中医药治疗2型糖尿病湿热证的用药规律研究

目的探讨中医药治疗2型糖尿病湿热证的用药规律,并通过聚类方分析其临床用药特点。方法以中国知网数据库为数据来源,检索自建库起至2021年9月30日收录的有关中医药治疗2型糖尿病湿热证的文献。经过文献筛选和资料提取之后,应用中医传承辅助平台(V2.5)进行数据录入、统计与分析。结果共纳入89篇文献,91首处方,136味中药。使用频次较多的药物有黄连、黄芩、茯苓、苍术、葛根等;药性以寒性最多;药味以苦为主,兼具甘、辛;药物主归脾经、胃经和肺经;关联规则分析得到使用频率最高的药对为黄连-茯苓,置信度最高的药物组合有“葛根,黄芩→黄连”“丹参→黄连”;通过高频药物聚类分析得到5首新方组合。结论中医药治疗2型糖尿病湿热证具有一定的可循规律,黄连为核心中药,葛根芩连汤为常用基本方,苦寒燥湿清热为用药基本原则。聚类分析得到5首新方,提示2型糖尿病湿热证可能具有中满热盛、湿热内蕴、湿重于热、湿聚成痰和湿热下注等临床特点。

基于临床试验注册平台的中医药注册登记研究现状分析

目的:调查分析目前国内中医药注册登记研究的现状,为下一步研究开展提供依据。方法:检索搜集已注册的在我国境内实施的登记研究,检索时限为注册平台建立到2021年5月26日。由2名研究者收集、整理数据后,采用描述性统计方法进行分析。结果:共检索到67个注册登记研究,其中中医药类24个。中医药注册登记研究主要以研究者发起为主;设计类型主要为中成药研究;发起地主要为北京(66.67%),其次为天津(8.33%);经费主要来源于企业(41.67%)和政府(29.17%);注册单位以医院、企业和研究所为主;目标疾病主要是心血管疾病(25.00%)、骨关节病(25.00%)和生殖系统疾病(16.67%)。结论:目前中医药注册登记研究的临床病种集中于心血管疾病、骨关节病、生殖系统疾病,开展注册登记研究对总结中医药人用经验、形成循证证据、促进中医药传承创新发展具有重要意义。

动物模型移植人源肠道菌群在中医药防治糖脂代谢病中的关键技术和挑战

糖脂代谢病是影响和危害全球公共健康的一类重大疾病。近年来,越来越多的证据指向糖脂代谢病和肠道菌群结构和功能改变密切相关。但是,临床研究很难在人群进行干预试验揭示肠道菌群改变与疾病核心机理的因果关系。因此,动物模型移植人源肠道菌群成为揭示中医药等干预策略或临床特征与肠道菌群改变因果关系的关键研究策略之一。动物模型移植人源肠道菌群研究方法主要包括4个主要步骤:1)采集观察组和对照人群的的粪便,进行移植菌液制备; 2)广谱抗生素诱导的条件性无菌小鼠诱导; 3)运用整体菌群或经宏基因组学分析鉴定出的特异性菌属,移植到条件性无菌小鼠后,进行代谢性疾病动物模型诱导; 4)比较分别接受干预组和对照组人源肠道菌群移植小鼠的糖脂代谢表型。作为肠道菌群研究领域的前沿方法之一,动物模型移植人源肠道菌群为中医药防治糖脂代谢病提供了新思路和线索。

基于临床文献的糖尿病冠心病中医证候分布规律研究

目的:通过对近二十年糖尿病冠心病中医证候临床研究文献的分析和挖掘,揭示糖尿病冠心病临床常见的基本证型及证候要素分布规律,为糖尿病冠心病的中医临床诊治及疗效评价提供更多依据。方法:检索获得中国学术期刊全文数据库(CNKI)、万方数据知识服务平台、中国生物医学1998年-2018年公开发表的糖尿病冠心病中医证候临床研究文献542篇,按照纳入、排除标准筛选出符合标准的45篇文献,进行统计分析。结果:糖尿病冠心病中医证型有40余种,分布呈虚实夹杂、本虚标实的特点,本虚以气阴两虚为主,标实以痰、瘀、湿、热为主;糖尿病冠心病证素分布中,病位证素分布由高到低依次为肾(48.02%)、肝(22.33%)、心(17.98%)、脾(11.66%),病性证素分布由高到低依次为气虚、阴虚、瘀、痰、湿、阳虚、热;证候研究文献中包含舌脉信息的文献较少,仅为3篇,出现2种舌形,9种舌色,7种舌苔,9种脉象。结论:肝在糖尿病冠心病发病中的核心和枢纽地位越来越突出,位于脏腑病位的第二位,高于心和脾;除传统的气虚、阴虚、痰、瘀外,湿、热证素在疾病病机演变中具有重要作用;糖尿病冠心病临床诊治要标本兼顾,在辨证论治基础上,尤其要注重调肝和清利湿热,综合治疗,方可取效。

