人呼吸道合胞病毒及其疫苗研究进展

人呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus,RSV）是引起婴幼儿支气管炎和肺炎的主要病原体.虽然已经过半个多世纪的研究,但至今仍没有安全有效的RSV疫苗上市.科研人员经过几十年的努力,对RSV的分子生物学、流行病学、致病机制等方面的研究已取得重大进展.此文就RSV的病毒学特征、流行病学和疫苗研发策略做一综述.

呼吸道合胞病毒反向遗传系统中辅助质粒的构建

目的 构建可用于表达呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus,RSV）反向遗传操作中所需的4个功能性结构蛋白的辅助质粒.方法 利用RT-PCR扩增RSV Long株的核蛋白（N）、磷蛋白（P）、大蛋白（L）及转录延长/终止抑制因子M2-1基因.将N、P、M2-1基因PCR产物双酶切后连接表达载体pCI;L基因分两段扩增并分别与pMD 19-T simple载体连接,再先后切下与pCI连接.将构建得到的4个辅助质粒测序并转染Veto细胞,通过间接免疫荧光法检测相应蛋白的表达.结果 扩增得到N、P、M2-1和L4个结构蛋白基因,相应构建的辅助质粒经序列测定,与GenBank公布的RSV Long株序列完全一致;间接免疫荧光法检测表明,N、P、M2-1能在Vero细胞中表达.结论 在分子水平构建了RSV反向遗传学研究中所需的4个辅助质粒,并成功表达出3个结构蛋白.