医学留学生本科病理学教学研究与实践

随着中国医学教育逐步与世界接轨,越来越多的留学生来到延边大学接受医学本科教育,他们的到来给延边大学的本科教育带来新的契机与挑战.这些留学生多元的文化背景不仅丰富校园文化,增加本校学生的国际交流机会,更为本科教育提出了一些新的问题.近几年来开展的病理学医学本科教育中,这些留学生给授课教师提出了更高的要求.在病理学教学过程中,延边大学医学院病理学教研室加强了与留学生交流。

关于病理学专业研究生就业问题的调查分析

《2012年全国研究生招生计划的通知》和《2003年教育统计数据》显示,2012年,我国研究生(包括硕士生和博士生)的计划招生规模达到了584416人,是2003年招生规模的2.18倍,这意味着10年间研究生年度招生规模扩大了1倍多。而大规模的扩招所带来的不争的事实就是研究生求职遇冷。在面对就业困难的同时,我们也应反思、寻找就业难的原因。所以,近期笔者对三所高校的病理学专业硕士研究生进行了问卷调查,并根据调查结果进行了初步分析、思考与建议,以期为未来研究生就业指导工作提供一定的参考依据。

关于病理学专业研究生培养问题的调查分析

医学教育结构中最高层次的教育就是对研究生的培养,研究生培养既担负着培养高素质人才的重任,又肩负着发展医学科学技术的任务,其成果的好坏直接影响到我国医学事业的发展。近年来随着研究生逐年的扩招,研究生数量不断地增加,现代社会对研究生类型的需求出现日益多元化等一系列问题,传统培养模式的弊端也逐渐显露出来。因此,近日笔者对三所高校的病理学硕士研究生进行了问卷调查,并根据调查结果进行了初步分析,提出了思考与建议,以期为未来研究生培养指导工作提供一定的参考依据。

乙肝相关性肝癌临床病理学特征与高敏C反应蛋白和溶血磷脂酸表达的相关性

目的探讨乙肝相关性肝癌临床病理学特征与溶血磷脂酸(LPA)和高敏C反应蛋白(hs-CRP)表达的相关性。方法选取2019年1月至2020年1月间河南省驻马店市中心医院收治的198例乙肝相关性肝癌患者作为乙肝组,198例酒精相关性肝癌患者作为酒精组。两组患者都进行血清hs-CRP和LPA表达检测,调查患者的病理学特征并进行相关性分析。结果乙肝组患者血清hs-CRP和LPA含量均高于酒精组,差异均有统计学意义(均P <0.05)。两组患者血清ALP、AFP、ALT、AST和GGT含量比较,差异均无统计学意义(P> 0.05)。乙肝组不同临床分期和组织学分化患者的血清hs-CRP和LPA含量比较,差异均有统计学意义(均P <0.05)。乙肝组患者的临床分期和组织学分化与血清hs-CRP和LPA表达均存在相关性,差异均有统计学意义(均P <0.05)。患者的临床分期和组织学分化均为影响hs-CRP和LPA表达的重要因素,差异均有统计学意义(均P <0.05)。结论相对于酒精相关性肝癌,乙肝相关性肝癌的血清hs-CRP和LPA呈现高表达,与患者的临床病理学特征存在相关性。

宫颈癌介入治疗的研究进展

宫颈癌是最常见女性恶性肿瘤之一,发病率仅次于乳腺癌,居第2位,且80%发生于发展中国家。我国宫颈癌发病率与死亡人数约占世界1/3[1]。在宫颈癌的临床治疗中介入治疗的应用越来越受到重视,许多研究表明介入化疗具有抑制淋巴结转移,缩小肿瘤体积,提高远期生存率的作用。宫颈癌病因尚未明了,常与性行为。

