退热合剂工艺筛选的正交实验研究

[目的]探讨退热合剂(由麻黄、石膏、知母、板蓝根、白茅根、葛根等中药组成)的最佳制剂工艺。[方法]采用正交实验方法,用干酵母造成大鼠发热模型,以大鼠体温下降为筛选指标,对退热合剂工艺进行优化筛选。[结果]退热合剂的最佳工艺流程是:药物洗净(石膏粉碎)-浸渍1h-石膏加10倍水先煎1h-余下各味药加10倍水与石膏合并共煎1h1次-提油-过滤-浓缩煎液-重蒸挥发油-合并两液,制成浓度1kg/L的煎液。

β-辛醚对ox-LDL损伤ECV304细胞内钙离子浓度影响的实验研究

目的:观察石菖蒲主要有效成分β-细辛醚对氧化低密度脂蛋白诱导损伤的人脐静脉血管内皮细胞内钙离子(Ca2+)的影响。方法:将细胞分为正常组,模型组,β-细辛醚高、中、低剂量组;采用流式细胞术(flow cytometry,FCM)测定ECV304细胞内Ca2+浓度;酶标仪检测细胞活性。结果:ox-LDL可致ECV304细胞内Ca2+明显增高,细胞活力降低,与正常对照组比较有显著差异(P<0.001);β-细辛醚能够不同程度的降低ox-LDL致损伤的ECV304细胞内Ca2+浓度,增强细胞活力,与模型组比较差异有统计学差异(P<0.05～0.01)。结论:β-细辛醚能有效减轻ox-LDL对ECV304的损伤。

研究生医学实验动物学实验教学改革实践

医学实验动物学作为医学院校研究生的必修课或选修课,越来越受到师生们的重视。实验教学是医学实验动物学重要组成部分和不可或缺的实践环节,动物实验课教学质量的提高是医学实验动物学课程教学质量的关键和保障。总结动物实验课教学内容、教学方法和考核方式等方面改革实践的经验和体会,旨在加强交流,深化医学实验动物学教学改革,提高教学质量。

神昌滴丸毒性的实验研究

目的 :观察神昌滴丸急性毒性和长期毒性反应。方法 :急性毒性试验 :小鼠一次性经口灌胃给药 ,观察动物 7天内的反应情况 ,改良寇氏法计算LD50 、95 %可信限。长期毒性试验 :大鼠连续 3个月经口灌胃给予神昌滴丸 ,药后进行病理、血液学、血液生化学检查 ;停药观察 2周后 ,同样进行上述检查。结果 :急性毒性试验 :小鼠经口灌胃LD50 为 5 12 5 5g/kg ,此剂量相当临床剂量的 410倍 ;长期毒性试验 :高剂量组剂量相当于临床剂量的 93倍 ,有些动物活动减少 ,毛发松散 ,精神状态稍差 ;白细胞总数、淋巴细胞数和血糖升高 ,血红蛋白降低 (P <0 0 5 ) ,但未超出正常范围 ;2只大鼠心肌有灶状水肿、空泡变性 ,其中 1只伴纤维化瘢痕形成 ;病理解剖及器官指数未见异常 ;其余动物及其它剂量组未见异常。停药 2周后 ,各项检查未见异常。结论 :神昌滴丸在正常的临床剂量下没有明显毒性反应 ,是安全的。

冲锋壹号果味咖啡饮料壮阳作用及耐缺氧实验研究

考察冲锋壹号果味咖啡饮料的壮阳作用及耐缺氧能力,为该饮料的进一步研究提供实验依据。通过对去势雄性大鼠和正常雄性大鼠灌胃给药,观察其扑捉潜伏期、扑捉次数、射精次数、扑捉动物例数和射精动物例数,测定血清睾酮含量,取前列腺、精囊腺和提肛肌测定湿重,计算其脏器指数;小鼠连续灌胃给药,观察小鼠在常压缺氧试验、亚硝酸钠中毒存活试验、急性脑缺血性缺氧存活试验中耐缺氧的能力。结果:冲锋壹号果味咖啡饮料高剂量组对去势雄性大鼠能缩短扑捉潜伏期(p<0.05),增加扑捉次数(p<0.05)和射精次数(p<0.05);高、中剂量组均能延长小鼠常压耐缺氧潜伏期(p<0.05),延长急性脑缺血性缺氧后小鼠的存活时间(p<0.001,p<0.05)。冲锋壹号果味咖啡饮料具有壮阳作用及耐缺氧功能。

