年龄相关性黄斑变性的研究进展

年龄相关性黄斑变性(AMD)严重威胁老年人视力健康,视网膜色素上皮细胞(RPE)功能障碍是其关键环节。年龄增长导致RPE复制性衰老,光暴露、香烟暴露等导致RPE压力性早衰,衰老的RPE细胞溶酶体消化能力下降导致脂褐素积累,触发早期AMD的发生。老化的视网膜内细胞衰老-更新失衡、氧化压力-抗氧化失衡、慢性炎性反应-抗炎失衡、肠道屏障和肠道微生态失衡、促血管生成-抗血管生成失衡一系列内稳态失衡进一步促进AMD的发展。

蠲痹通络口服液改善2型糖尿病模型小鼠坐骨神经细胞凋亡的效用评价研究

目的 评价蠲痹通络口服液对2型糖尿病模型小鼠坐骨神经细胞凋亡的改善效应。方法 小鼠给予高脂高糖饲料联合链脲霉素(STZ)腹腔注射构建2型糖尿病小鼠模型,分别给予阳性药二甲双胍(200 mg·kg^(-1)·d^(-1))、蠲痹通络口服液低剂量(3.9 g·kg^(-1)·d^(-1))与高剂量(7.8 g·kg^(-1)·d^(-1)),连续给药35 d。采用热板法检测动物疼痛潜伏期;测定受试动物空腹血糖值、胰岛素值、糖化血红蛋白值;采用生化试剂盒检测小鼠血清总胆固醇(T-CHO)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)与氧化应激标志物超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)与谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力以及氧化产物丙二醛(MDA)表达;采用ELISA法检测小鼠血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素(IL)-1β、IL-6与IL-10水平;采用HE染色考察模型小鼠坐骨神经损伤情况;采用TUNEL法检测小鼠坐骨神经凋亡情况;采用Western blot法检测小鼠坐骨神经凋亡信号通路蛋白cleaved Caspase-3、Caspase-3,神经丝蛋白NF-L、NF-H与氧化应激信号通路蛋白Nrf2、HO-1表达。结果 高剂量蠲痹通络口服液缩短模型小鼠热痛反应潜伏期(P<0.01);下调模型小鼠空腹血糖与糖化血红蛋白(P<0.01),上调空腹血浆胰岛素(P<0.01);下调血清T-CHO、TG、LDL-C水平(P<0.01),上调HDL-C水平(P<0.01);下调血清中促炎因子TNF-α、IL-1β与IL-6水平(P<0.05),上调抗炎细胞因子IL-10水平(P<0.01);抑制坐骨神经结构破坏与凋亡(P<0.05);下调凋亡通路蛋白cleaved Caspase-3与Caspase-3的比值(P<0.01);上调坐骨神经组织神经丝蛋白NF-L与NF-H表达(P<0.05,P<0.01);上调抗氧化应激蛋白Nrf2与HO-1的表达(P<0.01)。结论 蠲痹通络口服液具有改善2型糖尿病模型小鼠坐骨神经细胞凋亡的作用,可能与其改善氧化应激与炎性应激作用相关。

中药凝胶贴膏临床应用研究进展及上市产品概况分析

中药凝胶贴膏系指中药或中药提取物与适宜的亲水性基质混匀后涂布于背衬材料上制成的贴膏剂。其采用水溶性高分子材料如聚丙烯酸钠、甘油、明胶等作为基质,可产生全身性或局部作用,是一种现代透皮给药制剂,具有载药量大、适用范围广、吸收迅速、携带使用方便、刺激性小、贴敷舒适等优点。中药凝胶贴膏近年来临床上广泛运用于外伤、骨伤、消化道及呼吸道疾病,效果显著,但中药本身成分复杂,且以复方为主,用药量大,提取技术有限,膏体载药量受限等因素制约其生产。且其临床前研究包括物质基础、作用机制、药动学等研究仍较少。本文查阅近十年的相关文献,对中药凝胶贴膏的临床应用、上市产品分析等方面内容进行总结和探讨,以期为中药凝胶贴膏的进一步开发使用提供参考和依据。

