桂林麻鸭先天性鸭乙肝病毒模型的研究

目的了解桂林地区幼龄麻鸭携带鸭乙型肝炎病毒(DHBV)的情况并探讨PCR用于DHBV检测的可能性。方法采用常规聚合酶链反应(PCR)法检测桂林地区麻鸭血清中的DHBV。结果共检查284份鸭血清,DHBV阳性107份,阳性37.67%。结论桂林地区幼龄麻鸭自然携带DHBV率为37.67%,提示其对DHBV易感,是较为理想的动物模型;PCR法检测DHBV敏感性较高,重复性好,可用于DHBV的检测。

小叶黄杨药理研究初探

目的:观察广西桂林产小叶黄杨叶提取物(BMA和BMB)的半数致死量(LD50)、刺激性和对豚鼠离体回肠、家兔离体阴道及子宫的影响。方法:用改良寇氏法计算LD50;采用离体平滑肌装置,记录和比较豚鼠回肠、家兔阴道和子宫用药前用药后的张力变化。结果:BMA的LD50为6606mg/kg,BMB的LD50为4467mg/kg;BMA和BMB对家兔眼结膜无任何刺激性;BMA和BMB对豚鼠离体回肠和家兔阴道平滑肌有明显的收缩作用。结论:该药可用于治疗腹气胀、产后阴道松弛,有进一步研究的价值。

喘舒片的药理研究

为了观察“喘舒片”对慢性气管炎的药理效应，采用以下方法进行实验：①镇咳实验在大鼠及小鼠身上用二氧化硫及氨水引咳；②祛痰作用采用肺酚红排泌法（小鼠）；③实验性支气管痉挛性哮喘，采用豚鼠组胺喷雾引喘；④在大鼠用蛋清性关节炎肿胀程度作为炎症指标。实验所得数据经统计学处理有显著差异。结果：喘舒片具有较强的止咳、平喘及消炎作用，其组方合理。

雄风神药理作用研究

本资料报告了雄风神的药理作用。实验证明本品有以下作用：①能减轻实验性阳虚动物的证候，减少死亡率，具有壮阳补肾作用。②能明显促进幼年雄性小鼠睾丸和幼年雌性小鼠子宫的生长发育（Ｐ＜０．０１），具有促性激素样作用，并能增强雄性家兔的性功能。③能增加小白鼠免疫器官重量（Ｐ＜０．０１），提高免疫功能。④有抗寒（Ｐ＜０．０１）、抗疲劳（Ｐ＜０．０１）、抗缺氧（Ｐ＜０．０１）作用。

HIF-1α和VEGF在大鼠COPD中的表达及与肺血管重构的关系研究

目的探讨HIF-1α、VEGF在COPD各阶段的表达情况及其与肺血管重构的关系。方法 24只♂SD大鼠随机分为3个组,每组8只。正常对照组(A):d 1、14气道内注入生理盐水,4周后检测;慢支组(B):d 1、14经气道内注入脂多糖(LPS),200μg/次,4周后检测;COPD组(C):d 1、14气道内注入LPS,200μg/次,香烟烟雾暴露1 h.d-1,共4周。各组测定气道阻力及平均肺动脉压力(mPAP)。HE染色观察肺组织病理改变,VG+维多利亚蓝特殊染色检测肺血管重构指标:肺小动脉血管壁厚度与血管外径比(WT%)、血管壁面积与血管总面积比(WA%)。RT-PCR、Western blot分别检测各组肺组织匀浆中HIF-1α、VEGF mR-NA及蛋白表达情况。分析HIF-1α、VEGF的表达情况与肺血管重构指标的相关性。结果①与A组相比,C组气道阻力、mPAP增加(P<0.05)。②VG+维多利亚蓝特殊染色显示C组WT%、WA%值高于A组。③RT-PCR、Westernblot结果显示,C组HIF-1αmRNA及蛋白表达较A组明显增加,B、C组VEGF mRNA表达逐渐增强,C组VEGF蛋白表达较A组明显增加。HIF-1α、VEGF表达情况均与肺血管重构指标WT%、WA%呈正相关,(P<0.05)。结论 HIF-1α、VEGF与COPD的发病密切相关,其通过促进肺血管重构加重COPD的病情。改善缺氧状态及拮抗HIF-1α、VEGF的表达,尤其是在早期对VEGF的干预,可以减轻COPD的肺血管重构,减缓其到肺动脉高压的进展。