舒乐宁抗炎消肿作用的实验研究

目的:研究舒乐宁洗剂的抗炎消肿作用。方法:选用多种炎症模型观察舒乐宁对小鼠耳肿胀、大鼠足跖肿胀、小鼠毛细血管通透性的影响。结果:在多种炎症模型中证实舒乐宁洗剂有良好的抗炎消肿作用:能抑制二甲苯所致的小鼠耳肿胀和蛋清所致的大鼠足跖肿胀;能抑制醋酸所致的小鼠毛细血管通透性增高。结论:舒乐宁洗剂有良好的抗炎消肿作用。

丹参注射液眼部电离子导入治疗玻璃体出血的实验研究

目的探讨丹参注射液电离子导入治疗玻璃体出血的疗效及机制。方法将兔实验性玻璃体出血模型18只(36只眼)分为对照组和治疗组,对照组不做任何治疗,观察出血的自然转归;治疗组予以丹参注射液眼部电离子导入治疗。分不同时间点抽取兔房水和玻璃体,用高效液相色谱法测定房水和玻璃体中的药物质量浓度。用检眼镜观察眼底玻璃体出血吸收情况。结果对兔实验性玻璃体出血,丹参注射液电离子导入组出血吸收较对照组快。结论丹参注射液电离子导入法可促进玻璃体出血的吸收,缩短病程,是一种简易而有效的眼局部治疗方法。

顽癣敌软膏调控JAK2/STAT3炎症信号通路治疗咪喹莫特诱导的小鼠银屑病作用机制研究

目的考察顽癣敌软膏(WXD)对银屑病的作用及机制。方法采用小鼠背部皮肤连续涂抹7 d咪喹莫特建立银屑病模型。时-效关系研究,设正常对照组,模型对照组,WXD第1、2、3、4天给药组及糠酸莫米松组,每日涂抹药物一次。量-效关系研究,设正常对照组,模型对照组,WXD 1、2、3次组及糠酸莫米松组,从造模第4天开始给药。通过银屑病皮损面积和严重程度指数(PASI)和病理观察进行药效评价;采用qRT-PCR法检测皮肤TNF-α和IL-1βmRNA的表达;ELISA法检测IL-23、IL-17A、5-HT、组胺含量;免疫组织化学法检测皮肤髓过氧化物酶(MPO)水平和p-JAK2表达;Western Blot法检测p-STAT3蛋白表达。结果时-效关系研究结果显示,WXD第1、2、3、4天给药组的PASI、棘层厚度、棘层杵状突起长度、棘层杵状突起面积/棘层面积均较模型组明显降低(P<0.05,P<0.01)。量-效关系研究结果显示,WXD 1次组效果更佳(P<0.05,P<0.01)。WXD可明显降低银屑病小鼠皮肤组织MPO、p-JAK2、p-STAT3蛋白表达及IL-23、IL-17A水平,降低皮肤TNF-α及IL-1βmRNA表达,降低血清5-HT和组胺水平(P<0.05,P<0.01)。结论顽癣敌软膏在造模同时进行预防给药和在银屑病症状明显时进行治疗给药的两种给药方式均有效,以每日给药1次治疗银屑病效果最佳,其机制与下调JAK2/STAT3信号通路抑制炎症反应有关。

石菖蒲挥发油、β-细辛醚对高脂血症大鼠血管舒缩与抗血小板聚集的作用

目的研究石菖蒲挥发油、β-细辛醚对高脂血症模型动物血管舒缩与抗血小板聚集的作用。方法大鼠喂养高脂饲料造成高脂血症模型,采用流式细胞术检测血液中 CD_(62p)、CD_(63)表达率,并用放免法测定脑组织中内皮素(ET)、降钙素基因相关肽(CGRP)、神经肽 Y(NPY)的舍量。结果石菖蒲挥发油能降低脑ET 的含量而升高脑 CGRP 的浓度;β-细辛醚能降低血 CD_(62p)表达率、降低脑 ET、NPY 的含量。结论石菖蒲挥发油、β-细辛醚有舒张血管、抗血小板聚集活性的作用。

GC-MS建立石菖蒲挥发油特征指纹图谱方法学研究

目的 :建立石菖蒲挥发油GC MS分析色谱条件 ,初步拟定挥发油指纹特征图谱指标成分群。方法 :采用GC MS法分析 10批石菖蒲挥发油化学成分。结果 :在进样口温度 2 5 0℃ ,接口温度 2 30℃ ,载气流速 1.3mL·min-1,柱压 80kPa ,电离电压 1.4kV ,升温速率 3℃·min-1的色谱条件下 ,石菖蒲挥发油主成分可达到较好分离 ;挥发油主要含有甲基丁香酚 (2 .13% )、顺式甲基异丁香酚 (4 .4 8% )、反式甲基异丁香酚 (0 .82 % )、γ 细辛醚 (4 .5 1% )、β 细辛醚 (6 6 .15 % )、α 细辛醚 (6 .35 % )等 6个特征成分 ;以此 6个主要共有峰为评价指标 ,GC MS色谱条件的精密度、稳定性、重现性良好。结论 :方法准确可靠 ,重复性好 。