中药复方开心散调控慢性压力应激小鼠海马神经新生抗抑郁作用机制研究

目的评价开心散调控慢性不可预知压力应激模型小鼠海马神经新生抗抑郁效用,探讨作用机制。方法采用慢性不可预知压力应激构建抑郁小鼠模型,给以开心散水提取物。通过糖水偏嗜率检测、强迫游泳实验、悬尾实验等评价模型小鼠抑郁样行为。采用免疫荧光法检测模型小鼠海马区神经新生情况。采用蛋白免疫印迹法检测小鼠海马神经干细胞标志物巢蛋白以及Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的表达。采用ELISA法检测相应组织中压力应激因子如促肾上腺皮质激素释放因子、促肾上腺皮质激素、皮质醇与神经营养因子如脑源性神经营养因子、神经生长因子的表达。采用小鼠原代神经干细胞,采用免疫荧光法检测开心散对原代神经干细胞增殖情况,采用蛋白免疫印迹法检测巢蛋白以及Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的表达。结果开心散水提取物显著增加抑郁模型小鼠糖水偏嗜率,降低强迫游泳与悬尾不动时间;同时促进海马组织神经元新生,降低压力应激因子表达,提高神经营养因子表达,上调巢蛋白表达并调控Wnt/β-catenin信号通路。开心散提取物还可促进小鼠原代神经干细胞增殖及蛋白表达,并促进β-catenin入核,调控Wnt/β-catenin信号通路。结论开心散具有改善小鼠抑郁样行为效用,促进海马神经新生以及调控Wnt/β-catenin通路可能是其抗抑郁的重要作用环节与机制。

开心散联合氟西汀改善慢性压力应激小鼠抑郁样行为的效应评价研究

目的考察中药复方开心散联合用药氟西汀改善慢性压力应激小鼠抑郁样行为的效用与作用机制。方法采用慢性压力应激构建抑郁小鼠模型,通过糖水偏嗜实验评价开心散与氟西汀联合用药改善模型小鼠抑郁样行为的效用。采用ELISA法测定受试动物血清、海马组织和下丘脑组织中皮质醇(Cortisol)、促肾上腺皮质激素(ACTH)和促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)的表达。采用HE染色、尼氏染色和TUNEL染色法,观察模型小鼠海马神经元损伤情况。采用Western blot法考察小鼠海马组织中Caspase-3和Caspase-9等凋亡信号通路关键蛋白的表达情况。结果开心散与氟西汀联用能显著上调模型小鼠糖水偏嗜率;同时,联合用药可抑制脑内和血清中压力应激因子的上调,减少小鼠海马区因抑郁导致的细胞凋亡,调控海马区的凋亡信号通路。结论开心散联合氟西汀可有效改善抑郁模型动物的抑郁样行为,减少氟西汀临床用量。两者联用后抑制压力应激轴激活可能是联合用药抗抑郁的作用环节。

枸杞子-菊花药对提取物对豚鼠光源性近视模型的影响及机制研究

目的考察枸杞子与菊花药对配伍对发育期豚鼠光源性近视发生及发展的影响。方法采用三基色荧光灯照射发育期豚鼠,建立光源性近视模型,枸杞子-菊花提取物添加饲料饲养豚鼠,利用眼科A型超声测量仪检测眼轴,HE染色观察豚鼠视网膜病理损伤,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测豚鼠视网膜多巴胺(DA)及褪黑素(MT)含量,转录组学分析等方法探讨枸杞子-菊花对豚鼠光源性近视的影响。结果造模6周后,与正常组相比,模型组豚鼠眼轴显著增长(P<0.01),近视模型建立成功;枸杞子-菊花提取物可有效减缓模型组豚鼠晶状体加厚、玻璃体腔加深,进而延缓整体眼轴的过度增长;模型组豚鼠视网膜组织变薄,视网膜内核层及外核层的厚度及细胞数目显著降低,神经节细胞核稀疏,神经节细胞层空泡化明显,枸杞子-菊花提取物能保护视网膜细胞,视网膜内核层及外核层的厚度及细胞数目增加,神经节细胞核增多;ELISA检测显示模型组豚鼠视网膜内DA、MT水平显著降低(P<0.05),中、高剂量枸杞子-菊花提取物能够有效提升模型组豚鼠视网膜及血清中DA含量(P<0.01,P<0.001);眼部转录组学分析筛选的差异基因主要富集于过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)信号通路、含胶原蛋白的细胞外基质等相关途径;ELISA结果显示,高剂量枸杞子-菊花提取物能显著增加PPARγ、COL1A1含量(P<0.01),降低SMA含量(P<0.05)。结论枸杞子-菊花药对具有延缓发育期豚鼠光源性近视发生及发展效用,保护视网膜细胞,改善人工光环境导致的DA分泌紊乱,参与调控眼部PPARγ水平,对光源性近视的防控具有积极意义,为临床合理用药和创制眼功能健康产品提供了科学依据。

