四川省16家大型禽类养殖场抗生素残留调查和细菌耐药性分析

为评估禽类养殖场粪便中抗生素的残留及细菌耐药性情况,本研究以四川省16家大型规模化禽类养殖场为监测点,重点分析粪便中抗生素残留特征和肠杆菌耐药特征,并对粪便中抗生素的选择性耐药风险熵进行评估。16份粪便样品中共检出18种抗生素,抗生素检出浓度0.54~2780.00μg·kg^(−1),其中,ZJZX中多西环素检出浓度最高,达到2780.00μg·kg^(−1);抗生素的选择性耐药风险熵为0.0040~10561.13,呈现出高选择性耐药风险;其次,从粪便中共筛选鉴定出14株肠杆菌科Enterobacteriaceae细菌,均表现出多重耐药性,且有33种耐药基因被不同程度检出。畜禽粪便中磺胺类、四环素类、氯霉素类和喹诺酮类抗生素残留较为严重,且养殖环境中肠杆菌科细菌表现出多重耐药性,建议有关部门加强畜禽养殖中多西环素、氟苯尼考和恩诺沙星等抗生素的管控,同时应加强对畜禽养殖企业中肠杆菌耐药性的监控。

岷江上游流域土壤抗生素残留评价研究

岷江上游流域土壤中含有一定量的抗生素,在不同浓度抗生素影响下的土壤会抑制自身呼吸,土壤的氧化作用也将受到影响,并且会导致土壤外部环境的变化。因此,如何有效降低抗生素对土壤的不良作用,对保护生态环境和维持相对健康的土壤环境十分重要。提升抗生素残留整治能力,能够提升土壤中微生物活性;因此,可通过抗生素残留评定等方式,增强岷江上游地区的土壤抗生素治理效果。

四川抗生素制药企业废水抗生素残留特征与风险评估

为评估制药企业废水处理系统对抗生素的去除效果及残留抗生素的潜在选择性耐药风险,本研究选取四川省内20家制药企业为研究对象,采用固相萃取-高效液相色谱法对制药废水中残留抗生素进行检测;通过比较废水处理系统进水口和排水口的抗生素浓度,评估废水处理系统对抗生素的去除效果;结合风险熵对残留抗生素的潜在选择性耐药风险进行评估。制药废水中抗生素残留浓度普遍较高;大部分制药企业现有废水处理系统对残留抗生素去除效果不理想;17家制药企业排口抗生素选择性耐药风险处于高风险水平。制药企业废水处理系统对抗生素的处理效果普遍较差,建议制药企业改进其废水处理系统工艺。

四川典型水域表层水体抗生素残留特征与风险评估

为评价四川4个典型湖泊/水库的抗生素残留特征及相关风险等级,采用超高液相色谱-串联质谱仪对水体中15种抗生素的残留水平进行测定,并通过熵值法和蒙特卡洛法对残留抗生素进行风险评估。结果显示:4个水体样本共检出14种抗生素,以兽用抗生为主,其中四环素浓度最高。黑龙滩水库抗生素残留水平较高,且存在高选择性耐药风险,其他3地抗生素残留水平与国内部分湖泊河流相比处于普通水平,且选择性耐药风险水平低;4个水体监测点均存在高环境风险。成人、儿童经饮水途径摄入抗生素的累积健康风险指数在9.5×10^-5~4.03×10^-3之间,且儿童要高于成人。4个典型水域兽用抗生素残留量与检出率相对较高,且环境风险水平较高。

新的f%T>MIC计算方法在抗生素PK/PD折点确定中的应用

目的研究并提出一种针对时间依赖性抗生素f%T>MIC计算的新方法,克服原常规算法的局限性,可用于解决口服抗生素无法计算PK/PD折点的问题。方法通过研究常规PK/PD折点计算的原理及步骤,建立了一种新的f%T>MIC计算方法,并以两种算法对Beagle犬静脉注射头孢他美的PK/PD折点进行计算和比较。结果新算法在关键步骤上基于曲线拟合,不依赖药动学房室模型,不受房室模型和给药途径限制,与常规算法比较f%T>MIC和PTA值相关性良好,相关系数分别为0.999和0.969。结论新的f%T>MIC计算方法,有望为各种给药途径及给药方案下时间依赖性抗生素PK/PD折点的确定提供一种新的思路。

