应用PCR/RFLP技术对广西禽白血病病毒的检测与分型研究

对2000～2003年间从广西的南宁、玉林、桂林、钦州、柳州、梧州等地采集的有肿瘤/可疑肿瘤的250份鸡病例进行肿瘤病的检测。结果发现,外源性禽白血病阳性的有32份,阳性率为12.8%。其中,同时为马立克氏病阳性的有30份,两者共感染率高达93.75%(30/32);根据禽白血病病毒囊膜糖蛋白gp85基因的限制性片段长度多态性分析,对其中20份外源性禽白血病病毒进行分型鉴定,结果证实全部属于A亚群。

广西黑土鸡种群禽白血病净化防控效果研究

研究分别对广西两家育种公司DGGX4和DGGX11的黑土鸡育种群开展了禽白血病的净化,应用商品化的禽白血病病毒p27抗原、亚型A/B和J的抗体共3种ELISA检测试剂盒,分别对公鸡的肛拭或病毒细胞培养物、母鸡种蛋的蛋清以及血清样品进行检测。然后根据肛拭、病毒细胞培养物或者蛋清p27抗原检测的结果淘汰阳性鸡,阴性的留种,抽检血清样品抗体阳性的鸡也淘汰,同时对种蛋、鸡雏、后备鸡、繁殖群实施严格的生物安全措施。结果显示,DGGX4公司经过4个世代的净化,种群p27抗原的阳性率由零世代的12.4%下降到三世代的3.30%;DGGX11公司经过5个世代的净化,种群p27抗原的阳性率由零世代的7.71%下降到四世代的1.46%。结果提示禽白血病净化效果显著,证明所采取的净化方案可行。

广西麻(花)鸡禽白血病净化研究初报

鉴于禽白血病(Avian leukosis,AL)流行病学调查发现广西麻(花)鸡禽白血病病毒(Avian leukosis virus,ALV)感染率较高,我们对DGGX5公司的麻鸡一个三系配套的品系开展了ALV净化的研究。初步结果显示,母系一世代公鸡和母鸡J-ALV的阳性率比零世代的下降了33.33个百分点和21.48个百分点;第一父系公鸡和母鸡p27抗原检测阳性率比零世代的下降了25.34个百分点和18.22个百分点;第二父系公鸡和母鸡ALV-J血清抗体检测阳性率比零世代的下降了21.5个百分点和23.6个百分点。以上结果说明采用在p27抗原检测敏感期开展ALV净化的方法净化效果较好,可以加以推广应用。

广西地方优质鸡禽白血病净化中检测蛋的个数之结果的差异性分析

禽白血病(avian leukosis,AL)是由禽白血病病毒(avian leukosis virus,ALV)引起的禽类多种肿瘤性疾病的统称[1-3],主要造成鸡群生长迟缓、产蛋率和受精率等生产性能降低和导致感染鸡只的免疫抑制,同时可诱发各种肿瘤从而引起成活率的降低,对养禽业危害巨大[4]。21世纪初,南方的一些地方优质鸡群中仍有AL发生,对养禽业生产带来了巨大的危害,其发病死亡率有些高达40%,疫情严重[5-6]。

禽Ⅰ型副粘病毒各种禽源分离株毒力及其相关基因的研究

用测定新城疫病毒(NDV)毒力的经典方法,即鸡胚平均死亡时间(MDT)和脑内接种致病指数(ICPI),对源于鸡、鸽、鹅、珍珠鸡、孔雀、鹌鹑和画眉鸟等7种禽(鸟)源的共14个禽Ⅰ型副粘病毒(APMV 1)广西分离株,分别测定了毒力。同时对分离株F基因的N 端前段和HN基因的C 末端片段进行扩增、测序和分析,并绘制系谱树。结果发现,分离株的MDT在36h～75h之间,除1株鸽源毒株gxp22的ICPI值为0外,其余分离株在1 09～1 95之间;除孔雀源的分离株gxpc52在F基因裂解位点附近的氨基酸序列为112R R Q R R F117之外,其它13株均为112R R Q K R F117,都符合强毒株的特征。所有分离株与国内参考强毒株F48E8和国外参考强毒株HER/33在HN基因C 末端终止密码子的位置相同,也符合强毒株的特征。根据F基因核苷酸序列绘制的系谱树发现,近几年来在广西流行的APMV 1毒株的基因型为Ⅶd亚型;根据HN基因核苷酸序列绘制的系谱树表明,广西各种禽源AP MV 1分离株可分为2个群。研究的结果表明,根据F基因裂解位点附近的氨基酸序列和HN蛋白翻译的终止密码子的位置判定APMV 1毒力的结果,都与毒株在临床上的致病情况相符。因此,根据F基因和HN基因序列和结构的特征,均可以判定APMV 1临床分离株的体内致病性。

