男性医学生的艾滋病预防知识知晓情况和生殖健康现状调查

目的了解男性医学生对艾滋病预防知识的知晓情况和生殖健康现状及其影响因素,为开发出针对艾滋病宣传重点人群的健康教育材料提供依据。方法采用整群随机抽样法抽取581名1~4年级的男性医学生,采用统一的调查问卷进行横断面调查。结果艾滋病的三大传播途径及非传播途径中吃饭、握手、拥抱不会感染艾滋病的知晓率较高（90%以上）;蚊虫叮咬、礼节性接吻不会感染艾滋病的知晓率较低（70%左右）。多元Logistic回归分析结果表明,性病患病的影响因素为是否有包茎或包皮过长、最近一次性行为是否使用安全套,OR值分别为3.830（1.049,13.981）、0.244（0.064,0.932）;安全套使用频率的影响因素为是否有包茎或包皮过长,OR值为0.263（0.082,0.837）。结论我国应该加大相关知识的宣教力度、大力推广包皮环切手术,以降低性传播疾病特别是艾滋病的感染率,提高全民生殖健康水平。

贵港市2007—2021年男男同性性行为人群艾滋病流行的时空聚集性分析

目的:分析2007—2021年贵港市男男同性性行为人群(MSM)艾滋病病毒/艾滋病(HIV/AIDS)人口学及时空分布特征,为贵港市艾滋病防控提供依据。方法:收集中国疾病预防控制信息系统中2007—2021年贵港市MSM HIV/AIDS数据,以乡镇为单位,采用描述性流行病学分析人口学特征和发病情况,采用ArcGIS10.7软件进行空间自相关分析。结果:2007—2021年贵港市累计报告MSM艾滋病病例338例,新报告MSM病例数从1例增至43例,其构成比从0.16%增至5.26%,15年增长32.90倍,整体呈上升趋势(χ^(2)_(趋势)=102.874,P<0.001)。全局自相关分析显示,贵港市MSM艾滋病病例存在空间聚集性(Moran’s I=0.116,Z=2.096,P=0.036),并存在高值聚集(G=0.000 008,Z=4.196,P<0.01)。热点分析发现,热点区域主要集中在中西部,其次在东北部乡镇或街道。结论:贵港市MSM AIDS流行呈上升趋势,并存在空间聚集性和热点区域,应对热点区域进行重点防控,加强MSM的干预工作。

坏死性凋亡与HIV-1感染的研究进展

由于人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)在细胞中形成潜伏感染,且HIV-1潜伏感染机制尚不明确,导致当前抗逆转录病毒治疗无法根除感染者体内的HIV-1。坏死性凋亡作为一种受调控的细胞死亡形式,可在HIV-1感染的多种免疫细胞中发生,同时HIV-1可通过抑制细胞内坏死相关信号通路逃避细胞死亡的宿命,有利于为病毒潜伏库的形成。此外,坏死性凋亡主要发生在HIV-1感染的细胞中,不会造成近旁未感染细胞的损伤,可能成为靶向清除HIV潜伏库的潜在靶点。本文围绕坏死性凋亡在HIV-1感染细胞中的发生情况和相关机制进行综述,以期为后续开展HIV-1潜伏感染相关机制研究提供参考。

广西HIV-1毒株膜蛋白V3环氨基酸变异分析

目的了解广西HIV-1亚型膜蛋白V3环的氨基酸序列特征及变异特点。方法应用nest-PCR对46份来自广西主要流行区的HIV-1重组毒株env基因区进行扩增后,使用ABI310型测序仪测序,然后应用CLUSTAL、MEGA和dnatools等生物学软件对env基因区V3环及其临近区域的氨基酸序列进行分析。结果46份基因序列,43份为CRF01-AE(93.48%),3份为CRF08-BC(6.52%);V3环氨基酸序列分析显示,CRF01-AE毒株存在7种类型:GPGQ(74.4%)、GPGR(9.3%)、GPGK(4.7%)、GPGH(4.7%)、GPGA(2.3%)、GRGE(2.3%)和RPGE(2.3%),而CRF08-BC毒株V3顶端四肽为GPGQ;根据V3环关键氨基酸推测辅助受体使用情况,结果显示:60.47%的CRF01-AE重组毒株可能使用CCR5为辅助受体,39.53%不能对辅助受体的使用做出预测,CRF08-BC重组毒株100%可能使用CCR5。结论目前广西HIV-1的主要流行株是CRF01-AE;V3环序列高度变异,顶端四肽主要是GPGQ,可能为NSI型毒株。

