桂林地区中重型β珠蛋白生成障碍贫血患儿基因型与临床分析

目的探讨桂林地区儿童中间型和重型β珠蛋白生成障碍贫血(地贫)的基因型特点及其与临床的关系。方法运用PCR-反向斑点杂交法及多重PCR法确定患儿地贫基因型。结果共检出8种β和2种α地贫基因突变,患儿基因型包括4种β地贫纯合子、10种β地贫双重杂合子组合及αβ杂合子,除-28/-28、CD41-42/IVS-Ⅱ-654复合αα/--SEA、CD41-42/CD41-42复合αα/-α3.7、CD41-42/-28复合αα/--SEA表现为中间型β地贫外,余基因型均表现为重型地贫。结论β地贫临床症状轻重由其基因型决定,本组CD41-42(-TTCT)I、VS--Ⅱ654(C→T)、CD17(A→T)、-28(A→G)为桂林地区常见的β地贫基因突变类型。实用儿科临床杂志,2006,21(3)

桂林地区α地中海贫血的产前基因诊断

目的对桂林地区建卡的孕妇进行α地中海贫血筛查,对双方都是α地中海贫血携带者的夫妇进行产前基因诊断,以杜绝重型α地中海贫血患儿的出生。方法在孕16～24周时对高危孕妇行羊膜腔穿刺术获得胎儿细胞,运用多重PCR法确定胎儿α地中海贫血基因型。结果1574例建卡孕妇中,179例为α地中海贫血携带者,其中8例其配偶亦为α地中海贫血携带者,对这8对高危夫妇进行了产前诊断,其中HbBart’s胎儿水肿综合征(基因型:--SEA/--SEA)3例,α地中海贫血携带者(基因型αα/--SEA、αα/-α3.7)3例,正常(αα/αα)2例。结论运用分子生物学技术可快速、准确地确定α地中海贫血的基因型和进行产前诊断,达到优生优育的目的。

低出生体重儿与高血压关系的研究进展

近年来，高血压的发病率持续上升，我国目前大约有1．6亿高血压患者，高血压通过血管病变危害心、脑、肾、眼等器官，引起严重的并发症，是心脑血管疾病和肾病的重要危险因素，占我国慢性病死因第1位。由于全球高血压的高发病率及其对个人和国家造成的影响，越来越多证据提出：低出生体重儿会使血压生理性和病理性升高。这些发现给医疗和公共卫生事业提供了强大动力去思考“健康疾病起源学说”理论，并采取应对措施，以解决世界范围性的高血压造成的负担。

围产期肥胖对母婴近远期的影响

肥胖症已被世界卫生组织定义为全球范围的流行病，是一种由多因素引起的慢性代谢性疾病。肥胖症在全世界人群中的患病情况已呈流行趋势，并呈现低龄化趋势，对人体构成了严重的威胁，不管是哪个年龄阶段，它将是21世纪世界各国面临的最大公共卫生的挑战之一。

某些药物对大鼠双侧CCA结扎后脑内NE及卒中指数的影响

本文观察了某些药物对大鼠双侧颈总动脉结扎后脑内 NE 浓度及卒中指数的影响,结果发现 NE 耗竭剂利血平能使卒中症状显著加重(P<0.05);蛇毒抗栓酶和人参叶皂甙能使结扎动物脑内 NE 浓度较实验对照组显著升高(P<0.05),其卒中指数有下降的倾向或显著下降,提示蛇毒抗栓酶和人参叶皂甙可能通过影响 NE 代谢来改善脑缺血症状。