2009-2010年广西南宁畜禽食品及病禽中沙门氏菌的血清型调查

目的:对2009—2010年广西南宁市送检的患病家禽及市售新鲜畜禽食品检出的沙门氏菌进行血清型鉴定,以了解各种畜禽食品污染的沙门氏菌血清型的分布情况,为畜禽食品源性疾病的监控提供科学依据。方法:参照GB/T 4789.4—2008《食品卫生微生物学检验沙门氏菌检验》分离沙门氏菌并做血清型分型。结果:从病禽中检出鸡(S.gallinarum)、鼠伤寒(S.typhimurium)、爪哇那(S.javiana)等血清型的沙门氏菌,从畜禽食品中检出德比(S.derby)、鸡(S.gallinarum)、伤寒(S.typhi)等血清型的沙门氏菌。结论:畜禽食品检出血清型较从畜禽种类更多、分布更广泛,表明污染来源途径的多样化。因此,加强食品从生产到销售的整个食品产业链的卫生监督才能有效地减少沙门氏菌污染造成的危害。

广西三黄鸡配套系核心种群禽白血病的净化

针对广西育种公司DGGX4的三黄鸡育种三系配套的A系、B系、C系群体开展的禽白血病净化,应用商品化的禽白血病病毒（ALV）p27抗原、ALV-A/B抗体和ALV-J抗体3种ELISA商品检测试剂盒,分别对22~33周龄母鸡种蛋的蛋清、公鸡的肛拭子或血浆样品的病毒细胞培养物进行p27抗原检测并对血清样品进行抗体检测,淘汰阳性鸡,阴性鸡留种;对留种群及其种蛋、雏鸡、后备鸡、繁殖群实施针对性的生物安全措施及检测净化;对使用的活疫苗预先进行外源病毒的检测。经过连续6个世代的净化,结果显示A系、B系和C系种群ALV-p27抗原的阳性率分别由零世代的44.66%、8.14%和7.90%下降至五世代的1.93%、1.04%和1.02%。净化效果显著,证明所采取的净化方案可行。

广西地方品种鸡临床血管瘤型禽白血病的诊断

对2013年间广西3个地方品种鸡养殖公司发生的临床血管瘤型疑似禽白血病进行实验室诊断,本研究开展了临床病理观察、剖检变化和病毒的分离与鉴定3方面的工作。结果表明:1临床上,鸡表现出典型的血管瘤病症一般都发生在产蛋高峰期左右,血管瘤主要在胸腹部皮肤和脚趾处以血疱的形式出现;剖检病变主要见于肝脏,表现为肿大、坏死,有的表面出现大小不一的血疱;其次见于脾脏和腺胃,表现为肿大;也见于心、肺、胰、卵巢、胸腺和肠系膜等组织器官,多表现为肿大和坏死。2临床上表现出明显血管瘤病症的病鸡中,93.75%(15/16)能分离到ALV-J,6.25%(1/16)同时分离到ALV-A和ALV-J两个亚群。证实广西临床上表现出血管瘤的病鸡以ALV-J感染为主,且首次发现个别病鸡存在ALV-A和ALV-J的混合感染。

广西地方土鸡马立克氏病病毒和J亚群禽白血病病毒混合感染的报告

广西南宁某养殖场的广西土鸡群在60日龄开始陆续出现发病、死亡,105日龄送检时累计发病率20%,死亡200多只。通过病理组织学观察、PCR鉴定及病毒基因序列测定,证明土鸡群中存在马立克氏病病毒和J亚群禽白血病病毒的混合感染。

