长链非编码RNA TUG1和UCA1在结肠癌组织中的表达及临床意义

目的探究长链非编码RNA TUG1和UCA1在结肠癌组织中的表达及临床意义。方法选取2018年5月—2020年5月收治的80例结肠癌患者为研究对象,利用原位杂交与qRT-PCR法检测TUG1和UCA1的表达,对表达情况和患者病理特征及预后进行研究。结果UCA1和TUG1在结直肠癌组织表达过程中与性别、年龄以及病理情况关系较小(P>0.05),和患者肿瘤大小、是否存在淋巴结转移、疾病的分化情况以及分期情况高度相关(P<0.05)。UCA1和TUG1高表达患者肿瘤更大,淋巴结存在转移情况,分化程度较高且TNM分期以Ⅰ/Ⅱ为主;80例患者进行随访36个月,中位生存时间33.75个月,死亡人数16例,术后总生存率80.00%(64/80);Kaplan-Meier生存分析显示UCA1和TUG1高表达死亡12例,生存38例,生存率76.00%(38/50);UCA1和TUG1低表达死亡4例,生存26例,生存率86.66%(26/30)。结论直肠癌组织中lncRNA TUG1和UCA1高表达与低表达对患者疾病预后有一定影响。

结直肠癌发病相关的lncRNA筛选及GAPLINC对HCT116细胞的作用

目的筛选结直肠癌(CRC)差异性表达的长链非编码RNA (lncRNA),并进行临床标本验证,研究其对结肠癌细胞HCT116功能的作用。方法利用lncRNA PCR芯片对3对CRC组织和癌旁对照组织筛选差异性表达的lncRNA,确定候选研究lncRNA GAPLINC,RT-qPCR对21例临床样本进行验证其表达的差异性;同时构建GAPLINC表达质粒及其沉默体siRNA转染HCT116细胞,研究其对细胞凋亡、迁移及侵袭能力的影响。结果 lncRNA芯片实验结果提示CRC组织中存在大量的差异性表达的lncRNA,其中GAPLINC在CRC组织表达稳定增加,21例临床样本进一步验证了其在肿瘤组织中表达增加(P<0.05);转染GAPLINC表达质粒后,HCT116细胞凋亡被抑制,同时其迁移及侵袭能力增强,转染siRNA抑制GAPLINC的表达后,则出现相反的结果。结论利用lncRNA芯片可对CRC差异性表达lncRNA进行批量筛选,GAPLINC在CRC组织中表达稳定增加,具有促癌作用,在CRC发生发展中可能起着重要作用。

5-FU致小鼠肠黏膜严重损伤时β-catenin的表达及其意义

目的探讨与肠上皮干细胞增殖关系密切β-catenin蛋白在5-FU致小鼠肠黏膜严重损伤时的表达及其意义。方法取成年C57/BL小鼠70只,采用随机数字法将小鼠随机分为对照组(30只)和实验组(40只)。实验组予腹腔注射大剂量5-FU[150 mg/(kg·d)×5 d],分别于注射后1、3、5 d每天剖杀10只小鼠,取所有小鼠中段小肠组织固定,进行常规病理组织学检查及免疫化检查肠黏膜中β-catenin蛋白表达情况;对照组腹腔注射等体积的生理盐水,连续注射5 d,处理方法和检测指标与实验组相同。结果大剂量5-FU作用后,小鼠肠组织受到严重损伤,黏膜炎症、水肿,肠绒毛脱落及肠隐窝消失,随着时间推移,肠黏膜有少量修复;与对照组比较,实验组肠组织β-catenin蛋白表达水平显著增加,随着时间推移,β-catenin蛋白表达阳性的细胞比例逐渐下降。结论肠黏膜受到损伤后,β-catenin表达增加,促进肠上皮干细胞增殖,完成对肠黏膜的损伤修复。

