中医“肺肾交互”理论的探讨及其在急性肾损伤诱导急性肺损伤的物质基础

急性肾损伤可以导致远隔器官的损伤,诱导急性肺损伤的发生,这是急性肾损伤预后差的重要原因,深入理解肾和肺损伤的交互机制是改善AKI预后的关键。中医基础理论认为,肾和肺二者能相互影响,在生理上是"金水互生"。在病理上是"肺肾同源"。中医学这种肾肺之间生理和病理上的认识,与目前西医AKI能诱发ALI的交互相似。水通道蛋白-1可以表达于肾小管和肺泡,急性肾损伤和急性肺损伤时肾和肺组织水通道蛋白-1均下调,炎症是急性肾损伤诱导急性肺损伤的机制,而IL-1β、TNF-α等炎症可以下调水通道蛋白-1,因此在AKI诱导ALI过程中,中医"肺肾交互"理论的物质基础可能是AQP-1和炎症介质。

发酵虫草菌粉和泼尼松对急性马兜铃酸肾病大鼠肾小管Notch2／hes-1信号通路活化的影响

目的探讨发酵虫草菌粉及泼尼松对急性马兜铃酸肾病(acute aristolochic acid nephropathy,AAAN)大鼠肾小管上皮细胞Notch2/hes-1信号通路的影响。方法将50只SD大鼠随机分为正常组、模型组、发酵虫草菌粉组(CS组)、泼尼松组及CS加泼尼松组,每组10只。以马兜铃酸A纯品100mg/(kg·d)连续灌胃3天建立AAAN模型。CS组予发酵虫草菌粉5.0g/(kg·d)灌胃,泼尼松组予泼尼松0.5mg/(kg·d)灌胃,CS加泼尼松组予两药联合灌胃,连续3周。检测各组大鼠肾功能[尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)],HE染色观察肾脏病理改变,TUNEL法检测肾小管上皮细胞凋亡,免疫组织化学法及Westernblot法检测大鼠肾组织Notch2、Hes-1蛋白表达。结果 HE染色结果显示,正常组大鼠肾组织结构正常;模型组大鼠出现肾小管坏死改变;泼尼松组、CS组及CS加泼尼松组肾小管病理明显改善。与正常组比较,模型组大鼠BUN和SCr水平、肾小管间质半定量评分、凋亡细胞比例以及Notch2、Hes-1蛋白表达均显著升高(P<0.01)。与模型组比较,CS组、泼尼松组及CS加泼尼松组上述指标均显著降低(P<0.01)。以CS加泼尼松组降低更明显(P<0.05,P<0.01)。结论 Notch2/hes-1信号通路活化可能参与AAAN肾小管上皮细胞凋亡的发生。CS及泼尼松对AAAN有肾保护作用,但联合干预疗效更佳,其机制可能与抑制肾组织Notch2/hes-1信号通路活化有关。

加味六味地黄汤对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织Notch1/jagged-1信号通路的影响

目的:观察加味六味地黄汤对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾组织Notch1、jagged1蛋白表达的影响。方法:健康成年SD大鼠90只,按随机数字表法分为假手术组、模型组、中药组3组。假手术组和模型组给予生理盐水(2 ml/只/d)灌胃,中药组给予加味六味地黄汤组灌胃(2 ml/d)。HE染色和Masson染色观察肾脏病理改变,免疫组化和Western blot观察大鼠肾组织Notch1、jagged1蛋白的表达。结果:假手术组大鼠肾组织结构正常,模型组大鼠出现肾间质纤维化,中药组大鼠小管间质病变减轻。与假手术组相同时间点相比较,模型组大鼠小管间质半定量评分、Notch1、jagged1蛋白表达均显著增高,差异有统计学意义;与模型组大鼠相同时间点相比较,加味六味地黄汤显著降低小管间质半定量评分、Notch1、jagged1蛋白表达。结论:加味六味地黄汤可能通过阻断Notch1/jagged1信号通路的活化,发挥抗肾间质纤维化作用。

加味六味地黄汤对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织CTGF和MMP-2的影响

目的:观察加味六味地黄汤对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾组织结缔组织生长因子(CTGF)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的影响。方法:健康成年SD大鼠90只,随机分为3组:假手术组、模型组、中药组。假手术组和模型组予以生理盐水(2 ml·只-1·d-1)灌胃;中药组予以加味六味地黄汤组灌胃(2 ml/d)。HE染色和Masson染色观察肾脏病理改变,免疫组化和Western blot观察大鼠肾组织CTGF、MMP-2蛋白的表达。结果:假手术组大鼠肾组织结构正常,模型组大鼠出现炎症细胞浸润、肾间质纤维化,中药组大鼠小管间质病变减轻。与假手术组相同时间点相比较,模型组大鼠小管间质半定量评分、CTGF、MMP-2蛋白表达均显著增高,差异均有统计学意义(P<0.01);与模型组大鼠相同时间点相比较,加味六味地黄汤显著改善肾脏病理,降低小管间质半定量评分、CTGF、MMP-2蛋白表达(P<0.05)。结论:加味六味地黄汤可能通过抑制CTGF、MMP-2蛋白表达,发挥抗肾间质纤维化作用。