菊睛方对碘酸钠诱导的干性年龄相关性黄斑变性小鼠视网膜的保护作用及物质基础研究

目的研究菊睛方对干性年龄相关性黄斑变性(age-related macular degeneration,AMD)小鼠视网膜的保护作用。方法采用腹腔注射碘酸钠的方法诱导小鼠干性AMD模型,给予菊睛方干预后,运用光学相干断层扫描(OCT)检查视网膜厚度,苏木精-伊红(HE)染色观察视网膜形态学变化,原位末端转移酶标记(TUNEL)染色检测视网膜细胞凋亡情况,结合眼球及血清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α),白介素-6(interleukin-6,IL-6)和白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)炎症因子以及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD),谷胱甘肽(glutathione,GSH)及丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,评价菊睛方对干性AMD小鼠的视网膜保护作用。结果OCT、HE及TUNEL染色结果显示,菊睛方可明显改善碘酸钠诱导的干性AMD小鼠视网膜损伤,增加视网膜厚度(P<0.05),减少视网膜细胞的凋亡(P<0.01),提高眼球及血清中GSH和SOD活性(P<0.01),降低TNF-α、IL-6、IL-1β及MDA水平(P<0.01)。结论菊睛方能有效改善干性AMD小鼠视网膜损伤,其作用途径与抑制炎性反应、增强抗氧化能力密切相关。

枸杞叶改善D-半乳糖致亚急性衰老小鼠学习与记忆能力的效应部位与作用机制研究

目的研究枸杞叶改善D-半乳糖致亚急性衰老小鼠学习与记忆能力的效应部位与作用机制。方法建立D-半乳糖致亚急性衰老小鼠模型,制备枸杞叶不同溶剂提取部位,通过Y迷宫实验和新物体识别实验评价枸杞叶不同溶剂提取部位对模型小鼠学习与记忆能力的影响;苏木素-伊红(HE)以及尼氏(Nissl)染色观察小鼠海马区病理形态学变化;酶联免疫吸附法检测小鼠海马组织脑源性神经营养因子(Brain-derived neurotrophic factor,BDNF)、神经生长因子(Nerve growth factor,NGF)、胶质细胞源性神经营养因子(Glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)以及肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素10(IL-10)的含量;试剂盒检测小鼠海马组织中超氧化物歧化酶(SOD)的活力,丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)的含量;TUNEL法检测小鼠脑组织海马区细胞凋亡情况;蛋白印迹法检测小鼠海马组织抗氧化蛋白Nrf2、HO-1以及凋亡蛋白Caspase-3、Caspase-9的表达。结果枸杞叶水提部位和80%醇沉上清部位显著改善模型小鼠学习与记忆能力,改善小鼠海马区组织病理损伤,增加小鼠海马区尼氏体数目,并促进神经营养因子BDNF、NGF、GDNF的表达;下调致炎因子TNF-α、IL-1β、IFN-γ的表达,上调抗炎因子IL-10表达;提升SOD活力和GSH表达,降低MDA表达;提高Nrf2、HO-1抗氧化蛋白的表达;降低Caspase-3、Caspase-9凋亡通路蛋白的表达;抑制模型小鼠脑组织海马区细胞凋亡。结论枸杞叶水提部位和80%醇沉上清部位是枸杞叶改善D-半乳糖致亚急性衰老小鼠学习与记忆能力的效应部位,其作用途径与抑制中枢氧化应激与炎性应激导致的神经元凋亡有关。