石菖蒲提取液对脑缺血-再灌注诱导的神经细胞凋亡的保护作用

目的 观察石菖蒲提取液对脑缺血 -再灌注诱导的脑神经细胞凋亡的防治作用 ,探讨其神经保护作用的机制。方法 将SD大鼠随机分为生理盐水对照组、石菖蒲挥发油治疗组、石菖蒲去油水煎液治疗组及醒脑静注射液对照组 ,上述药分别灌胃给药 7d后建立双侧颈总动脉短时闭塞模型 ,采用原位细胞凋亡TUNEL染色和图像分析观察鼠大脑皮质的细胞凋亡情况。结果 各治疗组较生理盐水对照组凋亡神经细胞积分光密度减少 ,且以石菖蒲挥发油治疗组最为显著。结论 石菖蒲提取液可显著抑制由缺血 -再灌注诱导的脑神经细胞凋亡 ,从而起到一定程度的神经原保护作用 ,且以挥发油的疗效最为显著。

石菖蒲开窍醒神物质基础的药学系列研究

目的 探讨石菖蒲开窍醒神作用的物质基础。方法 采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)法建立石菖蒲挥 发油特征指纹图谱;采用GC-MS及HPLC法比较石菖蒲、水菖蒲、九节菖蒲成分的异同;采用GC-MS法分析水煎液 与醇提液主要化学成分;采用HPLC法测定β-细辛醚、α-细辛醚含量;采用GC-MS法分析挥发油入脑成分。结果 以 甲基丁香酚、顺式甲基异丁香酚、反式甲基异丁香酚、γ-细辛醚、β-细辛醚、α-细辛醚6个特征成分为指标, 建立了挥发油的GC-MS指纹图谱辨识技术;石菖蒲、水菖蒲及九节菖蒲挥发油以及β-细辛醚、α-细辛醚的含量 存在明显差异,不应混用;在GC-MS可检出成分中,石菖蒲水煎剂、醇提液除含挥发油外,尚含有2,3-二氢-3,5二 羟基-6-甲基-4H-吡喃-4-酮(4H-Pyran-4-one,2,3-dihydro-3,5-dihydroxy-6-methyl-)与5-羟甲基糠醛(2- Furancarboxaldehyde,5-[hydroxymethyl]-)等成分;精制β-细辛醚纯度达99％以上;6批次药材中β-细辛 醚含量为1．09％-2．87％,α-细辛醚含量为0．011％-0．172％;顺式甲基异丁香酚、γ-细辛醚、β-细辛醚、α-细 辛醚4个挥发油成分能进入脑组织。结论 石菖蒲挥发油及β-细辛醚可能是药效活性的最主要有效部位(成分)。

GC-MS法建立广藿香挥发油指纹特征图谱研究

目的 :建立广藿香挥发油指纹特征图谱 ,为广藿香的内在质量评价和鉴定提供特征数据。方法 :采用GC MS法对不同产地广藿香 (石牌、高要、海南藿香 ) ,组织培养广藿香 ,以及超临界提取广藿香、广藿香对照品共 2 1个样品进行主成分分析。结果 :2 1个广藿香样品均含有 β 广藿香烯、β 榄香烯、顺式 石竹烯、反式 石竹烯、刺蕊草烯、α 愈创木烯、α 广藿香烯、δ 愈创木烯、未鉴定A、广藿香醇、广藿香酮等主要成分 ,以上 11种主成分相对含量约占挥发油总量的 80 %左右。石牌藿香与高要、海南藿香比 ,11个成分的相对含量 (除顺式 石竹烯、反式 石竹烯外 ) ,均有显著性差异 ;高要藿香与海南藿香比无显著性差异。结论 :11个主要成分的出峰先后顺序及相对含量极具特征性 ,形成了广藿香特有的指纹图谱 (地貌 ) 。

石菖蒲对缺血再灌注脑损伤大鼠神经细胞凋亡的影响

目的 :观察石菖蒲对缺血再灌注脑损伤大鼠神经细胞凋亡影响的有效部位。方法 :提取石菖蒲 (去油水提液、含油水提液、挥发油、β -细辛醚 ) ,灌胃给药 7d ,1次 /d ,观察大鼠脑皮质和海马神经细胞凋亡的情况。结果 :β -细辛醚有明显抑制大鼠脑皮质神经细胞凋亡的作用 ,石菖蒲组分 (含油水提液、挥发油、β -细辛醚 )也有减少大鼠海马神经细胞凋亡的作用。β -细辛醚能抑制大鼠脑皮质和海马神经细胞Bax基因表达。石菖蒲挥发油和 β -细辛醚能增强大鼠脑皮质神经细胞Bcl -X基因的表达。结论 :石菖蒲挥发油尤其是 β

