拟穴青蟹池塘生态育苗技术研究

近年来,青蟹养殖业在我国出现蓬勃发展的势头,养殖面积约35万亩,年产量超过15万吨(中国渔业统计年鉴,2018)。然而,与中华绒螯蟹人工苗占95%和梭子蟹人工苗占70%的养殖现状相比,青蟹养殖所用的苗种几乎全部来源于海区中的天然苗。由于天然苗具有数量和质量不稳定,且易携带病菌等诸多不利因素,因而严重制约了养殖规模的扩大,因此,开展青蟹苗种规模化繁育技术研究是保障养殖业可持续发展的关键。

黄斑蓝子鱼LC-PUFA合成代谢与渗透压调节的关系研究

为探讨黄斑蓝子鱼(Siganus canaliculatus)长链多不饱和脂肪酸(long-chain polyunsaturated fatty acids,LC-PUFA)合成代谢与渗透压调节的关系,本研究以鱼油(FO)和混合植物油(苏子油与双低菜籽油,VO)为脂肪源配制两种等氮等脂饲料,投喂饲养在3种盐度(10、20和32)下的黄斑蓝子鱼幼鱼8周后,分析了各处理组幼鱼的生长性能和鳃的磷脂脂肪酸组成、Na+/K+-ATPase(NKA)活力及其基因表达。结果显示,相同盐度下,VO组和FO组鱼的生长性能差异不显著(P>0.05);FO组鱼鳃磷脂中的n-3 LC-PUFA含量显著高于VO组(P<0.05),但VO组鱼的n-6 LC-PUFA水平显著高于FO组(P<0.05);VO组鱼鳃的NKA酶活力及其m RNA表达量都显著高于FO组(P<0.05)。不同盐度下,无论VO组还是FO组的鱼,盐度10组鱼的生长性能显著低于盐度20和32组(P<0.05),而其鳃的LC-PUFA含量、NKA酶活力及其m RNA表达量都显著高于盐度20和32组(P<0.05),各指标在后两个盐度组之间差异不显著(P>0.05)。由此可见,盐度10对黄斑蓝子鱼具有一定的胁迫性,导致其生长性能较差。摄食鱼油脂肪源饲料,可以提高鱼鳃磷脂的n-3 LC-PUFA水平;而摄食植物脂肪源饲料时,鱼体可能通过自身合成的n-6LC-PUFA调控鳃的NKA基因表达及其酶活力以调节渗透压。

鱼类LC-PUFA合成代谢调控机制研究进展

鱼类是人体获取优质蛋白、特别是LC-PUFA的主要食物来源,人类对水产品需求的增加将主要依赖于水产养殖.然而,鱼油资源短缺、价格昂贵严重制约水产养殖业的可持续发展.弄清鱼类LC-PUFA合成代谢的调控机制,有助于解决在水产饲料中利用植物油替代鱼油存在的不良效果问题,降低或摆脱水产养殖对鱼油的依赖.本文主要从转录水平、转录后水平、表观遗传水平等方面,对鱼类LC-PUFA合成代谢调控机制方面的研究进展进行综述,以期为该领域的研究工作者提供参考.

金鼓鱼幼鱼对蛋白质的适宜需要量研究

为确定金鼓鱼（Scatophaus Jargus）日粮中蛋白质的适宜添加量，作者以酪蛋白为蛋白源、鱼油为脂肪源，配制脂肪水平为8％，蛋白水平分别为24％、28％、32％、36％、40％的5种配合饲料（D1-D5）．在海上网箱中以初始体质量为4.3g左右的幼鱼开展养殖实验。8周后，测定实验鱼增质量率、特定生长率、蛋白质效率、饲料系数、消化酶和一些免疫及抗氧化指标。结果显示，随着饲料蛋白水平的升高，金鼓鱼的增质量率、特定生长率、蛋白质效率等均呈现先上升后下降的趋势，以D3组最高，3项指标均显著高于Dl、D2组；饵料系数呈现先下降再上升趋势，以D3组最低，且显著低于D1、D2组。饲料蛋白水平也显著影响金鼓鱼的相关生理生化指标，其中D3和D4组的全鱼蛋白含量、消化道蛋白酶活性和一些免疫抗氧化指标最高，全鱼脂肪含量最低。根据饲料蛋白含量与增质量率的线性回归分析，确定金鼓鱼幼鱼饲料中的适宜蛋白水平为35％。