糖尿病性冠心病湿热证诊断标准的量化诊断研究

目的建立糖尿病性冠心病湿热证的量化诊断标准,为临床实践和证候量化诊断研究提供依据。方法通过检索中国知网(CNKI)、万方数据、维普(VIP)数据库、中国生物医学文献服务系统(SinoMed)等与糖尿病性冠心病湿热证相关文献数据库,同时补充以图书形式出版的标准和医案专著,对文献进行提取分析并建立症状条目池。构建德尔菲问卷,进行德尔菲法专家调查,从条目池中筛选出诊断糖尿病性冠心病的关键条目并确定其权重赋值。开展多中心的横断面调查,采用诊断性试验方式确定诊断阈值。结果共纳入各类文献24篇,经过对术语的提取、拆分和归并后,建立了包含52个症状和13条舌脉象的症状条目池。经两轮德尔菲法专家调查后确定核心条目17个,并按条目不同的均数区间分别赋予3分、2分、1分的权重。由广东、陕西等地的医院收集了376例糖尿病性冠心病患者的临床资料,通过计算约登指数确定16分是本标准最佳诊断阈值,此时的敏感度为0.809,特异度为0.958,受试者工作特征曲线(Receiver Operator Characteristic Curve,ROC)下面积为0.943。结论本研究确定了首个糖尿病性冠心病湿热证的量化诊断标准,可为临床诊断糖尿病性冠心病湿热证提供依据,研制过程对中医证候规范研究具有借鉴意义。

基于液质联用技术与网络药理学的生姜质量标志物研究

目的:基于超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF-MS/MS)技术和网络药理学对生姜的质量标志物(Q-Marker)进行预测分析。方法:采用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术在正、负离子模式下对生姜中化学成分进行定性分析;运用网络药理学分析生姜传统功效的现代药理作用机制从而初步探索生姜的Q-Marker,并利用分子对接技术验证活性成分与靶点蛋白的结合活性。结果:通过UPLC-Q-TOF-MS/MS技术共分析得到生姜中48种化学成分,筛选后得到活性成分33个,以这33个活性成分为Q-Marker候选成分做网络药理学分析,获得靶点基因508个,作用于157条信号通路,如磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路、大鼠肉瘤蛋白(Ras)信号通路等。该实验初步探究了8-姜酮(8-gingerone)、6-姜烯酚(6-shogaol)、8-姜酚(8-gingerol)、四氢姜黄素(Tetrahydrocurcumin)、1-脱氢-8-姜二酮(1-dehydro-8-gingerdione)和(E)-4-(3,7-dimethylocta-2,6-dien-1-yl)-2-methoxy phenol等6个化合物发挥药效的作用机制并预测为生姜的Q-Marker。结论:本研究初步预测了生姜传统功效的Q-Marker。

6-姜烯酚对急性肺损伤小鼠肺水肿的治疗作用及机制研究

目的:观察6-姜烯酚(6-SH)对脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤(ALI)小鼠肺水肿的治疗作用,探究可能的作用机制。方法:采用随机数字表法将40只无特定病原体(SPF)级Balb/c小鼠分为对照组、模型组、6-姜烯酚组、地塞米松组,每组10只。鼻腔滴注LPS构建ALI模型,对照组滴注等量生理盐水。30 min后,给予6-姜烯酚组灌胃(100 mg/kg);地塞米松组给予腹腔注射(5 mg/kg);对照组和模型组给予灌胃等量生理盐水,24 h后结束实验,收集样本。测定肺组织湿/干重比(W/D)和肺系数;收集支气管肺泡灌洗液(BALF),测定白细胞计数和总蛋白浓度;观察肺组织病理学改变、计算病理评分;测定BALF上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)以及白细胞介素-6(IL-6)水平;检测肺组织中Toll样受体4/核因子κB/水通道蛋白(TLR4/NF-κB/AQPs)信号通路相关蛋白表达水平。结果:与对照组比较,模型组肺组织损伤明显,病理评分、肺系数、W/D增加(P<0.01),白细胞计数、总蛋白浓度及TNF-α、IL-1β、IL-6的水平升高(P<0.01);与模型组比较,6-姜烯酚组的肺系数和W/D降低(P<0.01或P<0.05),白细胞计数、总蛋白浓度以及TNF-α、IL-1β、IL-6的水平降低(P<0.01或P<0.05),AQP1和AQP5的蛋白表达水平升高(P<0.01),TLR4、MyD88、NF-κB p65以及p-NF-κB p65的表达水平降低(P<0.01或P<0.05)。结论:6-姜烯酚可能通过调控TLR4/NF-κB/AQPs信号通路发挥其抗炎作用和改善肺组织水液代谢与转运,有效缓解ALI小鼠的肺组织水肿。