缺氧-复氧诱导HK2细胞HMGB1/TLR-4信号通路活化调控TNF-α、IL-1β表达的意义

目的:观察缺氧-复氧诱导后HK2细胞的凋亡率、高迁移率蛋白B1(HMGB1)、Toll样受体4(TLR-4)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)水平的改变,探讨缺氧-复氧模拟肾缺血-再灌注诱导HGMB1/TLR-4信号通路活化在调控晚期炎症反应和细胞凋亡的意义。方法:用抗霉素A处理HK2细胞(0.1μmol/L)耗竭ATP的方法建立缺氧-复氧HK2细胞模型以模拟缺血-再灌注损伤。将HK2细胞随机分成3组:normal组、I/R组和重组人HGMB1组(r HGMB1组),在复氧后12 h、24 h、48 h 3个时间点,用流式细胞术检测细胞的凋亡率,ELISA法检测细胞上清液HMGB1、TNF-α、IL-1β的水平,免疫激光共聚焦和western blot检测HK2细胞TLR-4蛋白的表达。结果:缺氧-复氧可诱导HK2细胞凋亡比率、细胞上清液重组人HMGB1、TNF-α、IL-1β水平及HK2细胞TLR-4蛋白12 h即明显增多,24 h达高峰,与normal组相同时间点相比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。经重组人HGMB1处理后,细胞的凋亡率、上清液HMGB1、TNF-α、IL-1β水平及HK2细胞TLR-4蛋白均明显降低,与I/R组相同时间点相比较差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结论:缺氧-复氧模拟肾缺血-再灌注可诱导HK2细胞HGMB1/TLR-4信号通路活化,参与调控TNF-α、IL-1β炎症介质的表达及HK2细胞的凋亡,通过晚期炎症和凋亡机制介导AKI的发生和发展。

高迁移率蛋白1相关信号通路在肾脏疾病中的作用

高迁移率蛋白1(HMGB1)是高迁移率蛋白家族成员之一,其生理作用广泛,参与细胞核内DNA重组、染色质结构稳定、基因转录调控、细胞修复、分化等生命活动,是细胞及生物体存活的关键。HMGB1相关信号通路作为晚期炎性介质信号,参与了缺血/再灌注损伤、急性肾损伤、慢性肾脏病、狼疮性肾炎等肾脏病。

中西医结合专业医学生临床实习教育的思考

临床实习是医学生高等医学教育培养过程中最重要的一个阶段,中西医结合专业的医学生需要在实习阶段将中医学的宏观辩证和西医学的微观检查相结合,更需要临床实习来培养其诊治思维。但目前中西医结合专业临床教学存在医学生对中西医结合专业学科如何发展和定位的困惑、理论知识差和学习缺乏主动性、动手操作机会少、受就业和考研影响大等问题,临床实习教学模式的陈旧、临床教学老师带教意识薄弱也是临床实习教育较为突出的问题。因此,加强理论教学和实习教学的师资队伍建设,提高教学质量,转变临床教学模式,加强教学经费投入,积极引导医学生建立正确的择业观,处理好考研和实习的关系,是提高当前中西医结合专业临床实习教育质量的重要手段。

基于网络药理学的防己茯苓汤治疗急性肾损伤机制研究

目的:利用网络药理学方法探讨防己茯苓汤治疗急性肾损伤的作用机制。方法:在网络药理学分析平台(TCMSP)检索防己茯苓汤中的化合物,经Swiss Target Prediction数据库获取其对应的靶点,运用Cytoscape3.7.1软件构建化合物-靶点网络并分析拓扑学,在CTD数据库筛选急性肾损伤的作用靶点,Venn分析化合物与疾病靶点,借助STRING数据库构建化合物与疾病靶点蛋白互作网络(PPI),最后在DAVID平台分析基因本体(GO)功能与KEGG通路富集。结果:共筛出防己茯苓汤127种化合物和273个靶点,急性肾损伤的靶点共496个,PPI共58个靶点,GO分析得到58个条目,KEGG分析得到62条信号通路。结论:本研究初步预测防己茯苓汤通过多靶点、多途径的药理作用机制治疗AKI,为深入研究其作用机制及临床运用提供新的思路。

