荧光原位杂交技术在先天性心脏病产前诊断中的应用

目的探讨采用荧光原位杂交技术(FISH)检查法对先天性心脏病胎儿进行染色体22q11微缺失产前诊断的临床应用。方法应用常规染色体核型分析及FISH检查法,对2012年3月至2014年10月中山市博爱医院收治的52例疑似妊娠22q11微缺失胎儿的孕妇进行产前22q11微缺失检查并跟踪随访。结果所有胎儿染色体核型分析均无异常,FISH检查结果显示3例呈阳性。结论染色体核型分析无法检测22q11微缺失综合征,因此对有22q11微缺失先天性心脏病风险的胎儿产前诊断应用FISH检查法,可提高检测的准确性。

IL-10和IL-33基因单核苷酸多态性与中山市汉族儿童哮喘易感性的关系

目的探讨IL-10和IL-33基因的单核苷酸多态性与中山市汉族儿童哮喘发病的相关性。方法采用病例对照研究,利用MassARRAY-IPLEX技术和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱平台(MALDI-TOF-MS)对158例儿童哮喘和198例健康对照的IL-10基因的rs1800896和IL-33基因的rs3939286位点进行基因分型。结果在中山市汉族儿童中rs1800896只检出AG和AA两种基因型,rs3939286检出AA、AG和GG 3种基因型,分型成功率为99.86%。与健康对照组相比,哮喘儿童rs1800896的基因型分布差异有统计学意义(2=3.864,P=0.049),但经Bonferroni校正后差异无统计学意义(Pc=0.098),等位基因分布差异无统计学意义(2=3.639,P=0.056)。rs3939286的基因型分布(2=9.988,P=0.007,Pc=0.014)和等位基因分布(2=8.266,P=0.004)差异有统计学意义。与GG基因型相比,rs3939286的AG和AA+AG基因型均能明显增加哮喘发生的危险性,OR值(95%可信区间)分别为2.230(1.243～3.997)和2.361(1.324～4.210)。与GG基因型相比,rs3939286的AA+AG基因型明显增加嗜酸性粒细胞计数(Z=-2.962,P=0.003)和IgE浓度(Z=-3.628,P=0.000)。结论 IL-33基因的rs3939286位点可能与中山市汉族儿童哮喘的发病有关。

产前基因诊断预测地中海贫血胎儿的价值分析

目的：探讨产前基因诊断预测地中海贫血胎儿的价值。方法选取本院2010年1月-2013年12月65例父母为地中海贫血基因携带的胎儿为受试对象，均抽取羊水给予产前基因诊断，引产或分娩后留取脐带血检验诊断准确性。结果65例风险胎儿中诊断为地中海贫血者48例，其中--SEA/--SEA型10例，-α^SEA/αα和CD41-42/CD41-42各3例，-α3.7/αα、-αα1/αα、CD41-42/-α3.7和-α4.2/αα各检出2例，CD41-42/（-CTTT）型检出19例，-28（A→G）型检出5例。48例产前基因诊断为地中海贫血胎儿中，引产率为26.8%，分娩率为73.2%，其中--^SEA/--^SEA型的10例胎儿引产8例，分娩2例；-α^SEA/αα和CD41-42/CD41-42均引产2例，分娩1例；CD41-42/-α^3.7均引产；剩余胎儿均成功分娩；所有胎儿脐带血检测结果与产前羊水基因检测结果一致。结论对地中海贫血携带夫妇孕育的高风险胎儿予以产前基因检测，准确率较高，对优生优育等具有积极意义，值得临床推广。

孕期血清学筛查在高龄孕妇产前诊断中的价值探讨

目的:探讨高龄孕妇(预产期年龄≥35岁)孕期血清学筛查的应用价值。方法:回顾性分析行产前诊断的2 133例高龄孕妇,包括血清学产前筛查及介入性产前诊断检查胎儿染色体的结果。结果:在2 133例高龄孕妇中,发现胎儿染色体异常共47例,总的阳性率为2.20%。孕期未行血清学筛查的高龄孕妇1 112例,发现胎儿染色体异常18例,阳性率为1.62%;血清学筛查高风险的高龄孕妇705例,发现胎儿染色体异常29例,阳性率为4.11%;血清学筛查低风险的高龄孕妇316例,未发现胎儿染色体异常。结论:孕期血清学筛查在高龄孕妇产前诊断中有较高的应用价值。

