基于“生效熟增”论探讨酸枣仁炮制方法历史沿革及其镇静催眠作用物质基础

酸枣仁是中医临床上养心安神的常用药,其炮制方法历史沿革悠久。古有"逢子必炒"理论,即种子类中药一般需经炒制后入药。酸枣仁作为一味种子类中药,其炮制方法历经净制、去皮、蒸制、加辅料炒等,到现代最主要为清炒。古籍中记载生酸枣仁多用于治疗多眠、好眠,炒熟后则多用于治疗不得眠、少眠。但近现代临床实践与实验研究结果表明生、炒酸枣仁均具有镇静催眠的功效,且炒制后其镇静催眠作用增强,表明生、炒酸枣仁功效之差并非如古籍所载,而是在炒制后达到生熟理论中"生效熟增"的目的。基于此,该文通过收集酸枣仁相关文献,就其炮制方法的历史沿革、生品与炒品镇静催眠作用变化沿革作一综述,并整理酸枣仁中的有关成分,以期为建立成分与药效之间的联系,探索酸枣仁经炒制后药效发生"生效熟增"变化的机制提供参考。

经典名方半夏厚朴汤物质基准制备工艺研究

目的:根据古代经典名方复方制剂物质基准的申报资料要求,研究经典名方半夏厚朴汤物质基准制备工艺。方法:单因素实验考察工艺参数,以指标性成分和厚朴酚、厚朴酚、6-姜辣素、野黄芩苷和迷迭香酸总转移率及出膏率为评价指标,采用权重综合评价。结果:确定工艺为称取姜半夏15 g,厚朴9 g,茯苓12 g,生姜15 g饮片放入药罐(2 L)加1400 mL水,加盖浸泡30 min,武火煮至沸腾后文火煎煮保持微沸,紫苏叶6 g于距煎煮结束前15 min放入,煎煮1次得滤液800 mL,常压趁热80℃双层200目尼龙纱布过滤后50℃(-100 kPa)减压浓缩至生药量1.0 g·mL^(-1),冷冻干燥。结论:此工艺均未出现离散数据,稳定可行,可为之后制定半夏厚朴汤物质基准质量标准提供一定的参考。

中药辛夷及其近缘种的DNA条形码分子鉴定

目的 应用DNA条形码技术对中药辛夷及其近缘种进行分子鉴定,建立快速、准确、便捷的辛夷药材鉴定方法。方法 提取21份辛夷药材基原植物及其近缘种基因组DNA,扩增ITS、ITS2、psbA-trnH、matK和rbcL基因序列并进行双向测序;运用MEGA7.0软件进行序列比对,基于Kimura-2-Parameter(K2P)模型计算种内、种间的遗传距离以评估Barcoding gap,构建邻接(NJ)系统发育树反应鉴定结果。结果 5个引物序列中,psbA-trnH和matK序列的2个引物能正常扩增目的基因,测序成功率均大于98%,rbcL测序成功率较低,只有38.1%;其中matK具有最多的变异位点,psbA-trnH较matK和rbcL的Barcoding gap明显;NJ系统发育树显示,psbA-trnH+matK组合条形码序列能够准确鉴别9个品种,将辛夷药材及其近缘种很好地区分,并首次将其应用到玉兰嫁接砧木品种的分子鉴定。结论 应用psbA-trnH+matK的序列组合能够实现辛夷药材的准确鉴定,并且可以应用于玉兰嫁接砧木品种的快速鉴别。