桂林市小细胞低色素红细胞症人群病因分析

目的调查桂林市患小细胞低色素红细胞症人群的病因。方法对桂林市634例经末梢血血细胞检查确定为小细胞低色素的人群采用电发光法检测其血清铁蛋白,全自动电泳仪进行其血红蛋白电泳,采用多重PCR法同时检测其--SEA、-α3.7、-α4.23种α珠蛋白生成障碍性贫血(地贫)基因缺失,采用PCR-反向斑点杂交法检测17种β地贫基因突变和HbCS/QS/WSα地贫点基因,采用直接测序法测定仍不能确诊的基因型。结果634例小细胞低色素红细胞症受检者中,分别检出各型α地贫271例(并铁缺乏8例),β地贫281例(并铁缺乏17例),铁缺乏56例,α地贫复合β地贫15例,HbE杂合子4例,-α4.2/αα复合高HbF(HbF分别为14.4%和31.4%)2例,单纯高HbF症2例,病因不明3例。地贫(包括各型α地贫、β地贫、αβ地贫、HbE、高HbF症)检出率为90.69%,铁缺乏检出率为12.78%,病因不明占0.05%。结论桂林市小细胞低色素红细胞症患者病因以地贫为主,在临床诊断、遗传咨询中应重视基因诊断,以避免漏诊和误诊。

自制珠蛋白生成障碍性贫血基因诊断阳性质控品用于室内质控的研究

目的探讨珠蛋白生成障碍性贫血基因诊断项目室内阳性质控品的制作方法及可行性。方法选取经血型测定、血常规、血红蛋白电泳、珠蛋白生成障碍性贫血基因检测及临床资料分别确诊为--SEA/αα、HbCS杂合子、CD41-42(-TTCT)杂合子的同血型血标本各5～10份,将同基因型的血标本混匀,作为阳性质控品,分装成每管0.1 mL,每次进行珠蛋白生成障碍性贫血基因检测时,取相应的阳性质控品与待测标本同时抽提DNA、PCR扩增、PCR产物分析,从而对珠蛋白生成障碍性贫血基因检测全过程进行质量监控。结果对近5 500余人次的血标本进行珠蛋白生成障碍性贫血基因检测过程中均使用了阳性质控品进行质量监控。在进行缺失型α-珠蛋白生成障碍性贫血基因检测时,有2次检测中均各有一待测标本无电泳条带,阳性质控品和其他待测标本均有电泳条带。点突变型α-珠蛋白生成障碍性贫血和β-珠蛋白生成障碍性贫血的检测过程中未出现失控。结论本阳性质控品制备方法简单、使用方便、成本低、结果稳定,达到对珠蛋白生成障碍性贫血基因诊断过程中有效质量控制的预期目的,适合在临床开展珠蛋白生成障碍性贫血基因诊断项目的实验室推广应用。

不同妊娠期骨代谢状况的研究

测定不同妊娠期孕妇血清及新生儿脐血游离钙（Ｃａ〕、骨型酸性磷酸酶（ＴＲ－ＡＣＰ）及碱性磷酸酶（ＡＬＰ），并与非妊娠妇女进行对照。结果显示：对照组、妊娠早中期组、妊娠晚期组及新生儿组游离Ｃａ分别为１．１６±０．０７、１．１３±０．０７、１．０９±０．１１、１．２５±０．０６ｍｍｏｌ／Ｌ，并随孕周增加而明显下降。新生儿组游离Ｃａ值显著高于妊娠晚期组（Ｐ＜０．０１）。提示：胎盘逆浓度主动转运游离Ｃａ，同时ＴＲ－ＡＣＰ、ＡＬＰ活性随孕周增加而升高，说明孕妇骨代谢非常活跃。

桂林地区少见β-珠蛋白生成障碍性贫血基因突变分析

目的分析桂林地区少见的β-珠蛋白生成障碍性贫血(β-地贫)的基因突变类型。方法收集2005年5月-2010年12月桂林地区11 941份检测血标本。男2 066例,女9 875例;年龄2个月～74岁。采用血细胞学检测红细胞平均容积和红细胞平均血红蛋白、血红蛋白电泳定量HbF、HbA2,初筛出β-地贫,PCR-反向斑点杂交同时检测17种中国人常见的β-地贫基因突变确定其基因型,对于常规基因检测不能确诊的基因突变,采用DNA直接测序法。结果 982例确诊为β-地贫的标本中,911例为轻型,71例为重型,共1 053条11号染色体携带了β珠蛋白缺陷基因,检出了24例6种少见的β-地贫基因突变,其中IVS-Ⅰ-1(G→T)10例,CD43(G→T)6例,CD27-28(+C)、CD37(TGG→TAG)各3例,CD31(-C)、-73(A→T)各1例。结论桂林地区β-地贫基因突变类型丰富,有明显的地域性,在地贫的诊断和产前诊断中应加以重视。