双胎妊娠120例的介入性产前诊断的临床分析

随着促排卵药物及辅助生殖技术的应用,多胎妊娠的发生率明显增加,绝大多数为双胎妊娠。双胎妊娠发生胎儿结构畸形和染色体畸变的风险高于单胎妊娠。本研究对中山市博爱医院中心因各种指征行介入性产前诊断的120例双胎妊娠病例资料进行回顾性分析和总结。

荧光原位杂交与染色体核型分析在产前染色体异常筛检中的比较

目的比较荧光原位杂交与染色体核型分析在产前染色体异常筛检中的应用价值。方法选择2011年5月—2014年9月来本院进行产前诊断孕妇444例为研究对象，同时进行荧光原位杂交和染色体核型分析检测，以染色体核型分析为“金标准”，比较两种检测方法的筛检效果。结果荧光原位杂交平均报告时间[（3．1±0．3）d]明显低于染色体核型分析平均报告时间[（22．5±3．4）d]；444例患者中，检出异常染色体28例（6．3％），荧光原位杂交检出26例（5．9％），差异无统计学意义，荧光原位杂交检测灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为92．9％、100．0％、100．0％、99．5％；28例染色体异常患者中，染色体核型分析检出13、18、21、X、Y非整倍体20例，荧光原位杂交检出18例，漏检或误检2例，差异元统计学意义，荧光原位杂交检出18例，检测灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为90．0％、100．0％、100．0％、99．5％。结论荧光原位杂交检测具有直观、安全、快速、灵敏度高的特点，但受到探针与种类的限制，还无法替代染色体核型分析，必要时应联合进行染色体核型分析和荧光原位杂交检测。

全外显子测序鉴定1例遗传性球形红细胞增多症SPTB基因新突变

遗传性球形红细胞增多症(HS)是最常见的遗传性溶血性贫血,其特征是外周血涂片上出现球形红细胞,具有广泛的临床表现(无症状到严重溶血),其中贫血、黄疸和肝脾肿大是其典型的表现[1]。HS在世界各地均有发病,尤其北欧和北美人群更为常见,发病率分别为1/5 000和1/2 000,该病在中国人群中相对罕见,相关研究报道较少[2]。

叶酸代谢相关基因及血清同型半胱氨酸与出生缺陷的相关性

目的:分析中山市孕妇中叶酸代谢关键酶基因多态性的分布,探讨不同基因型及个体化补充叶酸对血清同型半胱氨酸(Hcy)水平和出生缺陷的影响。方法:选取2013年734名在本院进行孕检的孕妇,于第1次孕检时检测孕妇MTHFR C677T、A1298C及MTRR A66G位点情况及血清Hcy水平,根据基因检测结果分为研究组(382例)及对照组(352例),分别给予800和400μg/d叶酸至孕3个月,观察Hcy变化情况,追踪新生儿出生情况,分析两组出生缺陷有无差异。结果:734名孕妇中,C677 TT、A1298 CC和A66GG三种纯合突变基因型频率分别为8.04%、4.36和7.36%。补充叶酸前对照组与研究组Hcy水平差异有统计学意义(P<0.05),个体化补充叶酸后两组间Hcy水平及出生缺陷发生率差异无统计学意义(P>0.05)。补充叶酸前Hcy水平≥8.55μmol/L时,预示叶酸利用能力为中度或高度风险的敏感度为80.9%,特异性为71.4%。结论:孕妇进行叶酸代谢基因多态性及Hcy检测,并根据叶酸利用能力个体化补充叶酸,可以降低出生缺陷的发生。

pcDNA3.1-HMOX1重组质粒载体的构建与鉴定

目的构建pc DNA3.1-HMOX1重组质粒载体。方法使用基因合成法合成HMOX1基因,在其N端添加Kozak序列及His标签序列,将扩增后的目的基因双酶切连接至pc DNA3.1载体的Bam HⅠ和NotⅠ之间。转化DH5α大肠杆菌后,挑取阳性克隆子进行质粒抽提电泳及测序鉴定。结果 p CDNA3.1-HMOX1重组质粒经酶切电泳及DNA测序证实,目的基因HMOX1的序列完全正确,重组质粒载体构建成功。结论成功构建p CDNA3.1-HMOX1融合基因并在DH5α大肠杆菌内表达,为进一步探讨HMOX1的生物学功能奠定了基础。