基于网络药理学探讨地榆抗菌活性成分研究及初步实验验证

目的采用网络药理学方法探讨地榆抗菌活性成分,并结合抗菌药效学实验进行验证。方法基于TCMSP数据库获取地榆化学成分及其对应靶点,通过Gene cards和OMIM数据库获取细菌感染靶点。通过Cytoscape构建药物-疾病-靶点网络图,利用STRING数据库构建蛋白互作网络,采用DAVID数据库开展预测靶点的GO和KEGG分析。采用琼脂二倍稀释法对预测的活性成分进行体外最低抑菌浓度(MIC)测定,进一步利用临床分离菌耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)建立秀丽隐杆线虫感染和药物救治模型,观察线虫的存活情况,计算存活率。结果共筛选出8个潜在活性成分,其中山奈酚和槲皮素Degree值高于平均Degree值,得到17个关键靶点;GO和KEGG富集分析显示地榆抗细菌感染主要涉及细胞增殖、细胞凋亡、免疫应答等生物学过程,主要作用与调控Toll样受体、TNF、MAPK等信号通路相关。山奈酚对革兰阳性菌MRSA和MSSA的MIC_(50)和MIC_(90)均为128μg/mL。山奈酚、槲皮素对革兰阴性菌铜绿假单胞菌的MIC_(50)和MIC_(90)均为128μg/mL。与菌对照组比较,山奈酚(2.56 mg/mL)对MRSA和铜绿假单胞菌感染的秀丽隐杆线虫存活率明显升高(P<0.05),槲皮素(5.12 mg/mL)可明显提高铜绿假单胞菌感染线虫的存活率(P<0.05)。结论该研究初步揭示了山奈酚和槲皮素可能是地榆抗菌作用的物质基础之一,其作用机制可能与网络药理学预测的调节机体免疫和炎症反应等有关,为进一步实验研究奠定一定基础。

抗真菌抗生素CA1189产生菌SIIA-A1626的鉴定

目的抗真菌抗生素CA1189产生菌SIIA-A1626的分类鉴定。方法采用形态观察、生理生化特征鉴定、16S r RNA基因序列对比及系统发育学分析等相结合的多相分类研究方法来确定该菌株的分类学地位。结果与结论菌株SIIA-A1626在高氏1号培养基和ISP系列培养基上的形态特点和培养特征都呈现出链霉菌属菌株的形态学特征;菌株SIIA-A1626的16S r RNA基因与菌株Streptomyces violascens NBRC 12920T相似性最高,达到99.18%;在基于16S r RNA基因序列分析构建的系统进化树上,菌株SIIA-A1626在链霉菌属簇内形成独立分支。综合以上实验结果,菌株SIIA-A1626可能是链霉菌属的一个新种。

岷江上游养殖场土壤中抗生素残留风险评估

文章采用固相萃取-高效液相-紫外(SPE-HPLC-UV)联用法同时检测土壤中磺胺类、四环素类和氯霉素类抗生素含量,对四川岷江上游流域养殖场土壤中残留抗生素进行风险评估。分时段采集6处不同养殖场土壤,采用乙腈-磷酸缓冲盐和EDTA提取液提取,使用SAX和HLB小柱固相萃取,C_(18)柱进行液相分析,草酸盐-乙腈为流动相,梯度洗脱,270 nm下紫外检测。根据结果,利用环境风险熵值法对上述地区不同时间环境土壤进行评估。结果表明:该检测方法中待测组分能达到有效分离且专属性强。在0.048~41.78μg/mL线性范围内,浓度与峰面积均呈良好线性关系(r>0.9995),不同种类的抗生素最低检出限范围为11~26μg/kg,磺胺类、四环素类和氯霉素类回收率分别为75.2%~79.8%、60.2%~63.0%和65.4%。不同时段土壤样品均检出不同种类抗生素,以四环素类含量最高,且冬季采样土壤中残留量大于春夏季。大部分抗生素残留的环境风险处于较低水平,但仍有部分地区处于中风险水平。该研究所建方法准确、快速、简便,可用于土壤中残留抗生素的检测,结合环境风险分析,有效指导土壤污染检测管理和降解评估。

新型噻唑肽类抗生素产生菌SIIA-A6351的鉴定

目的新型噻唑肽类抗生素产生菌SIIA-A6351的分类鉴定。方法采用形态观察、生理生化、细胞壁化学类型、16SrDNA基因测序等多相特征来鉴定该菌株。结果与结论鉴定菌株SIIA-A6351为四川游动放线菌(Actinoplanes sichuanensis),为噻唑肽类抗生素的新产生菌。

一种时间依赖性抗生素序贯给药的PK/PD折点计算方法

目的用一种新的f%T>MIC计算方法,对时间依赖性抗生素头孢他美Beagle犬序贯给药的PK/PD折点进行计算,并与多次静脉注射和多次口服给药进行比较。方法设计Beagle犬包括序贯给药(3d×190mg/tid,i.v.+4d×250mg/bid,p.o.)、多次静脉注射(7d×190mg/tid,i.v.)和多次口服(7d×250mg/bid,p.o.)的3种给药方案,用模拟的方法在单次给药实验的基础上通过药动学"叠加"原理获得3种给药方案的模拟C-T曲线,并建立f%T>MIC计算公式;用蒙特卡罗模型对3种设计的给药方案进行PK/PD折点计算和评价。结果 Beagle犬序贯给药、多次静脉注射和多次口服给药的PK/PD折点分别为24.1、23.6和7.98μg/m L。结论模拟结果显示,新的f%T>MIC计算方法可用于时间依赖性抗生素序贯给药的PK/PD折点计算,头孢他美序贯给药与多次静脉注射的PK/PD折点接近,序贯给药可替代多次静脉注射。