广西HIV-1重组流行株env基因V3-V4区序列变异分析

[目的]分析广西HIV-1重组流行株env基因V3-V4区及其临近区域的基因变异。[方法]应用nest-PCR对24份来自广西主要流行区的HIV-1重组毒株env基因区进行扩增后,使用ABI310型测序仪测序,然后应用CLUSTAL、MEGA和dnatools等生物学软件对env基因区V3-V4区及其临近区域进行序列分析。[结果]24份毒株中21份为CRF01-AE(93.48%),3份为CRF08-BC(6.52%);系统树分析显示,21份与分离于广西地区的CRF01-AE.97CNGX2f和泰国代表毒株THCM240接近,3份CRF08-BC重组毒株中有2份与CRF08-BC.98CN006和CRF08-BC.97CNGX6f靠近,还有1份样本则接近C.95IN21068;env基因V3-V4区核苷酸序列分析显示,广西的样本与分离于该地区的代表毒株基因距离较小,CRF01-AE和CRF08-BC重组毒株的氨基酸替换主要发生在C3和V4区,而V3区氨基酸序列相对保守。[结论]CRF01-AE重组毒株env基因V3-V4区的变异主要发生在C3和V4区,而不是V3区。

Photofrin联合碘化钾抗革兰阴性细菌光动力效果的研究

目的:探索碘化钾(KI)对Photofrin(PF)介导的抗菌光动力疗法(aPDT)抗革兰阴性细菌效果的影响。方法:以铜绿假单胞菌(P.a)、肺炎克雷伯菌(K.p)、奇异变形杆菌(P.m)和鲍曼不动杆菌(A.b)为实验对象,用不同浓度PF及KI进行光动力处理,观察并计算CFU及各组细菌存活率。用Amplex Red检测H2O2以探索KI提高PF介导的aPDT效果的机制。结果:当光能量密度为10 J/cm^(2)时,不同浓度的PF对这4种革兰阴性细菌均无杀伤效果。当光能量密度为10 J/cm^(2)时,50 mmol/L KI联合10μmol/L PF可对A.b实现高效杀菌(P<0.001);100 mmol/L KI联合10μmol/L PF可对P.a、K.p和P.m实现高效杀菌(P<0.001)。当光能量密度相同时,10μmol/L PF联合100 mmol/L KI组的荧光量明显高于对照组(P<0.05)。结论:PF联合KI对革兰阴性细菌的抗菌作用显著增强,其增强作用可能是由于^(1)O_(2)与KI反应生成H_(2)O_(2)。

HIV-1重组毒株gag区快速基因分型方法

目的建立一种简便、快速基因分型方法,对广西人类免疫缺陷病毒(HIV-1)重组毒株gag基因区进行亚型鉴定。方法从HIV阳性样本中提取核酸,使用HIV-1 M组通用引物对gag区进行第1轮扩增,第2轮使用分别检测C亚型和CRF01-AE重组型的二套特异性引物放入同一反应管中进行扩增,根据不同亚型扩增的目的带位置不同判断亚型。另外设计了一套引物,专门用于检测B’/C重组毒株。扩增出的所有样本均进行基因测序和系统树分析以验证结果。结果54份样本中,经基因测序和系统树分析证实CRF08-BC样本4份(7.41%),CRF01-AE样本46份(85.18%),4份(7.41)无法确定亚型。经亚型特异性引物PCR法检测出4份(100%)B’/C重组毒株,45份(97.83%)CRF01-AE重组毒株,灵敏度为98%,特异性为100%。2种方法检测结果经差异性检验显示,P>0.05,差异无统计学意义,结果一致性高达98.15%。与基因分析结果吻合。重复实验显示,B’/C的平均重复性为100%(20/20),CRF01-AE为98.3%(59/60)。结论该方法具有简便、快速,高度灵敏度和特异性的特点,可直接对广西HIV-1重组毒株CRFO 1-AE gag基因区进行分型。