多重荧光定量PCR快速检测缺失型α地中海贫血

目的采用多重荧光定量PCR技术快速检测缺失型α地中海贫血(以下简称α地贫),初步评价其诊断性能,并探讨该体系应用于临床基因诊断的可行性。方法采用多重荧光定量PCR体系检测300份,采用gap-PCR和β地中海贫血(以下简称β地贫)点突变反向点杂交法确定基因型的正常及地中海贫血标本,其中150例为α地贫标本,100例基因型为αα/αα的正常样本,50例为β地贫标本。结果多重荧光定量PCR在150例α地贫样本及100例正常样本的检测结果与gap-PCR符合率均达到100%,50例β地贫标本,有49例检测结果与gap-PCR一致,有1例gap-PCR报告为αα/αα的标本,多重荧光定量PCR报告为α1以及α2各仅有一个拷贝,经多重连接探针扩增技术证实为--THAI/αα。结论多重荧光定量PCR是一种快速、简便和可靠的缺失型α地中海贫血检测技术。

毛细管电泳技术在分析胎儿脐血血红蛋白中的应用

目的：分析不同孕周胎儿脐血血红蛋白的组成,探讨毛细管电泳技术在定量分析中晚孕胎儿脐血血红蛋白中的应用价值.方法：收集在产前诊断中心行B超引导下脐静脉穿刺术,并剔除夫妻双方或一方确诊或可疑为地中海贫血的孕妇脐带血样本,对其进行血红蛋白毛细管电泳分析.结果：全部425例样本HbA含量间于2.3％ ～ 18.0％,平均6.80％;HbF含量间于82.0％～97.7％,平均值93.18％.随着胎儿孕龄的增加,脐静脉血中HbA的百分含量逐渐增多,HbF的百分含量逐渐减少,且各孕龄组之间HbA百分含量及HbF百分含量的差异均具有统计学意义（P＜0.05）.结论：毛细管电泳技术定量分析血红蛋白,简便、准确,可用于中晚孕胎儿脐血血红蛋白电泳,并为诊断胎儿地中海贫血和异常血红蛋白病提供了参考依据.

1237例不孕症患者染色体检查结果分析

目的对1 237例不孕症患者进行染色体检查,分析核型结果并探讨不孕症与染色体异常的关系。方法对该院2010年3月至2014年12月收治的1 237例不孕症患者的外周静脉血进行淋巴细胞培养,收获细胞,低渗下固定制片,经G显带处理后镜检进行观察。结果 1 237例患者共检出异常核型111例,总检出率8.9%,其中性染色体异常57例,常染色体异常54例。结论染色体异常是导致原发性不孕的重要原因之一,因染色体异常导致的不孕多数是不可逆的,所以细胞遗传学检查染色体在不孕症患者的诊疗过程中尤为重要。

诺里病家系NDP基因新突变分析及产前诊断

诺里病是1种罕见的X连锁隐性遗传性疾病，以先天性失明为主要临床表现，眼部表型多样，婴儿期发病。诺里病初期表现为晶状体后纤维组织团块增生，逐渐发展为白内障、虹膜前或后粘连、虹膜萎缩、角膜混浊、视网膜脱离、眼球萎缩等，部分患者还伴有神经性耳聋、精神行为异常及智力低下。诺里病由诺里病蛋白（Norrin disease protein，NDP）基因突变引起。NDP基因定位于Xp11.4，包含3个外显子，外显子1为非编码区，具有基因调控功能，外显子2和3为编码区，编码NDP。目前，人类基因突变数据库（human gene mutation database）已报道的NDP基因的致病突变为165种，其中以外显子2和3的错义突变及无义突变居多。本研究对1例诺里病家系成员的NDP基因进行筛查，探讨该诺里病家系的NDP基因致病突变，阐明基因型与表型的关联，为其育龄期家族成员进行妊娠前指导提供分子诊断基础。

孕早期母体血清PAPP-A及子宫动脉搏动指数在预测子痫前期中的价值

目的通过回顾性分析孕早期母体血清PAPP-A水平及子宫动脉搏动指数,评估两者在预测子痫前期中的价值。方法收集2016年1月～2017年6月孕11～13+6周在我院行早孕期唐氏血清学筛查或联合筛查的单胎妊娠病例共2608例,将孕期出现子痫前期的孕妇列为病例组,未出现妊娠并发症的孕妇作为对照组,比较两组间PAPP-A水平和子宫动脉搏动指数水平的差异。通过受试者工作特性曲线的曲线下面积评估单项和两者组合的筛查效果。结果 (1)114例病例组的血清PAPP-A水平明显低于2494例对照组,且差异有统计学意义(t=6.073,P <0.01)。(2)78例病例组的子宫动脉搏动指数明显高于695例对照组,且差异有统计学意义(t=7.104,P <0.01)。(3)当单独采用PAPP-A、子宫动脉搏动指数和联合两者用于子痫前期的筛查时,其受试者工作特性曲线下面积分别为:0.761、0.831和0.866。结论在子痫前期孕妇,其血清中PAPP-A水平及子宫动脉搏动指数明显与正常妊娠孕妇存在差异;当作为预测子痫前期的筛查标志物时,均具有良好的筛查效能,但子宫动脉搏动指数优于血清PAPP-A。