磷酸三(2,3-二氯丙基)酯暴露诱发NRK-52E细胞纤维化的体外研究

自2004年禁止使用五溴联苯醚混合物阻燃剂以来,有机磷阻燃剂(organophosphorus flame retardants,OPFR)作为替代品开始被广泛生产和使用,因而成为当今阻燃剂研究的热点。目前,有机磷阻燃剂在水体环境及生物体中已有较高的检出率,而其对生物体及生态环境的潜在毒性效应还知之甚少。本研究利用磷酸三(2,3-二氯丙基)酯(tri(2,3-dichloropropyl)phosphate,TDCPP)对大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)的毒性暴露实验,探讨TDCPP潜在的肾脏毒性。结果表明:一定剂量的TDCPP对NRK-52E的细胞活性有抑制作用,能诱导细胞内活性氧自由基(reactive oxide species,ROS)生成量增加,并触发上皮-间充质转换(epithelial-mesenchymal transition,EMT)及胞外基质沉积因子如波形蛋白(vimentin)、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、胞外基质成分纤连蛋白-1(fibronectin-1,FN-1)等基因mRNA表达的显著上调以及上皮细胞钙粘蛋白(E-cadherin)等基因mRNA表达的显著下调。上述研究结果表明,TDCPP可促进NRK-52E细胞发生上皮间充质转化及纤维化。本研究为进一步综合评估TDCPP的生物和环境毒理效应提供了基础实验数据。

鱼类高度不饱和脂肪酸合成的影响因素及其机理

由于海水鱼类的高度不饱和脂肪酸(HUFA)合成能力一般缺乏或很弱,所以其配合饲料中需要添加较高比例富含HUFA的鱼油才能满足其正常生理功能的需要。随着鱼油资源的日益紧缺,研究者们试图寻找提高鱼体内源性HUFA合成能力的方法或途径,以提高配合饲料中植物油替代鱼油的比例,而HUFA合成调控机制的阐明将有助于达到此目的。本文着重介绍影响鱼类HUFA生物合成的主要因素及其作用机理,包括不同脂肪源、日粮中n-3/n-6多不饱和脂肪酸(PUFA)比例、维生素和矿物质等营养因子,温度、盐度、光周期等环境因子,以及转录因子、激素与遗传因子等,以期为鱼类HUFA合成调控机制的深入研究提供参考。

饲料中添加浒苔对黄斑蓝子鱼生长性能与生理生化指标的影响

试验用黄斑蓝子鱼（Siganus canaliculatus）幼鱼捕白汕头大学南澳临海试验站附近海域，在海上网箱中暂养半个月后将其转入室内水族缸（容积200L）中驯养2周，饵料为自制配合饲料。新鲜浒苔（Enteromorpha prolifera）从汕头市南澳县盐田采得，用水清洗后晒干，经小型粉碎机粉碎，过60目筛，制成海藻干粉。选取体质量约23g黄斑蓝子鱼进行试验。在蛋白水平32％、脂肪水平8％的情况下，配制6种配合饲料，其中3种饲料分别添加5％、10％和15％的浒苔干粉，另2种添加10％、15％浒苔的饲料中还添加0．2％非淀粉多糖酶（NSP酶），对照组饲料不添加浒苔。养殖试验周期为8周。结果显示：与对照组相比，5％浒苔组鱼的生长性能不受影响（P〉0．05），但10％和15％浒苔组鱼的生长性能显著降低（P〈0．05）；然而，在添加0．2％NSP酶的情况下，10％和15％浒苔组鱼的生长性能与对照组相比无显著差异俨〉0．05）。各饲料组鱼的成活率及全鱼的水分、蛋白、脂肪、灰分含量无显著差异（P〉0．05）。与对照组鱼相比，浒苔饲料组鱼肝和肌肉中的过氧化氢酶及谷胱甘肽过氧物酶的活性增高，丙二醛含量降低。结果表明，黄斑蓝子鱼配合饲料中浒苔的添加比例可达5％；在加入一定量NSP酶的情况下，其添加比例可达10％～15％。饲料中添加适当比例的浒苔可提高鱼体的抗氧化能力。本研究旨在探讨浒苔作为黄斑蓝子鱼配合饲料原料加以利用的可行性，为浒苔资源开辟一条有效的利用途径，并为研发高效、低成本蓝子鱼配合饲料提供指导和依据。