石菖蒲冰片对神经细胞缺氧性损伤的保护作用

[目的]探讨石菖蒲、冰片对缺氧损伤神经细胞的保护作用。[方法]在缺氧培养条件下造成大鼠神经细胞损伤,测定空白对照组、模型对照组、石菖蒲挥发油组、冰片组、冰片+石菖蒲挥发油(低、中、高配比)组神经元细胞数、神经细胞支配面积。[结果]石菖蒲挥发油、冰片、冰片+挥发油(低、中、高配比)给药组神经细胞支配面积和神经元细胞数高于空白对照组和模型对照组。[结论]石菖蒲、冰片对缺氧诱导的大鼠神经细胞损伤具有保护作用。

β-细辛醚对PC12细胞和乳鼠皮层神经细胞形态学及细胞活力的影响

目的:观察β-细辛醚对PC12细胞和乳鼠皮层神经细胞形态学及细胞活力的影响。方法:用免疫细胞化学方法检测皮层神经细胞特异性标志物NSE、GFAP的表达;在体外将不同浓度β-细辛醚与PC12细胞和皮层神经细胞各作用24 h,用相差显微镜观察细胞形态的改变,并用MTT比色法检测细胞活力的变化。结果:原代培养的乳鼠皮层神经细胞大多数NSE呈阳性表达,少量GFAP呈阳性表达;β-细辛醚与PC12细胞作用24 h,低浓度β-细辛醚(7.5、15、30、60μg/ml)有促增殖作用,高浓度β-细辛醚(120、140、2480μg/ml)则可抑制其增殖,且随药物浓度的增加而增强;β-细辛醚与皮层神经细胞作用24 h,7.5、15、30、60、120μg/mlβ-细辛醚对其细胞形态和活力无明显影响,240μg/mlβ-细辛醚对其有促增殖作用,而480μg/mlβ-细辛醚对其则有损伤作用。结论:β-细辛醚可能有抗肿瘤和保护神经细胞的作用。

广藿香药材挥发油及主要成分含量影响因素的考察

目的 :考察影响广藿香挥发油及主要成分含量的因素 ,为广藿香的内在质量评价和鉴定提供依据。方法 :采用《中国药典》挥发油含量测定法及GC MS法对不同产地、不同采收期、不同加工方法 ,以及不同水平施肥和施用农药等因素对广藿香挥发油和主要成分含量的测定和比较。结果 :不同产地、不同采收期和不同加工方法均对广藿香挥发油含量有影响 ,不同水平施肥和施用农药则对其无显著影响。结论 :在制订广藿香药材及中成药质量标准时必须考虑原药材的不同产地、不同采收期和不同加工方法等因素的影响。

复方玄驹胶囊对去势雄性大鼠性激素水平及性器官重量的影响

目的:探讨复方玄驹胶囊对去势雄性大鼠性激素水平及性器官重量的影响。方法:采用随机分组、空白对照、模型对照的临床研究方法,从60只SPF级雄性幼年SD大鼠中,随机取出12只大鼠为正常对照组,余大鼠去势(摘除双侧睾丸)后,随机均分4组,分别为模型对照组、复方玄驹胶囊高、中、低剂量组。正常模型对照组予生理盐水灌胃,模型组采用复方玄驹胶囊配制液灌胃干预,20 d后,采用放射免疫法检测各组大鼠外周血液中睾酮(T)、黄体生成素(LH)和卵泡刺激素(FSH)水平,同时称取附睾、包皮腺、精囊腺、前列腺及提肛肌的重量。结果:①与正常对照组相比,去势各组T水平显著降低,说明造模成功。与模型对照组相比,复方玄驹胶囊高、中、低剂量组T水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.01)。②与正常对照组相比,模型对照组、复方玄驹胶囊各剂量组LH水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);FSH水平虽有所升高,但差异无统计学意义。③与正常对照组相比,模型对照组包皮腺、精囊腺、前列腺、提肛肌指数明显降低,说明造模成功;与模型对照组相比,复方玄驹胶囊高剂量组精囊腺指数明显提高,差异有统计学意义(P<0.05);而复方玄驹胶囊不同剂量组之间比较,包皮腺、前列腺、提肛肌指数均未见明显增加,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:复方玄驹胶囊可改善雄性SD大鼠外周血中激素水平,提高附性器官指数,可能是临床治疗ED的重要作用机制之一。