小白菊内酯对人肺癌A-549细胞株的抗增殖及诱导凋亡作用

[目的]探讨小白菊内酯(Par)对人肺癌A-549细胞株的抗增殖及诱导凋亡作用及其机制.[方法]应用倒置显微镜、HE染色光学显微镜、吖啶橙(AO)/溴化乙锭(EB)双染色荧光显微镜观察Par作用前后人肺癌A-549细胞的形态学变化;应用流式细胞术(FCM)检测Par作用之后肿瘤细胞周期分布及诱导凋亡的情况;应用免疫细胞化学技术检测Par作用前后蛋白阳性表达变化情况,并观察Par对人肺癌A-549细胞株抑制增殖及诱导凋亡的作用机制.[结果]倒置显微镜观察结果显示,实验组细胞体积缩小、变圆,核染色质聚集成团,细胞之间的连接疏松,贴壁不牢,易脱落.HE染色光学显微镜观察结果显示,实验组细胞体积变小,数目减少,可见部分细胞核固缩碎裂,部分细胞凋亡.AO/EB双染色荧光显微镜观察结果显示,对照组细胞呈绿色荧光,而实验组中早期凋亡细胞呈黄绿色荧光,随着Par作用时间延长,可见呈橘红色荧光的晚期凋亡细胞及坏死细胞.流式细胞术检测结果显示,G0/G1期细胞数量减少,而S期和G2/M期细胞数量明显增多(P<0.05).免疫细胞化学技术检测结果显示,实验组细胞Bcl-2,Ki-67,Livin,Survivin及核转录因子kappa B(NF-κB)表达明显降低(P<0.05).[结论]Par对人肺癌A-549细胞有明显的抑制增殖作用,其机制可能与细胞周期发生S期和G2/M期阻滞有关.Par作用于人肺癌A-549细胞株后,可诱导细胞凋亡,其机制是通过死亡受体通路及线粒体通路来完成的,NF-κB可能参与Par诱导人肺癌A-549细胞凋亡的作用.

小白菊内酯对人肝癌细胞HepG-2细胞Caspase-3和NF-κB蛋白表达的影响

目的:研究小白菊内酯对人肝癌细胞Hep G-2增殖抑制和诱导凋亡作用的机制。为小白菊内酯在临床上早日应用于肝癌患者提供理论及实验依据。方法:用体外培养的方法培养人肝癌Hep G-2细胞;用四唑盐(MTT)比色法检测小白菊内酯对人肝癌Hep G-2细胞的抗增殖及细胞毒作用;用倒置显微镜、HE染色光学显微镜;用免疫组织化学染色法检测小白菊内酯作用人肝癌Hep G-2前后Caspase-3、NF-κB蛋白阳性表达变化的情况。通过以上实验研究小白菊内酯在体外对人肝癌Hep G-2在细胞增殖、细胞凋亡等方面的影响及其作用机制。结果:(1)MTT法结果显示:小白菊内酯对人肝癌Hep G-2细胞的作用影响具有浓度和时间依赖性;(2)细胞形态学观察:倒置显微镜观察到对照组细胞贴壁生长,伸展性良好,细胞呈梭形和多角形,细胞之间连接紧密。小白菊内酯作用人肝癌Hep G-2 24h以后,增殖速度减慢,细胞贴壁能力下降,细胞之间连接疏松。药物作用48h以后,增殖速度大大减慢,大部分细胞变圆漂浮在培养瓶中。药物作用72h以后,几乎无活细胞,并且可见死细胞碎片;HE染色光学显微镜下观察:对照组细胞呈梭形和多角形,细胞之间连接紧密,细胞胞浆丰富,细胞核完整;药物作用24h以后,细胞伸展减弱,有一部分细胞呈现圆形,细胞之间连接疏松,核浓缩,染色质出现边聚;药物作用48h后视野中可见凋亡细胞和死亡细胞,细胞浆浓缩、染色质浓缩成新月形和"出泡"现象的变化;(3)免疫组化结果显示:实验组Caspase-3表达增加,NF-κB表达降低,与对照组相比具有显著性差异(P<0.05)。结论:小白菊内酯对人肝癌Hep G-2细胞有明显的抑制增殖作用,呈现出浓度和时间的依赖性;小白菊内酯对人肝癌Hep G-2细胞株有诱导凋亡作用,其诱导人肝癌Hep G-2细胞凋亡机制可能与NF-k B、Caspase-3等信号转导有关。