围产儿窒息与新生儿肺出血(附28例临床分析)

窒息是造成新生儿死亡及脑功能障碍的主要原因之一,已被临床医师所重视,而窒息所致新生儿肺出血,临床经过凶险,预后极差,尚未引起注意,现将我院1981年至1987年新生儿肺出血28例报告如下。临床资料1.性别与发病时日龄:本组病例男婴19例,女婴9例,男:女为2.1:1。发病日龄:0～4天12例,5～7天6例,8～14天6例,15～28天4例。其中一月内发病18例,占64.3%。2.孕周和入院时体重:胎龄低于37周14例,占50%,最低胎龄33周。38～42周14例,占50%。入院时体重在2500g 以下18例,占64.3%,体重在正常范围者10例,占35.7%。3.入院时原发病:以窒息和硬肿症为多,有的同时有两种疾病,见表1.

桂北地区166例HbH病患儿血液学参数和基因谱分析

目的研究桂北地区HbH病患儿的基因谱特点及不同基因型HbH病的血液学参数特点。方法根据临床表现、血细胞学检测、血红蛋白电泳确诊HbH病患儿166例,均来自桂北地区。Multi-PCR和PCR-反向斑点杂交确定基因型,对于经常规基因检测不能确诊的基因突变,采用直接DNA测序法。结果 166例确诊为HbH病的患儿中,共检出8种基因型,其中--SEA/-α3.782例,--SEA/-α4.240例,--SEA/αCSα38例,--SEA/αQSα1例,--SEA/αWSα1例,--SEA/αCD43/44(-C)α1例,--SEA/-α3.7复合CD17(A→T)1例,--SEA/-α4.2复合CD41-42(-TTCT)1例,另有1例为--SEA与未知基因突变的双重杂合子。实际可分析血液学参数的HbH病患儿有134例,其中2例Hb在正常范围,36例轻度贫血,90例中度贫血,6例--SEA/αCSα因合并感染而呈重度贫血;69例--SEA/-α3.7患儿Hb为62～120 g/L,31例--SEA/-α4.2患儿Hb为69～127 g/L,34例--SEA/αCSα患儿Hb为34～110 g/L。非缺失型HbH病组(基因型--SEA/αCSα)Hb低于缺失型HbH病组(基因型--SEA/-α3.7和--SEA/-α4.2)(P<0.05),MCV含量高于缺失型HbH病组(P<0.05)。结论桂北地区HbH病患儿基因谱丰富,以缺失型HbH病为主,并有明显的遗传异质性;非缺失型HbH病患儿的贫血程度较缺失型HbH病组重,但MCV值较缺失型HbH病组高。

