火龙果皮花青素生物转化菌株筛选及工艺优化

该研究以火龙果皮粉为发酵基质,采用20种食用真菌进行发酵,通过监测发酵后发酵液中花青素含量的变化,筛选出转化效率高的供试菌株作为火龙果皮发酵菌株,并采用响应面法优化其发酵工艺。结果表明,20种食用真菌中,经蜜环菌(Armillaria mellea)发酵的火龙果皮液中花青素含量最高,其最优发酵工艺为发酵时间5 d、接种量6%、发酵温度25℃、料液比1∶50(g∶mL)。在此优化条件下,发酵液中花青素含量达(2.03±0.02)mg/100 mL,是未经食用真菌转化的11.94倍,表明微生物辅助可有效转化火龙果果皮中花青素。

海洋石油降解酵母的分离鉴定与降解特性

以原油为唯一碳源,采用富集培养、平板涂布分离、平板划线纯化及摇瓶复筛等方法,从表层海水或海泥中分离得到2株具有较强石油降解能力的菌株SYB-5和SYB-2.根据菌落及菌体形态、生理生化特征和分子生物学分析、鉴定显示,SYB-5为季也蒙毕赤酵母(Meyerozyma guilliermondiiPichia guilliermondii),SYB-2为长孢洛德酵母(Lodderomyces elongisporus).对2株酵母菌的石油降解性能的研究结果表明,SYB-5和SYB-2以原油组分作为碳源,以(NH4)2SO4和(NH4)3PO4作为氮源,在ρ(NaCl)为30 gL、氧气充足的条件下,生长的最适温度分别为36和32℃,pH均为7.0.在最适生长条件下,培养5 d后的原油降解率分别达到45.8%和34.4%.当2株菌混合培养时,培养5 d的原油降解率可提高到53.9%,培养8 d时达到56.4%,说明2株菌利用原油作碳源生长时具有协同作用.

海洋微生物纤维素酶及半纤维素酶基因克隆与表达研究进展

海洋极端酶因在极端环境中具有更高的酶活性及更好的稳定性而具有重要的理论价值和工业应用前景。由于海洋极端微生物培养条件苛刻,难以作为工业生产菌使用。采用基因工程技术,用常用的宿主表达极端酶基因,是开发海洋微生物酶的主要研究内容。随着海洋微生物极端酶的研究开发,对海洋微生物纤维素酶、半纤维素酶的研究也逐渐受到学者们的关注,相关研究取得了较大进展。综述海洋微生物纤维素酶、半纤维素酶的基因克隆与表达的国内外研究现状。

海洋微生物纤维素酶的研究进展及其应用

海洋极端酶因在极端环境中具有更高的酶活性及更好的稳定性,因而具有重要的理论价值和工业应用前景。随着海洋微生物极端酶的研究开发,海洋微生物纤维素酶的研究也逐渐受到学者们的关注,并取得了较大进展。综述迄今为止分离出的产纤维素酶的海洋微生物种群及其酶学特性,海洋微生物纤维素酶基因克隆与表达的国内外研究现状,分析海洋微生物纤维素酶潜在的应用价值及未来发展前景。

玉米超氧化物歧化酶的提取与纯化工艺

为优化玉米超氧化物歧化酶(SOD)提取与纯化工艺。研究不同浸提条件及沉淀分离工艺对玉米SOD提取及纯化效果的影响。最佳诱导和浸提的原料与缓冲液配比分别为1∶1.5~1∶3、1∶2,最佳诱导和浸提时间分别为25 h^30 h、1.5 h。采用50、60℃分别处理15、10 min两次热变性除杂蛋白、丙酮沉淀SOD的纯化效果最好。DEAE-纤维素柱层析纯化后,SOD比活为1 699.7 U/mg,回收率为31%,纯化倍数为30.7。该方法高效且低毒污染少,适于工业化生产。

基于CDIO的“微生物学课程群”教学改革与实践

社会对生物工程类人才的需求是多层次的:既要有研究创新型人才,更要有应用创新型人才。引入CDIO工程教育理念是提升应用创新型生物工程类专业内涵的有效途径之一。对照CDIO的标准,提出了"微生物课程群"的实践课程体系,探索了以发酵产品设计为中心培养学生产品创新能力、计算机辅助设计能力、团队协作能力和工程系统能力的方法方式,论述了提升生物工程类类专业内涵的具体方法,并指出了运用CDIO工程教育理念可以使学生实现的一些有益转变。