响应面法优化聚醚类抗生素拉沙里菌素的发酵条件

目的为了提高拉沙里链霉菌Streptomyces lasaliensis产拉沙里菌素的发酵水平,利用响应面法对其发酵条件进行优化。方法用Plackett-Burman实验对影响发酵水平的9个主要因素进行显著性评价,筛选出3个显著因素,再选取最陡爬坡法逼近最佳响应面区域的发酵条件,通过CCD中心组合实验以及响应面分析,确定最优发酵条件。结果优化后,最佳培养条件为葡萄糖6.26g/L、糊精28.75g/L、p H 5.58,最佳产量为393.121mg/L。结论在此优化条件下,拉沙里菌素的产量提高了1.18倍。

碳青霉烯类抗生素中间体MAP的合成工艺改进

本研究报道了一种以4-乙酰氧基氮杂环丁酮(4-AA)为起始原料经过Reformatsky、酰化、还原、亲核取代、Dieckmann环合、烯醇化六步反应得医药中间体β-甲基乙烯基磷酸酯(MAP)的方法,通过单因素对照实验对关键反应的重要参数进行了优化,得到一条收率高、成本低和高效的合成路线,总收率达到43%,液相纯度达到98.82%,并采用MS和^(1)HNMR对关键中间体和产物都进行了表征。

岷江上游流域土壤抗生素残留对农业生产的影响

抗生素能够在一定程度上提升微生物、动物以及人类的抗性基因,但长此以往会导致机体抗药性增强,造成抗生素对动物、微生物以及人类的效用降低,影响某个种群的长远发展,因此,抗生素的大量残留也被认为是一种环境污染。本研究以岷江上游寿溪河流域为例,分析该区域土壤中抗生素污染现状、抗生素来源、抗生素对动植物的影响以及降低土壤中抗生素的措施等几个方面,以期为降低抗生素对农业发展的负面影响,提供有益参考。

附子内生放线菌EA12432抗真菌次级代谢产物研究

目的对一株分离自四川江油附子的放线菌EAl2432，研究其产生的抗真菌次级代谢产物。方法采用多相分类方法对菌株进行鉴定；采用有机溶剂萃取、硅胶柱层析和制备型HPLC分离获得活性单体，通过紫外可见光谱、质谱和核磁共振谱测定分析及天然产物数据库检索，对化合物进行结构确证；采用微量液体稀释法对化合物进行抗烟曲霉、抗白色念珠菌和抗新型隐球菌的活性测定。结果鉴定内生菌EAl2432为白长链霉菌，其发酵产物中分离获得5个次级代谢产物，其结构分别与文献报道的SF2738A、B、C、D及F同质。化合物1、2和4具有较强抗真菌活性，其IC90值的范围为1．74—57．92μmol／L。结论首次报道了从江油附子样本中分离出内生白长链霉菌EAl2432，其产生5个2，2’-联吡啶类已知化合物，化合物4（SF2738D）具有中等强度的抗真菌活性。

广藿香酮衍生物的合成以及抗菌活性研究

目的通过简单快速的有机催化,在温和反应条件下,合成一系列新型的广藿香酮衍生物3a^3m,并考察其体外抗菌活性。方法基于具有抗菌活性的广藿香酮,在课题组前期对其作用机制的研究基础上,利用绿色高效的有机催化策略,设计并合成一系列具有共轭结构侧链的广藿香酮衍生物。经过条件筛选,确定了最佳反应条件,通过柱层析能够快速分离得到目标产物,并通过核磁共振、高分辨质谱和单晶衍射等分析方法确定化合物结构。结果在筛选的最优条件下,在广藿香酮侧链进行了一系列具有不同电子效应和位阻效应的结构修饰,目标产物分离收率最高可达91%。最后,考察了该系列衍生的抗菌活性,得到一个有应用前景的先导化合物。结论广藿香酮是具有多种生理活性的中药药效物质,其在医药领域有着极其重要的学术价值,该化合物的构效关系和结构修饰研究是中药化学的热点方向之一。通过本研究,可以高效地制备一系列广藿香酮衍生物,对开发新的抗菌药物具有启示作用和参考价值。