血红蛋白氧合酶-1抑制剂锌原卟啉对高体积分数氧肺损伤早产大鼠的影响

目的探讨锌原卟啉(Znpp)对高体积分数氧(高氧)肺损伤早产大鼠的影响。方法出生3 d SD早产大鼠随机分为空气对照组(Ⅰ组),高氧对照组(Ⅱ组),空气加Znpp组(Ⅲ组),高氧加Znpp组(Ⅳ组)。Ⅱ组、Ⅳ组吸入氧体积分数≥900 mL/L,Ⅲ组和Ⅳ组每日腹腔注射Znpp 45μmol/(kg.d)。于实验第3、7天,分别检测其肺组织匀浆血红蛋白氧合酶-1(HO-1)活性、碳氧血红蛋白(HbCO)水平及支气管肺泡灌洗液TNF-α、总蛋白、丙二醛(MDA)水平,测定肺湿/干质量比值(W/D),光镜下观察其肺组织病理学变化。结果实验第3天,Ⅱ组早产大鼠HO-1活性、HbCO水平、肺W/D及TNF-α水平、总蛋白、MDA水平明显高于Ⅰ组(Pa<0.05,0.01);Ⅳ组HO-1活性、HbCO水平、肺W/D及TNF-α水平、MDA水平明显低于Ⅱ组(Pa<0.01,0.05);实验第7天,Ⅱ组HO-1活性、HbCO水平及TNF-α水平、总蛋白、MDA水平明显高于Ⅰ组(Pa<0.01);Ⅳ组HO-1活性、HbCO水平及TNF-α水平、总蛋白、MDA水平明显低于Ⅱ组(Pa<0.01,0.05)。第3天,Ⅱ组肺组织呈急性炎性反应性改变,Ⅳ组炎性反应减轻明显;第7天,Ⅱ组呈亚急性炎性反应性改变、肺间质纤维化、肺泡发育障碍等,Ⅳ组病理损害有所减轻。结论HO-1参与早产大鼠高氧肺损伤。Znpp可通过抑制HO-1活性,减轻早产鼠高氧肺损伤。

非缺失型α珠蛋白生成障碍性贫血杂合子及纯合子基因型与表型分析

目的对非缺失型α珠蛋白生成障碍性贫血(简称地贫)杂合子及纯合子的基因型和表型进行分析,并与缺失型α地贫作比较。方法对检测标本采用血常规、血红蛋白电泳、Multi-PCR法检测--SEA、-α3.7、-α4.2,PCR-反向斑点杂交法检测αCS、αQS、αWS。将非缺失型α地贫杂合子设为A组,α地贫2(-α3.7或-α4.2杂合子)设为B组,α地贫1(--SEA杂合子)设为C组,将3组平均红细胞容积(MCV)、平均红细胞血红蛋白(MCH)水平进行统计学分析。结果确诊的28例非缺失型α地贫中,24例为杂合子,临床表现为静止型-轻型,3例为αCSα/αQSα,1例为αCSα/αWSα,临床表现为轻型-中间型;B组、C组分别为53例和51例。共检出32条非缺失型α地贫的等位基因,其中αCS15条,αQS15条,αWS2条。3组MCV比较:A组与B组t=4.700 8,P=0.000 0;A组与C组t=8.333 2,P=0.000 0;B组与C组,t=16.189 7,P=0.000 0。3组MCH比较:A组与B组t=3.810 2,P=0.000 3;A组与C组t=7.610 2,P=0.000 0;B组与C组,t=15.759 2,P=0.000 0。结论αCS、αQS、αWS是桂林地区常见的非缺失型α地贫基因突变类型,其表型较α地贫2明显,在临床诊断和遗传咨询中应加以重视。

不同铁状态对血红蛋白A_2的影响

目的研究不同铁状态对Hb电泳时HbA2的影响,确定影响HbA2的铁临界值。方法以2008年5月-2009年5月在桂林医学院附属医院儿科门诊和产科门诊就诊的330例患者为研究对象,研究对象均进行血液学检查,免疫荧光法测定其血清铁蛋白(SF),Hb电泳并定量测定其HbA2值,珠蛋白基因检测排除常见的3种缺失型、3种点突变型α珠蛋白生成障碍性贫血和17种常见的点突变型β珠蛋白生成障碍性贫血。根据SF水平,将330例标本分为A组304例(SF≥12μg.L-1)、B组26例(SF<12μg.L-1)、C组297例(SF≥20μg.L-1)、D组33例(SF<20μg.L-1),并应用SPSS12.0软件进行统计分析。结果将4个相关组HbA2值进行比较,其中A组与B组比较(t=3.6939,P<0.05)、C组与D组比较(t=4.1517,P<0.05),差异均有统计学意义,B组与D组比较差异无统计学意义(t=0.0464,P>0.05)。结论铁缺乏会影响Hb电泳时HbA2的值,SF<20μg.L-1可以作为Hb电泳时影响HbA2的临界值,而非诊断缺铁性贫血时的SF<12μg.L-1。

铁缺乏对轻型β-珠蛋白生成障碍性贫血血红蛋白A_2水平的影响(英文)