糖尿病合并冠心病中医证候研究进展

糖尿病冠心病是临床常见重大复杂疾病,中医学具有独特的治疗优势,中医治病以辨证论治为前提,因此证候研究是基础和关键。本文检索了近20年糖尿病冠心病中医证候研究相关文献,从该病病因病机、中医证候分布、证候实质三个方面探讨糖尿病冠心病中医证候研究进展,为相关研究提供参考和借鉴。发现众医家对糖尿病冠心病中医证候在总体特征及分布上基本取得了一致的意见,均认为其证候特点为本虚标实、虚实夹杂,具体表现为本虚以气虚、阴虚为主,标实除传统的痰浊、血瘀证外,湿热证在疾病证候演变中具有核心枢纽地位,但尚未引起足够的重视。在具体辨证分型上,由于患者疾病程度、体质、环境因素、年龄等复杂因素的作用,存在一定差异。在该病证候本质的研究上,手段较单一,多为与疾病生化指标和功能的相关性研究,未取得突破性进展,今后应加强采用表观组学、基因组学、代谢组学等系统生物学技术和大数据分析等手段开展研究。

糖尿病肾病小鼠CD4^(+)T细胞的脂质组学研究

目的:初步探讨糖尿病肾病(DKD)小鼠CD4^(+)T免疫细胞在脂质组学方面的差异,筛选出具有生物学意义的差异代谢产物。方法:先采用CD4 (L3T4) MicroBeads免疫磁珠法分离BKS.Cg-Dock7^(m+/+)Lepr^(db)/J自发性DKD小鼠脾脏CD4^(+)T免疫细胞;流式细胞术鉴定CD4^(+)T免疫细胞纯度,LC-MS/MS技术检测CD4^(+)T免疫细胞非靶向脂质组学,对差异代谢产物进行分析。结果:LC-MS法检测出463个代谢产物;PCA和OPLS-DA分析显示代谢组分明显分离;筛选出24种差异代谢物。KEGG及富集分析可知差异代谢物涉及甘油磷脂代谢紊乱。结论:CD4^(+)T细胞磷脂类代谢与DKD的发生密切相关,靶向DKD CD4^(+)T细胞的磷脂类代谢可能是DKD治疗的新方向。

簕欓花椒的化学成分及药理作用研究进展

簕欓花椒(Zanthoxylum avicennae)是我国传统中药材,在民间用作草药,有祛风化湿、消肿通络等作用,用于黄疸、咽喉肿痛、疟疾、风湿骨痛、跌打挫伤等症状。据文献报道含有香豆素类、生物碱、木脂素、三萜、黄酮、甾体、芳香族、挥发油等化学成分。目前已发现簕欓花椒具有抗氧化、抑菌、抗肿瘤、镇痛抗炎等多种药理活性,具有一定的药用价值。基于近年来公开发表的文献,对簕欓花椒的化学成分和药理作用进行归纳总结,为其日后的研究及开发利用提供理论依据。

拳参高效液相色谱指纹图谱与抗氧化活性的谱效关系研究

目的采用高效液相色谱(HPLC)指纹图谱与抗氧化活性建立谱-效关系分析筛选拳参抗氧化活性的有效成分。方法采用HPLC法建立拳参指纹图谱,评价指纹图谱相似度,结合HPLC-Q-Orbitrap HRMS/MS定性分析,对其中29个主要特征峰进行指认。使用2,2′-联氮-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二胺盐(ABTS)和2,2-二苯基-1-苦基肼(DPPH)自由基清除法,以及铁离子还原能力(FRAP)测定法,分别评价拳参样品的抗氧化能力,并利用抗氧化活性综合指数(APC)进行综合评价,结合灰色关联度分析和偏最小二乘回归分析研究谱效关系。结果建立了11批拳参样品的HPLC指纹图谱,相似度评价结果均≥0.970。标定29个主要特征峰,并鉴定其中26种成分。灰色关联度分析和偏最小二乘回归分析结果显示,峰2+3(6-O-没食子酰葡萄糖)、峰8(二没食子酰葡萄糖)、峰11(绿原酸)、峰14(儿茶素)、峰15(二没食子酰葡萄糖)、峰18(二没食子酰葡萄糖)和峰23(表儿茶素)是反映拳参抗氧化药效的重要特征峰。结论拳参发挥的抗氧化作用是酚酸类和黄酮类等多种成分联合效应的结果,本文研究结果可为拳参药材的质量评价提供更全面的参考。