杞参益智方改善D-半乳糖注射亚急性衰老模型小鼠学习与记忆能力的效应评价研究

目的评价杞参益智方对D-半乳糖注射亚急性衰老模型小鼠学习与记忆能力的改善效应。方法小鼠皮下注射D-半乳糖构建亚急性衰老动物模型,分别给予阳性药多奈哌齐(2 mg·kg^(-1)·d^(-1))、杞参益智方低剂量组(1.33 g·kg^(-1)·d^(-1))、高剂量组(2.67 g·kg^(-1)·d^(-1)),连续给药30 d。通过水迷宫和Y迷宫实验评价模型小鼠学习与记忆行为;采用HE染色考察模型小鼠海马损伤情况;采用TUNEL法检测小鼠海马组织凋亡情况;采用ELISA法检测小鼠海马组织中氧化应激因子与炎症因子表达水平;采用Western blot法检测小鼠海马凋亡、氧化应激与炎性应激相关信号通路蛋白表达。结果杞参益智方水提取物显著缩短模型小鼠水迷宫测试中潜伏期和上台前路程(P<0.01),增加穿越平台次数(P<0.01);增加模型小鼠Y迷宫新臂探索时间和次数(P<0.05);抑制模型小鼠海马TUNEL荧光表达(P<0.01);上调氧化应激因子超氧化物歧化酶(SOD)活力(P<0.05)与谷胱甘肽(GSH)含量(P<0.05),下调丙二醛(MDA)含量(P<0.05);下调白细胞介素(IL)-1β、IL-6与肿瘤坏死因子(TNF-α)表达水平(P<0.05,P<0.01);下调凋亡信号通路蛋白Cleaved Caspase-3与Caspase-3表达(P<0.05),上调氧化应激信号通路蛋白Nrf2与HO-1表达(P<0.05),下调炎性应激信号通路蛋白p-NF-κB与NF-κB表达(P<0.05)。结论杞参益智方具有改善D-半乳糖注射亚急性衰老模型小鼠学习与记忆能力的作用,可能与其抑制海马氧化应激与炎性应激作用相关。

杞参益智方改善Aβ_(1-42)海马区注射小鼠学习与记忆能力的效用评价与作用机制研究

目的评价杞参益智方对Aβ_(1-42)海马区注射小鼠学习与记忆能力的改善作用,初步探索作用机制。方法小鼠海马区注射b淀粉样蛋白(Aβ_(1-42))构建拟阿尔茨海默症(Alzheimer’s disease,AD)动物模型,给予杞参益智方水提取物。通过Morris水迷宫实验和Y迷宫实验评价模型小鼠的学习与记忆能力。采用HE染色观察小鼠海马组织损伤情况。采用TUNEL法检测小鼠海马组织细胞凋亡情况。检测痴呆模型小鼠海马组织中氧化因子、炎症因子的表达和相关的抗氧化蛋白及凋亡蛋白的表达。结果杞参益智方水提取物低剂量组和高剂量组均可显著改善海马A1-42注射小鼠学习与记忆能力,抑制模型动物海马组织细胞凋亡,抑制模型小鼠氧化应激并下调炎症因子IL-6、IL-1β与TNF-α的表达,上调抗氧化蛋白Nrf2与HO-1蛋白的表达并调节凋亡信号通路相关蛋白Caspase-9、Caspase-3、Bax、Bcl-2的表达。结论杞参益智方改善痴呆模型小鼠的效用可能与其调控中枢氧化应激、抑制炎症因子表达并且增加抗氧化蛋白的表达有关。

近三年抑郁症的中医研究进展

抑郁症(depressive disorder,DD),是一种现代社会常见的心理健康疾病,严重危害患者的身心健康,并给患者及其家庭带来了巨大的心理和经济负担。相较于西医治疗,中医药在治疗DD方面具有独特优势:不良反应小、易于患者接受,并且能够明显改善临床症状。该文将从DD的病因病机、辨证分型以及治疗方法等多个方面探讨近三年来中医药在治疗DD方面的研究进展,为临床抑郁症治疗提供参考支持。

