基于医学“五术”新内涵的《医学细胞生物学》课程思政教学建设探索——以昆明医科大学为例

课程思政就是要寓价值观引导于知识传授和能力培养之中,实现专业课与思政课同向同行,帮助学生塑造正确的世界观、人生观和价值观,这是人才培养的应有之义,更是必备内容。《医学细胞生物学》以细胞的生命现象和规律为研究对象,与人体各项生命活动密切相关,该课程是医学生专业基础必修课。该文以昆明医科大学为例,阐述《医学细胞生物学》课程思政建设路径探索,为医学类其他课程思政教育提供借鉴思路和经验。

GJA8基因错义突变致先天性白内障一家系遗传分析

目的通过使用外显子测序定位分析一先天性白内障家系中GJA8基因致病错义突变。方法对2020年6月在昆明医科大学第二附属医院就诊的一个先天性白内障家系全体成员进行详细的临床眼科检查及全身查体。采集先证者及6个亲属外周血并提取基因组DNA,应用全外显子测序筛查可疑致病基因,使用生物信息工具对可疑基因突变进行致病性分析,并对家系全部成员进行Sanger测序验证候选致病突变。结果外显子测序及生物信息学分析显示GJA8基因存在一个错义突变c.593G>A,p.R198Q,导致其第198位氨基酸残基由谷氨酰胺取代了原有的脯氨酸。氨基酸保守性分析显示该突变影响的氨基酸在物种间高度保守。在家系全部受检者中进行的Sanger测序结果表明该突变与疾病表型共分离,可以认定该突变是该突变为该家系的致病性突变,系谱分析显示该突变所致先天性白内障呈现常染色体显性遗传。结论位于GJA8基因的错义突变c.593G>A,p.R198Q是导致该家系出现先天性白内障的遗传病因,遗传方式为常染色体显性遗传。

细胞与分子综合性实验教学中的生物信息学实践

实验教学是高等医学院校教学体系的重要组成部分,综合性与创新性实验教学是近年来基础医学实验教学改革的方向和趋势。在细胞与分子综合性实验教学中进行生物信息学实践,学生学习利用网络生物数据库资源进行实验设计,有利于调动学生积极性、培养学生的动手能力和后续科研能力,是学生能力培养过程中不可缺少的教学环节。文章介绍了在细胞与分子综合性实验教学中进行生物信息学实践的必要性,并探索了教学方式和教学内容。

螺蛳分子系统发育的初步研究

目的建立田螺科已有种类的系统发育关系,探讨螺蛳(Margarya melanioides)的分类地位.方法测定采自云南高原湖泊中的螺蛳、方形环棱螺和中华圆田螺的线粒体COI、16S r RNA基因序列,并结合Gen Bank中田螺科已有物种序列,计算螺蛳和其他主要类群的遗传距离,用最大简约法(MP)、最大似然法(ML)和贝叶斯法(BI)构建包含螺蛳的田螺科部分物种系统发育树.结果 COI基因第三位密码子转换已达到饱和.在COI基因片段数据集、COI第1,2位密码子数据子集、16S基因片段数据集中,螺蛳与圆田螺属的遗传距离最小.在MP法、ML法、BI法构建的系统发育树中,螺蛳和中华圆田螺聚为一支,我国的环棱螺属种类和非洲该属未聚在一起.结论螺蛳与中华圆田螺的亲缘关系较近,线粒体COI联合16S基因片段可以弥补形态学在研究田螺科物种系统发育关系时的不足.