一株耐盐纤维素酶海洋曲霉的筛选及产酶条件研究

从东海海底泥中分离到了一株耐盐和高产内切葡聚糖酶(CMCase)及β-葡萄糖苷酶(β-Gluase)的海洋曲霉ZJUBE-1,根据形态特征及18SrDNA分析,初步鉴定该菌为黑曲霉(Asper-gillus niger)。通过液体发酵产酶优化,获得最佳培养基组成,质量分数分别为:麸皮2.5%,氯化铵(或蛋白胨、磷酸二氢铵)1%,含NaCl 3.0%～3.6%的人工海水作无机盐液。发酵条件为100mL三角瓶装培养液30mL,在起始pH 6.0、37℃,接种量为6%,180r/min条件下振荡培养7d,测得发酵液中CMCase、β-Gluase酶活及滤纸酶活(FPA)分别为5.3、5.4、0.75U/mL。该菌在NaCl质量分数24%下仍具产酶能力,所产3种纤维素酶的最适反应温度均为65℃,最适反应pH分别为4.0、5.0、5.0;在NaCl质量分数为2%～12%(β-Gluase在2%～16%)范围内,3种酶活力维持较高水平。该菌及其所产纤维素酶的高度耐盐性预示着其在废水处理、纺织业、海洋养殖、海产品加工或海藻的能源化利用等高盐环境下可能有较好的应用前景。

一株新型异养硝化细菌的分离鉴定及硝化特性

文章分别以硫酸铵、亚硝酸钠为唯一氮源,从养殖池塘中筛选出一株高效去除亚硝态氮的异养硝化细菌N-2。根据菌落及菌体形态、生理生化特征和16S rDNA序列的系统发育分析,对分离菌株N-2进行了鉴定。且研究了该菌的生长及异养硝化相关特性。初步鉴定该菌为粘质沙雷氏菌,命名为Serratia marcescens N-2。菌株N-2能利用有机物进行异养硝化,最适生长条件为:以蔗糖为碳源,32℃,pH 8.0,溶氧5.2 mg/L;氨氮去除的最适pH 7.0,最适溶氧5.7 mg/L。以硫酸铵为氮源时,菌株培养72 h后,对氨氮的去除率达90.79%,仅在对数生长期检测到少量亚硝酸盐存在;以亚硝酸钠为氮源时,对亚硝态氮的去除率可达98.52%。在2种培养基中均未检测到硝酸盐的积累。菌株N-2降解氨氮、亚硝态氮能力较强,其在富营养化水体治理领域有较好的应用前景。

里氏木霉和黑曲霉降解香蕉秆产可发酵糖的研究

研究了里氏木霉和黑曲霉以香蕉秆作为碳源生产纤维素酶的培养特性。采取30℃培养木霉30 h后接种黑曲霉,32℃混合培养,得到FPA和β-Gluase活性互补的酶系组成:FPA为920.6 U/g,β-Gluase为864.2U/g。对发酵曲降解香蕉秆的研究结果表明:当木霉纯培养曲和黑曲霉纯培养曲以2∶1混合酶解时,最大酶解得率达到30.6%,酶解得率比木霉纯培养曲提高16.8%;优化条件下混合培养的酶解得率为31.5%,达到最大酶解得率所需时间比木霉纯培养曲缩短4 h,酶解得率提高20.2%。混合培养不仅优化了纤维素酶系组成,提高了糖化效率,而且可大大简化生产全酶系纤维素酶的工艺。

一株产纤维素酶镰刀菌的筛选、鉴定与酶学性质

根据菌株菌落、菌丝体、孢子等形态特征及其生理特性,初步鉴定高产纤维素酶的丝状真菌为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum),命名为XA-1。考察了不同碳源及氮源、培养温度、初始pH等因素对XA-1产酶的影响,并研究了该菌所产纤维素酶酶学性质及酶解性能。该菌的最适产酶条件为:分别以水葫芦和硫酸铵为碳、氮源,30℃,pH 5.0,培养6 d后,内切葡聚糖酶(CMCase)、β-葡萄糖苷酶(β-Gluase)和滤纸酶活力(FPA)分别达到4 083.2、3 258.8 U/g和773.2 U/g(成熟曲)。CMCase、β-Gluase最适反应温度为45℃,FPA则为55℃;CMCase、β-Gluase和FPA的最适反应pH分别为5.0、4.5和5.0。菌株XA-1纤维素酶酶解香蕉秆或水葫芦32 h后,酶解得率分别达到27.3%和29.8%。菌株XA-1在纤维素酶开发及转化秸秆类纤维素为可发酵糖方面显示出较好的应用前景。