白芍水溶性成分快速鉴定研究

目的:利用超高效液相色谱-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)对白芍水提物中的化学成分进行分析和鉴定。方法:色谱条件:色谱柱:Waters ACQUITY^(TM) BEH C_(18)(100 mm×2.1 mm,1.7μm),流动相为0.1%甲酸水溶液(A)-甲醇(B),梯度洗脱,流速0.4 m L/min,柱温30℃,进样量5μL。质谱条件:AB Sciex Triple TOF 5600质谱仪,ESI离子源,正、负离子模式扫描。结果:通过分析正、负离子质谱信息及元素组成,并结合相关文献,共鉴定出69个化学成分。结论:通过UPLC-Q-TOF-MS技术,为鉴定白芍建立了一种快速、高效的分析方法。

高脂血症大鼠病程进展的尿液代谢组学研究

目的采用超高效液相色谱-飞行时间质谱代谢组学法动态观察高脂血症大鼠造模过程中尿液的代谢轮廓的改变,寻找高脂血症演进过程中的生物标志物。方法将SD大鼠分成正常对照组和模型组,运用高脂乳剂灌胃法复制高脂血症大鼠模型,并收集不同时间点的尿样,采用超高效液相色谱-飞行时间质谱仪检测并进行多元数据分析。结果随着造模时间的延长,高脂血症大鼠血浆代谢轮廓呈现动态演变,与正常组相比,模型组3-羟基丁酸、乙酸乙酰、丙酮酸、肌酐、N-氧化烟酰胺明显升高,而柠檬酸、马尿酸、牛磺酸以及3-吲哚硫酸、肌酸、乌头酸明显下降。结论在高脂血症大鼠病程进展过程中,出现了能量代谢紊乱、炎症和氧化应激。该研究加深了对高脂血症发病机制的认识,为研发有效防控高脂血症策略提供科学依据。

11β-羟基类固醇脱氢酶1在2型糖尿病中的研究进展

糖尿病(diabetes)系一组由于胰岛素分泌缺陷及(或)其生物学作用障碍引起的以高血糖为特征的代谢性疾病,成为继心血管、肿瘤之后的第三号健康杀手。其中2型糖尿病(T2DM)占90%以上,寻找治疗T2DM的新药物成为迫在眉睫的任务。研究表明,糖皮质激素(glucocorticoid,GC)是胰岛素的拮抗激素之一,11β-羟基类固醇脱氢酶1(11β-hydroxy steroid dehydrogenase type 1,11β-HSD1)是糖皮质激素的代谢酶,可通过调节局部组织中有活性的糖皮质激素水平影响机体内的糖脂代谢,因此11β-HSD1已成为治疗T2DM的靶点。本文就11β-HSD1在T2DM中的最新研究进展进行综述。

佛手化学成分及调节糖脂代谢紊乱药理作用研究进展

随着经济的快速发展和人们生活方式的改变,糖脂代谢紊乱性疾病的患病率急剧上升,用药成本高。临床研究显示中药在改善糖脂代谢紊乱性疾病症状具有优势。佛手在我国的应用已有数千年,具有止咳平喘祛痰,抗肿瘤,抗氧化,免疫调节作用,抗菌抗炎的作用。本文综述佛手活性成分以及治疗糖脂代谢紊乱性疾病的药理作用,为佛手进一步的研究及开发应用提供借鉴。

