LncRNA HCG18通过靶向miR-140-3p/PD-L1通路对鼻咽癌细胞生物学行为的影响

目的 探讨长非编码(lncRNA)HCG18通过微小RNA-140-3p(miR-140-3p)/程序性死亡受体配体1(PD-L1)对鼻咽癌细胞增殖、迁移与侵袭的影响。方法 选择人鼻咽癌CNE2细胞、人正常鼻黏膜上皮细胞HNEpC细胞,将CNE2细胞分为HCG18组、pcDNA3.1组、sh-HCG18组、sh-NC组、miR-140-3p组、miR-NC组、miR-140-3p inhibitor组、Scramble组、HCG18+miR-NC组、HCG18+miR-140-3p组、miR-140-3p inhibitor+sh-NC组及miR-140-3p inhibitor+sh-PD-L1组。用CCK-8检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞侵袭及迁移能力,Western blot检测PD-L1蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测lncRNA HCG18、miR-140-3p及PD-L1 mRNA水平,生物信息学、双荧光素酶报告实验分析lncRNA HCG18、miR-140-3p及PD-L1的靶向关系。结果 CNE2细胞lncRNA HCG18、PD-L1蛋白及其mRNA表达水平高于HNEpC细胞,miR-140-3p表达水平低于HNEpC细胞(P <0.05)。上调lncRNA HCG18或下调miR-140-3p后CNE2细胞增殖、细胞迁移与侵袭能力增强,PD-L1蛋白、PD-L1 mRNA水平升高(P <0.05);下调lncRNA HCG18或上调miR-140-3p后CNE2细胞增殖、细胞迁移与侵袭能力降低,PD-L1蛋白、PD-L1 mRNA水平降低(P <0.05)。miR-140-3p与lncRNA HCG18、PD-L1均有靶向关系。上调miR-140-3p表达可逆转上调lncRNA HCG18对CNE2细胞增殖、迁移与侵袭的促进作用;沉默PD-L1可逆转下调miR-140-3p对CNE2细胞增殖、迁移与侵袭的促进作用。结论 过表达lncRNA HCG18可通过海绵化miR-140-3p,上调PD-L1表达,促进CNE2细胞增殖、迁移与侵袭。

miR-146a及MUC5AC在慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉组织中的表达及临床意义

目的:探讨微小RNA-146a(miR-146a)及黏蛋白5AC(MUC5AC)在慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉组织中的表达及其临床意义。方法:选取2022年1月—2023年1月新疆医科大学第二附属医院耳鼻喉科所收治的慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉患者40例(观察组)及同期因鼻外伤、鼻中隔偏曲、单纯鼻窦囊肿接受手术治疗患者40例(对照组)。检测对照组鼻黏膜组织和观察组鼻息肉组织的miR-146a水平及MUC5AC水平,并分析两组的VAS评分、鼻内镜评分,以及鼻息肉组织的miR-146a、MUC5AC表达水平与VAS评分、鼻内镜评分、炎症细胞百分比的相关性。结果:观察组miR-146a水平低于对照组,MUC5AC水平高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);鼻息肉组织中的miR-146a水平与VAS评分及鼻内镜评分均呈负相关(r=-0.637、-0.339,P<0.05),而MUC5AC水平与VAS评分及鼻内镜评分均呈正相关(r=0.525、0.471,P<0.05);miR-146a的表达水平与嗜酸性粒细胞的百分比呈负相关(r=-0.701,P<0.05),MUC5AC的表达水平与嗜酸性粒细胞百分比呈正相关(r=0.587,P<0.05),miR-146a、MUC5AC的表达水平与中性粒细胞百分比、淋巴细胞百分比均无相关性(P>0.05)。结论:在慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉疾病诊断中,鼻息肉组织的miR-146a水平低表达及MUC5AC水平高表达均提示病情加重,均与组织炎性程度有关。