经典名方“易黄汤”物质基准制备工艺研究

目的建立易黄汤物质基准的最佳制备工艺。方法采用单因素试验法和正交试验法,以小檗碱、没食子酸、毛蕊花糖苷和固含物的转移率为评价指标,采用HPLC法测定含量,对易黄汤前处理、煎煮、过滤、浓缩和干燥等工序的参数进行优选。结果易黄汤物质基准最优的制备工艺为:取炒白果粉碎过1号筛,酒车前子包煎,同其它饮片置于药罐中煎煮2次,第1次加8倍量水,浸泡30 min,加盖煎煮30 min;第2次取药渣再加7倍量水煎煮25 min,趁热滤过。合并两次滤液减压浓缩至1.0 g/mL饮片,冷冻干燥48 h,得冻干粉约8 g,置于20 mL棕色玻璃西林瓶中密封保存,即得易黄汤物质基准。结论优选的易黄汤物质基准制备工艺稳定可行。

中药三棱不同来源植物荆三棱和黑三棱的现代研究进展

对活血化瘀中药三棱不同基源荆三棱和黑三棱块茎的化学成分和药理作用研究进展进行整理,为合理开发利用两种药用资源提供参考。两种三棱主要含有机酸、异香豆素、茋、黄酮等类等成分,其中,异香豆素类和茋类是三棱的特征性成分;两种三棱都具有抗炎、抗肿瘤、抑制血管生成和保护肝纤维化等作用。异香豆素类黑三棱素B是一个选择性TLR2和TLR4拮抗剂,具有多种活性。两种三棱有相似的物质基础和药理活性,为不同科属的两种植物块茎同为三棱药用近千年的历史提供依据。

基于中药量丰成分的药物发现研究

从中医药临床实践经验总结中,通过科学研究发现天然先导结构,进一步通过活性优化、成药性优化转化为创新药物,是实现中药现代化的有效途径。大量研究显示单味中药传统功效的物质基础通常是其量丰的特征性成分。通过对青蒿素、三氧化二砷、根皮苷等几种量丰特征性成分的活性发现、作用机制揭示、结构优化,最终开发成药物,总结了它们的成功经验,可为基于中药量丰成分的药物发现研究者提供可借鉴的研究思路。

雷公藤多苷片抗人急性单核细胞白血病的物质基础研究

目的发现雷公藤多苷片抗不同亚型血液肿瘤的敏感细胞株及其对敏感细胞株增殖抑制作用的物质基础。方法利用CCK-8法检测雷公藤多苷片及其提取物体外对肿瘤细胞增殖的影响;构建敏感瘤株的体内异种移植瘤动物模型考察雷公藤多苷片对肿瘤细胞的抑制作用;采用色谱分离技术对雷公藤多苷片提取物进行系统分离,综合质谱和核磁共振数据鉴定化合物结构,并考察单体化合物抗人急性单核细胞白血病(Acute monocytic leukemia,AMOL)活性;进一步通过制备液相定向敲除雷公藤多苷片及其提取物中的雷公藤甲素(Triptolide,TP),考察敲除TP前后雷公藤多苷片及其提取物的抗AMOL活性。结果细胞实验结果表明雷公藤多苷片有较强的抗AMOL活性;体内异种移植瘤实验结果表明雷公藤多苷片可明显抑制AMOL细胞皮下异种移植瘤的生长;进一步对雷公藤多苷片提取物进行系统分离及其细胞水平上的活性评价,发现二萜类化合物TP抗AMOL活性最强;定向敲除TP后的雷公藤多苷片及其提取物对AMOL细胞MV-4-11的IC_(50)值分别升高8及13倍。结论雷公藤多苷片对AMOL细胞具有显著的抗白血病效应,其中TP是其发挥药效的物质基础。

基于CCL2/CCR2信号轴的肿瘤免疫治疗药物的研究进展

趋化因子配体2(C-C motif chemokine ligand 2,CCL2)及其受体CCR2与肿瘤的发生、发展密切相关。CCL2/CCR2信号轴通过多种机制促进肿瘤进展,一方面CCL2与肿瘤细胞表面的CCR2结合促进肿瘤的生长/存活和转移;更为重要的是CCL2可以招募多种免疫抑制细胞在肿瘤微环境中聚集,抑制免疫细胞的功能和活性,促进肿瘤进展。本文综述了CCL2/CCR2信号轴以及其在肿瘤及肿瘤微环境中的作用,并重点介绍了靶向CCL2/CCR2信号轴药物的临床研究进展,以期深入并全面了解CCL2/CCR2信号轴在肿瘤进展中的作用机制,开发更有效的肿瘤免疫治疗药物。