蝙蝠葛活性成分抑制人肺癌A-549裸小鼠移植瘤

目的 研究蝙蝠葛活性成分对人肺癌A-549裸小鼠移植瘤抑制作用。方法 将动物进行随机分为4个组:阴性对照组(加入蝙蝠葛活性成分的药物溶剂Na2CO3),为12只;阳性对照组(加入丝裂霉素),为6只;蝙蝠葛活性成分低剂量组,为6只;蝙蝠葛活性成分高剂量组,为6只。每周两次使用游标卡尺测量裸鼠移植瘤的长度和宽度,动态观察裸鼠移植瘤的生长情况,并计算其体积,以此绘出裸鼠移植瘤生长曲线图,同时称取小鼠的体重。结果 蝙蝠葛活性成分低剂量组的T/C值为68.4%,对裸小鼠移植瘤的生长无明显地抑制作用;蝙蝠葛活性成分高剂量组的T/C值为58.8%,并P<0.05,故可以认为对裸小鼠移植瘤的生长具有抑制作用。各实验组裸鼠生长情况良好,蝙蝠葛活性成分实验组体重均有增加,与对照组裸鼠无明显差异,丝裂霉素组体重相对较轻。结论 蝙蝠葛活性成分对人肺癌A-549细胞裸小鼠移植瘤具有生长抑制作用。

β-二氢青蒿素-大黄素复合物对人胃癌细胞株SGC-7901增殖的影响

目的探讨β-二氢青蒿素-大黄素复合物抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖,促进其凋亡的作用及机制。方法用MTT比色法检测β-二氢青蒿素-大黄素复合物对SGC-7901细胞的抗增殖及细胞毒作用;利用流式细胞仪分析复合物作用前后SGC-7901细胞周期分布及凋亡率的改变;应用免疫细胞化学染色法检测蛋白CyclinD1和Ki-67的表达变化。结果(1)MTT结果显示,β-二氢青蒿素-大黄素复合物对SGC-7901细胞抑制作用显著,且呈浓度-时间依赖性(P<0.05);(2)流式细胞仪检测分析出:实验组的细胞增殖被阻滞于G0/G1期、且凋亡率升高,均呈浓度梯度趋势(P<0.05);(3)免疫细胞化学染色结果显示:实验组中Ki-67和CyclinD1的阳性表达率明显降低,且具有浓度依赖性(P<0.05)。结论β-二氢青蒿素-大黄素复合物可以抑制人胃癌SGC-7901细胞的增殖,促进其凋亡,并且呈时效和量效关系;其作用机制可能与影响细胞周期有关,且药物浓度越高,下调作用越明显。

β-二氢青蒿素-大黄素复合物对人胃癌细胞株SGC-7901作用的实验研究

目的探讨β-二氢青蒿素-大黄素复合物能否诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡及相关作用机制。方法四唑盐(MTT)比色法检测β-二氢青蒿素-大黄素复合物对SGC-7901细胞的抗增殖及细胞毒作用、Hoechst33258荧光染色和HE染色观察细胞凋亡的形态学改变、AnnexinV-PI双染法检测凋亡、Western Blotting方法检测CyclinD1和Ki-67蛋白的表达变化。结果 MTT结果β-二氢青蒿素-大黄素复合物对SGC-7901细胞抑制作用显著,且呈浓度和时间依赖性(P<0.05);镜下观察可见明显的细胞凋亡形态;流式细胞仪检测结果显示,β-二氢青蒿素-大黄素复合物能诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡,且呈浓度依赖性(P<0.05);Western Blotting方法发现β-二氢青蒿素-大黄素复合物明显下调了CyclinD1和Ki-67的表达水平。结论β-二氢青蒿素-大黄素复合物可抑制人胃癌SGC-7901细胞的增殖,诱导其凋亡,其作用机制可能与细胞周期阻滞有关。