转录组测序分析黄连总碱抗脑缺血的作用机制

背景:黄连清热燥湿、泻火解毒,黄连及其成分对脑缺血有显著的保护作用,基于网络药理学和转录组测序探究黄连总碱抗脑缺血的作用机制。目的:在明确黄连总碱对脑缺血大鼠保护作用的基础上,基于网络药理学和转录组测序技术探讨黄连总碱干预脑缺血的作用机制。方法:将SD大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、阳性药物组和黄连总碱组,后3组采用改良线栓法制备大脑中动脉阻塞的缺血再灌注模型,假手术组不插入线栓,其余手术操作相同。通过TTC染色、Longa 5神经功能缺损评分、苏木精-伊红染色、尼氏染色评价黄连总碱对脑缺血再灌注模型大鼠的脑保护作用。对假手术组、缺血再灌注组、黄连总碱组大鼠脑组织进行转录组测序,通过差异表达基因筛选、基因本体论分析、京都基因与基因组百科全书分析以及转录组学与网络药理学关联分析,阐明黄连总碱干预脑缺血的作用特点,最后通过ELISA检测及免疫荧光染色对黄连总碱干预脑缺血的关键靶点进行验证。结果与结论:①黄连总碱可降低缺血再灌注模型大鼠Longa 5神经功能缺损评分及脑梗死面积,增加神经元、尼氏小体数目;②黄连总碱治疗后差异表达基因的基因本体论功能富集分析包括炎症反应、分裂原活化蛋白激酶级联的正调控等生物学过程;京都基因与基因组百科全书通路富集分析主要涉及白细胞介素17信号通路、神经活性配体-受体相互作用、环磷腺苷信号通路等通路;③转录组分析发现黄连总碱主要调控的基因有前列腺素内过氧化物合酶2、脑源性神经营养因子、瞬间受体电位A1等;④采用网络药理学分析发现,黄连总碱中9个成分可能通过87个成分靶点关联到过氧化物合酶2、脑源性神经营养因子及瞬间受体电位A1而发挥作用;⑤ELISA检测及免疫荧光染色结果进一步证实,黄连总碱调控脑缺血再灌注模型大鼠过氧化物合酶2、脑源性神经营养因子和瞬间受体电位A1的表达;⑥提示黄连总碱能明显改善脑缺血再灌注模型大鼠损伤,可能通过调控过氧化物合酶2、脑源性神经营养因子和瞬间受体电位A1而发挥作用。

脂质组学在中药调脂研究中的应用进展

脂质组学从脂质代谢网络变化的整体角度反映机体状态的系统研究方法,与中医药治疗疾病的整体观一致。脂质组学在中药现代研究,尤其是在中药的多靶点作用机制、中药复方调脂规律及毒性中药调脂安全性等方面的研究具有重要理论意义和应用价值。

血管平滑肌细胞表型转化的诱导因素研究进展

血管平滑肌细胞(VSMCs)异常增殖和迁移造成的表型转化在心脑血管疾病中起着关键作用,是动脉粥样硬化、高血压、心衰、脑梗和血管动脉瘤等疾病的重要病理过程之一。选择适宜的诱导因素是探讨VSMCs表型转化的分子机制、研发相关血管保护作用药物的重要支撑。VSMCs表型转化的诱导因素众多,如氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)、高糖、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、晚期糖基化终末产物(AGEs)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)等,已被成功应用于建立VSMCs表型转化模型。

医学研究中动物实验样本量的确定方法

在开始人体临床药物试验之前,研究人员需要在动物实验中进行广泛的临床前研究,以初步明确药物的作用、毒性和药代动力学特征。在实验研究中,除了与研究设计有关的一般考虑因素外,动物样本量计算也是核心要素。目前研究人员在动物样本量的选择方面具有很大的随意性,不仅导致实验结果的可复制性和代表性降低,而且造成了大量资金的浪费。因此,本文将医学实验研究分为探索性研究和验证性研究,并且探讨了基于文献与经验的样本量确定法、精度分析确定法、两样本均数确定法、资源方程式确定法和KISS确定法,旨在为实验中样本量的选择提供计算方案,进而降低对动物伤害与提高实验的准确性。随着医学统计学与医学实验结合的发展和传播,动物实验样本量确定方面的研究将愈加完善,将为研究过程的严谨性及研究结论的可靠性提供坚定的理论基础和实验依据。

不同产地佛手指纹图谱及模式识别研究

目的:建立不同产地佛手指纹图谱,利用模式识别方法比较不同产地佛手的差异。方法:本文采用高效液相色谱法对4个产地25批佛手建立高效液相指纹图谱,利用相似度评价技术、聚类分析、主成分分析进行分析研究。结果:从已建立的佛手指纹图谱中确定26个共有峰,指认出4个共有峰,利用聚类分析、主成分分析可区分佛手产地。结论:研究结果表明,不同地理位置佛手药材相似度存在一定差异,地理位置相近的佛手药材相似度较高。