多巴胺转运蛋白显像剂^(99)Tc^m-TRODAT-1的制备及动物实验

目的研制早期诊断帕金森病的多巴胺转运蛋白（ＤＡＴ）显像剂９９Ｔｃｍ２β［Ｎ，Ｎ′双（２巯乙基）乙撑二胺基］甲基，３β（４氯苯基）托烷（ＴＲＯＤＡＴ１）。方法以可卡因为原料，经多步反应，合成配体ＴＲＯＤＡＴ１；用亚锡作还原剂，在葡庚糖酸钠（ＧＨ）存在下制备９９ＴｃｍＴＲＯＤＡＴ１。测定标记物的稳定性及在磷酸缓冲液和正辛醇中的分配系数，进行大鼠体内分布和猴显像实验。结果经ＩＲ、１ＨＮＭＲ、ＭＳ等鉴定，ＴＲＯＤＡＴ１与结构一致。制备的９９ＴｃｍＴＲＯＤＡＴ１经ＨＰＬＣ测定其放化纯＞９０％，室温下放置２４ｈ稳定；ｐＨ值７０和７４时的分配系数分别为１３２和１５４。大鼠体内分布结果：９９ＴｃｍＴＲＯＤＡＴ１在脑内浓聚较低（２、６０ｍｉｎ分别为０２８％和０１２％ＩＤ／ｏｒｇａｎ），但脑纹状体摄取２、３０、６０、１２０ｍｉｎ分别为０１９３％、０１８９％、０１４２％和０１３６％ＩＤ／ｇ，保留很好；而小脑、大脑皮质和海马清除较快，纹状体与小脑的比值随时间延长而升高（２、３０、６０、１２０ｍｉｎ分别为１０６、１７７、２４０和４４５），１２０ｍｉｎ纹状体与海马和大脑皮质的比值分?

慢性实验性帕金森病模型猴多巴胺转运蛋白显像研究

目的 探讨多巴胺系统功能显像对帕金森病 (PD)的诊断价值。方法 对 5只正常猴及 6只经颈动脉注射 1 甲基 4 苯基 1,2 ,3,6 四氢吡啶 (MPTP) 30个月的PD模型猴进行99Tcm 2 β [N ,N′ 双 (2 巯乙基 )乙撑二胺基 ]甲基 ,3β (4 氯苯基 )托烷 (TRODAT 1)SPECT显像 ,经图像处理 ,计算正常及PD模型猴纹状体特异摄取比值 (SURs)。结果 正常猴纹状体在 30 ,6 0 ,12 0 ,15 0 ,180及 2 4 0minSURs分别为 0 5 4 9,0 792 ,0 84 8,0 96 5 ,0 96 9和 0 96 4 ;MPTP模型猴 3h双侧纹状体比值 [健侧 (左侧 ,L) 损毁侧 (右侧 ,R) (L R) =1 32 8± 0 30 8]明显高于对照猴 (L R =1 0 16± 0 0 12 ,t=9 87,P <0 0 5 ) ;损毁侧纹状体 枕叶摄取比值为 0 385± 0 32 6 ,明显低于对侧 (0 795± 0 4 2 6 )及对照猴 (R :0 790± 0 2 4 4 ,L :0 819± 0 2 4 9;t分别为 8 5 6 ,9 4 2和 8 93,P均 <0 0 5 )。结论 99Tcm TRODAT 1SPECT脑显像能反映PD模型猴脑多巴胺能突触前功能的变化。

23-羟基桦木酸体外抑制血管生成的实验研究

目的探讨23-羟基桦木酸(23-HBA)对体外血管生成的抑制作用。方法采用磺酰罗丹明B(SRB)法测定23-HBA对人毛细血管内皮细胞(HMEC)增殖、迁移和小管形成的影响;用免疫组化染色法检测HMEC中CD31表达的变化。结果23-HBA体外可明显抑制HMEC增殖(IC50为40.44mg/L)、迁移和小管的形成,且呈明显的剂量依赖性。23-HBA的浓度为10mg/L时,HMEC中CD31的表达明显降低。结论23-HBA体外具有明显抑制血管生成的作用,有可能成为有效的血管生成抑制剂。