采收期、生长年限和加工方法对黄花乌头不同部位中关附甲素含量的影响

目的:为规范黄花乌头的人工栽培,通过优化高效液相法,对不同采收时期、生长年限黄花乌头不同部位中关附甲素的含量进行测定,比较不同加工方法对关附甲素含量的影响,为制定黄花乌头合理的采收时间和加工方式提供依据。方法:采用反相离子对高效液相色谱法,测定黄花乌头中不同部位中关附甲素的含量;色谱柱为安捷伦Zorbax SB-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相A为2 mg/mL庚烷磺酸钠水溶液(含0.2%三乙胺并以H_(3)PO_(4)调pH值至3.0),流动相B为乙腈,采用梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长为205 nm,柱温20℃。结果:关附甲素的质量浓度在0.0251~0.2513 mg/mL^(2)范围内线性关系良好(R^(2)=1),精密度、重复性、稳定性试验结果的RSD均≤1.0%;平均加样回收率为97.83%,RSD为3.5%。不同采收期黄花乌头不同部位中9月份采集的样品子根含量最高,说明9月份为最佳采收期。不同生产年限样品中,三年生和三年以上生黄花乌头母根含量相差不大,但均大于两年生母根,地上部分中所含关附甲素都明显小于根部。不同加工方法所得关白附中关附甲素的含量大小依次为:阴干>晒干>炕干,说明不同条件对含量的影响较大。结论:建立的含量测定方法专属性强、精密度、重复性和稳定性较好,结果可靠,黄花乌头的最佳采收期为9月份,生长期限为3年,本研究为黄花乌头科学的人工栽培采收提供了实验依据。

铁死亡在肝细胞癌中的作用以及研究进展

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是最常见的一种原发性肝癌,可由多种病因引起,当前在我国乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染是最重要的原因。HCC的发生、发展过程受到多种细胞因子以及细胞内多种信号通路网络的调控。近年来,临床与基础研究均表明铁死亡(ferroptosis)在HCC的发生、发展中扮演着重要的角色。铁死亡可以通过调节细胞内铁离子水平以及脂质过氧化程度等,影响肝脏疾病的发展进程。许多学者认为,铁死亡可以作为HCC疾病诊断、预防和治疗靶标。该文综述了铁死亡在防治HCC中的作用以及相关研究进展。

正品、伪品治糜康栓的差异特征元素分析及无机元素特征谱

目的研究正品治糜康栓(方中枯矾由钾明矾制备)和伪品治糜康栓(方中枯矾由铵明矾制备)的差异特征元素,并建立无机元素特征图谱。方法采用微波消解-电感耦合等离子体原子发射光谱/质谱(ICP-OES/MS)技术测定正品、伪品治糜康栓中18种无机元素的含有量,通过SPSS 16.0、SIMCA-P 13.0、t检验及秩和检验对样品进行聚类分析及差异特征元素分析,建立正品、伪品治糜康栓的无机元素特征谱。结果伪品治糜康栓中Al含有量最高,K、Fe、Mn、Zn、Ga、Cr次之;正品治糜康栓中K含有量最高,Al、Fe、Mn、Zn、Cr次之;其他微量元素含有量均较低。16批样品聚类为2类。结论共筛选出12种差异特征无机元素(P<0.05)。建立了正品、伪品治糜康栓中16种无机元素特征谱,可作为治糜康栓质量控制手段之一。