CyclinD1和CD15蛋白在结直肠癌中的表达及其临床意义

[目的]探讨CyclinD1和CD15蛋白在结直肠癌中的表达及在侵袭和转移中发挥的作用和意义.[方法]用免疫组织化学(SP)方法检测60例结直肠癌、30例腺瘤、30例正常结直肠组织中CyclinD1和CD15蛋白的表达水平.[结果]CyclinD1和CD15蛋白在结直肠癌中的表达水平较正常结直肠组织明显增高(P<0.01).CyclinD1蛋白表达阳性率在分化程度不同的结直肠癌中不同(P<0.01),随着浸润深度的增加,有淋巴结转移组CyclinD1蛋白表达阳性率较无淋巴结转移组显著增高(P<0.01);随着临床分期的升高,CyclinD1蛋白表达呈上升趋势(P<0.01).CD15蛋白表达阳性率在分化程度较低的结直肠癌中明显增高(P<0.01),随着浸润深度的增加,有淋巴结转移组CD15蛋白表达阳性率较无淋巴结转移组显著增高(P<0.01);随着临床分期的增加,CD15蛋白表达呈上升趋势(P<0.01).CyclinD1和CD15蛋白的共同表达与结直肠癌分化程度、浸润深度、淋巴结转移及离原发灶较远处转移、临床Dukes分期有相关性.[结论]CyclinD1和CD15蛋白可作为结直肠癌早期诊断的参考指标;检测CyclinD1和CD15蛋白在癌组织中的表达水平有助于判断结直肠癌的恶性程度、转移潜能及预后分析.

桔梗皂苷D对人移行细胞癌5637细胞株的诱导凋亡作用及其分子机制

目的探讨桔梗皂苷D对人移行细胞癌5637细胞诱导凋亡作用及分子机制。方法 HE染色和透射电子显微镜观察细胞的形态学变化;流式细胞学技术检测细胞凋亡率的变化;Western blot法检测凋亡通路相关蛋白的表达变化;PCR法检测p53、Bcl-2、Bax mRNA表达;免疫组织化学法检测凋亡相关蛋白表达的影响。结果通过HE染色和电子显微镜观察桔梗皂苷D组5637细胞,可见凋亡细胞,凋亡指数明显高于对照组(P<0.01);与对照组细胞相比,桔梗皂苷D组5637细胞Survivin、Livin表达量明显下降(P<0.05);Caspase-9、Caspase-8、Caspase-3、Cyt-c表达量与对照组比较,明显增加(P<0.05);p53、Bax mRNA水平明显升高,Bcl-2 mRNA表达下降(P<0.01);Bax、Caspase-9、Caspase-8以及Caspase-3表达较对照组增多,而Bcl-2表达则明显下降(P<0.01)。结论桔梗皂苷D能诱导人移行细胞癌5637细胞凋亡,其作用机制可能与上调Caspase-9、Caspase-8、Caspase-3、Cyt-c、p53和下调Bcl-2表达、激活线粒体途径和死亡受体途径有关。