亲水作用色谱法测定纽莫康定B0及其杂质的研究

目的建立同时检测纽莫康定发酵液中纽莫康定A0、Bo和C0的含量的HILIC方法a方法采用Xlon色谱柱（4．6mm×250mm，10μm）进行分离，以乙腈和水（87：13）为流动相；流速为2．0mL／min;检测波长：210rim；柱温：30℃进样量10此。结果纽莫康定A0、B0和c0三者质量浓度与峰面积分别在0．23-150μg／mL、0．12～100μg／mL、0．34～70μg／mL范围内线性关系良好，尺。均大于0．9993，平均加样回收率分别为96．73％（RSD，1．52％）、99．62％（RSD，1．77％）、102．35％（RSD，2．08％）。结论HILIC法同时检测纽莫康定A0、Bo和co含量的方法简单可行、精密度高、重复性好，为工业生产中分离纯化及质量控制提供依据。

Box-Behnken响应面法优化去氧氟尿苷缓释片处方及其体外释放机制研究

目的响应面法优化去氧氟尿苷骨架片处方,并进行体外释放机制研究。方法以羟丙甲纤维素(HPMC K4M)为骨架材料,结合其他辅料混合均匀,以直接压片法制备去氧氟尿苷骨架缓释片。通过Box-Behnken响应面法(Box-Behnken designresponse surface methodology,BBD-RSM)对处方进行优化,研究优化处方的体外释药规律,并进行数学模型拟合。结果优化处方的去氧氟尿苷骨架缓释片体外释放性能良好,可持续释药24h,药物释放符合Ritger-peppas模型。结论通过BBD-RSM建立的模型可用于去氧氟尿苷骨架缓释片的处方优化,优化处方达到去氧氟尿苷缓释骨架片设计要求。

铜绿假单胞菌生物被膜基因表达生物信息学研究

目的通过生物信息学探究铜绿假单胞菌生物被膜形成的差异表达基因及可能作用机制。方法通过GEO数据库筛选获得铜绿假单胞菌生物被膜数据芯片GSE120760,GEO2R工具筛选出铜绿假单胞菌浮游状态和生物被膜状态的差异表达基因;差异表达基因通过String数据库和Cytoscape3.7.1软件中构建靶点PPI网络图,并在DAVID和KOBAS数据库中对差异表达基因进行GO生物富集和KEGG通路分析。用铜绿假单胞菌体外生物被膜模型测定5种氨基酸(D/L型)的抗生物被膜作用效果。结果由芯片GSE120760筛选得到556个差异表达基因,其中上调基因143个,下调基因413个;从差异表达基因中筛选到62个关键基因,这些基因主要与30S和50S核糖体蛋白相关;GO功能富集得到40个条目;KEGG富集到44条通路,主要涉及代谢途径、次生代谢产物的生物合成、氨基酸生物合成通路、多种氨基酸代谢、群体感应、氨酰tRNA生物合成通路等;体外验证试验中,D-氨基酸对铜绿假单胞菌生物被膜有抑制作用,而L-氨基酸对其形成无影响。结论通过生物信息学挖掘出铜绿假单胞菌生物被膜形成的关键基因与靶点,并与代谢途径、氨基酸合成和代谢、群体感应、氨酰tRNA生物合成通路等相关,为铜绿假单胞菌生物被膜的靶向抗感染药物的研发提供思路。

吸收促进剂用于提高中药制剂口服生物利用度的研究进展（英文）

口服给药是一种便利的,不需要使用针头等其他器械的给药方式。然而由于中药制剂的胃肠道消化吸收往往不尽人意,而导致其口服的生物利用度也较低。为了能够改善中药制剂的吸收,提高其临床使用价值,目前已经有许多研究致力于提升中药制剂有效成分的溶解度或胃肠道渗透性以期达到提高口服生物利用度的目的。本文将着重介绍通过使用口服吸收促进剂来改善中药制剂口服生物利用度的方法。文中探讨了合成的和天然的口服吸收促进剂的促吸收作用,并且也探讨了利用中药配伍机制作用来增加成分之间的相互吸收的"药对"。我们期待能够通过对近期中药制剂口服吸收促进剂的研究综述,为吸收促进剂在中药中的使用提供一个有力的借鉴和参考。

无氟喹诺酮类抗菌药研究进展

目的综述一类新型母核上无氟喹诺酮类抗菌药的的药效学/药动学及安全性的研究进展。方法查阅近年来国内外相关文献30篇,对其进行归纳、总结和分析。结果目前,全球已上市三种无氟喹诺酮类抗菌药,为新型广谱喹诺酮类抗菌药,保持了喹诺酮类抗菌药对革兰阴性菌的抗菌活性,同时对革兰阳性菌的抗菌活性也明显增强,且由于不含氟元素,其安全性更高,更少引起过敏反应和光毒性。结论喹诺酮类抗菌药是临床上使用的一类十分重要的抗菌药,新型无氟喹诺酮抗菌药在全球面临耐药菌的威胁下值得进一步研究开发。