目的研究铁缺乏对β-珠蛋白生成障碍性贫血(β-地贫)患者血红蛋白A2(HbA2)的影响。方法标本来自2008年5月-2010年5月在桂林医学院附属医院儿科、产科门诊及重型β-地贫家系,对所有标本进行血常规检查、血红蛋白电泳并定量测定HbA2值、免疫荧光法测定血清铁蛋白(SF)、Multi-PCR法确定3种缺失型α-地贫基因突变、PCR结合反向斑点杂交法确定17种β-地贫基因突变。结果 408份标本中,A组304例,B组26例,C组56例,D组22例,将各组进行计量资料两样本均数的比较,其中A组与B组比较q=5.074 7,P<0.05,A组与C组比较q=37.650 8,P<0.05,A组与D组比较q=16.043 0,P<0.05,C组与D组比较q=7.682 9,P<0.05,B组与D组比较q=15.806 6,P<0.05。4组的SF和HbA2的相关性检测均无显著性差异。结论 1.铁缺乏会使健康人和轻型β-地贫患者血红蛋白电泳时HbA2值下降;2.轻型β-地贫合并铁缺乏时HbA2值较单纯轻型β-地贫下降显著,但仍较健康人群高,差异有统计学意义,可见即使合并铁缺乏,HbA2仍可以作为临床诊断轻型β-地贫的可靠指标。

新生儿早开奶的影响因素分析

目的了解新生儿早接触、早吸吮和早开奶的情况,并分析其影响因素。方法采取问卷调查和查阅病历的方法收集321例母亲及新生儿的资料。结果新生儿半小时内早接触、早吸吮和早开奶的共有277例,占86.3%。单因素分析结果显示,早开奶与家庭住址,母亲受教育水平,父亲受教育水平,妊娠周数,分娩方式,产时并发症和婴儿出生体重有关。多因素Logistic回归分析结果显示,产时并发症,妊娠周数和婴儿出生体重是早开奶独立的影响因素。结论新生儿早开奶比例有待提高,应结合其影响因素,加强宣传教育和干预工作。

银杏叶制剂对高氧暴露早产鼠肺组织血红素加氧酶-1表达的影响

目的探讨血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)在高氧暴露早产鼠肺组织中的表达及银杏叶制剂(舒血宁)对HO-1 mRNA及HO-1蛋白表达的影响,为舒血宁防治早产儿高氧肺损伤提供理论依据。方法3日龄早产鼠随机分为高氧组、空气组和高氧+舒血宁组3组,于实验3 d及7 d时,分别用半定量反转录-聚合酶链反应法和免疫组织化学法检测各组早产鼠肺组织HO-1 mRNA的表达水平和HO-1蛋白质表达水平。结果实验第3天,空气组HO-1 mRNA、HO-1蛋白均有微弱表达;与空气组相比,高氧组HO-1 mRNA表达明显高于空气组(P<0.01),HO-1蛋白仅在巨噬细胞表达弱阳性(P<0.05);与高氧组相比,舒血宁+高氧组HO-1 mRNA的表达明显下降(P<0.01),但仍然高于空气组(P<0.05),HO-1蛋白弱阳性表达(P>0.05)。实验第7天,各组HO-1 mRNA均未见表达。空气组HO-1蛋白极微弱或无表达,高氧组HO-1蛋白在巨噬细胞呈强阳性表达,明显高于空气组(P<0.01);舒血宁+高氧组HO-1蛋白的表达较高氧组明显下降(P<0.01),但仍然高于空气组(P<0.01)。结论HO-1可能参与了早产鼠高氧肺损伤,舒血宁能够下调高氧暴露早产鼠肺组织中HO-1的表达水平。