不同类型饲料对黄斑篮子鱼幼鱼生长及肌肉蛋白质和脂肪酸组成的影响

本研究旨在通过比较不同饲料对黄斑篮子鱼(Siganus canaliculatus)的生长性能和肌肉营养成分的影响,为开发基于以低值海藻为原料的篮子鱼配合饲料提供依据。选用浒苔(Enteromorpha prolifra)和龙须菜(Gracilaria lemaneiformis)以及冰鲜鱼、配合饲料(自制)等4种饲料投喂黄斑篮子鱼8周。结果显示:生长效果以配合饲料组最好,海藻组最差。不同饲料对鱼体的生化成分有明显影响。配合饲料组和冰鲜鱼组全鱼的蛋白和脂肪含量明显高于海藻投喂组,而冰鲜鱼组全鱼的灰分含量明显低于其它3组。从肌肉必需氨基酸和半必需氨基酸占总氨基酸的比例来看,龙须菜组明显高于其它3组,尤以精氨酸和组氨酸的含量最为明显;配合饲料组鱼肌肉的n-3/n-6多不饱和脂肪酸含量明显高于其它各组,而浒苔组鱼肌肉中多不饱和脂肪酸的含量显著高于其它各组。以上结果说明,结合海藻和配合饲料各自在生长或肌肉营养成分上的优点,可望开发出基于此类低值海藻原料的低成本黄斑篮子鱼配合饲料。

三种紫菜叶状体对高温胁迫的生理响应

文章以中国南方常见的紫菜属物种长紫菜Pyropia dentata、坛紫菜P.haitanensis和皱紫菜P.crispata叶状体为研究对象,通过测定藻体叶绿素a、类胡萝卜素、藻红蛋白和藻蓝蛋白含量,以及光化学量子产量、总抗氧化能力和二苯基苦基苯肼(diphenyl picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率,研究了这三种紫菜对高温胁迫(26、29、32℃)的生理响应。研究结果显示,高温胁迫造成了三种紫菜色素含量的降低,藻体外观逐步出现了发红、发白、变透明的现象;高温导致了三种紫菜最大光化学量子产量和实际光化学量子产量的下降,29℃和32℃下的降低更是达到了极显著水平;长时间(>3d)的高温胁迫也导致了紫菜总抗氧化能力和DPPH自由基清除能力的降低:32℃下,坛紫菜和长紫菜在第3d就开始死亡,皱紫菜也无法存活6d。相对而言,皱紫菜耐高温能力最强,长紫菜次之,而坛紫菜受高温胁迫的伤害程度则最严重,可见皱紫菜和长紫菜具有在中国南方沿海推广栽培的潜力和优势。

