虚拟实验技术在分子生物学实验教学中的应用

目的建立医学分子生物学虚拟实验教学平台,探索出有效的虚拟实验教学运行机制.方法将昆明医科大学2011级临床专业学生随机分为2组,虚拟实验技术教学组195人,传统实验教学组205人,采用问卷调查了解学生对教学效果的评价,并统计学分析2组期末考试成绩.结果同学对虚拟实验的教学方式接受程度较高,有助于同学对实验实际操作及理论知识的理解和掌握.2组期末考试成绩无统计学差异(P>0.05).结论虚拟实验技术作为一种新的教学手段,具备许多传统实验所不具备的优点,但其不能完全代替传统实验,在医学分子生物学实验教学中,应合理运用虚拟实验与传统实验两种教学手段.

慢性应激对大鼠行为学及脑神经颗粒素水平的影响及药物防治

目的探讨慢性应激对大鼠外显行为学变化的影响,检测体内儿茶酚胺类物质及神经颗粒素(Neurogranin,Ng)表达的变化及三七皂苷Rg1的防治效果。方法成年雄性SD大鼠36只,随机分为对照组(CON)、模型组(CUS)、和治疗组(CUS-G),采用慢性不可预见性应激方法建立慢性应激动物模型;采用旷场试验检测行为学变化,运用Morris水迷宫实验进行学习记忆力测试,使用放射免疫法检测血浆、脑组织儿茶酚胺类含量,Western blot法检测皮质、海马、下丘脑Ng含量。结果 6 w慢性应激后,实验组大鼠在水平运动和垂直运动方面得分均明显低于对照组与药物组,均P<0.05;水迷宫实验显示慢性应激后动物逃避潜伏期明显延长,而治疗组大鼠逃避潜伏期呈下降趋势(P<0.05);血浆、脑组织去甲肾上腺素与多巴胺在对照组、实验组与药物组间无明显变化;慢性应激大鼠皮质、海马、下丘脑Ng含量水平皆与模型大鼠有差异(P<0.05、P<0.01、P<0.05),治疗大鼠皮质、海马、下丘脑Ng含量亦皆与模型大鼠有差异(P<0.01、P<0.05、P<0.05)。结论慢性应激研究领域,神经颗粒素的敏感性优于单胺类神经递质,可作为敏感指标加以观察;100 mg/kg剂量的三七皂苷Rg1能够抑制应激所致学习记忆功能紊乱,对应激所致外显行为有积极的调节作用,对脑内神经颗粒素表达水平降低趋势有较好抑制作用。

三七皂苷Rg1对慢性应激大鼠脑组织神经颗粒素表达的影响

目的探讨三七皂苷Rg1对慢性应激模型大鼠皮层、海马神经颗粒素(neurogranin,Ng)表达的影响.方法成年雄性SD大鼠36只,随机分为对照组(CON)、模型组(CUS)和治疗组(CUS-G),采用慢性不可预见性应激方法建立慢性应激动物模型,运用Morris水迷宫实验对大鼠进行学习记忆力测试,QPCR、Western blot分别检测皮层、海马Ng m RNA及Ng蛋白含量.结果水迷宫实验显示慢性应激后动物学习记忆能力显著降低,而治疗组大鼠逃避潜伏期明显降低(P<0.0 5);应激6周后,慢性应激大鼠皮层、海马Ng m RNA水平皆与模型大鼠有差异(P<0.05、P<0.01),治疗组大鼠皮层、海马Ng m RNA水平皆与模型大鼠有差异(P<0.01、P<0.05);慢性应激大鼠皮层、海马Ng含量水平与模型大鼠有差异(P<0.05、P<0.01),治疗大鼠皮层、海马Ng含量亦与模型大鼠有差异(P<0.01、P<0.05).结论慢性不可预见性应激导致大鼠皮层、海马Ng m RNA水平、NG蛋白含量显著下降,造成大鼠学习记忆功能减退,三七皂苷Rg1可上调Ng m RNA水平、NG蛋白含量表达,且对慢性应激所致外显行为有积极调节作用.

慢性应激环境大鼠神经颗粒素水平与脑组织病理变化相关性研究

目的观察慢性应激对大鼠外显行为学变化及特异性蛋白——神经颗粒素（Ng）表达的影响，探讨三七皂苷Rg1对应激后认知功能损害的防治效果。方法成年雄性SD大鼠36只，按随机数字表法分为对照组、模型组（cus组）和治疗组（cus-G组），每组12只。采用慢性不可预见性应激方法建立慢性应激动物模型，采用体质量测量、糖水实验检测行为学变化，Morris水迷宫实验进行学习记忆力测试．Westernblotting法俭测皮层、海马Ng含量，免疫组化染色检测Ng表达，HE染色观察动物模型目标区域的形态学变化。结果CUS组大鼠体质黾明显减少，糖水消耗量明晟降低，与对照组、CUS—G组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。水迷宫实验显示应激动物逃避潜伏期明显延长，而CUS—G组大鼠逃避潜伏期呈下降趋势，与对照组、CUS组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。与较对照组大鼠比较．CUS组大鼠皮层、海马Ng含量明显降低，免疫组化染色实验中吸光度值明显下降；CUS—G组大鼠则较CUS组明显上升，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论100mg／kg剂量的三七皂苷Rg1能显著升高慢性应激模型大鼠Ng在皮层、海马的表达，对应激所致外届行为有积极的调节作用。