HbA2正常的β地中海贫血携带者基因突变分析

目的对血红蛋白电泳时HbA2在正常范围内的β地中海贫血的基因突变类型进行分析。方法对所有的标本进行血常规、血红蛋白电泳,PCR-反向斑点杂交同时检测17种中国人常见的β地中海贫血基因突变确定其基因型,对于经常规基因检测不能确诊的基因突变,采用直接测序法。结果 1084例确诊为轻型β地中海贫血的标本中,血红蛋白电泳时1018例HbA2≥3.5%,占93.91%,66例<3.5%,占6.09%,这66例轻型β地中海贫血有9种基因突变类型,分别为:CD41-42(-TTCT)35例、CD17(A→T)15例、IVS-Ⅱ-654(C→T)4例、-28(A→G)4例、CD71-72(+A)3例、CD43(G→T)2例、IVS-Ⅰ-1(G→T)1例、-29(A→G)1例、CD31(-C)1例。结论血红蛋白电泳时HbA2在正常范围内并不能完全排除轻型β地中海贫血,轻型β地中海贫血的诊断需结合血常规、血红蛋白电泳、基因检测等综合分析,以避免漏诊、误诊。

过氧化物酶增殖激活受体γC161T基因多态性与低出生体质量新生儿的关系

目的探讨基因过氧化物酶增殖激活受体(PPAR)γC161T多态性对低出生体质量新生儿的影响。方法用横断面调查法,使用统一的调查表,对入住本院分娩的孕妇及其单胎、活胎的低出生体质量儿和健康对照新生儿进行调查,共得到有效样本268个母亲-新生儿对,并根据出生体质量和孕周进行分组,分为健康对照组和低出生体质量组,其中低出生体质量组包括早产儿组和小于胎龄儿组。使用多聚酶链-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测其外周血基因PPARγC161T单核苷酸多态性,分析不同基因型对其低出生体质量的影响。结果 1.根据双变量Logistic回归分析得出低出生体质量与父母的受教育水平、职业、家庭居住环境和氛围及维生素的补充相关,相关系数分别为-0.434、-0.337、-0.343、-0.269、-0.691、0.296、0.235。2.PPARγC161T多态性CC型、CT型与TT型基因频率分布在健康对照组、小于胎龄儿组和早产儿组分别为53.33%、14.44%、21.11%,75.00%、18.18%、6.82%和76.67%、20.00%、3.33%,早产儿组和小于胎龄儿组比较均无统计学差异,但与健康对照组比较均有统计学差异。携带C等位基因增加低出生体质量的风险,低出生体质量组携带CC基因型风险与健康出生体质量儿的OR值分别为1.938(95%CI:1.001～3.750,P=0.002)、2.122(95%CI:1.091～4.127,P=0.000)。结论低出生体质量是环境和遗传因素共同作用的结果,PPARγC161T多态性与低出生体质量有关,C等位基因可能是低出生体质量的遗传易感基因。

P53基因多态性及环境因素与低出生体重儿的关系

【目的】探讨新生儿P53基因多态性及环境因素与低出生体重儿之间是否存在关联。【方法】采用病例对照研究方法,收集母亲和新生儿资料,并根据新生儿出生体重和孕周进行分组,分为健康对照组和低出生体重组,其中低出生体重组包括早产儿组和小于胎龄儿组。使用多聚酶链-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测其外周血p53基因的2个多态性位点p53codon72、p53PIN3(rs1042522,rs17878362)并比较各自的基因型和等位基因的分布频率。【结果】1)多因素非条件Logistic回归分析显示低出生体重儿的发生与胎儿性别、产妇文化程度、产前检查和居住地有关,回归系数分别为-0.710、1.055、0.825、-0.676。2)p53codon72位点基因型总体分布差异有统计学意(χ2=19.182,P=0.001),而p53PIN3位点的基因型总体分布差异没有统计学意义(χ2=0.566,P=0.754)。p53codon72位点Pro/Pro基因型在早产儿组和小于胎龄儿组的分布明显高于健康对组,其两组携带Pro/Pro基因型风险与健康对照组的OR值分别为2.317(95%CI:1.290～4.162,P=0.002)、2.805(95%CI:1.599～4.919,P=0.000)。【结论】遗传和环境因素及其交互作用在低出生体重儿的发生中均起着重要的作用。p53codon72位点多态性与低出生体重遗传易感性存在相关性,Pro等位基因可能是低出生体重的遗传易感基因。