马氏珍珠贝中核苷类成分的分离富集工艺研究

目的:对马氏珍珠贝中核苷类成分进行分离富集工艺研究,以期得到纯度较高的天然核苷。方法:以马氏珍珠贝水提醇沉液中的核苷类成分为指标,采用HPLC测定含量,对大孔树脂型号、上样工艺、洗脱工艺进行考察,采用UV对纯化部位的核苷类成分进行测定。结果:根据HPLC-UV所得结果,选定大孔树脂型号为SP207、上样浓度为2.19 mg/mL、上样pH为4.6、上样流速为2 BV/h,核苷最佳上样体积为25 mL,洗脱时水洗量为2 BV,洗脱溶剂选择15%乙醇,洗脱流速选择3 BV/h,洗脱体积选择为3 BV,径高比选择1∶7。结论:经SP207纯化后,总核苷纯度为58.19%,表明该方法适用于分离富集马氏珍珠贝中的核苷类成分。

肝细胞程序性坏死在肝损伤中的研究进展

各种致病因子损伤肝脏时会导致肝细胞死亡。持续的肝细胞死亡将诱发并加重慢性炎症与纤维化,最终引起肝硬化,甚至肝癌。因此,控制肝细胞死亡是改善肝损伤的有效策略。程序性坏死(necroptosis)是指一种受信号分子调控,具有典型坏死样形态的新的细胞死亡形式。现已证实,细胞程序性坏死在药源性肝损伤、免疫性肝损伤、酒精性脂肪肝、非酒精性脂肪肝、肝纤维化等多种肝损伤中扮演着重要角色。该文就近年来肝细胞程序性坏死在肝损伤中的研究进展作一综述,旨在为肝脏疾病的病理机制与相关治疗药物的研究提供新的视角和靶标。

lncRNA在慢性肝病中的作用与机制研究进展

长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)是一组长度>200 nt,且不具有编码蛋白功能的RNA转录本。在表观遗传、转录、转录后水平发挥生理功能。研究发现,lncRNA参与肝脏细胞多种生命过程,并已逐渐成为慢性肝病研究的热点,包括慢性肝炎、非酒精性脂肪肝、肝纤维化、肝癌等,尤其在肝癌方面。该文根据不同慢性肝病分类,详细阐述lncRNA与慢性肝病的密切关系,总结调控机制,预测lncRNA作用新靶点,为慢性肝病的研究和防治提供研究基础和新思路。

益智醒脑颗粒对血管性痴呆大鼠行为认知能力及胆碱能系统的影响

目的观察益智醒脑颗粒对血管性痴呆大鼠行为认知能力及胆碱能系统的影响。方法双侧颈总动脉结扎法制备模型,将大鼠随机分为假手术组,模型组,吡拉西坦组(378 mg/kg),益智醒脑颗粒高、中、低剂量组(1 260、630、315 mg/kg)。然后,进行Morris水迷宫实验,检测血浆Ach含有量、Ach E、GSH-Px活性,以及海马MDA含有量、SOD、MAO-B活性。结果与模型组比较,益智醒脑颗粒高、中剂量组可显著缩短大鼠逃避潜伏期(P<0.05),Ach含有量升高、GSH-Px、SOD活性显著升高(P<0.05,P<0.01),MDA含有量降低、Ach E、MAO-B活性显著降低(P<0.05),但低剂量组无明显变化(P>0.05)。结论益智醒脑颗粒可改善血管性痴呆大鼠行为认知能力及胆碱能系统,在中、高剂量下作用更明显。