禽流感病毒三种检测方法的比较研究

对分别应用病毒分离鉴定、反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)、间接免疫荧光(IFA)3种方法对病料组织中的禽流感病毒(AIV) 进行检测与比较研究。结果显示:经鸡胚尿囊腔接种分离到的病毒,通过用禽流感病毒H5、H9亚型单克隆抗体所进行的血凝(HA)和血凝抑制试验(HI),鉴定为AIV H5亚型毒株;应用RT-PCR技术直接对病料组织抽提的RNA样品进行检测,从病料组织能扩增出大小为229bp的AIV通用目的片段和大小为380bp的H5亚型特异性片段;取病料组织的过滤液接种狗肾上皮细胞(MDCK)单层,24h后用H5亚型AIV特异性的单克隆抗体进行间接免疫荧光试验,结果在细胞核、细胞质内观察到特异性的荧光。研究的结果表明,3种技术都可对病料样品中的AIV进行检测,而RT-PCR和IFA两种方法还可直接对病料样品中的病毒进行亚型的鉴定。相对而言,后两者具有更快速、更敏感、操作更简便的特点。

广西凭祥斗鸡禽白血病病毒检测及分离株env基因分析

为了解广西凭祥市特有家禽品种斗鸡禽白血病病毒（ALV）的感染情况,采集了该市3个鸡场斗鸡的肛拭子、血清、血浆样品共344份,用禽白血病ELISA检测试剂盒进行检测。结果显示,斗鸡ALV感染情况严重,其中肛拭样品ALV-p27抗原阳性率高达39.13%,血清样品病毒分离阳性率为12.97%,ALV-J和ALV-A/B抗体阳性率分别为22.39%和7.46%;对从2只斗鸡获得的病毒分离株DJ-3-18和DJ-45进行病毒囊膜蛋白基因env的扩增、序列测定及比较分析,结果显示2株病毒的gp85基因与ALV-A亚群参考株之间氨基酸的同源性为88.2%～96.5%,gp37基因与ALV-A亚群参考株之间氨基酸的同源性为91.4%～98.0%,其中与台湾A亚群蛋鸡源分离株TW-3577的亲缘关系最近,而与ALV其他亚群毒株的同源性则较低。结果表明,首次获得的2株斗鸡源ALV分离株属A亚群。

传染性腔上囊病病毒广西流行株免疫原性的研究

分别制备传染性腔上囊病病毒（IBDV）广西流行毒株040124、BH11、TSC-2（9）和YL052以及参考强毒株CJ801-BKF的灭活油乳剂疫苗（OEV）及其多价OEV,分别进行IBD商品疫苗毒株B87（in）和FW2512对4个广西流行毒株的攻毒免疫保护试验、流行毒株间的免疫交叉保护试验、多价OEV不同免疫剂量及其与CJ801-BKF株OEV的免疫保护对比试验。结果显示,2个IBD商品疫苗均不能对4个流行毒株提供完全的保护;4个流行毒株的OEV对同源毒株的攻毒均可产生100%保护,其中040124株OEV的交叉免疫保护性最好;在毒株免疫组与未免疫组免疫器官指数的比较中发现,TSC-2（9）株OEV免疫鸡的免疫器官受病毒的损伤程度最严重,而040124、BH11和YL052株OEV的免疫均能较好地保护鸡的免疫器官免受病毒的损伤;多价OEV 3个免疫剂量的免疫保护指数（IPI）为80%~100%,1 mL免疫组的IPI显著高于0.25 mL免疫组（P〈0.05）,而1 mL免疫组与0.5 mL免疫组差异不显著（P〉0.05）;多价OEV的免疫效力显著高于毒株YL052、TSC-2（9）和CJ801-BKF的OEV（P〈0.05）。结果表明,本研究制备的多价灭活疫苗适用于本地IBD的防制。