医学生包皮环切术接受意愿影响因素的多元Logistic回归分析

目的:了解重庆市某高校医学生包皮环切术接受意愿及其影响因素,为针对性的开发出提高艾滋病重点人群包皮环切接受意愿的宣传材料提供依据。方法:采用整群随机抽样法抽取580名1～4年级大学生,用统一的调查问卷进行横断面调查。结果:不愿手术的原因:不影响健康、没必要(76.31%),担心手术风险(38.96%),不知道手术的医学益处(26.51%),担心影响性功能(22.89%),担心费用过高(15.66%)。明确了手术并发症发生率很低,而且可预防艾滋病等性传播疾病、保护生殖健康,接受率增加33.06%,可能增加40.82%(P<.0001)。多元Logistic回归分析结果显示,手术接受意愿分别受自身有无包茎或包皮过长,是否认为手术可以增加未来性生活满意度以及身边有无亲朋好友做过手术等因素影响。结论:推广手术需要加大相关知识的宣传力度,可以培训自身做过手术的医学生给其他人群做健康教育;同时,希望相关部门不断改进技术,使手术更加安全、简便、便宜。

两种HIV抗体初筛诊断试剂的质量比较

目的 :了解两种 HIV抗体初筛诊断试剂的质量。方法 :使用酶联免疫吸附试验 (EL ISA)试剂和快速诊断试剂 (EY)分别对 30份已知 HIV抗体为阳性的标本和 2 0份随机抽样的标本进行同步测试。结果 :EL ISA试剂敏感性、特异性、假阴性率分别为 90 %、10 0 %、10 %。 EY试剂则分别为 6 0 %、10 0 %、4 0 %。两种试剂的敏感性和假阴性率比较差异有统计学意义 (χ2 均为7.2 ,P均 <0 .0 1) ;两种试剂检测结果的一致性检验有统计学意义 (χ2 =5 ,P <0 .0 5 ) ,结果一致者占 70 % ,差异性检验亦有统计学意义 (χ2 =7.1,P<0 .0 5 )。结论 :EL ISA试剂优于 EY试剂 ,在实际工作中 ,选用 EL ISA诊断试剂还是

广西HIV-1 CRF01-AE重组毒株env基因V3环序列变异及其与生物表型的关系

目的研究广西HIV-1 CRF01-AE重组毒株env基因V3环序列变异及其与生物表型间的关系。方法从广西主要流行区收集来的50份HIV-1感染者血液样本中提取前病毒DNA,使用巢式聚合酶链反应(nested-PCR)扩增HIV-1 env基因片段并进行亚型鉴定,选择38份CRF01-AE重组型HIV-1毒株env基因V3环及邻近区域的序列进行系统树和氨基酸变异分析。结果38份CRF01- AE重组毒株中36份与分离于广西地区的CRF01-AE．97CNGX2f和泰国代表毒株THCM240接近,另外2份与中非共和国代表株90CF402聚成一簇;CRF01-AE重组毒株V3环顶端四肽存在着4种类型: GPGQ、GPGR、GPGH和GPGA;根据V3环关键氨基酸推测辅助受体使用情况,结果显示:71．05％的CRF01-AE重组毒株可能使用CCR5作为辅助受体,28．95％不能对其辅助受体的使用情况做出预测。结论广西HIV-1 CRF01-AE重组毒株V3顶端四肽变异较大,而且大部分毒株可能为NSI型,这可为广西该毒株的防治和诊断试剂的更新提供参考。