2种辅助方法提取川芎挥发油成分GC-MS分析

目的对2种辅助方法提取川芎挥发油成分进行GC-MS分析。方法分别采用酶解、盐析辅助水蒸气蒸馏法提取川芎挥发油,并与传统水蒸气蒸馏法进行比较,再通过GC-MS分析鉴定其中所含化学成分及其相对含有量。结果 3种方法所得川芎挥发油化学成分基本相似,共鉴定出56个峰,主要成分为内酯类,相对含有量最高的为反式-藁本内酯(34. 22%～38. 17%),其次为洋川芎内酯(8. 59%～18. 22%)、丁烯基酞内酯(7. 17%～7. 33%)、丁基苯酞(5. 21%～6. 46%)等。酶解辅助水蒸气蒸馏法和盐析辅助水蒸气蒸馏法均能有效提高川芎挥发油的得率,分别为0. 45%和0. 56%,并且是水蒸气蒸馏法的1. 28倍和1. 6倍。结论 2种辅助方法所得的川芎挥发油组分相差不大,但含有量有一定差异,并且盐析辅助水蒸气蒸馏法提取川芎挥发油得率更高。

铁死亡的调控机制及其在肝疾病中的作用研究进展

铁死亡是近年来新发现的一种细胞死亡方式,是由于细胞内铁离子水平异常升高,导致氧化还原失衡,细胞膜发生脂质过氧化,最终细胞膜破裂导致细胞死亡。目前认为铁死亡的中心环节是铁代谢和活性氧代谢。铁死亡涉及多种生理和病理过程,包括癌细胞死亡、神经毒性、缺血再灌注损伤和T细胞免疫等。越来越多的研究表明,在多种肝病的发生发展过程中,均出现不同程度的铁过载以及脂质活性氧堆积等铁死亡特征,而铁死亡可以通过调节细胞内铁离子水平及脂质过氧化程度,影响肝疾病的进程。因此,调控铁死亡可能是一种新的治疗肝疾病的策略。本文综述了铁死亡及其在肝疾病中的研究进展,为探索肝疾病的治疗方法提供理论基础。

大黄[庶虫]虫丸抗癌作用的基础理论及临床治疗研究进展

张仲景在《金匮要略》中创制的大黄?虫丸是有效的抗癌中成药方,适用于肝癌、胃癌、食道癌、肺癌、胰腺癌、白血病以及宫颈癌、子宫肌瘤等,能显著提高患者生活质量,减缓肿瘤的发展。本文整理分析了其在抗癌症治疗中的基础及临床研究概况,综述其抗肿瘤机制研究进展,并结合本课题组的研究成果提出将缓中补虚、活血化瘀功效与寒凉药性结合,利用现代新型科学技术,结合中医理论进行整体与拆方研究,为大黄?虫丸抗肿瘤的研究提供新思路。

白介素1家族在脂肪肝疾病中的作用及机制研究进展

白介素1(interleukin-1,IL-1)炎症因子家族在脂肪肝疾病进程中发挥关键作用。IL-1炎性因子家族参与脂肪肝疾病发生发展的各个阶段,如肝炎、肝纤维化、肝硬化、肝癌,抑制IL-1信号转导途径可能是目前治疗脂肪肝疾病的有效策略。IL-1炎症因子家族多环节多途径地整体调节脂肪肝疾病的发生发展,有望成为有效治疗脂肪肝的药物靶点,指导脂肪肝治疗药物的筛选。该文对近年来关于IL-1炎症因子家族在酒精性和非酒精性脂肪肝疾病中的作用及机制研究进行全面综合、整理和归纳。

肝细胞癌的RNA甲基化修饰

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是全球最常见的肝脏原发性肿瘤,其具有起病隐匿、发病率高、生长迅速、侵袭性强和致死率高等特点,目前尚缺乏有效的治疗手段,因此更好地阐明肝癌发生的分子机制对于开发新的诊断方法以及鉴定新的治疗靶点至关重要。近年来随着高通量测序技术的快速发展,表观遗传修饰尤其是甲基化修饰研究开始得到了重视,人类肿瘤中常见的表观遗传甲基化修饰包括DNA甲基化、组蛋白甲基化及近年来兴起的RNA甲基化。本文就近年来RNA甲基化修饰在HCC领域的相关研究做一综述,为HCC发病机制的研究提供新的方向。