不同品种桑葚果的风味成分分析

本文比较了六个品种桑葚的基本理化性质和风味成分。通过对桑葚的水分、灰分、总酸、可溶性固形物、p H值和有机元素C、H、N元素的测定,获得其理化性质;并用高效液相色谱(HPLC)测定桑葚中有机酸含量,用固相微萃取技术(SPME)结合气相色谱-质谱联用(GC-MS)检测桑葚的挥发性香气成分。结果表明:六种桑葚理化性质具有一定的差异,水分含量为66.65%~84.83%,灰分0.63%~1.21%,p H 4.31~6.06,总酸0.037%~0.062%,可溶性固形物8.7~18.2°Brix;各种桑葚中有机酸的组成和含量存在明显的差异,白桑葚、紫桑葚、黑珍珠、大十和283桑葚都是酒石酸含量最高,而32109桑葚不含酒石酸,以柠檬酸含量最高;六种桑葚共鉴定出99种挥发性成分,主要包括醇类、酯类、醛类、酮、烯烃、酸和烷烃等,各种桑葚所含挥发性成分种类和含量均有较大差异。依据上述结果,大十酸度高,水分含量高,适合加工;白桑葚味甜,可溶性固形物含量高,黑珍珠、283桑葚酸甜适中,香气浓郁,适合鲜食;32109桑葚可溶性固形物含量低,酸度适中,香气充足,更适宜深加工;紫桑葚可溶性固形物含量较高,酸度适宜,可以酿酒。

镝氨基酸(Tyr,Trp)咪唑配合物的合成与抗菌性能研究

为了开发高生物活性的稀土氨基酸配合物抑菌剂,在酸性乙醇介质中,合成了稀土镝(Dy3+)氨基酸(Tyr,Trp)咪唑三元配合物,由其一般性质、荧光性能及紫外吸收光谱得到初步确认。以Dy3+、咪唑及镝氨基酸二元配合物为对照,研究了镝氨基酸咪唑三元配合物的抑菌性能。结果表明,镝氨基酸二元及镝氨基酸咪唑三元配合物对大肠杆菌及金黄色葡萄球菌均有不同程度的抑制作用,咪唑参与配位后,更加强了配合物的抗菌性能,当两类配合物浓度≥8 g/L时,对两种供试菌均有较强的抑制作用;镝酪氨酸配合物抑菌作用较镝色氨酸配合物强,其最低抑菌浓度可低至2～4 g/L。

多元化与特色化教学相结合,提升学生核心竞争力

分析了新形势下生物技术与生物工程本科专业人才培养所面临的普遍问题,以培养高素质应用型人才为导向,以提升学生就业核心竞争力为目标,以满足学生个性化需求和社会对人才需求为基础,构建多元化与特色化相结合的人才培养模式,并应用于两专业的教学实践。实践证明全面提升和实现了学生的创新能力、创业能力、就业能力、社会竞争能力。

养殖水体氨氮降解菌的分离与降解特性研究

以（NH4）2SO4为唯一氮源，经富集培养、平板涂布分离及平板划线纯化、摇瓶复筛等方法，从当地养殖池水体中分离、筛选氨氮降解菌。根据形态学、生理生化特征分析，对其进行归属鉴定，并研究其降解特性。通过对初步鉴定归属为沙雷氏菌属（Serratia．sp），命名为N-2的氨氮降解菌降解特性的研究，得到其最适降解条件：N-2利用（NH4）：S04作唯一氮源时，最适碳源为蔗糖，降解温度为32—37℃，pH为7．0。在最适条件下，当NH4＋-N初始质量浓度为50mg／L时，该菌培养至72h氨氮降解率可达97．4％。结果表明，该菌为高效氨氮降解菌，这种土著微生物在修复富营养化水体方面有较好的应用前景。

乳腺癌MiR-34a启动子荧光素酶载体构建及活性测定

提取人乳腺癌细胞(MCF7)基因组DNA,应用PCR扩增miR-34a启动子序列,将其克隆连接到荧光素酶报告质粒p GL3-Basic中;瞬时转染人肾上皮细胞(293T),检测荧光素酶活性。成功构建了p GL3-miR34a-promoter报告基因载体并对其测序验证,结果表明启动子序列正确,载体具有较高的启动子活性。

茂名地区柑橘黄龙病内生菌检测的初步分析

为探索柑橘黄龙病的病因,获得柑橘黄龙病拮抗菌,从茂名市信宜市的几个乡镇柑橘园采取柑橘叶样品,通过平板培养的方式分离纯化柑橘叶片的内生细菌,并通过PCR扩增技术对其鉴定分析。结果:从所采的柑橘叶片上分离出来4株内生细菌,经过革兰氏染色鉴定以及显微观察,发现分离出的4株均为革兰氏阳性菌。随后成功对柑橘内生细菌的DNA进行提取,并进行PCR扩增、测序,确定为其内生菌种,该研究可用于柑橘黄龙病的检测分析。