基于GC-MS代谢组学的牛黄解毒片配伍减毒机制研究

目的采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)的代谢组学技术探讨牛黄解毒片复方配伍的减毒作用及机制。方法将24只小鼠随机分为空白组、雄黄组(1.0 g·kg^(-1))和牛黄解毒片组(7.8 g·kg^(-1)),每组8只,连续口服给药14 d,采集各组小鼠的肝脏和肾脏,观察病理形态学变化;测定肝脏中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)和肾脏中肌酐(Cr)、尿酸(UA)的含量;GC-MS代谢组学分析肝脏和肾脏中内源性代谢物的差异。结果与雄黄组比较,牛黄解毒片组小鼠肝脏中ALT、AST和肾脏中Cr、UA含量发生显著变化(P<0.05),肝脏和肾脏病理损伤减轻;筛选出柠檬酸、抗坏血酸、天冬酰胺、左旋多巴、苯丙氨酸等17种与减毒相关的生物标志物,涉及谷氨酰胺和谷氨酸代谢、精氨酸的生物合成、色氨酸代谢、酪氨酸和色氨酸的生物合成、苯丙氨酸代谢等通路。结论牛黄解毒片复方配伍降低了雄黄的肝肾毒性,减毒作用可能与回调氨基酸代谢有关。

中医方剂现代研究的实践与思考——方剂功效物质组学的构想与建立

本文通过对四物汤、三拗汤等代表性类方较为系统的研究实践和学习体会,探索性地提出方剂功效物质组学的研究策略与方法学体系。方剂功效物质组学是研究功效物质组的组成及其相互关系以及与生物系统相互作用的方法学体系。作为新的概念和研究方法的探讨,作者提出了结构性的功效表征-效应信息群-功效物质组-作用机制的研究策略与相应方法技术体系。基于整体观和辨证论治原则有效关联中医临床功效、生物效应及效应物质的关系,从而建立了功效物质组及功效物质组学的方法学体系,为符合中医临床特点的方剂复杂效应物质基础研究提供了研究思路和方法技术支撑,有助于从功效物质层面深化认识经典方剂及其衍化类方的配伍关系与衍化规律的共性和差异,对中医临床应用具有指导意义,为方剂创新药物的发现提供引导。

胃肠道系统功能评价技术体系的建立及其在中药配伍禁忌研究中的应用

胃肠道系统功能评价是中药配伍禁忌研究的重要内容。本文围绕胃肠运动、分泌、吸收、屏障功能及微生物菌群调节等方面,探索性构建了适宜于中药配伍禁忌研究特点的胃肠道系统功能评价技术体系;探讨中药反药组合通过促进或抑制胃肠运动与分泌功能,干预药物胃肠吸收过程,影响胃肠屏障功能,调节胃肠道菌群结构与生态诸环节,揭示其产生致毒增毒或减效降效及相互作用机制,以期为阐明中药配伍禁忌的科学内涵提供有效支撑。

杞蛎还少方改善D-半乳糖致亚急性衰老小鼠性激素水平紊乱与睾丸氧化损伤的效用评价研究

目的 评价杞蛎还少方对D-半乳糖(D-galactose,D-gal)致亚急性衰老小鼠性激素水平紊乱与睾丸组织氧化损伤的改善作用与机制研究。方法 将105只雄性小鼠随机分成正常组,模型组,杞蛎还少方低、中、高剂量组,维生素E组和金匮肾气丸组,通过连续腹腔注射D-gal建立亚急性衰老模型小鼠,同时各组分别给予杞蛎还少方提取物、维生素E和金匮肾气丸。通过HE染色法检测睾丸组织病理损伤情况,ELISA法检测小鼠血清中相关性激素水平,试剂盒检测氧化应激因子表达,TUNEL法检测睾丸细胞凋亡,Western blot法检测小鼠睾丸组织中氧化应激与凋亡相关蛋白表达。结果 相较于衰老模型小鼠,杞蛎还少方各剂量组均能改善睾丸组织病理损伤;提高血清T、E_2、GnRH含量,降低LH、FSH含量(P<0.01);增强血清与睾丸组织中SOD活力(P<0.01)、GSH含量(P<0.01),降低MDA含量(P<0.01)。杞蛎还少方中剂量组能够显著抑制睾丸细胞凋亡(P<0.01),提高模型组小鼠睾丸组织Nrf2、HO-1蛋白表达及Bcl-2/Bax比值(P<0.05),下调Cleaved-Caspase-3/Caspase-3、Cleaved-Caspase-9/Caspase-9凋亡蛋白表达水平(P<0.05)。结论 杞蛎还少方可有效改善衰老小鼠的性激素紊乱,保护睾丸组织,其作用机制可能与抑制睾丸组织慢性氧化应激诱导的细胞凋亡有关。研究结果将为枸杞子及其组方临床应用与抗衰老功能性产品开发提供借鉴和奠定基础。