5-溴甲基-2(5H)呋喃酮诱导人肝癌HepG-2细胞株凋亡的作用机制

[目的]研究5-溴甲基-2(5H)呋喃酮诱导人肝癌HepG-2细胞株凋亡的作用机制.[方法]应用细胞体外传代培养方法培养人肝癌HepG-2细胞;利用四唑盐比色(MTT)法检测5-溴甲基-2(5H)呋喃酮对人肝癌HepG-2细胞株的抗增殖及细胞毒作用;采用流式细胞术检测癌细胞周期分布及药物对细胞凋亡的影响;采用免疫细胞化学技术检测5-溴甲基-2(5H)呋喃酮作用前后细胞凋亡相关基因Caspase-3,Caspase-8,Caspase-9,Survivin,Livin,NF-κB,Bcl-2,Bax,Fas蛋白的表达情况,并探讨其诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡的作用机制.[结果]MTT检测结果显示,5-溴甲基-2(5H)呋喃酮对人肝癌HepG-2细胞的抑制作用表现出质量浓度和时间依赖性,IC50值为5 mg/L,48 h.流式细胞仪检测结果显示,5-溴甲基-2(5H)呋喃酮5 mg/L作用于人肝癌HepG-2细胞24,48,72 h后可见典型的亚二倍体峰,且G1期细胞数量增多,48 h时对照组G0/G1期细胞占40.30%,5-溴甲基-2(5H)呋喃酮组占46.21%,提示细胞阻滞在G0/G1期;对照组细胞凋亡率为0.02%,5-溴甲基-2(5H)呋喃酮组为19.74%,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05).免疫细胞化学检测结果显示,与对照组比较,5-溴甲基-2(5H)呋喃酮组Survivin,Livin,NF-κB,Bcl-2蛋白的阳性表达率明显减少(P<0.05),Caspase-3,Caspase-8,Caspase-9,Fas及Bax蛋白的阳性表达率明显增加(P<0.05).[结论]5-溴甲基-2(5H)呋喃酮对人肝癌HepG-2细胞株具有明显的抑制增殖作用,且呈量-效和时-效关系,并将细胞阻滞于G0/G1期.5-溴甲基-2(5H)呋喃酮对人肝癌HepG-2细胞株有明显的诱导凋亡作用,作用机制可能是通过死亡受体途径和线粒体途径共同介导的.

肺曲菌病尸检3例

肺曲菌病（PA）是由曲菌引起的感染性、进展性、变态反应性疾病,属于机会性感染,与长期应用广谱抗生素、糖皮质激素、细胞毒性药物、免疫抑制剂或气管插管、深静脉置管等有关.本病的发病率呈逐年增高趋势,已成为医院内感染的常见原因之一.PA的临床表现及影像学特征缺乏特异性,易被误诊,往往在尸检时才被发现.为提高对PA的认识,对3例PA尸检病例进行了总结,现报告如下.

高丽红参对庆大霉素引起的耳毒性的保护作用及其机制

[目的]探讨高丽红参对庆大霉素引起的耳毒性的保护作用及其机制.[方法]取8周龄SD雄性大鼠分为对照组和实验组,对照组大鼠左耳鼓膜内注射给予庆大霉素(剂量20μL,质量浓度为0.5 mg/L,每2 d给药1次,共7次),实验组大鼠在注射给予庆大霉素7 d前开始灌胃给予高丽红参粉溶液(剂量为2 mL,质量浓度为500 mg/kg,每日给药),7 d后开始注射给予庆大霉素,方法与剂量与对照组相同.注射给予庆大霉素前和实验第1,8,15,22,30 d时分别行耳前庭功能和听力功能检查.第30 d检查结束后取大鼠耳蜗前庭器行固定,用扫描电子显微镜和激光共聚焦显微镜观察耳蜗毛细胞、球囊斑和椭圆囊斑毛细胞的形态学变化并进行分析.[结果]实验组实验各时间点时的听力下降幅度均低于对照组,但两组间差异均无统计学意义(P>0.05).前庭功能检查及头偏实验结果显示,对照组注射给予庆大霉素1 d后4只大鼠出现严重头偏(>40℃),3只出现中度头偏(10℃~40℃),而实验组均未出现(P<0.01);提尾实验结果显示,对照组注射给予庆大霉素后4只大鼠出现不能控制的头旋转,而实验组大鼠均未出现(P<0.05);游泳实验结果显示,对照组5只及实验组1只大鼠出现游泳时间延长,两组间差异无统计学意义(P>0.05).扫描电子显微镜和激光共聚焦显微镜检查结果显示,对照组与实验组耳蜗毛细胞和球囊斑/椭圆囊斑毛细胞计数间差异均有有统计学意义(P<0.01).[结论]高丽红参对庆大霉素引起的耳前庭功能损伤具有保护作用,其机制认为可能与保护毛细胞免受损伤和促进毛细胞增殖有关系.