荔枝核黄酮类化合物对HepG2.2.15细胞系HBsAg与HBeAg表达及HBVDNA含量的影响

目的 :研究荔枝核提取物 黄酮类化合物 (IL)对乙肝病毒的抑制作用 .方法 :应用光密度测定法和细胞培养及定量PCR技术研究荔枝核提取物IL对HepG2 .2 .15细胞系HBsAg与HBeAg表达及HBV DNA含量的影响 .结果 :96孔板试验 :实验第 3,6日 ,IL对HBsAg和HBeAg表达均有明显的抑制作用 (与对照组比较P <0 .0 1) .2 4孔板试验 :实验第 3,6 ,9日IL对HBsAg表达有明显的抑制作用 (与对照组比较P<0 .0 1) ;实验第 6 ,9日IL对HBeAg表达有明显的抑制作用(与对照组比较P <0 .0 1) ;同时采用定量PCR方法检测 ,IL(4 0 0mg/L )可使培养基中的HBV DNA转阴 .结论 :IL体外实验 (培养细胞 )有较强的抗乙肝病毒作用 .

大黄蒽醌类化合物体外抗呼吸道合胞病毒作用的研究

目的:探讨大黄蒽醌类化合物(Rhubarb Anthraquinone Analogues,RAA)在细胞培养中抗呼吸道合胞病毒(RSV)的作用。方法:采用细胞培养技术,以病毒唑为阳性对照药,比较观察大黄蒽醌类化合物对RSV引起的细胞病变(CPE)的抑制作用。结果:RAA半数中毒浓度(TC50)为209.7mg/L,其抗RSV的半数有效浓度(IC50)为96.7mg/L,治疗指数(TI)为2.3,且对RSV抑制作用存在明显的量效反应关系。结论:RAA在Hep-2细胞中对呼吸道合胞病毒有抑制作用。

荔枝核黄酮类化合物体外抗呼吸道合胞病毒的作用

目的:探讨荔枝核黄酮类化合物体外抗呼吸道合胞病毒(RSV)的作用.方法:采用细胞培养技术,以病毒唑为阳性对照,观察比较荔枝核黄酮类化合物对RSV引起的细胞病变(CPE)的抑制作用.结果:荔枝核黄酮类化合物半数中毒浓度(TC50)为152.9mg/L,其抗RSV的半数有效浓度(IC50)为58.6mg/L,治疗指数(TI)为2.6,体外抗RSV作用与病毒唑相当,且对RSV抑制作用存在明显的量效关系.结论:荔枝核黄酮类化合物在Hep-2细胞中对呼吸道合胞病毒有抑制作用.

丹参酮ⅡA诱导人肺腺癌A549细胞凋亡

目的探讨丹参酮ⅡA(TanshinoneⅡA,TanⅡA)抗人肺腺癌A549作用及其可能作用机制。方法通过细胞形态学和MTT法观察TanⅡA对A549细胞增殖的影响;应用Hoechest33258和PI双染法观察细胞凋亡;采用荧光分光光度计检测细胞内钙及线粒体膜电位;RT-PCR检测Bad和MT-1A mRNA的表达。结果 TanⅡA能抑制A549细胞增殖,且随TanⅡA剂量的增加和作用时间的延长而增强,TanⅡA作用A549细胞24、48和72h的IC50分别为117.85、14.87和6.89μmol·L-1。TanⅡA作用A549细胞24h后,A549细胞出现染色质聚集等典型的凋亡形态学改变,且随TanⅡA剂量的增加,A549细胞凋亡百分率逐渐增大。TanⅡA作用后,A549细胞的细胞内钙升高、线粒体膜电位降低、Bad mRNA表达增加、MT-1A mRNA表达下调。结论 TanⅡA具有抗A549作用,其诱导细胞凋亡可能与钙依赖性通路和MT-1A表达下调有关。

凉薯种子提取物急性毒性和对KB细胞抑制作用的初步研究

目的:观察桂林地区凉薯种子不同组分提取物的体外抗肿瘤作用和对小鼠的急性毒性反应。方法:用MTT法观察凉薯种子的各种提取物对KB细胞的抑制作用;采用一次灌胃后,测定凉薯种子提取物的小鼠半数致死量(LD50)及95%可信限。结果:凉薯种子石油醚提取物的LD50为7.314g/kg(6.328～8.455g/kg),正丁醇提取物的LD50为4.223g/kg(3.586～4.973g/kg);水溶性提取物的最大耐受量大于8g/kg;80μg/ml和40μg/ml的乙酸乙酯提取物对KB细胞72h时的抑制率分别为32.6%(p<0.01)、16.4%(p<0.05);正丁醇提取物80μg/ml对KB细胞72h时的抑制率为49.9%(p<0.01);结论:乙酸乙酯和正丁醇提取物对KB细胞有一定抑制作用;凉薯种子正丁醇提取物和石油醚提取物的毒性较大,水溶性提取物的毒性较小。