禽流感病毒的分子生物学特性及其检测技术的研究进展

禽流感(A I)是由A型流感病毒引起的一种禽类感染和/或疾病综合征,在许多国家给家禽养殖业带来巨大的经济损失,而且威胁到人类的健康和安全。从禽流感病毒(A IV)的分子生物学特性及检测技术的最新研究进展进行了概述,重点介绍了禽流感诊断技术的最新研究及进展。

三黄鸡群混合感染禽白血病病毒和马立克氏病病毒导致的临床肿瘤初步研究

为了进一步研究禽白血病病毒（avianleukosisvirus，ALV）与马立克氏病病毒（Marek’s dis—easevirus，MDV）的流行趋势和致病机理，试验对三黄鸡疑似肿瘤样品中ALV—J的gp85基因和MDV的meq基因进行PCR扩增、克隆和序列测定与比较分析。结果表明：GX15PP03-ALV的gp85基因与ALV—J英国原型株HPRS-103的核苷酸及氨基酸的同源性分别为97．9％和96．8％，与其他8株国内外参考株的核苷酸及氨基酸的同源性分别为87．9％-99．7％和83．7％～99．0％；GX15PP03-MDV的meq基因与8个MDV强毒参考株的核苷酸及氨基酸的同源性分别为99．0％-99．8％和97．4％～99．4％，而且具有强毒株的序列特征。说明ALV—J和MDV混合感染是导致该鸡群临床爆发肿瘤的主要原因。

广西主要地方优良品种鸡禽白血病的感染情况调查

禽白血病（avian lenkosis，AL）是由一种常见的反转录病毒禽白血病／肉瘤病毒群中的病毒引起，以在成年鸡中产生淋巴样肿瘤和产蛋量下降为主要特征。近年来，禽白血病对养禽业的危害日益严重。据报道，作为全国地方家禽品种资源最丰富的省份，广西已有多个地方品种鸡比较严重地感染了禽白血病。

广西鸡大肠杆菌病研究摘要

广西鸡大肠杆菌病研究摘要李康然，韦平，梁梅芳，陆善勇，戴鼎震，韦婷，张为宇广西农业大学养禽与禽病学研究所５３０００５鸡大肠杆菌病（Ａｖｉａｎｃｏｌｉｂａｃｉｌｌｏｓｉｓ）是由大肠埃希氏菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ）的某些血清型所引起的一类疾病的...

RNAi技术在家禽病毒病防控中的研究进展

RNA干扰(RNAi)是近年来发现的由双链小RNA介导的以序列特异性方式诱导同源mRNA降解的一种新技术。运用人工方法在体内外构建RNAi体系建立对目的病毒产生基因敲除或基因沉默的途径,在许多禽类病毒性疾病的抗感染和治疗性研究均取得了显著的成果,为禽病毒病的预防和治疗开辟了一条新途径。本文就上述相关话题进行综述。

广西龙胜县某凤鸡养殖场禽白血病检测

为了解广西纯地方品种龙胜凤鸡中禽白血病(AL)的流行情况,采集龙胜凤鸡的肛拭子217份、蛋清样品59份和血清样品276份,采用禽白血病病毒(ALV)群特异性抗原p27和A/B、J亚群抗体检测试剂盒分别对肛拭子、蛋清样品和血清样品进行检测。结果显示,p27抗原的总阳性率为26.45%(68/276);A/B亚群抗体的总阳性率为24.64%(10/276);J亚群抗体的阳性率为3.62%(73/276)。结果表明,龙胜凤鸡的种群已存在ALV的感染,以A/B亚群感染为主。

广西地方优质鸡禽白血病与鸡白痢净化检测的关系

禽白血病(avian leukosis,AL)是由反转录病毒科的禽白血病病毒(avianleukosis virus,ALV)引起的禽类肿瘤性疾病之一。近年来,AL在我国的地方品系的鸡群中广泛流行[1],发病率呈逐渐上升趋势,给养鸡场带来了巨大的经济损失;鸡白痢(plorum disease PD)是由鸡白痢沙门菌所引起的一种常见的传染病[2],是严重危害我国养鸡业发展的传染病[3-4]。研究表明,母鸡感染了鸡白痢沙门氏菌后,会严重影响种蛋的孵化率及雏鸡的成活率[5],对此病的防治应引起高度重视。