应用^(99m)Tc-NGA进行肝ASGP受体显像的实验研究

新半乳糖人血清白蛋白（ＮＧＡ）是肝细胞表面去唾液酸糖蛋白受体（ＡＳＧＰＲ）的特异性配基。根据受体与配基结合的原理，报道了以９９ｍＴｃ标记的ＮＧＡ与人血清白蛋白（ＨＳＡ）在正常兔中显像行为的对比。结果表明９９ｍＴｃ－ＨＳＡ呈现血池显像剂的行为，而９９ｍＴｃ－ＮＧＡ则呈现肝脏受体显像剂的行为，并且若兔事先用１００倍量未标记的ＮＧＡ将肝脏受体饱和后，再用９９ｍＴｃ－ＮＧＡ显像则呈现与９９ｍＴｃ－ＨＳＡ相似的显像结果。以异硫氰酸荧光素标记的ＮＧＡ（ＦＩＴＣ－ＮＧＡ）进行流式细胞分析（ＦＣＭ）也表明，ＡＳＧＰＲ具有明显可饱和性。由此进一步表明９９ｍＴｃ－ＮＧＡ是ＡＳＧＰ受体显像，而非胶体显像；且具有饱和性．

炎症显像剂^(99)Tc^m-citrate的制备及动物实验

目的研制炎症显像剂９９Ｔｃｍ柠檬酸盐（ｃｉｔｒａｔｅ）。方法柠檬酸三钠在还原剂氯化亚锡存在，ｐＨ值６０时与９９Ｔｃｍ络合，生成９９Ｔｃｍｃｉｔｒａｔｅ。研究了标记物的稳定性、炎症模型小白鼠体内分布并进行了炎症模型大白兔显像。结果制备的９９Ｔｃｍｃｉｔｒａｔｅ标记率大于９０％，６ｈ内稳定。小白鼠炎症组织与正常组织的放射性比值高，注射后５、３０、６０、１２０ｍｉｎ分别为０９７、３１８、４７６和３３２。９９Ｔｃｍｃｉｔｒａｔｅ主要经肾脏排泄，血液清除快。兔显像表明：注射后３０、６０、１２０、２４０ｍｉｎ，炎症部位与对侧正常组织放射性比值分别为２３０、２６８、３４０和３３１。结论９９Ｔｃｍｃｉｔｒａｔｅ是一种有效灵敏的炎症灶显像剂，且制备方便。

利凡诺去白蛋白人血浆再利用的实验研究Ⅰ.蛋白C和蛋白S的纯化与鉴定

目的综合再利用利凡诺去白蛋白人血浆进行抗凝血成分蛋白C(PC)和蛋白S(PS)的分离纯化。方法采用钡盐吸附、分段盐析、亲和层析和制备性等电聚焦等技术从利凡诺去白蛋白人血浆中分别纯化PC和PS。结果所得PC和PS的相对分子量分别为 (6 1± 0 .9)、(83± 0 .8)kD ;等电点分别为 4.70± 0 .0 3、5 .2 0± 0 .0 3;分别富含Glu、Leu、Gly和Asp、Glu、Leu ;毛细管区带电泳分析高度均一 ;与文献报道基本一致 ;得率分别为 2 8.3%和 12 .6 %。结论该纯化路线省时、经济 ,有助于利凡诺去白蛋白人血浆的综合再利用和抗凝血成分输血制剂的研制和开发。

帕金森病功能显像实验研究

目的 应用99mTc TRODAT 1SPECT显像观察偏侧帕金森病 (PD)猴模型两侧纹状体多巴胺转运体 (DAT)密度的变化。方法 4只恒河猴 ,编号为M1～ 4,M1为正常者 ,M2～M4为右侧颈总动脉注射神经毒素MPTP的PD模型者。静脉注射99mTc TRODAT 1(3 70～ 5 5 0MBq) ,1～ 2小时后进行SPECT断层扫描 ,选取清晰图像进行处理分析。结果 M1两侧纹状体感兴趣区比值为 1 0 0 ,M2～ 4左右侧纹状体感兴趣区比值为 1 10～ 1 2 2 ,而且右侧纹状体与各脑叶感兴趣区的比值均低于左侧。结论 99mTc TRODAT 1SPECT可以在体评估偏侧PD模型猴纹状体DAT的变化 。

CACPPA的^(99)Tc^m标记及其动物实验研究

在ｐＨ８．５～９．５的水溶液中，采用氯化亚锡还原法制备９９Ｔｃｍ－ＣＡＣＰＰＡ，ＴＬＣ和ＨＰＬＣ检测其标记率和放化纯均大于９０％。小鼠体内分布表明，心肌最高摄取率为１８．１７±２．６７％ＩＤ／ｇ；小鼠血药动力学研究表明９９Ｔｃｍ－ＣＡＣＰＰＡ的血液清除快，Ｔ１／２α为１．１１ｍｉｎ，Ｔ１／２β为２０．０８ｍｉｎ，清除速率为０．４０７ｍＬ／ｍｉｎ。９９Ｔｃｍ－ＣＡＣＰＰＡ的体内外血浆蛋白结合率高，ｐＨ７．００和ｐＨ７．４０时分配系数分别为１０．９８和１１．４５；代谢干预研究结果表明，葡萄糖胰岛素组心肌摄取升高，与对照组相比，差异具有显著性意义。