石莼饲料中添加非淀粉多糖酶对黄斑蓝子鱼(Siganus canaliculatus)生长以及肌肉营养成分的影响

为探讨酶制剂是否有助于提高黄斑蓝子鱼(Siganus canaliculatus)对石莼(Ulva pertusa)海藻饲料的消化利用率,在总蛋白水平为32%、总脂肪水平为8%情况下配置6种饲料,其中两个对照组(未添加石莼为C1、添加15%石莼为C2)、4个实验组,饲养黄斑蓝子鱼幼鱼56 d,通过比较鱼的生长性能、消化道消化酶的活性及饲料的表观消化率等,以确定酶制剂的效果及其适宜添加量。结果显示,4种实验饲料养殖的黄斑蓝子鱼在增重率、特定生长率、蛋白质效率等方面均优于C2对照组,与C1对照组无显著差异(T4实验组的蛋白质效率除外)(P>0.05)。全鱼生化成分及胃、前肠、肝脏的蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性在各组之间无显著差异(P>0.05)。实验组鱼对饲料中蛋白质的表观消化率显著高于C2对照组(P<0.05)。添加石莼组鱼肌肉中除多不饱和脂肪酸18:2n6、20:5n3、22:5n3和必需氨基酸Met、Tyr含量显著降低(P<0.05)以及Glu与His氨基酸含量显著升高(P<0.05)外,无其他显著变化。结果表明,石莼饲料中添加非淀粉多糖酶可提高黄斑蓝子鱼的生长效果和饲料利用率,且对鱼肉品质无较大影响。

地表水中甲醛的光谱吸收曲线-线性拟合斜率-乙酰丙酮分光光度法检测

光谱吸收曲线-线性拟合斜率-分光光度法(SAC-LFS-S)用于检测地表水中甲醛尚存准确度不足问题,通过筛选合适的参比波长段,使SAC-LFS-S法准确度进一步提高。以试剂空白和浊度梯度地表水样品的检测结果及方法检出限为主要筛选对象,得到425~435、420~435、420~440、415~440、415~445、410~445、415~450、410~450、455~495、410~455、405~455、450~500 nm等共12个合适的测定波长段;再选择试剂空白结果较低、批间重复性较好的450~500 nm测定波长段,筛选参比波长段(455~465、480~495、450~490 nm共3个)。结果表明:优化后SAC-LFS-S法线性范围为0. 100~3. 00 mg/L,方法检出限为0. 025~0. 033 mg/L;优化前、后方法测得部分地表水样品结果分别为有检出和未检出,回收率为73. 4%~108. 8%,后者与无亮黄色化合物产生的实验现象更吻合。经参比波长段校正的SAC-LFS-S法具有更高的准确度,非常适用于地表水中甲醛的直接测定。

韩江滤后水不同消毒过程无机副产物生成特性

以某自来水厂滤后出水为原水,研究6种不同消毒过程消毒剂余量衰减和无机副产物生成情况。结果表明,在相同有效氯投加量下,NaClO、O^+3NaClO、NaClO/UV工艺在60 min余氯的质量浓度分别为0.62、0.22、0.14 mg/L;在相同臭氧投加量下,60 min剩余臭氧含量依次为:O3>O^+3NaClO>O3/UV;O^+3NaClO组合消毒过程同时存在余氯和剩余臭氧2种消毒剂余量;NaClO溶液极不稳定,久置NaClO消毒出水ClO^-3和BrO^-3含量分别超标13倍和3.4倍;O3工艺出水甲醛和BrO^-3的生成量随臭氧投加量的增加而增加;UV工艺出水NO^-2的生成量随NO^-3初始含量的增加而增加;相比单独消毒工艺,组合工艺可降低无机消毒副产物的生成量。

监测环境水样中总铬和铬(Ⅵ)的相关标准、规范存在问题及修订建议

日常工作发现,现行标准、规范在总铬、铬(Ⅵ)水质样品的采集、保存和监测环节存在不一致或不科学的问题。建议总铬、铬(Ⅵ)水质样品均采用非玻璃材质的采样容器和保存容器;1 000mL总铬样品中添加入10mL硝酸进行保存;鉴于铬(Ⅵ)样品的复杂性,其保存条件及保存期建议重新研究确定;排放标准中,污染物配套检测方法的规定不宜过于死板;采用二苯碳酰二肼分光光度法检测总铬和铬(Ⅵ)时,针对浊度、还原性物质、氧化性物质等干扰物的预处理需进一步完善。建议水质现行标准、规范在颁布实施后,长期公开征求修改建议并作相应修订。