加味六味地黄汤对UUO大鼠肾组织Wnt4/β-catenin信号通路介导调控FGF-23的影响

目的:观察加味六味地黄汤对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾组Wnt4、β-catenin及FGF-23蛋白表达的影响。方法:健康成年SD大鼠120只,随机分为4组:假手术组、模型组、中药组、缬沙坦组,各组组内分为1周、2周、4周3个时间点。假手术组和模型组予以生理盐水(2 ml/只/d)灌胃;中药组予以加味六味地黄汤组灌胃(2 ml/d);缬沙坦组在造模后给予缬沙坦(30 mg·kg^-1·d^-1)灌胃。HE染色和Masson染色观察肾脏病理改变,免疫组化和Western blot观察大鼠肾组织Wnt4、β-catenin及FGF-23蛋白的表达。结果:假手术组大鼠肾组织结构正常,模型组大鼠出现肾间质纤维化,中药组和缬沙坦组大鼠小管间质病变减轻。与假手术组相同时间点相比较,大鼠模型组肾功能(BUN、Scr)、小管间质半定量评分、Wnt4、β-catenin及FGF-23蛋白表达均显著增高,差异均有统计学意义(P<0.01);与模型组大鼠相同时间点相比较,加味六味地黄汤和缬沙坦均能改善肾脏病理,显著降低BUN和Scr水平、小管间质半定量评分,下调肾组织Wnt4、β-catenin及FGF-23蛋白的表达(P<0.05或P<0.01)。结论:UUO大鼠肾组织Wnt4/β-catenin信号通路活化,并可能介导了FGF-23的转录,而加味六味地黄汤可能通过阻断Wnt4/β-catenin信号通路的活化,下调FGF-23的表达,发挥抗肾间质纤维化作用。

加味六味地黄汤对大鼠肾间质纤维化的干预机制

【目的】探讨加味六味地黄汤对大鼠肾间质纤维化的干预机制。【方法】将120只健康成年SD大鼠随机分为假手术组、模型组、中药组、缬沙坦组等4组,4组组内再按7、14、28 d 3个时间点分组,每组10只。除假手术组,其他组别大鼠均采用结扎输尿管法构建单侧输尿管梗阻模型。假手术组除不结扎输尿管外其他手术步骤均与上述造模方法相同。成功造模后,中药组术后24 h给予加味六味地黄汤2.376 g·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,缬沙坦组术后24 h给予缬沙坦30 mg·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,假手术组和模型组均在术后24 h给予等体积生理盐水灌胃,每日1次,直至相应实验时间点处死。采用免疫组织化学法检测肾组织c-myc、纤维连接蛋白(Fn)的表达,蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测肾组织Wnt4、β-连环蛋白(β-catenin)、磷酸化糖原合成激酶3β(p-GSK-3β)、磷酸化T细胞因子/淋巴增强因子(p-TCF/LEF)的表达。【结果】与假手术组相同时间点比较,模型组大鼠肾组织Wnt4、β-catenin、p-GSK-3β、p-TCF/LEF、Fn和c-myc蛋白表达水平显著上调,差异均有统计学意义(P<0.01);与模型组相同时间点比较,中药组和缬沙坦组大鼠肾组织Wnt4、β-catenin、p-GSK-3β、p-LEF/TCF、Fn和c-myc蛋白的表达水平下调,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01),且2个治疗组组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。【结论】加味六味地黄汤具有抗肾间质纤维化作用,其机制可能与阻断Wnt4/β-catenin信号通路的活化,下调Fn和c-myc蛋白的表达有关。