云南汉族ATP2B1基因标签SNPs与原发性高血压的关系

目的探讨I型细胞膜钙离子转运酶（ATP281）基因标签单核苷酸多态（SNPs）与云南汉族原发性高血压（EH）的相关性。方法用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性方法，检测1020例云南汉族人（EH组和对照组各510例）A凇B1基因12个标签SNPs（rs10506974、m10506975、rs2854371、rs957525、rs3741895、rs2681472、rs2070759、rs12423192、rs1050395、rs11105357、rs11105358和m7975689）和ATP2B1基因附近区域的rs17249754位点的多态性。结果rs17249754位点基因型和等位基因频率在EH组和对照组间的分布均具有显著性差异（P〈0．01），Logistic回归分析发现，rs17249754位点AA基因型和A等位基因使EH患病风险显著性降低（OR=0．60，95％C10．40～0．89，校正P〈0．05；OR：0．73，95％C10．60～0．88，校正P〈0．01）。结论ATP281基因附近区域rs17249754位点与云南汉族人群EH相关，rs17249754A等位基因可能是降低云南汉族EH风险的保护因子。

MCV、MCH联合红细胞脆性初步筛查中缅边境间日疟患者常见缺失型α地中海贫血

目的探讨平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)联合红细胞渗透性脆性实验初步筛查间日疟患者α地中海贫血的应用价值。方法收集中缅边境2017年7—8月117例疟疾患者,进行血液学分析得到MCV、MCH值,应用一管法红细胞脆性实验检测红细胞脆性率,以α珠蛋白基因诊断结果作为金标准,采用ROC曲线评价各单项检测指标,计算各项指标及联合检测的灵敏度、特异性、准确度。结果 MCV、MCH和红细胞脆性率曲线下面积依次为0.740,0.836,0.700,MCV、MCH和红细胞脆性的单项实验结果的灵敏度分别为14.3%,67.9%,39.3%,特异性分别为98.9%,83.1%,97.8%,MCV和MCH联合平行检测的灵敏度为70.4%,特异性为100%,MCV、MCH和红细胞脆性三项平行检测灵敏度为96.3%,特异性为82.2%。结论 MCV、MCH联合红细胞脆性三项平行联合检测具有较高的灵敏度,能初步诊断间日疟患者中的α地中海贫血。

SH2B3基因标签单核苷酸多态性与汉族原发性高血压的关系

目的探讨SH2B衔接蛋白3(SH2B3)基因标签单核苷酸多态(SNPs)与汉族原发性高血压(EH)的关系。方法用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性方法(PCR-RFLP),对1 020例汉族人(EH患者和对照者各510例)SH2B3基因6个标签SNPs(rs7309325、rs11065898、rs10849947、rs2239196、rs2238154和rs739496)的多态性进行检测,运用遗传模型分析该基因与汉族EH的相关性。结果 rs2239196位点基因型和等位基因在EH组和对照组间的频率分布均具有显著性差异(Bonfferoni校正P<0.05),Logistic回归分析结果显示T等位基因携带者的患病风险显著升高(OR=2.59,95%CI 1.36~4.96,Bonfferoni校正P<0.05)。结论 SH2B3基因rs2239196位点T等位基因可能是汉族EH发生的危险因子。

昆明地区5284例孕妇地中海贫血基因检测分析

目的探讨昆明地区孕妇地中海贫血基因突变谱,为昆明地区地贫防控体系的构建提供参考数据。方法对2019年上半年来昆明市妇幼保健院做常规产检的5284例孕妇行23型常见地贫基因型检测。结果确诊地贫基因携带者313例,昆明地区孕妇地贫总携带率为5.92%。检出α-地贫229例,占地贫总携带数的73.16%,基因型以αα/-α^3.7型、αα/--^SEA型、αα/-α^4.2型最为常见;检出β-地贫80例,占地贫总携带数的25.56%,基因型以βEM/N型、IVS-Ⅱ-654M/N型、CD17M/N型最为常见;检出复合型地贫5例,占地贫总携带数的1.60%。上述三种地贫类型构成,差异有统计学意义(P<0.01)。结论昆明地区人群的地贫基因突变谱与我国南方其他地区有所不同,多见αα/-α^3.7、αα/--^SEA、βEM/N、IVS-Ⅱ-654M/N和CD17M/N这5种基因型。