麋鹿角调控CUMS小鼠海马区神经元凋亡改善抑郁样行为的效用部位与作用机制研究

目的基于慢性不可预见性动物应激(CUMS)模型考察麋鹿角各提取物的抗抑郁效用,以及其对氧化损伤诱导神经元凋亡的抑制效应,并对产生该效应的功效物质进行筛选研究。方法制备麋鹿角各提取物,采用小鼠CUMS模型,通过糖水偏嗜实验、悬尾实验和强迫游泳实验评价麋鹿角提取物的抗抑郁功效。采用TUNEL法检测小鼠海马区细胞凋亡情况,采用相应试剂盒测定小鼠血清中丙二醛(MDA)的含量,过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽还原酶(GSH)的活性。采用小鼠海马神经元细胞系HT22和大鼠肾上腺嗜铬瘤细胞系PC12,以过氧化氢(H_(2)O_(2))作为造模剂构建氧化损伤模型,通过MTT法评价麋鹿角提取物对细胞氧化损伤的保护作用。采用TUNEL染色法考察麋鹿角水提取物(EDC-WE)对H_(2)O_(2)诱导HT22细胞凋亡的抑制作用,进一步采用Western blot法考察神经元细胞凋亡通路相关蛋白Caspase3、Cleaved-Caspase3、Caspase9、Cleaved-Caspase9的表达水平。将EDC-WE采用超滤法分离为分子量>100 kD、分子量30~100 kD、分子量10~30 kD、分子量<10 kD的4个组分,通过MTT法评价EDC-WE不同分子量段对HT22细胞氧化损伤的保护作用,并对分子量<10 kD的组分进行TUNEL染色分析和Caspase信号通路的考察验证。结果麋鹿角各提取物均能显著上调模型小鼠糖水偏嗜率,缩短小鼠悬尾和强迫游泳不动时间,在各提取物中以EDC-WE的效用最强。EDC-WE能够对抗HT22细胞的氧化损伤,并调控Caspase信号通路对抗H_(2)O_(2)诱导的HT22细胞凋亡,其中分子量<10 kD的麋鹿角水溶性物质抗细胞氧化损伤效用较强。结论EDC-WE可以抑制氧化应激诱导的神经元细胞凋亡,从而实现抗抑郁作用,其中分子量<10 kD的麋鹿角水溶性物质可能是关键的功效成分。

基于网络药理学和分子对接技术研究八珍益智方治疗阿尔茨海默病的潜在作用机制

目的利用网络药理学方法及分子对接技术,研究八珍益智方治疗阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)的潜在药效物质基础和作用机制,为其临床应用提供理论依据。方法通过TCMSP、BATMAN-TCM、TCMID、中国知网(CNKI)和Pubmed数据库检索八珍益智方8味组方药材化学成分和作用靶点;通过GeneCards、OMIM数据库查询AD的相关靶点;利用R语言3.6.3得到药物和疾病的交集靶点;借助String数据库和Cytoscape 3.7.2软件构建PPI网络,筛选核心靶点;通过DAVID数据库进行GO功能富集分析和KEGG通路富集分析;利用AutoDock tools 1.5.6、AutoDock vina 1.1.2进行分子对接。结果八珍益智方共收集到200个化学成分和226个靶点,Cytoscape 3.7.2软件筛选出包括AKT1、MAPK3、IL-6、VEGFA、CASP3等37个核心靶点,槲皮素、山柰酚、柚皮苷、豆甾醇、7-甲氧基-2-甲基异黄酮等15个核心化合物。GO富集分析得到1331个条目(P<0.05),KEGG通路富集得到相关通路65条(P<0.05)。分子对接结果显示15个核心化合物和AKT1、MAPK3、IL-6、VEGFA、CASP3具有较好的亲和力。结论八珍益智方治疗AD的通路主要涉及癌症的途径、MAPK信号通路、前列腺癌、神经活性配体-受体相互作用、钙信号通路等,研究结果为八珍益智方治疗AD作用机制的进一步阐明提供了指引。