加味六味地黄汤对CKD-MBD模型大鼠肾/骨组织损伤的影响

目的:研究加味六味地黄汤对慢性肾脏病矿物质和骨异常(CKD-MBD)模型大鼠肾/骨组织损伤的影响。方法:将雄性SD大鼠随机分为正常组(n=10)、单纯高磷组(n=30)、模型组(n=30)、骨化三醇组(阳性对照,0.09μg/kg,n=30)和加味六味地黄汤组(以生药总量计10 g/kg,n=30)。采用高磷联合腺嘌呤饲料饲养6周的方法建立CKD-MBD模型。造模后,正常组和模型组大鼠继续以普通饲料/高磷饲料饲养并灌胃蒸馏水;各药物组大鼠改为普通饲料饲养并灌胃相应药液(溶剂均为水);按0.1 mL/kg每天按时灌胃1次,连续6周。正常组大鼠末次给药后取血、处死,其余各组大鼠分别于给药2、4、6周时随机取10只取血、处死。检测各组大鼠血清中尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、钙、磷、全段甲状旁腺激素(iPTH)、成纤维细胞生长因子23(FGF-23)、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)和骨钙素含量,测定股骨头的骨密度,观察肾组织和骨组织的形态学变化并计算肾小管损伤百分比和肾间质纤维化分值。结果:与正常组比较,单纯高磷组大鼠各时间点上述指标均无明显变化(P>0.05),肾/骨组织亦无异常改变。与单纯高磷组相同时间点比较,模型组大鼠各时间点血清中BUN、Scr、磷、iPTH、FGF-23、RANKL、骨钙素含量和肾小管损伤百分比、肾间质纤维化分值均显著升高,血清中钙含量和股骨头的骨密度均显著降低(P<0.05或P<0.01),肾组织呈弥散性纤维化,骨小梁宽度增加、成骨细胞减少。与模型组相同时间点比较,加味六味地黄汤组和骨化三醇组大鼠各时间点血清中BUN(加味六味地黄汤组给药2周除外)、Scr、血磷、iPTH、FGF-23、RANKL、骨钙素含量和肾小管损伤百分比、肾间质纤维化分值均显著降低,血清中钙含量和骨密度(给药2周除外)均显著升高(P<0.05或P<0.01),肾/骨组织病理变化明显改善;而加味六味地黄汤组和骨化三醇组上述各指标差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:加味六味地黄汤可改善CKD-MBD模型大鼠肾/骨组织损伤,提高其骨密度并调节钙磷代谢紊乱。

中西医结合分阶段治疗肾病综合征的现状与思考

肾病综合征(nephrotie syndrome,NS)是临床的常见疾病,具有难治、容易复发等特点。目前中医和西医治疗分别存在各自的优势与不足,而中西医结合治疗此病则有独特的优势和确切的疗效。文章对近十余年肾病综合征在足量激素治疗阶段、减量治疗阶段以及小剂量维持治疗阶段中药辨证论治现状进行归纳与思考。

冬虫夏草对肾缺血-再灌注损伤大鼠血清和肺泡TNF-α、IL-1β以及肾和肺组织水通道蛋白1表达的影响

目的观察冬虫夏草对肾缺血再灌注损伤(I/R)大鼠血清和肺泡TNF-α和IL-1β、肾和肺组织水通道蛋白1(AQP-1)表达的影响。方法 SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、缺血-再灌注组(I/R组)和低剂量冬虫夏草(CS1)组和高剂量冬虫夏草(CS2)组4组,每组15只。采用摘除右肾夹闭左肾蒂60 min的方法建立I/R大鼠模型,Sham组和I/R组大鼠再灌注后灌服生理盐水(2 m L/d);CS1和CS2组再灌注后分别灌服冬虫夏草提取液(5 g/kg·d)和(10 g/kg·d),HE染色观察各组大鼠肾脏和肺脏病理,酶联免疫吸附法检测血清血清和肺泡TNF-α和IL-1β水平,免疫组织化学法和免疫印迹法检测肾和肺组织AQP-1表达。结果 Sham组肾小球、肾小管以及肺组织结构基本正常,而I/R组大鼠可见肾小管坏死、肺间质炎症和肺水肿等改变。与Sham组再灌注后24、48、72 h各相同时间点相比较,I/R组肾和肺组织半定量评分、血清TNF-α和IL-1β水平增高,肾和肺组织AQP-1表达均下调(P<0.01);与I/R组再灌注后24、48、72 h各相同时间点比较,CS1和CS2组大鼠肾小管和肺组织病理改善,肾和肺组织半定量评分、血清TNF-α和IL-1β水平降低,肾和肺组织AQP-1蛋白的表达均上调(P<0.05,P<0.01)。结论肾I/R可诱发急性肺损伤,其机制可能与炎症及肾和肺组织AQP-1蛋白下调有关;冬虫夏草对肾I/R导致的肾和肺发挥保护作用,其机制可能与抗炎及上调肾和肺组织AQP-1蛋白有关。

一种医用多功能服药手表的设计

慢性病患者往往需要长期甚至终身服药,然而,患者的服药依从性普遍较差。因此,如何提高慢性病患者的服药依从性是值得关注的问题。目前市场上的提醒药盒多为非穿戴式设备,不方便随身携带,且外观设计缺乏美感。本文介绍一种医用多功能服药手表,通过将电子手表和腕式电子药盒相结合,使手表兼具定时提醒和携带药品功能,既方便患者按时服药,也能满足患者对产品外观及造型的追求。