先天性虹膜缺损合并先天性白内障一家系的PAX6基因新突变

目的探讨先天性虹膜缺损合并先天性白内障一家系的致病基因及遗传方式。方法采用家系调查研究方法,2020年2月于云南省残疾人康复中心和昆明医科大学第二附属医院眼科收集云南汉族先天性虹膜缺损合并先天性白内障一家系,对先证者及其父母、子女和丈夫进行眼科临床检查及诊断。收集该家系成员全血,提取基因组DNA。对先证者及其丈夫进行全外显子组测序,采用生物信息学分析方法定位可疑致病基因,采用UGENE进行氨基酸保守性分析;采用MutationTaster预测变异对蛋白翻译的影响;参照美国医学遗传学与基因组学学会(ACMG)遗传变异分类标准与指南对变异位点进行致病性评估。对所有收集样本进行Sanger测序验证,确定致病基因及变异位点。结果先证者临床表现为双眼虹膜大部缺损,仅周边部见少量虹膜组织,晶状体皮质及后囊混浊,伴有眼球震颤,眼部检查无其他异常。先证者全外显子组测序结果显示,PAX6基因第8外显子有1个新的杂合移码变异PAX6:c.415dupA(p.R139fs),发生移码突变的位点在各物种间保守。MutationTaster预测结果显示,该变异位点位于PAX6蛋白高度保守区,变异使蛋白质丧失功能。ACMG遗传变异分类标准与指南评分为PVS1+PM2+PP1,为致病性变异。结合该家系疾病临床表型及Sanger测序分析,显示变异与疾病共分离,表明该变异致病。先证者及子女均患该病,先证者父母表型正常,该变异为新发变异,符合常染色体显性遗传。结论PAX6基因杂合移码突变c.415dupA(p.R139fs)是导致该家系出现先天性虹膜缺损合并先天性白内障的原因,该变异位点为首次报道。

扩散张量成像技术评估认知功能损害脑白质区变化的价值

目的分析阿尔茨海默病(AD)患者白质区改变与认知功能损害的关系,评估扩散张量成像技术(DTI)在AD患者的诊断及病情监测中的价值。方法选取AD组20例、正常对照组20例,用神经心理学量表对患者的认知功能进行评估,并对AD组DTI测定白质的各向异性分数(FA)、平均弥散度(MD)与认知功能评分进行相关性分析。结果与正常对照组相比,AD患者扣带后部、胼胝体压部白质的FA值显著减低,MD值显著增加(P<0.01),额叶、顶叶、胼胝体膝部白质的FA值减低,额叶白质MD值增加(P<0.05),扣带后部、胼胝体膝部、压部FA、MD与简易精神状态量表(MMSE)、成人韦克斯勒智力量表(WAIS)、AD评定量表-认知部分(ADAS-Cog)显著相关(P<0.01),额、顶叶FA、MD与MMSE、ADAS-Cog相关(P<0.05)。结论脑白质微观结构损伤程度和完整性变化是导致AD病人认知功能异常的重要原因,FA、MD值与AD病情发展相关。

细菌双杂交验证古菌UDG与TRX相互作用的研究

目的验证别府硫化叶菌(Sulfolobus tokodaii,S.tokodai)i DNA碱基切除修复中重要的酶-尿嘧啶-DNA糖基化酶(uracil-DNA glycosylase,StoUDG)与硫氧还蛋白(thioredoxin,StoTRX)之间的相互作用,方法将StoUDG和StoTRX的基因分别克隆到细菌双杂交载体上,共转化至报告菌株,从筛选平板上检测StoUDG和StoTRX相互作用的强弱.结果 (1)pBT-TRX与pTRG-UDG等细菌双杂交质粒共转化至报告菌株,可使报告菌株在含氯霉素、四环素和卡那霉素的LB平板上生长;(2)含pBT-TRX与pTRG-UDG质粒的细菌双杂交报告菌株可在筛选平板上缓慢生长,且不发生自激活.结论 StoUDG与StoTRX存在较弱的相互作用,提示StoTRX参与依赖于StoUDG的DNA碱基切除修复过程,