结直肠癌发病相关关键lncRNA的筛选和鉴定:基于肿瘤基因图谱数据库的生物信息学分析

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)在结直肠癌(CRC)中的表达特征及其对患者生存预后判断的潜在价值。方法下载肿瘤基因图谱(TCGA)中CRC相关的RNA序列(RNA-seq)数据,进行lncRNA表达差异、功能、通路富集、调控网络及lncRNA-mRNA共表达分析,同时分析lncRNA差异表达对CRC患者预后的影响。结果对TCGA 453个CRC临床样本数据进行分析,提示有119个lncRNA存在差异性表达,lncRNA和编码基因存在共表达关系,对基因富集性分析发现,lncRNA参与细胞的多个生物学行为;16个lncRNA对患者生存预后显著相关,其中3个lncRNA BVES-AS1、HAND2-AS1和MAMDC2-AS1为关键lncRNA,可作为预后判断的标志物,同时与mi RNA、coding gene存在紧密的调控网络。结论 lncRNA在CRC中存在差异性表达,起着重要的调控作用,在CRC患者诊断、靶向治疗及预后判断方面具有潜在的应用价值。

胃空肠吻合在结肠肝曲癌侵犯十二指肠患者中的应用价值

目的 探讨胃空肠吻合在结肠肝曲癌侵犯十二指肠患者中的应用价值。方法 将2005年1月至2015年6月期间，广州市第一人民医院普通外科手术治疗的45例结肠肝曲癌侵犯十二指肠患者纳入本回顾性对照研究。27例（吻合组）予行右半结肠切除及十二指肠病灶切除后，不论肿瘤侵犯十二指肠范围的大小，均予横向缝合关闭十二指肠缺损，但同时予行胃空肠吻合术。另18例行常规手术。比较两种方法的临床疗效。结果 两组患者均顺利完成手术，无术中死亡，手术时间相近。与对照组相比，吻合组患者十二指肠瘘发生率更低[分别为4/18（22.2%）和3/27（11.1%）]；住院时间更短[（8.5 ± 1.9）d比（13.3 ± 2.6）d]，十二指肠瘘愈合时间更短。随访结果显示，生存时间超过3年的吻合组患者有19例，对照组患者有11例，两组患者的3年生存率差异无统计学意义（χ2=1.25，P= 0.19）。结论 结肠肝曲癌侵犯十二指肠患者在行肿瘤根治术同时予行胃空肠吻合术具有一定临床应用价值。

lncRNA MAMDC2-AS1作为竞争性内源RNA在结直肠癌发生发展过程中的作用机制

目的探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA) MAMDC2-AS1对结直肠癌细胞的作用及其机制。方法收集21对临床样本,利用实时逆转录定量聚合酶链反应(real-time reverse transcription quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测肿瘤组织及其癌旁对照组织MAMDC2-AS1、miR-197-3p和丝裂原活化蛋白激酶4(mitogen-activated protein kinase 4,MAPK4)的表达情况,并分析其表达的相关性;培养结直肠癌细胞株HCT116细胞,合成MAMDC2-AS1 siRNA和构建表达质粒,转染至HCT116细胞,观察细胞侵袭、迁移能力的改变,同时利用流式细胞术检测细胞凋亡比例的改变;利用RT-qPCR检测转染siRNA和表达质粒后,HCT116细胞MAMDC2-AS1、miR-197-3p和MAPK4表达的改变。结果与癌旁对照组织比较,肿瘤组织的MAMDC2-AS1表达显著增高,miR-197-3p表达显著降低,MAPK4的表达显著增高,同时MAMDC2-AS1和miR197-3p的表达量呈显著负相关,MAMDC2-AS1与MAPK4的表达呈显著正相关;HCT116细胞转染MAMDC2-AS1 siRNA后,其细胞侵袭和迁移能力显著降低,细胞凋亡比例增高;MAMDC2-AS1和MAPK4的表达显著降低,miR-197-3P的表达显著增加;转染MAMDC2-AS1的表达质粒后则出现相反的结果。结论 lncRNA MAMDC2-AS1具有促癌作用,其作用机制可能为通过竞争性结合miR-197-3p而促进MAPK4的表达。