对碘苯代十五烷酸的初步动物实验

为了解脂肪酸代谢显像剂125I－对碘苯代十五烷酸（IPPA）在动物体内的分布、清除等行为，进行了125I－IPPA动物实验。结果表明，大鼠心肌对125I－IPPA的摄取高而快，最大心肌摄取值为4．4ID％／g，半清除时间T1／2α－3．8min；甲状腺摄取低，至120min，甲状腺摄取值仅为0．005ID％／organ．免血药清除T1／2α＝2．7min．125I－IPPA与小鼠体内血浆蛋白结合高而快，体外血浆蛋白给会稳定；异常毒性试验合格，小鼠的耐受量是人的560倍。大鼠体内各主要脏器的摄取和清除、免血药清除、小鼠体内血浆蛋白结合等均呈现第二计数峰。提示125I－IPPA能被大鼠心肌迅速摄取并参与心肌代谢，其代谢产物进入血液，最终由肾脏排泄，几乎没有游离碘的释放，从而降低本底，提高显像的质量。

脑灌注显像剂^（99m）Tc—MRP20的放化研究及初步药理实验

报道了９９ｍＴＣ－ＭＲＰ２０的最佳标记条件、小鼠脏器分布、兔血药清除动力学、血浆蛋白结合率、不同ｐＨ值时的分配系数、猴显像等结果。

β甲基对^(125)碘苯代十五烷酸(^(125)I-BMIPP)的初步动物实验

为了解脂肪酸代谢显像剂 β甲基对12 5碘苯代十五烷酸 (12 5I -BMIPP)在动物体内的分布、清除和代谢干预对其心肌摄取的变化等行为 ,进行了12 5I -BMIPP的动物研究。结果显示 ,禁食SD大鼠心肌对12 5I -BMIPP的摄取高 ,最大吸收值为 5 .70 %/ g ,在心肌中滞留 1h都不变 ,至12 0min心肌摄取仍高达 2 .19± 0 .4 2ID %/ g ;30min心 /血、心 /肝和心 /肺比分别为 3.4 0、2 .6 4和 2 .88;12 5I-BMIPP在肝、肺中的摄取低 ,排泄快 ;甲状腺摄取低 ,至 12 0min ,甲状腺摄取值为 0 .0 2ID %/g ;12 5I-BMIPP与小鼠体内、外血浆蛋白结合稳定 ;异常毒性试验合格 ,每千克小鼠接受的量是人的 5 0 0倍 ;pH为 7.0 0和 7.4 0时的分配系数 (logP)分别为 1.93和 1.6 8;代谢干预研究结果显示 ,葡萄糖胰岛素干预组心肌摄取明显升高 ,与对照组相比差异具有极显著的意义。

新型血栓显像剂～(99m)Tc-重组水蛭素的实验研究

采用直接法和间接法进行了９９ｍＴｃ标记重组水蛭素的研究，结果表明，间接法制备的９９ｍＴｃ－重组水蛙素具有更高的放化纯和稳定性。更适合于血栓模型的显像研究。９９ｍＴｃ－重组水蛙素在小鼠体内的分布表明，心、肝、脾、肺和脑的放射性分布均较低；放射性主要集中在肾脏，１５ｍｉｎ时肾脏放射性可达总注入剂量的６５％；且血液中放射性清除较快。兔血栓模型显像结果表明，９９ｍＴｃ－重组水蛙素可在血栓部位浓聚；注入后１ｈ即可使血栓清晰显影。因此，９９ｍＴｃ－重组水蛙素有望成为一种新型的血栓显像剂。

利凡诺去白蛋白人血浆再利用的实验研究Ⅱ.抗凝血酶Ⅲ和蛋白C抑制物的纯化与鉴定

目的综合再利用利凡诺去白蛋白人血浆进行抗凝血成分抗凝血酶Ⅲ (AT Ⅲ )和蛋白C抑制物 (PCI)的分离纯化。方法以钡盐吸附上清为原料 ,采用铝盐吸附、有机沉淀、离子交换层析、分子筛层析、亲和层析和制备性等电聚焦等技术从利凡诺去白蛋白人血浆中分别纯化AT Ⅲ和PCI。结果从利凡诺去白蛋白人血浆 10L中得到了AT Ⅲ 16 0mg和PCI4.2mg ,得率分别为 12 .7%和 10 .5 % ,其相对分子量分别为 (5 7± 0 .8)和 (5 6± 0 .8)kD ;等电点分别为 4.81± 0 .0 2和 8.0 1± 0 .0 2 ;分别富含Glu、Asp、Leu和Glu、Leu、Asp ;毛细管区带电泳分析高度均一 ;与文献报道基本一致。结论该纯化路线经济、简便 。