HIV-1耐药性发生及其传播的研究

HIV耐药株的出现导致了HIV治疗的失败，其传播流行使艾滋病进一步蔓延。本文对HIV耐药株的发生机制以及其传播流行方式综述如下。

应用多重巢式PCR法快速鉴定广西HIV-1主要亚型

目的建立快速鉴定广西HIV-1主要流行亚型CRF01_AE、CRF07_BC、CRF08_BC、B和C的多重巢式PCR方法。方法针对HIV-1gag基因设计CRF01_AE、CRF07_BC、CRF08_BC、B和c亚型特异性引物，建立多重巢式PCR法，用该法鉴定来自广西的HIV-1毒株的亚型，并与基因测序法的鉴定结果比较。结果多重巢式PCR法能正确鉴别5种已知亚型的样本，10份HIV阴性样本均无扩增，在72份未知亚型样本中，正确鉴定出66份，分别属于CRF01_AE、CRF07BC、CRF08_BC、B亚型，多重巢式PCR法的灵敏度为91.7％，特异度达100％。结论多重巢式PCR法能准确鉴定广西CRF01_AE、CRF07_BC、CRF08_BC和B亚型毒株，是_种简便、快速、低成本的亚型鉴定方法。

Photofrin联合碘化钾抗白色念珠菌光动力效果的研究

目的探讨光敏剂(photosensitizer,PS)Photofrin(PF)联合不同浓度碘化钾(potassium iodide,KI)介导的抗菌光动力疗法(antimicrobial photodynamic therapy,aPDT)抗白色念珠菌(Candida albicans,C.albicans)的效果。方法实验对象C.albicans(DAY286),进行三部分实验分别为:(1)PF及PF联合KI介导的aPDT对C.albicans的杀伤作用。实验分为PDT组(A组)和对照组(B组),A组处理分别为:(1)PF-PDT,取10^(7)CFU/ml的C.albicans菌悬液1 ml与PF(终浓度分别为0.1、0.2、1、2和4μM)1 ml混匀,室温避光孵育30 min,行能量密度10 J/cm^(2)的蓝光光照;(2)PF+KI-PDT,取菌悬液1 ml与PF(终浓度分别为5、10μM)1 ml混匀,室温避光孵育30 min,再添加KI(终浓度分别为0、1、10、25、50和100 mM)1 ml后,行能量密度10 J/cm^(2)的蓝光光照。B组处理分别为:(1)仅加入PF或仅加入PF+KI,光照或不光照;(2)仅加入菌悬液,不加入PF、KI也不光照。(2)单线态氧猝灭剂叠氮化钠(sodium azide,NaN_(3))对PF+KI-aPDT抗菌作用的影响。实验分为aPDT组(A组)和空白对照组(B组)。A组首先将107CFU/ml的C.albicans菌悬液1 ml与PF(终浓度为10μM)1 ml混匀后避光孵育30 min,然后分为4个小组:(1)不加入KI、NaN_(3),仅光照;(2)加入KI(终浓度为100 mM)后光照;(3)加入NaN_(3)(终浓度为50 mM)后光照;(4)加入KI、NaN_(3)后光照,4小组均采用能量密度10 J/cm^(2)光照。B组:空白对照组,仅接种菌悬液,不加入PF、KI、NaN_(3),也不光照。(3)两种荧光探针检测PF光化学特性。实验分为单线态氧荧光探针(singlet oxygen sensor green reagent,SOSG)组(A组)、羟基自由基荧光探针[3’-(p-hydroxyphenyl)-fluorescein,HPF]组(A0组)和对照组(B组)。A组先将SOSG(终浓度为10μM)与PF(终浓度为10μM)混匀,加或不加入KI(终浓度为100 mM),构成总体积200μl,光照;A0组将HPF(终浓度为10μM)与PF混匀,加入或不加入KI,光照;B1、B2组:不加PF及KI,分别加入SOSG和HPF,光照;B3、B4组:分别加入SOSG和HPF,两组均加入KI,不加PF,光照。此部分各组均予以能量密度为0、1、2、5、10、20、30、40、50、60、70、80 J/cm^(2)的蓝光照射,每次照射后利用分光光度计测量各组的荧光量。第(1)、(2)部分处理后的菌悬液经连续梯度稀释后接种于培养基,30℃恒温培养24~36 h后计数菌落数并计算存活率。结果(1)PF浓度为0.1~2μM时,比较PDT组与空白对照组的存活率,差异无统计学意义(P>0.05);当PF浓度为4μM时,PDT组存活率下降88.6111%,与空白对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05),但未能有效杀菌。(2)当PF浓度为5、10μM时,PF-aPDT组存活率分别下降60.7365%、99.6030%,添加100 mM KI后,PF+KI-aPDT组存活率分别下降99.9853%、99.9996%,与PF-aPDT组相比差异均有统计学意义(P<0.001)。(3)单线态氧猝灭剂NaN_(3)显著降低了PF-aPDT组及PF+KIaPDT组的抗菌效果(P<0.01)。(4)在各个光能量密度下,SOSG组荧光量均大于HPF组,差异具有统计学意义(P<0.05)。加入KI后SOSG组及HPF组的荧光量均下降,与未加入前相比差异具有统计学意义(P<0.05)。结论KI可增强PF介导的光动力抗C.albicans效果,PF产生光动力抗菌效应主要经历Ⅱ型光化学反应。