DB-5MS石英毛细管色谱柱用于常见挥发性有机物检测

总结了目前常用于几十种挥发性有机物(VOCs)同时检测的色谱柱;对比了DB-624和DB-5MS型石英毛细管色谱柱分离目标物的优缺点,发现对二甲苯和间二甲苯在DB-624型色谱柱中,色谱峰完全重叠,而在DB-5MS色谱柱中可实现一定分离。相对于0.25μm固定相厚度的DB-5MS型色谱柱,固定相厚度增加至0.5μm更有利于有效分离目标物,更有利于目标物的独立定性和定量分析;针对部分VOCs在DB-5MS中出现色谱峰分离不理想的现象,可选用特征离子作为定性和定量离子。因此,固定相厚度为0.5μm的DB-5MS型色谱柱,可替换DB-624色谱柱用于VOCs检测,其同时兼顾了测定半挥发性有机物(SVOCs)的能力,可实现一台气相色谱-质谱联用仪用于几十种VOCs和SVOCs检测,而无需更换色谱柱。

黄斑蓝子鱼CRH基因的克隆及其在浅水应激后的mRNA表达

鱼类应激时主要启动两种生理反应系统,即"交感-嗜铬组织"系统/和/或"下丘脑-垂体-肾间组织轴"(HPI轴)系统.在实际生产操作中,鱼类容易受到浅水暴露应激.为了探讨黄斑蓝子鱼在受到浅水应激后HPI轴是否被激活,本研究克隆了下丘脑中启动HPI轴活性的关键因子—促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)的基因,并检测其在应激前和受到浅水应激后不同时间点(0、20、40、60、80 min)的mRNA水平.结果显示,CRH前体的cDNA全长为1025 bp,编码170个氨基酸(aa),分别由一个信号肽(24个aa)、一个功能未知保守区(13个aa)和一个成熟肽(41个aa)组成;该CRH前体和成熟肽与其他鱼类的相应肽分别具有62%-98%和78%-100%的序列相似性.当鱼体受到短暂(4 min)浅水应激后80 min内,脑中CRH mRNA水平在应激前后无显著变化(P>0.05),说明黄斑蓝子鱼在受到急性浅水应激后可能主要启动"交感-嗜铬组织"系统而不是HPI轴.

金鼓鱼幼鱼对脂肪的适宜需要量

为确定金鼓鱼(Scatophagus argus)日粮中脂肪的适宜添加量,以鱼油为脂肪源,配制脂肪水平分别为3%、6%、9%、12%、15%的5种等氮的配合饲料(F1~F5),在海上网箱中对初始体质量为4.3g左右的幼鱼进行为期8周的养殖试验,测定其生长、免疫与抗氧化指标、内源性消化酶活性等。结果显示,增重率、特定生长率以饲料脂肪水平为9%的F3组最大,与饲料脂肪水平为12%和15%的两试验组间没有显著差异;蛋白质效率以饲料脂肪水平为12%的F4组最大,在F2~F5组间没有显著差异;饵料系数以饲料脂肪水平为9%的F3组最低,在F2~F5组间没有显著差异,其变化趋势与上述3个指标相反;肝体比随饲料脂肪水平的升高而不断上升,饲料脂肪水平为15%的F5组鱼的肝体比显著大于F1和F2组。饲料脂肪水平也显著影响金鼓鱼的粗脂肪、粗蛋白、灰分及水分含量。当饲料脂肪水平为9%时,金鼓鱼胃和肠道的脂肪酶活性较高,且肠道和肝脏的免疫与抗氧化指标较好。根据饲料脂肪含量与金鼓鱼的增重率、饵料系数分别作曲线回归分析,确定金鼓鱼饲料脂肪的适宜添加量为8.6%~11.0%。

监测环境水样中总铬和铬(Ⅵ)的相关标准、规范存在问题及修订建议

日常工作发现,现行标准、规范在总铬、铬(Ⅵ)水质样品的采集、保存和监测环节存在不一致或不科学的问题。建议总铬、铬(Ⅵ)水质样品均采用非玻璃材质的采样容器和保存容器;1 000mL总铬样品中添加入10mL硝酸进行保存;鉴于铬(Ⅵ)样品的复杂性,其保存条件及保存期建议重新研究确定;排放标准中,污染物配套检测方法的规定不宜过于死板;采用二苯碳酰二肼分光光度法检测总铬和铬(Ⅵ)时,针对浊度、还原性物质、氧化性物质等干扰物的预处理需进一步完善。建议水质现行标准、规范在颁布实施后,长期公开征求修改建议并作相应修订。