M受体亚型放射配基结合－免疫沉淀分析方法的建立及考核

利用１％洋地黄皂甙溶解大鼠脑匀浆Ｍ受体，用非选择性配基３Ｈ－ＱＮＢ标记可溶性Ｍ受体，以自制的Ｍ１、Ｍ２亚型抗血清和固相二抗分别特异性地免疫沉淀相应的亚型，分析单一受体亚型。对方法进行了考核，包括受体的溶解效率、抗原抗体反应时间、抗血清稀释度、反应温度等对分析结果的影响。对大鼠脑Ｍ受体的试验表明，用两种亚型抗血清进行的免疫沉淀分析呈典型的单位点饱和曲线，抗体对配基与受体的结合反应无影响。

偶联心得宁衍生物的合成、^(125)I 标记和动物实验

对偶联心得宁衍生物的合成、１２５Ｉ标记和动物体内分布实验进行了研究。结果表明，由于该药物具有双配位基团，对β受体的亲和力比单价配基要高５０多倍。给药后大鼠心血比持续升高，在４ｈ达到峰值，因此该药物有可能成为心肌受体显像剂。

超声与核素显像诊断甲状腺结节的对比研究

目的：探讨超声和核素显像法诊断甲状腺结节的价值。材料和方法：对比研究超声和核素显像诊断经手术病理证实的１００例甲状腺结节。结果：核素显像中，冷（凉）、温、热结节分别占７５％、１９％、６％；冷（凉）、温结节中甲状腺癌分别为８％和１１％，热结节中未见恶性存在。超声检查诊断甲状腺结节良恶性的敏感性６２５％、特异性９６７％、准确性９４％、阳性预测值６２５％、阴性预测值９６７％、假阴性３／８和假阳性３例。结论：甲状腺扫描能反映结节摄取９９ｍＴｃＯ４－功能，据此可判断肿瘤性质，但存在一定困难；超声对甲状腺结节具有定性诊断价值，但对恶性结节诊断时存在假阴性和假阳性。

实验性高眼压对兔睫状体多巴胺转运体和多巴胺D_2受体的影响

目的研究兔实验性高眼压对睫状体多巴胺能系统的影响。方法将新西兰兔随机分为3组:实验A组于前房内注射复方卡波姆溶液0.1ml,实验B组于前房内注射等量生理盐水,对照组不作前房注射。每日测量眼压,共1周。利用放射性配体125I-epidepride多巴胺D2(DAD2)显像剂、99mTc-TRODAT-1多巴胺转运体(DAT)显像剂,结合放射自显影技术观察兔虹膜睫状体内的DAD2受体(DAD2R)和DAT含量。结果实验A组虹膜睫状体DAD2R特异性放射性摄取比值(3.8231±0.6487)较对照组(6.3949±0.7780)下降67.27%(P<0.05);DAT特异性放射性摄取比值(10.4431±1.2430)较对照组(16.2321±0.5939)下降35.66%(P<0.05);而对照组与实验B组DAD2R、DAT特异性放射性摄取比值的差异无显著性(P>0.05)。结论高眼压时实验兔睫状体多巴胺能系统受到损害。

^(125)IUdR对人脑胶质瘤细胞SHG44的杀伤作用

为评价12 5IUdR对人脑胶质瘤细胞SHG4 4的杀伤作用 ,把12 5IUdR加入到SHG4 4细胞的培养基中 ,孵育后测量细胞摄取12 5IUdR的放射性活度 ;采用克隆形成法测定12 5IUdR对SHG4 4细胞生长抑制的效果。结果表明 ,培养基中12 5IUdR浓度增加时 ,SHG4 4细胞对12 5IUdR的摄取量也相应增加 (相关系数r =0 .9917)。SHG4 4细胞摄取12 5IUdR后生长受到明显抑制 ,细胞存活分数与培养基中12 5IUdR浓度呈直线负相关 (r =- 0 .9736 ) ,其半数致死剂量LD50 为 (8.7± 0 .12 )kBq/mL ,12 5IUdR组的SHG4 4细胞存活分数明显低于Na12 5I组 (P <0 .0 0 1)。结果提示 ,12 5IUdR能够掺入到SHG4 4细胞中 ,12 5IUdR对SHG4 4细胞有明显的杀伤作用 ,说明12 5IUdR可望成为治疗脑胶质瘤的潜在的一种放射性药物。