四种光敏剂介导的体外光动力抗白色念珠菌效果的研究

目的探讨4种不同类型光敏剂:亚甲基二甲基蓝(9-dimethylmethylene blue,DMMB)、菌绿素38(Bacteriochlorins 38,BC38)、玫瑰红(Rose Bengal,RB)和尼罗蓝衍生物(5-Ethylamino-9-diethylminobenzo[a]phenothiazinium chlorin,EtNBS),分别介导的光动力抗菌疗法(antimicrobial photodynamic therapy,APDT)对白色念珠菌的体外杀菌效果。方法以白色念珠菌标准株DAY 286为实验对象,将实验分为4大组:光动力治疗组(APDT组)、单纯光敏剂对照组、单纯光照组及空白对照组。(1)APDT组:根据光敏剂种类不同分为4小组,DMMB组、BC38组、RB组和EtNBS组。不同浓度的各组光敏剂1ml分别与10~7菌落数/ml白色念珠菌1 ml混合,避光孵育30 min后,DMMB组和EtNBS组选取波长660 nm光源照射;BC38组选取波长730 nm光源照射;RB组选择波长540 nm光源照射,每组照射光剂量能量密度均为10 J/cm^2。(2)单纯光敏剂对照组:分组方式与APDT组相同,各种不同类型光敏剂与菌悬液混合,避光孵育30 min后,不予任何光照。(3)单纯光照组:无光敏剂,菌液避光孵育30 min后,予APDT组相同条件光源照射。(4)空白对照组:无光敏剂,不予任何光照。实验后的菌悬液经连续梯度稀释接种于培养基,孵育24~36 h,进行菌落计数。结果在能量密度10 J/cm^2条件下,各光敏药物的浓度分别为DMMB为10μM;BC38为5μM;RB为50μM;EtNBS为10μM,均清除了99.99%白色念珠菌。当光敏剂浓度为5μM,光能量密度为10 J/cm^2时,DMMB、BC38、RB、EtNBS介导的APDT使真菌存活率分别下降99.992%、99.999%、3.5%和99.980%。除APDT组外,其余两组白色念珠菌存活率无明显下降,与空白对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论光能量密度一定时,APDT效果随光敏剂浓度增加而增强。相同光敏剂浓度及光能量密度条件下,DMMB、EtNBS及BC38对白色念珠菌的APDT效果优于RB。