木脂素对胃癌SGC-7901细胞增殖和迁移的影响及其机制

[目的]研究木脂素对胃癌SGC-7901细胞增殖和迁移的影响及其机制.[方法]利用MTT、克隆实验、划痕实验、Transwell小室实验和Western blot法检测木脂素对胃癌SGC-7901细胞增殖、迁移及对Ezrin和P-Ezrin蛋白表达的影响.[结果]MTT检测结果显示,木脂素可抑制胃癌SGC-7901细胞的增殖,且具有浓度和时间依赖性(P<0.05,P<0.01);划痕实验和Transwell小室实验结果显示,木脂素可抑制细胞横向和纵向迁移能力,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),且具有浓度依赖性;Western blot检测结果显示,木脂素可显著下调Ezrin和P-Ezrin蛋白的表达(P<0.01).[结论]木脂素可抑制胃癌SGC-7901细胞的增殖和迁移,机制认为与下调Ezrin和P-Ezrin蛋白的表达有关系.

黄芩素对肺癌A549细胞的抗增殖作用及机制

[目的]探讨黄芩素对人肺癌A549细胞增殖、凋亡及迁移等生物学功能的影响及作用机制.[方法]采用激光共聚焦技术检测Ezrin,Skp2在A549细胞中的定位情况;MTT法检测0.1,1.0,10.0和100.0μmol/L黄芩素对A549细胞的抗增殖作用;Hoechst 33342染色法观察30.0,90.0μmol/L黄芩素对A549细胞凋亡的影响;细胞划痕愈合实验观察细胞迁移能力的改变;采用Western Blot检测30.0,60.0,90.0μmol/L黄芩素对A549细胞中Ezrin,Skp2蛋白表达情况的影响.[结果]Ezrin和Skp2在A549细胞膜上的表达水平明显高于细胞浆;1.0,10.0和100.0μmol/L黄芩素对细胞增殖具有明显的抑制作用(P<0.05,P<0.01),并具有时间和剂量依赖;24 h和48 h 60μmol/L黄芩素处理组的划痕区域细胞迁移数量、细胞愈合宽度明显小于对照组,表明黄芩素可抑制A549细胞增殖及迁移;Hoechst 33342染色结果表明,随黄芩素组浓度升高,亮蓝色增强,凋亡率明显增高;Western Blot检测结果表明,10.0,30.0,60.0μmol/L黄芩素组与对照组比较,Ezrin,Skp2蛋白的表达趋势呈梯度下降,与对照组相比较差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01),且蛋白表达量与黄芩素的浓度呈反比,具有浓度依赖性.黄芩素组Ezrin,Skp2蛋白相应灰度值与对照组相比较差异具有统计学意义(P<0.05).[结论]黄芩素抑制A549细胞的增殖和迁移,诱导细胞凋亡,其机制可能与下调Ezrin,Skp2蛋白的表达有关.