盘龙七片中抗炎镇痛生物碱类成分同时测定的方法学研究

采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱联用(UPLC-Q-TOF-MS)技术,对盘龙七片抗炎镇痛生物碱类成分进行表征,共表征出17种生物碱成分;根据表征的结果建立UPLC-ESI-MS/MS定量分析方法以用于盘龙七片质量分析评价,结果表明17种生物碱在各自浓度范围内线性关系良好,r≥0.9990,仪器精密度、方法重复性、供试品稳定性均良好,平均加样回收率为86.42%~112.75%,RSD为1.49%~5.59%(n=6)。本研究所建立的方法准确、重复性良好,可用于盘龙七片中17种生物碱的定量测定,为完善盘龙七片质量控制的潜在新指标提供了参考。

菊睛丸改善D-半乳糖致亚急性衰老小鼠视网膜损伤效应评价与作用机制研究

目的评价菊睛丸改善D-半乳糖致亚急性衰老小鼠视网膜损伤效应并探索作用机制。方法采用小鼠皮下注射D-半乳糖构建亚急性衰老模型,分别给予西药阳性药AREDS2、中药阳性药杞菊地黄丸、菊睛丸水提取物低、高剂量组和菊睛丸50%乙醇提取物低、高剂量组。通过光学相干断层成像检查(OCT)检测小鼠视网膜及眼底情况,HE染色法检测视网膜细胞损伤程度,TUNEL染色法检测视网膜细胞凋亡情况,试剂盒检测氧化应激因子表达,Western blot检测小鼠视网膜凋亡和氧化应激通路相关蛋白表达情况。结果菊睛丸提取物显著增加模型小鼠视网膜厚度(P<0.05),改善视网膜损伤并抑制视网膜细胞凋亡(P<0.05)。同时,菊睛丸提取物下调Cleaved Caspase-3与Cleaved Caspase-9凋亡通路蛋白表达(P<0.05),上调Bcl-2/Bax蛋白表达比值(P<0.05)。菊睛丸提取物显著提高抗氧化因子SOD与GSH等表达(P<0.05),减少氧化产物MDA产生(P<0.05),显著上调抗氧化蛋白Nrf2与HO-1的表达(P<0.05)。菊睛丸水提取物和50%乙醇提取物有相似的作用趋势。结论菊睛丸改善D-半乳糖亚急性衰老模型小鼠视网膜损伤,其作用途径与抑制视网膜细胞凋亡并改善氧化应激有关。

近红外光谱法快速测定灵芝孢子粉胶囊中多糖含量的研究

目的基于近红外光谱技术建立快速测定灵芝孢子粉胶囊中多糖的含量方法。方法收集35批灵芝孢子粉胶囊样品,采集各样品漫反射近红外光谱信息,扫描范围为10000~4000 cm^(-1),扫描次数64次,光谱分辨率为8 cm^(-1)。每份样品重复测定3次。多糖参比值采用蒽酮-硫酸显色法测定。划分数据采用Kenston划分法,分析多种光谱预处理方法对近红外光谱定量模型的影响,确定最佳光谱预处理方法,选用偏最小二乘法建立了定量预测模型。结果多糖含量范围为1.5%~3.0%,所建立的偏最小二乘法模型中相对预测偏差为3.40,验证集相关系数rpre为0.9605,说明近红外模型验证集与多糖测定值具有良好的线性关系。结论采用近红外光谱技术建立的快速预测模型能够准确测定灵芝孢子粉胶囊多糖含量,方法操作简便,可为灵芝孢子粉胶囊生产质量控制提供快速测定候选方法。