脐血毛细管电泳在产前诊断重型地中海贫血中的应用

目的探讨脐血毛细管电泳在产前诊断重型地中海贫血中的应用价值。方法对71例夫妻双方患有同型地中海贫血的孕妇进行脐静脉穿刺术,抽取脐血同时进行地中海贫血基因检测和血红蛋白毛细管电泳。结果重型α地中海贫血胎儿脐血Hb Bart’s含量高达72.9%∽89.8%,而Hb H病、轻型α地中海贫血及静止型α地中海贫血胎儿脐血Hb Bart’s含量分别为18.4%∽24.3%、2.1%∽5.7%及0.3%∽0.6%,正常胎儿脐血中未检出Hb Bart’s。重型β地中海贫血胎儿脐血Hb A含量极低,为0%∽0.6%,而轻型β地中海贫血胎儿和正常胎儿脐血Hb A含量分别为2.2%∽5.2%和2.5%∽9.4%。脐血Hb Bart’s和Hb A定量分析能准确的检出胎儿重型地中海贫血。结论毛细管电泳具有操作简便及自动化的优点,能准确诊断胎儿重型地中海贫血,可以作为产前诊断的一种常规方法。

ORM1-like3基因单核苷酸多态性与客家人群哮喘发病的关系

目的 探讨ORM1-like 3基因的单核苷酸多态性（SNPs）与客家人群哮喘发病的相关性.方法 选取确诊的客家人群哮喘患者194例（哮喘组）和同期健康查体者200例（对照组）为研究对象,利用MassARRAY-IPLEX技术和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱平台对ORM1-like 3基因的6个SNPs位点进行基因分型.结果 哮喘组与对照组的性别（χ^2＝0.013,P=0.909）和年龄（t=0.728,P=0.259）差异均无统计学意义.与对照组相比,哮喘组嗜酸性粒细胞计数（Z=-5.670,P=0.000）和IgE（Z=-9.158,P=0.000）明显升高,CRP水平（Z=-1.716,P=0.086）差异无统计学意义,吸入性过敏原（χ^2＝55.452,P=0.000）和食物过敏原（χ^2＝12.853,P=0.000）检出率明显升高.单纯哮喘组与哮喘合并过敏性鼻炎组比较,除rs3859192差异有统计学意义（χ^2＝6.659,P=0.036）外,其余5个位点差异均无统计学意义（P〉0.05）.总的基因型分型成功率为97.34%.与对照组相比,哮喘组rs7216389的等位基因分布（χ^2=7.103,P=0.008）和基因型分布（χ^2=7.695,P=0.021）差异均有统计学意义,但进行Bonferroni校正后基因型分布差异无统计学意义（Pc=0.126）.与对照组比较,哮喘组rs12603332、rs8069176和rs3859192的等位基因分布（χ^2=2.119,P=0.145;χ^2=2.167,P=0.141;χ^2=0.026,P=0.871）和基因型分布（χ^2=2.197,P=0.333;χ^2=5.686,P=0.058;χ^2=5.052,P=0.080）差异均无统计学意义.与对照组比较,哮喘组rs2305480和rs4795400的等位基因分布（χ^2=14.722,P=0.000;χ^2=10.417,P=0.001）和基因型分布（χ^2=12.351,P=0.002;χ^2=12.271,P=0.002）差异均有统计学意义,进行Bonferroni校正后两组间差异仍均有统计学意义（Pc=0.012;Pc=0.012）.与CC基因型相比,rs2305480的CT、TT基因型显著增加哮喘发生的危险性（P=0.033,P=0.003）,OR值（95% CI）分别为1.763（1.044～2.978）和5.681（1.600～20.171）,CT＋TT基因型增加哮喘的发生,OR值（95% CI）为2.130（1.306～3.475）.与TT基因型相比,rs4795400的CT基因型不增加哮喘发生的危险性（P=0.059）,而CC基因型显著增加哮喘发生的危险性（P=0.002）,OR值（95% CI）为4.440（1.600～12.316）.在82例初次确诊的哮喘患者中,与CC基因型相比,rs2305480的CT＋TT基因型的FVC占预计值百分比和FEV1占预计值百分比下降明显（均P〈0.05）.与TT＋CT基因型相比,rs4795400的CC基因型的FVC占预计值百分比和FEV1占预计值百分比下降亦明显（均P〈0.05）;rs2305480的基因型分布在初诊哮喘的病情严重程度不同分级之间差异无统计学意义（χ^2=2.130,P=0.144）,rs4795400差异有统计学意义（χ^2=9.522,P=0.002）.结论 ORM1-like 3基因的rs2305480和rs4795400位点与客家人群哮喘的发病有关,它们的基因型分布可能影响初诊哮喘患者的肺功能,而且rs4795400可能与病情严重程度有关.