甲基莲心碱对人卵巢癌顺铂耐药逆转的体外研究

目的研究甲基莲心碱(Nef)在人卵巢癌耐药细胞SKOV3/顺铂(DDP)对DDP敏感性中的作用,初步探讨其化疗增敏的作用机制。方法采用MTT比色法筛选Nef对细胞株的无毒剂量,并测定Nef干预后SKOV3/DDP对DDP耐药性的变化;免疫细胞化学法检测Nef对SKOV3/DDP细胞GST-π蛋白表达的影响;RT-PCR法分析Nef作用SKOV3/DDP细胞株不同时间GST-πmRNA水平表达的差异。结果不同浓度DDP与Nef联合应用使DDP对SKOV3/DDP细胞IC50明显下降,且逆转倍数随药物作用时间延长而增大,24 h、48 h、72 h分别为1.15、1.91、2.28倍(P<0.01);镜下SKOV3/DDP细胞较SKOV3细胞高表达GST-π,经Nef作用72 h后其GST-π表达明显下降(P<0.01);无毒剂量Nef作用1、3、5 d后SKOV3/DDP细胞内GST-πmRNA转录水平随作用时间延长而降低(P<0.01)。结论 Nef能有效逆转SKOV3/DDP细胞的耐药性,其逆转机制可能与下调GST-π基因高表达有关。

内皮抑制素对慢性阻塞性肺疾病肺血管重塑的影响

目的探讨重组人血管内皮抑制素(Endostar)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)肺血管重塑的影响。方法将64只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(A)、慢支组(B)、COPD组(C)、COPD并低氧组(D),A1组、B1组、C1组、D1组。动物模型制作同各对应组,从第3周起给各药物干预组腹腔内注射Endostar,剂量7.5 mg.m-2.d-1(1.25 mg/kg)。A1组从第3周起腹腔内注射同Endostar剂量相同的生理盐水。各组测定气道阻力及平均肺动脉压力(mPAP)。HE染色观察肺组织病理改变,VG+维多利亚蓝特殊染色检测肺小动脉血管壁厚度与血管外径比(WT%)、血管壁面积与血管总面积比(WA%)。免疫组化法检测各组肺组织中血管内皮生长因子(VEGF)的表达,ELISA、RT-PCR分别检测各组血清VEGF的表达情况及肺组织匀浆中VEGF mRNA表达情况。分析VEGF的表达情况与肺血管重塑指标的相关性。结果①与A组相比,C、D组气道阻力、mPAP增加(P<0.05)。使用Endostar干预后,C1、D1组的气道阻力较对应的C、D组下降(P<0.05)。②VG+维多利亚蓝特殊染色显示C、D组WT%、WA%值高于A组,药物干预后此两组WT%、WA%值较干预前有所降低。③ELISA、RT-PCR、免疫组化结果显示,血清中C、D组的VEGF浓度高于A组,使用药物干预后,此两组VEGF浓度较对应试验组下降。RT-PCR结果提示,B、C、D组VEGF mRNA表达逐渐增强,药物抑制后,此三组的VEGFmRNA表达减弱。免疫组化显示C、D组的VEGF表达显著高于A组,药物干预后此两组VEGF表达下调。VEGF的表达与肺血管重塑指标呈正相关。上述结果均有显著差异(P<0.05)。结论 VEGF在慢性阻塞性肺疾病中表达增强,参与肺血管重塑的过程,VEGF表达水平与肺血管重塑严重程度相关。使用Endostar干预后,VEGF表达下调,在C、D组变化明显,与此同时此两组的气道阻力、mPAP及肺小动脉WT%、WA%值下降,提示En-dostar可以减轻慢性阻塞性肺疾病病程的进展。