苦参碱对肝癌HepG-2细胞增殖和迁移的影响及其分子机制研究

[目的]探讨苦参碱对肝癌细胞株HepG-2细胞增殖与迁移的影响及其分子机制.[方法]采用MTT法、克隆实验、划痕愈合实验、Transwell小室实验和Western blot法观察0.25、0.50、1.00、1.50和2.00 g/L苦参碱对肝癌细胞株HepG-2细胞增殖、迁移的影响及Ezrin和p-Ezrin蛋白表达与EMT相关蛋白的相互关系,并探讨苦参碱抑制HepG-2细胞增殖和迁移的作用及分子机制.[结果]MTT法检测结果显示,与对照组比较,给予苦参碱处理的肝癌HepG-2细胞的增殖能力均显著降低,且呈剂量和时间依赖性(P<0.01);克隆实验结果显示,0.50、1.00、1.50 g/L苦参碱处理组HepG-2细胞的集落形成受到显著抑制,呈剂量依赖性(P<0.01);划痕愈合实验及Transwell小室实验结果显示,0.50、1.00、1.50 g/L苦参碱可显著抑制HepG-2细胞的横向及纵向迁移能力,亦呈剂量依赖性(P<0.01);Western blot法检测结果显示,0.50、1.00、1.50 g/L苦参碱可明显上调上皮标志物E-cadherin蛋白的表达(P<0.01),下调Ezrin、p-Ezrin(P<0.05,P<0.01)及间质标志物Vimentin、Snail蛋白(P<0.05,P<0.01)的表达.[结论]苦参碱可抑制肝癌HepG-2细胞的增殖和平板克隆形成,抑制HepG-2细胞的横向和纵向迁移,其机制认为可能与苦参碱通过对Ezrin和EMT相关蛋白表达的调控、逆转EMT的发生有关系.

皮试与冠状动脉性猝死相关尸检2例

皮试主要是检测机体是否对某种过敏原处于致敏状态,某些药物易发生过敏反应,因此临床上为了用药安全先行皮试后再用药,以防止过敏反应发生.冠心病（CHD）是冠状动脉狭窄、供血不足而引起的心肌机能障碍和/或器质性病变,又称为缺血性心脏病（IHD）.冠状动脉粥样硬化是最常见的狭窄性冠状动脉疾病,冠状动脉性猝死（SCD）是心源性猝死中较常见的一种.本观察对皮试与SCD相关的医疗纠纷尸检病例进行了分析.

小白菊内酯对人肺癌A-549细胞周期变化和凋亡通路的影响

目的:研究小白菊内酯对人肺癌A-549细胞株的抗增殖和诱导凋亡作用及其机制,为研发新型抗肿瘤中药奠定坚实的基础。方法:应用MTT法测定小白菊内酯对肺癌细胞的毒性作用和抑制增殖作用;应用倒置显微镜、Annexin V-FITC/碘化丙锭(PI)染色荧光显微镜观察药物作用前后人肺癌A-549细胞的形态学变化;应用活性氧(ROS)检测药物作用后细胞内活性氧的水平,以及活性氧含量与细胞凋亡之间的关系;应用免疫细胞化学技术检测药物作用前后蛋白阳性表达变化的情况并进一步探讨小白菊内酯对人肺癌A-549细胞株抑制增殖和诱导凋亡的作用机制。结果:(1)MTT法检测结果显示:小白菊内酯在不同浓度(5mg/L、10 mg/L、20 mg/L、40 mg/L、50 mg/L、55 mg/L、60 mg/L、65 mg/L)对人肺癌A-549细胞有不同程度的生长抑制作用,并呈现出浓度和时间梯度依赖性,当药物终浓度为55 mg/L作用时间为48h时,对A-549细胞的抑制率为51.02%。(2)Annexin V-FITC/PI染色荧光显微镜观察发现实验组细胞可见大量绿色荧光细胞和红色凋亡细胞。(3)活性氧检测发现:实验组细胞内活性氧的水平出现明显升高。(4)免疫细胞化学检测法结果显示对照组Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、Fas和Bax分别为10.07%、11.42%、14.09%、9.75%和11.87%,加入小白菊内酯后(实验组)细胞中Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、Fas和Bax蛋白的表达为89.24%、85.75%、84.46%、85.14%和84.09%,与对照组相比明显增加,有显著差异。结论:小白菊内酯作用于人肺癌A-549细胞株后,诱导其出现细胞凋亡的改变,它通过死亡受体通路和线粒体通路来完成诱导凋亡的机制,小白菊内酯作用后活性氧水平的增加可能参与诱导细胞凋亡的机制。