孕妇外周血胎儿游离DNA应用于β地中海贫血产前诊断

目的建立胎儿游离DNA(cell free fetal DNA,cff-DNA)提取、检测技术,应用于β地中海贫血产前诊断。方法 26例β地中海贫血产前诊断的孕妇在穿刺取样同时抽取外周血,进行常规β地中海贫血基因诊断和cff-DNA检测。结果 26例样本中,穿刺产前诊断结果 8例正常,11例杂合子,7例双重杂合子;cff-DNA检出10例IVS-Ⅱ-654突变基因携带者,与穿刺诊断结果相符,其余15例阴性,1例实验失败。结论利用cff-DNA进行β地中海贫血产前诊断具有较高的可行性,但母源性游离DNA对结果存在影响。

50例单脐动脉临床分析

目的:了解单脐动脉胎儿染色体异常的发生率、妊娠结局,指导产前咨询。方法:回顾性分析产前超声诊断为单脐动脉并行胎儿染色体核型分析的病例共50例,就染色体检查结果、妊娠结局进行评估分析。结果:32例单纯单脐动脉中,发现2例染色体多态性;单脐动脉合并1种超声异常16例,合并2种以上种超声异常2例,合并超声异常组中发现1例13-三体嵌合体,1例染色体多态性。结论:单纯性单脐动脉胎儿妊娠结局良好,对于同时合并有其他超声异常,建议行胎儿染色体核型分析。

孕期膳食指导在改善孕妇脂代谢及降低妊娠相关并发症中的作用

目的探讨孕期膳食指导对妊娠期妇女脂代谢及妊娠相关并发症的影响。方法选取我院2017年1～12月收治的62例妊娠期血脂代谢异常孕妇作为研究对象,依据有无接受膳食指导分为对照组(n=30)与观察组(n=32)。对照组孕妇不接受膳食指导,观察组孕妇在妊娠第32周开始接受膳食指导方案。比较两组孕妇妊娠第32周、分娩前的脂代谢相关指标、妊娠相关并发症情况、新生儿情况。结果两组孕妇孕32周血脂检测结果中的血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与孕32周比较,两组分娩前的TC、TG降低,HDL-C升高,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组孕妇分娩前的TC、TG水平低于对照组,HDL-C显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组孕妇分娩前的LDL-C水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。观察组的妊娠相关并发症发生率与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。两组孕妇的新生儿并发症发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论孕期膳食指导可有效改善孕期脂质代谢异常情况,降低妊娠相关并发症发生率,对新生儿无明显影响,值得临床推广应用。

患者陪护家属进行心理干预在改善先兆流产住院患者心理状态的作用

目的探讨对患者陪护家属进行心理干预在改善先兆流产住院患者心理状态的作用。方法选取2016年7月～2017年6月于我院进行治疗的存在负性情绪的先兆流产患者及陪护家属各96例作为研究对象,通过不同护理模式分为实验组49例,对照组47例,对照组运用常规护理,实验组在其基础上对患者陪护家属进行心理干预。分别利用患者的焦虑评分量表及抑郁量表比较两组患者的负性情绪及保胎成功率、不良事件发生率。结果两组患者干预前SDS(抑郁)及SAS(焦虑)评分无统计学差异(P> 0.05),干预后实验组SDS及SAS评分均比对照组低,且差异有统计学意义(P <0.05)。实验组患者保胎成功率93.88%,高于对照组78.72%,两组差异有统计学意义(P <0.05)。实验组不良事件发生率低于对照组,差异有统计学意义(P <0.05)。结论对患者陪护家属进行心理干预有助于改善先兆流产患者的心理状态,并提高保胎成功率。