荔枝核总黄酮抗胆管结扎大鼠肝纤维化的作用及机制

目的:研究荔枝核总黄酮(total flavone from Litchi chinensis Sonn,TFL)抗胆管阻塞性(bile duct occlusion,BDO)大鼠肝纤维化的作用及机制.方法:采用胆总管结扎(common bile duct ligation,CBDL)制备肝纤维化大鼠模型.以水飞蓟素(SL)为对照,TFL[200,100mg/(kg·d)]灌胃给药,4wk后用酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血清中肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)的水平;放射免疫法(RIA)检测大鼠血清中透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)及Ⅲ型前胶原(PCⅢ)的水平;采用HE染色和Masson胶原染色观察大鼠肝纤维化程度;采用免疫组织化学法(SABC法)检测肝组织TRAIL的表达.结果:TFL大剂量给药组、假手术组和SL组血清TRAIL均明显低于模型组,具有显著性差异(7.11ng/L±0.99ng/L,5.83ng/L±2.42ng/L,7.02ng/L±1.09ng/Lvs42.99ng/L±14.39ng/L,均P<0.05),TFL大剂量给药组、假手术组和SL组血清肝纤维化指标HA、LN、PCⅢ均明显低于模型组,具有显著性差异(103.03μg/L±2.33μg/L,105.76μg/L±3.16μg/L,109.64μg/L±6.50μg/Lvs788.7μg/L±83.98μg/L;12.43μg/L±1.45μg/L,7.31μg/L±0.79μg/L,8.68μg/L±1.05μg/Lvs26.66μg/L±2.41μg/L;31.07μg/L±3.04μg/L,31.78μg/L±2.33μg/L,33.06μg/L±3.23μg/Lvs74.32μg/L±2.43μg/L,均P<0.05),TFL小剂量给药组血清TFL、HA、LN、PCⅢ与模型组比较无显著性差异(P>0.05).血清TRAIL水平与肝组织中TRAIL表达一致;血清TRAIL水平与血清HA、LN、PCⅢ呈正相关.TFL大剂量给药组和SL给药组的肝组织均显示肝纤维化程度明显改善.结论:TFL[200mg/(kg·d)]能抑制肝纤维化大鼠TRAIL、HA、LN、PCⅢ的表达,并改善CBDL大鼠肝组织纤维化程度.

白花丹醌对CIA大鼠滑膜细胞增殖及TNF-α、IL-1β和MMP-3表达的影响

目的研究白花丹醌对脂多糖(LPS)诱导的体外培养CIA大鼠成纤维样滑膜细胞(CIA-FLS)的增殖及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)和基质金属蛋白酶-3(MMP-3)表达的影响。方法采用Ⅱ型胶原蛋白+弗氏完全佐剂建立大鼠关节炎模型(CIA);原代培养CIA-FLS,MTT法检测药物对CIA-FLS增殖的影响;随机设立CIA对照组、LPS对照组、甲氨蝶呤组、白花丹醌1.0μmol/L组、白花丹醌1.5μmol/L组、白花丹醌2.0μmol/L组;各药物与细胞共同孵育48 h后,ELISA法检测细胞培养上清液中TNF-α、IL-1β和MMP-3的含量;Western blot检测细胞内MMP-3的蛋白含量。结果 MTT显示,白花丹醌能不同程度抑制CIA-FLS的增殖,呈浓度和时间依赖性;与LPS对照组比较,甲氨蝶呤或白花丹醌均能明显下调细胞培养上清液中TNF-α、IL-1β和MMP-3的含量(P<0.001),明显降低细胞中MMP-3的蛋白含量(P<0.001)。结论白花丹醌能抑制CIA-FLS的增殖,并能通过下调TNF-α、IL-1β和MMP-3的表达而抑制LPS诱导CIA-FLS的炎症反应。

安宫牛黄丸通过诱导细胞凋亡和降低线粒体膜电位抑制肿瘤细胞增殖(英文)

目的观察安宫牛黄丸的抗肿瘤作用,并探索其可能的作用机制。方法安宫牛黄丸9,30,90,300和900 mg·L-1分别与人胃癌MGC-803和人肝癌BEL-7402细胞孵育24,48和72 h。采用噻唑蓝〔3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-5(3-羧基甲基苯基)-2-(4-磺酸苯基)-2H-四氮唑〕细胞毒实验MTS法和克隆实验观察安宫牛黄丸对MGC-803和BEL-7402细胞增殖的影响;应用Hoechst 33258/PI染色和流式细胞仪检测细胞凋亡;荧光分光光度计检测线粒体膜电位。结果安宫牛黄丸具有浓度依赖性地抑制肿瘤细胞增殖的作用。MTS法测定结果表明,安宫牛黄丸作用48和72 h对MGC-803细胞增殖具有抑制作用,浓度-效应相关系数分别为0.996(P=0.002)和0.756(P=0.024);与BEL-7402细胞作用48和72 h的浓度-效应相关系数分别为0.732(P=0.030)和0.702(P=0.037)。细胞克隆实验结果表明,安宫牛黄丸作用24 h可浓度依赖性地抑制MGC-803细胞(r=0.914,P=0.011)和BEL-7402细胞(r=0.871,P=0.024)克隆形成。Hoechst 33258/PI染色和流式细胞仪检测结果表明,安宫牛黄丸900 mg·L-1作用24 h可诱导MGC-803和BEL-7402细胞凋亡,细胞凋亡百分率分别达27.2%和19.7%。安宫牛黄丸900 mg·L-1作用后连续检测3 min,MGC-803和BEL-7402细胞的线粒体膜电位比对照组分别下降15.9%和15.0%。结论安宫牛黄丸具有抑制肿瘤细胞增殖的作用,其作用机制与诱导细胞凋亡和降低肿瘤细胞线粒体膜电位有关。