微小RNA-142-3p靶向肿瘤坏死因子-α对脂多糖诱导的人鼻黏膜上皮细胞炎症反应的影响

目的探讨微小RNA(miR)-142-3p对脂多糖(LPS)诱导的人鼻黏膜上皮细胞(HNEPC)炎症反应的影响及其与TNF-α的靶向关系。方法选取HNEPC为研究对象,使用LPS诱导建立炎症反应模型。将miR-142-3p上调、miR-142-3p下调、空质粒转染至细胞,分为对照组、LPS组、miR-142-3p上调组、miR-142-3p下调组、空质粒组;将TNF-α下调、下调对照质粒分别与miR-142-3p上调质粒共同转染至细胞,记为miR-142-3p上调+TNF-α下调组、空质粒+TNF-α下调组、miR-142-3p上调组和空质粒组。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测细胞增殖能力;采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-142-3p和白细胞介素(IL)-6、IL-10、干扰素γ(IFN-γ)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA水平;采用酶联免疫吸附试验检测细胞上清液中IL-6、IL-10、IFN-γ、TNF-α含量;通过TargetScan网站、荧光素酶报告实验分析miR-142-3p与TNF-α的靶向关系。结果LPS组细胞增殖能力高于对照组,miR-142-3p上调组细胞增殖能力高于空质粒组,miR-142-3p下调组细胞增殖能力低于空质粒组,差异有统计学意义(P<0.05)。LPS组细胞IL-6、IL-10、IFN-γ及TNF-α蛋白及其mRNA表达水平高于对照组,miR-142-3p上调组细胞相关炎性因子表达水平高于空质粒组,miR-142-3p下调组细胞相关炎性因子表达水平低于空质粒组,差异有统计学意义(P<0.05)。TNF-α下调组细胞IL-6、IL-10、IFN-γ及TNF-αmRNA及细胞上清液中蛋白表达水平低于下调对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-142-3p与TNF-α具有良好的靶向关系。结论miR-142-3p在慢性鼻窦炎伴鼻息肉患者鼻黏膜组织中高表达,过表达miR-142-3p可促进LPS诱导HNEPC炎性反应,可能与上调TNF-α基因表达有关。

喉癌前病变与HPV感染的相关性研究

目的:探讨喉癌前病变与HPV感染之间的相关性。方法:对本院30例喉癌前病变组织标本(喉癌前病变组)并以30例声带息肉患者标本为对照(声带息肉组)进行37种HPV亚型检测、HPV DNA检测、HPV mRNA提取。结果:喉癌前病变组HPV阳性率为16.66%,声带息肉组HPV阳性率为3.33%,喉癌前病变组HPV感染阳性的喉癌标本共5例,其中共检测出HPV毒株6株,其中67单一型感染1例,16型单一感染3例,16、45混合型感染1例,喉癌HPV阳性率在不同年龄、性别、病程患者对比中无差异,且喉癌前病变组患者组织HPV DNA检测阳性5例,HPV E7 mRNA拷贝数为3 2例,>103且4 3例。结论:喉癌前病变患者的发病、恶化与HPV感染存在一定的关联,HPV病毒在诱发喉癌前病变演变为喉癌的过程中有一定的作用,但喉癌前病变后患者感染HPV与其性别、年龄、病程并无明显关联。

miR-140-3p靶向AGT5调控鼻咽癌细胞增殖、侵袭、迁移及自噬研究

目的探讨miR-140-3p对鼻咽癌细胞增殖、侵袭、迁移和自噬的影响及其与自噬相关基因5(AGT5)的靶向关系。方法选择人鼻咽癌细胞CNE2细胞、人鼻黏膜上皮细胞HNEpC,根据转染不同质粒分为miR-140-3p组(转染miR-140-3p mimic质粒)、si-miR-140-3p组(转染miR-140-3p inhibitor质粒)、miR-空白对照(NC)组(转染miR-140-3p mimic空载体)、NC组(转染miR-140-3p inhibitor空载体)、si-miR-140-3p+OE组(转染miR-140-3p inhibitor质粒、过表达AGT5空载体)及si-miR-140-3p+AGT5组(转染miR-140-3p inhibitor质粒、过表达-AGT5质粒)。CCK-8实验检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞侵袭、迁移能力,荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测细胞AGT5 mRNA及miR-106b-5p表达水平,Western blot检测细胞微管关联蛋白轻链3Ⅰ(LC3Ⅰ)、微管关联蛋白轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)、AGT5、自噬关键分子酵母Atg6同系物1(Beclin1)及p62蛋白表达水平,TargetScan在线网站预测miR-140-3p与AGT5结合位点,双荧光素酶报告基因实验验证miR-140-3p与AGT5的靶向关系。结果CNE2细胞miR-140-3p、AGT5蛋白及AGT5 mRNA表达水平明显低于HNEpC细胞(0.21±0.03 vs 0.87±0.11、0.21±0.06 vs 0.87±0.12、0.32±0.05 vs0.74±0.08)(P<0.01)。上调miR-140-3p的CNE2细胞增殖、侵袭及迁移能力降低,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1、AGT5蛋白表达水平升高,p62蛋白表达水平降低(P<0.01);下调miR-140-3p的CNE2细胞增殖、侵袭及迁移能力升高,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1、AGT5蛋白表达水平降低,p62蛋白表达水平升高(P<0.01)。上调AGT5可逆转敲低miR-140-3p对CNE2细胞增殖、侵袭、迁移的促进作用及自噬的抑制作用。miR-140-3p与AGT5具有靶向调控关系。结论miR-140-3p对CNE2细胞增殖、侵袭、迁移具有抑制作用,对自噬具有促进作用,机制可能与正性调控AGT5有关。