浅水应激后黄斑蓝子鱼生理指标变化及牛磺酸的抗应激作用

研究报道黄斑蓝子鱼受到短暂(4min)浅水应激后鱼体相关应激指标的变化及应激后20、40、60、80min时的恢复情况,以及牛磺酸的抗应激作用。结果表明,浅水应激后,该鱼血清肾上腺素浓度显著升高(P<0.05),从应激前的(2.00±0.22)ng/mL达到应激后的(15.12±1.04)ng/mL,之后逐渐恢复到应激前水平;皮质醇和胆固醇浓度没有显著性变化(P>0.05);葡萄糖浓度在应激后20min达到最大值(7.10±0.38)mmol/L,是应激前(2.15±0.02)mmol/L的约3.5倍(P<0.05)。应激后60min时,脑中HSP70 mRNA的表达量达到最大值,为应激前的11.54倍(P<0.05)。0.02‰牛磺酸浸泡能够显著降低蓝子鱼应激后的血清肾上腺素和葡萄糖水平以及脑HSP70 mRNA表达量(P<0.05)。结果说明,交感神经-嗜铬组织系统可能是黄斑蓝子鱼的急性应激途径之一,鱼体通过释放肾上腺素来提高血糖浓度以满足应激时的能量需求,同时通过提高细胞HSP70的表达水平来增强鱼体的保护作用;牛磺酸具有一定的抗应激作用。

三氯卡班可以影响肾小管上皮细胞的屏障功能

三氯卡班(TCC)是一种被广泛应用于个人护理用品中的广谱型亲脂性杀菌剂,已在多种环境介质和生物体中检出。因其潜在的环境蓄积、生物累积和生物毒性效应,日益受到学者们的关注。借助TCC对NRK-52E(大鼠肾小管上皮细胞)的毒性暴露实验,通过检测细胞活力、以及与跨膜电阻和紧密连接相关的连接黏附分子1(JAM^(-1),junctional adhesion molecule 1)的蛋白表达水平,研究了TCC潜在的肾脏毒性效应。结果显示,10μmol·L^(-1)TCC处理48 h时培养细胞呈现不规则的集落;10μmol·L^(-1)和20μmol·L^(-1)TCC处理NRK-52E 24 h、48 h和72 h后可以显著抑制细胞生长;3.57μmol·L^(-1)TCC(生长抑制的48 hIC20)处理NRK-52E 48 h可以显著抑制细胞间紧密连接蛋白JAM^(-1)的表达量,并降低跨膜电阻,影响肾脏的屏障功能。本研究的结果能够为进一步揭示TCC对动物的毒害机制、评估其对动物的健康风险提供数据支持。

三种非淀粉多糖酶对几种海藻的体外消化效果比较

研究旨在为比较纤维素酶、木聚糖酶、β-葡聚糖酶等非淀粉多糖酶对石莼(Ulva Pertusa)、龙须菜(Gracilaria lemaneiformis)、浒苔(Enteromorpha Linza)等海藻的酶解效果和其在藻粉中适宜添加量。首先采用不同浓度的单酶进行体外消化实验,得到单酶适宜添加量后按照单酶适宜添加量的25%、50%、75%和100%进行混合酶解实验。单酶消化实验结果得出每克藻粉中纤维素酶、木聚糖酶和β-葡聚糖酶的单独适宜添加量,石莼分别为120、80、160 U/g;龙须菜分别为160、160、240 U/g;浒苔分别为160、120、160 U/g。混合酶解结果显示,按3种单酶适宜添加量的75%混合时可达到最佳消化效果,即3种酶混合适宜添加量在石莼、龙须菜、浒苔的藻粉中分别为90 U/g+60 U/g+120 U/g、120 U/g+120 U/g+180 U/g、120 U/g+90 U/g+120 U/g。结果说明3种酶对石莼和龙须菜有着较好的酶解效果,对浒苔的酶解效果相对较差。