内氧化应激效应。