声导抗与纯音听阈测试在伪聋鉴别诊断中的作用

目的:探讨声导抗与纯音听阈测试在伪聋检查诊断中的作用。方法:采用声导抗测试与纯音听阈测试并辅以心理疏导方法,以自身对侧耳和正常人耳(20例40耳)作对照,对389例外伤后主诉单耳听力损失者进行检查诊断。结果:本组病例中对侧耳纯音听阈各倍频率听阈≤20dBHL,声导抗检查正常。9耳纯音听阈各倍频为30～40dBHL,声导抗示:B型鼓室图,耳咽管闭塞,鼓膜静态声顺值<0.3ml,镫骨肌反射消失,后经鼓膜穿刺抽液确诊为分泌性中耳炎。21耳气导纯音听阈各倍频率听阈50～85dBHL,声反射阈>90dBHL,经听觉脑干诱发电位、耳声发射等客观检查确诊为中重度聋,359耳纯音听阈各倍频率听阈85～100dBHL。声导抗示:A型鼓室图,耳咽管功能正常,鼓膜静态声顺值0.3～1.8ml,声反射阈正常,诊断为伪聋。结论:伪聋在临床上可以通过声导抗与纯音听阈测试进行检查诊断。

老年2型糖尿病伴感应神经性耳聋患者与老年单纯性耳聋患者的听力损害状况比较

目的探讨老年2型糖尿病(T2DM)伴感应神经性耳聋患者与老年单纯性耳聋患者的听力损害状况。方法研究对象为2007年1月至2012年3月来该院门诊就诊的64例老年T2DM伴感应神经性耳聋患者及39例老年单纯性耳聋患者,观察两组听力损害情况,包括患者平均听阈、诱发性耳声发射(DPOAE)幅值。结果观察组的纯音听阈在500、1 000、2 000、4 000、8 000 Hz时平均听阈均显著高于对照组(P<0.05);观察组在500、1 000、2 000、4 000、8 000 Hz时DPOAE幅值均显著低于对照组(P<0.05)。结论对于老年T2DM患者,将平均听阈、DPOAE测试幅值等检测作为听力损害的常规评价指标。

修正性鼻内镜手术治疗复发性鼻窦炎-鼻息肉的效果

目的分析修正性鼻内镜手术治疗复发性鼻窦炎-鼻息肉的效果。方法 124例复发性鼻窦炎-鼻息肉患者,按术式不同分两组各62例,对照组予传统术式治疗,观察组予修正性鼻内镜术治疗,比较组间疗效及并发症等。结果观察组临床总有效率为95.16%,高于对照组的77.42%(P<0.05);观察组及对照组治疗后的嗅觉功能评分、鼻腔气道阻力[(4.52±0.63)分、(1.27±0.12)k Pa/sl]、[(3.50±0.33)分、(2.23±0.33)k Pa/sl]均优于治疗前,且观察组优于对照组(均P<0.05);观察组术后并发症发生率为6.45%,明显低于对照组的(20.97%,P<0.05)。结论修正性鼻内镜手术医治复发性鼻窦炎、鼻息肉的效果优于传统手术,可改善鼻窦炎症状,减小鼻腔通气阻力,提高嗅觉功能,且术后并发症少。

巴曲酶治疗老年突聋患者的安全性评估

目的 通过检测纤维蛋白原（FIB）评估巴曲酶治疗老年突聋患者的安全性.方法 选择2014年1月至2014年12月在北京大学人民医院康复医学科住院并接受巴曲酶治疗的患者111例,依据年龄分为老年组（≥60岁）与中青年组（20-59岁）.巴曲酶治疗方案为首剂10BU,如年龄＞70岁者,改为5BU.采集患者应用巴曲酶前、应用巴曲酶后次日或隔天静脉血,检测FIB结果及全身出血情况.结果 用药前中青年组FIB水平为（297.13±97.62） mg/dl,老年组为（302.38±53.08） mg/dl,两组间差异无统计学意义（P=0.812）;在治疗过程中两组间FIB水平及用药前后FIB下降程度差异均无统计学意义（P＞0.05）;用药期间老年组在第4天危机值的发生率明显高于中青年组,其他时间点差异无统计学意义.结论 巴曲酶治疗老年突聋患者,其安全性与在中青年患者中是无差异的.