不同光源对Photofrin联合碘化钾抗大肠杆菌光动力效果的研究

目的比较两种波长光源对光敏剂(Photofrin,PF)联合碘化钾(Potassium Iodide,KI)介导下的光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)抗大肠杆菌(Eschenrichia coli,E.coli)效果。方法检测PF吸收光谱后,以大肠杆菌标准株K-12(ATCC 33780)为实验对象,进行PDT处理。将实验分为PDT组(A组)和对照组(B组)后分别处理,A组处理分别为:(1)相同光剂量下两种波长对PF介导的a PDT抗菌能力;(2)相同光剂量下两种波长对PF联合KI介导的a PDT抗菌能力;(3)不同光剂量下,两种波长对相同浓度PF联合KI介导下的a PDT抗菌能力。其中PDT组分别将1μM、10μM与108菌落数(Colony forming units,CFU)/ml大肠杆菌各1 ml混匀,避光孵育30 min后,在光剂量10 J/cm^(2)的蓝光或红光下进行光照;PF联合KI组,将终浓度为10μM PF与108CFU/ml大肠杆菌各1 ml混合,避光孵育30 min后添加1ml KI(终浓度为100 m M),在蓝光或红光的不同光能量密度下进行光照。对照组分为3个小组,B1组:仅加入PF或仅加入PF+KI,不进行光照;B2组:不加入PF、KI,仅进行光照;B3组:空白对照组,仅加入菌悬液,不加入PF、KI也不进行光照。实验后的菌悬液经连续梯度稀释接种于培养基,孵育24 h后进行菌落计数。结果PF在(366±15)nm波长范围内有高吸收峰,在415 nm蓝光处吸光度值较635 nm红光处高。不同浓度的PF在10 J/cm^(2)的蓝光或红光作用下均无抗大肠杆菌作用(P>0.05)。PF联合100 m M KI后,PF在10μM时具有抗菌作用,在能量密度10 J/cm^(2)的蓝光或红光作用下大肠杆菌存活率分别为0.00003865%、28.7%,在该条件下蓝光抗大肠杆菌作用强于红光(P<0.001)。在10μM PF联合100 m M KI条件下,0 J/cm^(2)的蓝光或红光与空白对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05);在0.5 J/cm^(2)的蓝光作用下大肠杆菌存活率为0.0001209%,在20 J/cm^(2)的红光作用下其存活率为0.00002783%。结论PF联合KI,调节照射光的能量密度,可增强蓝光或红光对光敏剂PF介导下光动力抗大肠杆菌效果。

光动力疗法对耐药鲍曼不动杆菌生物膜形成的影响

目的:探索碘化钾(KI)联合亚甲基蓝(MB)介导的抗菌光动力疗法(aPDT)对多重耐药鲍曼不动杆菌(MDRAb)及广泛耐药鲍曼不动杆菌(XDRAb)生物膜形成的影响。方法:以MDRAb、XDRAb菌株为实验对象,在10 J/cm^(2)光能量密度照射下,亚致死量的aPDT对MDRAb、XDRAb进行不同次数的光动力干预。通过结晶紫半定量法测定aPDT干预不同次数耐药菌生物膜形成。比较aPDT对MDRAb、XDRAb不同干预次数之间生物膜的表达量,探索KI联合MB介导的aPDT对耐药鲍曼不动杆菌生物膜形成的影响。结果:在10 J/cm^(2)光能量密度照射下,亚致死量的aPDT对MDRAb、XDRAb进行多次干预后,生物膜表达量较干预前显著下降(P<0.05),干预7次比干预1次生物膜表达量显著下降(P<0.001),干预1次与干预4次、干预4次与干预7次相比生物膜表达量无明显下降(P>0.05)。结论:KI联合MB介导的aPDT使耐药鲍曼不动杆菌的生物膜的形成能力下降,aPDT连续干预7次可显著抑制耐药菌的生物膜形成能力,可减少耐药菌的体外生物膜形成量。

医学生包皮环切术接受意愿影响因素分析

目的了解重庆医科大学男性医学生对包皮环切术的认知状况及影响因素,为进一步提高艾滋病重点人群包皮环切术接受意愿宣传提供科学依据。方法采用自制问卷对整群随机抽样法抽取的580名1～4年级大学生进行横断面调查。结果男生对包皮过长或包茎的危害、手术常见原因有一定了解,但完全知晓率分别为39.65%(224/565)、7.69%(35/455);认为手术可以预防艾滋病及其他性传播疾病的占38.9%(177/455);不选择手术的原因:76.31%(190/249)觉得不影响健康、没必要,38.96%(97/249)担心手术风险,26.51%(66/249)不知道手术的医学益处,22.89%(57/249)担心影响性功能,15.66%(39/249)担心费用过高;当男生了解手术并发症发生率很低,而且可预防艾滋病及其他性传播疾病,保护生殖健康后,33.06%(81/245)愿意手术,40.82%(100/245)不确定。结论相关知识的掌握情况、手术的安全性和费用影响医学生对包皮环切术的接受意愿。