中国弯螺属一新种记述(肺螺亚纲,柄眼目,扭轴蜗牛科)

2011年8月在云南省泸水县进行陆生贝类调查过程中,于蛮云采集到一些弯螺属个体,经鉴定为中国弯螺属一新种,蛮云弯螺新种Sinoennea manyunensis sp.nov.。弯螺属的种类主要分布于东亚和南亚地区;对新种的形态特征进行了详细描述,并与近似种进行了比较、讨论。模式标本保存在昆明医科大学基础医学院细胞生物学与医学遗传学系。

中国云南喇叭螺属一新种(肺螺亚纲,柄眼目,虹蛹螺科)

详细记述了喇叭螺属Boysidia一新种,金平喇叭螺新种Boysidia(Bensonella)jinpingensis sp.nov.。对新种的形态进行了详细描述,并与其近似种进行了对比和讨论。模式标本保存于昆明医科大学细胞生物学与医学遗传学系标本室。

Hb、MCV、MCH在腾冲汉族地贫筛查中的临床应用价值

目的探讨血液学参数血红蛋白浓度(Hb)、平均红细胞体积(MCV)、红细胞平均血红蛋白含量(MCH)在腾冲市汉族人群缺失型α-地中海贫血和常见突变型β-地中海贫血筛查中的临床应用价值,研究临床初筛方案。方法随机选择2017年12月在腾冲市人民医院检验科进行常规体检的500例汉族受试者进行血常规检测,通过基因诊断确诊为常见的缺失型α-地中海贫血和突变型β-地中海贫血,比较Hb、MCV、MCH单项及联合检测对地中海贫血筛查的灵敏度和特异度,探讨其临床应用价值,制定适合当地人群的临床筛查截断值。结果腾冲市汉族中最常见的α-和β-地中海贫血分别为-α3.7/αα和异常血红蛋白E(HbE),血液学参数MCH、MCV分别为筛查-α3.7/αα及HbE筛查最具价值的指标。结论血液学参数Hb、MCV、MCH对腾冲市汉族人群上述2种常见地中海贫血的筛查有临床应用价值。

6例异常血红蛋白K(Hb K)的基因型分析

目的分析6例异常血红蛋白K患者的基因型特征.方法对9 897例常规产检的孕妇行全自动毛细管电泳检测,检出的6例异常血红蛋白K患者进行23种常见地中海贫血基因检测及α、β-珠蛋白基因测序检测.结果 (1)1例杂合突变发生在α2链上,首次报道基因突变型为CD51 (GGC->TGC);(2)3例杂合突变发生在α1链上,基因突变型为Hb Hekinan II(GAG->GAT);(3)2例杂合突变发生在β链上,基因突变型分别为Hb Hope(GGT->GAT)和Hb New York(GTG->GAG).结论同一种异常血红蛋白病存在不同的基因型,且不同基因型临床表现不尽相同.

G6PD缺乏症与疟疾的选择优势及抗性机制研究进展

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase,G6PD)缺乏症是一种常见的遗传性溶血性疾病,其基因定位Xq28,G6PD基因突变导致G6PD活性降低,红细胞内还原型辅酶Ⅱ(NADPH)和还原型谷胱甘肽(GSH)含量下降,对细胞造成氧化损伤,在各种因素诱导下发生溶血反应。疟疾是危害全球健康的重要虫媒传染病,其流行地区与G6PD缺乏症高发地区具有高度一致性,普遍认为疟疾对G6PD缺乏症具有选择优势,G6PD缺乏症对疟疾有抗性作用,但其具体抵抗疟疾的机制尚不清楚。为了进一步探讨G6PD缺乏症与疟疾之间的复杂关系,本文从G6PD缺乏症与疟疾的选择优势、G6PD缺乏症对疟疾抗性机制等方面的研究进展进行综述。