聋儿助听器佩戴前后听力检测在WHO和ANSI分级标准中的应用分析

目的 分析聋儿助听器佩戴前后听力检测在WHO和ANSI分级标准中的应用情况。方法 收集我院诊治的中度至极重度感音神经性聋儿20例作为研究对象,所有患儿均为从小开始佩戴助听器的语前聋儿童,采用回顾性的方式分析患儿的临床资料。结果 本组研究结果显示,WHO和ANSI分级标准在人工耳蜗手术分类结果中的一致性较差,且具有统计学意义(P<0.05);同时,ANSI和ANSI+言语理解能力测试在人工耳蜗的手术分类结果中具有较好的一致性;而WHO和WHO+言语理解能力测试在人工耳蜗的手术分类结果中的一致性较差。结论 WHO和ANSI分级标准比较,ANSI更具科学性、准确性。

血管内皮生长因子在喉癌患者中的表达及影响因素分析

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)在喉癌患者中的阳性表达情况,分析影响VEGF阳性表达的因素。方法回顾性分析80例喉癌患者(喉癌组)和80例喉息肉患者(喉息肉组)的临床资料。观察两组患者喉组织中VEGF的阳性表达情况,比较不同临床病理特征的喉癌患者喉组织中VEGF阳性表达情况,分析影响VEGF阳性表达的因素。结果喉癌组患者喉组织中VEGF阳性表达率为85.0%,明显高于喉息肉组(40.0%)(P﹤0.001);喉癌患者喉组织中的VEGF阳性表达率在不同年龄、肿瘤分期、分化程度、有无远处转移和有无血管癌栓间比较,差异有统计学意义(P﹤0.05);不同性别喉癌患者喉组织中的VEGF阳性表达率比较,差异无统计学意义(P﹥0.05);肿瘤分期、分化程度和有无血管癌栓是影响喉癌患者喉组织中VEGF阳性表达的因素。结论 VEGF在喉癌患者中高表达,且与患者的肿瘤分期、分化程度和有无血管癌栓密切相关。

比较金喉健超声雾化剂与利咽饮对小儿急慢性喉炎的疗效

目的观察金喉健超声雾化剂与利咽饮治疗小儿急性慢性喉炎的的临床疗效。方法随机将病例分为金喉健超声雾化剂组和利咽饮对照组,对2组治疗前后的主要症状及疗效进行比较。结果治疗组与对照组临床总有效,急性喉炎组分别为98.8%和82.9%;慢性喉炎组分别为97.7%和91.4%,治疗组均明显优于对照组(P<0.05)。结论金喉健雾化液治疗急性喉炎、慢性喉炎疗效显著,安全可靠。

以问题为基础学习教学方法在耳鼻喉科住院医师规范化培训中的应用

目的 探讨以问题为基础学习教学方法在耳鼻喉科住院医师规范化培训中的应用效果.方法 选取2014年和2015年在新疆维吾尔自治区住院医师规范化培训基地（三甲医院）进行耳鼻喉科住院医师规范化培训的27名学员为研究对象,分为实验组和对照组.2014年的12名学员为对照组,采用传统的教学方法,2015年的15名学员为实验组,采用以问题为基础学习教学方法.培训结束后,两组分别进行不同层次的知识体系考核与问卷调查,对比两种教学方法的培训效果.结果 两组学员在性别、年龄、培训前理论考试成绩和技能考试成绩等方面的差异均无统计学意义（均P＞0.05）.培训后,两组学员的基础知识测试成绩的差异无统计学意义（P＞0.05）,而临床技能操作考核成绩,实验组学员优于对照组学员,差异具有统计学意义（P＜0.05）.实验组学员对其教学方法在提高学习能力、独立思考能力、创新思维能力、动手能力、综合分析能力和有助知识的临床应用方面的评价均高于对照组学员,差异均具有统计学意义均（均P ＜0.05）.结论 与传统教学方法相比,以问题为基础学习教学方法更能够调动学员的学习积极性与主动性,提高学员的责任心和临床综合素质,值得在住院医师规范化培训中推广.