趋化因子受体CX3CR1基因V249I多态性在云南彝族人群中的分布

目的研究云南省彝族健康人群CX3CR1基因V249I多态位点分布情况以及与其他人群之间的差异,为探讨CX3CR1基因相关疾病分子机制提供理论基础。方法使用PCR-RFLP技术检测云南省晋宁县双河乡268例彝族健康个体CX3CR1基因V249I位点多态性,分别计算基因型频率和等位基因频率,并与其它人群该位点多态性分布相比较。结果晋宁县彝族人群CX3CR1基因VV、VI、II基因型频率分别为86.53%、12.25%、1.22%;V、I等位基因的频率分别为92.65%和7.35%。与已报道的日本人、法国人、意大利人、高加索人、希腊人、印度人、塞尔维亚人与维吾尔族人、汉族人、新疆汉族人相比,CX3CR1基因V249I位点基因型分布和基因频率差异均具有统计学意义(P <0.05);与傣族人、景颇族人、湖南汉族人、包头汉族人无论从基因型分布还是基因频率均差异无统计学意义(P> 0.05)。结论 CX3CR1基因V249I多态性分布在部分民族和种族之间存在一定的差异,其中不同种族之间的差异更为显著。

中国喇叭螺属的研究及一新种记述

笔者整理和厘清了Boysidia Ancey,1881已记载的中国喇叭螺属的种类,共计24种,其中有1新种,即清凉峰贝喇叭螺新种Boysidia(Bensonella)qingliangfengensis sp.nov.,对喇叭螺各亚属、贝喇叭螺亚属的已知种列出检索表,并对新种的形态特征、栖息环境进行了记述,与相似种进行了讨论。新种模式标本分别保存在中国科学院动物研究所标本馆和昆明医科大学细胞生物学与医学遗传学系标本室。

分子医学整合课程中基于微课程的翻转课堂设计与实施

医学课程整合是高等医学教育改革趋势。昆明医科大学将《医学细胞生物学》《医学遗传学》《医学生物化学》《医学分子生物学》整合为包括《分子医学理论基础》和《分子医学实验技术》的分子医学课程体系。在整合课程的具体教学实践中，以微课程结合翻转课堂为主，并联合运用多种教学法；在教学评价中，以形成性考核为主、终结性考核为辅，且建设了相应的网络教学评价体系。

细胞间黏附因子-1基因与云南彝族原发性高血压及血压水平的关联研究

目的探讨细胞间黏附因子-1基因（intercellular adhesion molecules-1,ICAM-1）标签SNPs与云南彝族原发性高血压及血压水平的相关性。方法采用病例-对照关联研究策略,运用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态方法,对615例彝族人（高血压患者303例、对照个体312例）进行ICAM-1基因7个标签SNPs（rs5491、rs281428、rs5498、rs3093032、rs5496、rs281437、rs309303）的多态性进行检测。结果彝族女性人群中,rs281437位点基因型和等位基因频率分布在高血压组和对照组间,差异均有统计学意义（P〈0.01）。Logistic回归分析结果提示CT/TT基因型和T等位基因使患病风险升高（OR=3.50,95%CI：1.61~7.62,P=0.002;OR=3.73,95%CI：1.78~7.80,P=0.000 5）。经Bonfferoni校正,这种相关性差异均有统计学意义（P=0.012,P=0.003）。在未接受降压治疗的彝族女性人群中,发现随着rs281437 T风险性等位基因数目的增加,血压水平呈现上升趋势,进一步验证了单位点分析所得结果的准确性。结论本研究结果提示ICAM-1基因rs281437位点可能是云南彝族女性高血压发生的易感标记,该位点与高血压和血压水平均相关,在云南彝族女性人群中值得关注。