伊托必利片联合裸花紫竹片治疗咽功能紊乱伴胃食管返流病临床分析

对咽功能紊乱伴胃食管返流病75例患者,予以伊托必利片与裸花紫竹片合用,治疗伴胃食管返流病咽功能紊乱,治愈率达到92.5%。

微小RNA-155-5p通过靶向组蛋白去乙酰化酶1调控鼻黏膜上皮细胞上皮间质转化的实验研究

目的 观察微小RNA(miR)-155-5p对人鼻黏膜上皮细胞(HNEPC)上皮间质转化(EMT)的影响及其与组蛋白去乙酰化酶1(SIRT1)的靶向关系。方法 选取2019年5月—2021年12月行鼻内镜手术治疗的患者50例为研究对象。根据是否合并鼻息肉分为慢性鼻窦炎伴鼻息肉(CRSwNP)组36例和慢性鼻窦炎不伴鼻息肉(CRSsNP)组14例,另选取同期行鼻中隔偏曲手术治疗的20例鼻中隔偏曲患者为对照组。将miR-155-5p mimics、miR-155-5p inhibitor、miR-NC及Vector质粒转染至细胞,分为miR-155-5p组、miR-155-5p inhibitor组、miR-NC组和Vector组。实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测细胞、组织miR-155-5p表达水平;Western blot、免疫荧光检测组织、细胞SIRT1、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤黏蛋白(Fibronectin)表达;生物信息学工具、荧光素酶报告实验分析miR-155-5p与SIRT1的靶向关系。结果 CRSwNP组鼻腔黏膜组织miR-155-5p表达水平高于CRSsNP组及对照组,CRSsNP组鼻腔黏膜组织miR-155-5p表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。CRSwNP组鼻腔黏膜组织E-cadherin、SIRT1表达水平低于CRSsNP组及对照组,CRSsNP组鼻腔黏膜组织E-cadherin、SIRT1表达水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。CRSwNP组鼻腔黏膜组织Vimentin、α-SMA、Fibronectin表达水平高于CRSsNP组及对照组,CRSsNP组鼻腔黏膜组织Vimentin、α-SMA、Fibronectin表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。上调miR-155-5p促进了HNEPC细胞EMT,沉默miR-155-5p抑制了HNEPC细胞EMT。miR-155-5p负性靶向调控SIRT1。结论 miR-155-5p、EMT相关标记物在CRSwNP中表达升高,上调miR-155-5p可通过负性靶向调控SIRT1促进HNEPC的EMT过程。

LncRNA TTN-AS1调控miR-139-5p/PDK1/AKT/Caspase-3信号通路促进鼻咽癌的生长和转移

目的探究lncRNA TTN-AS1对鼻咽癌生长和转移的影响及机制。方法qRT-PCR检测TTN-AS1在NP69、TW03、C666-2、CNE2细胞中的表达。将CNE2细胞分为si-NC组(转染TTN-AS1 siRNA Negative Control)、si-TTN-AS1组(转染TTN-AS1 siRNA)、si-TTN-AS1+miR-139-5p inhibitor组(共转染TTN-AS1 siRNA和miR-139-5p inhibitor)、si-TTN-AS1+PDK1组(共转染TTN-AS1 siRNA和PDK1质粒)。CCK-8检测各组细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡水平,Transwell小室检测细胞迁移和侵袭能力,双荧光素酶报告基因实验检测lncRNA NNT-AS1与miR-139-5p的靶向关系以及miR-139-5p与PDK1的靶向关系,Western blot检测各组细胞PDK1、p-AKT、AKT、Caspase-3表达。结果TTN-AS1在鼻咽癌细胞系TW03、C666-2、CNE2中的表达显著高于鼻咽上皮细胞系NP69(P<0.05)。相比于si-NC组,si-TTN-AS1组CNE2细胞增殖能力显著降低(P<0.05),细胞凋亡水平显著较高(P<0.05),细胞迁移和侵袭数显著减少(P<0.05)。miR-139-5p为TTN-AS1的靶基因,PDK1为miR-139-5p的靶基因。相比于si-TTN-AS1组,si-TTN-AS1+miR-139-5p inhibitor组和si-TTN-AS1+PDK1组CNE2细胞增殖能力显著增加(P<0.05)、细胞迁移和侵袭数显著增加(P<0.05),细胞凋亡水平显著较低(P<0.05)。相比于si-NC组,si-TTN-AS1组CNE2细胞中PDK1蛋白表达显著下调(P<0.001),Caspase-3蛋白表达显著上调(P<0.001),p-AKT水平显著下调(P<0.001);相比于si-TTN-AS1组,si-TTN-AS1+miR-139-5p inhibitor组和si-TTN-AS1+PDK1组CNE2细胞中PDK1蛋白表达显著上调(P<0.001),Caspase-3蛋白表达显著下调(P<0.001),p-AKT水平显著上调(P<0.001)。结论LncRNA TTN-AS1可抑制鼻咽癌细胞的生长和转移,其机制为调控miR-139-5p/PDK1/AKT/Caspase-3信号通路。