黑枸杞本草酵素缓解小鼠脂溢性脱发作用

该研究对黑枸杞本草酵素缓解小鼠脂溢性脱发症状的功能开展了研究。将实验小鼠随机分为空白组、模型组、原浆组和酵素组,通过皮下注射丙酸睾酮建立脂溢性脱发小鼠模型,原浆组和酵素组小鼠在14 d内分别灌胃黑枸杞原浆和黑枸杞本草酵素(25 mL/kg·bw),观察其对脱发小鼠背部毛发生长状态、皮肤组织中毛囊数量、胶原蛋白含量、毛囊增殖细胞和毛囊干细胞标记物的影响。结果表明,黑枸杞原浆和酵素促进了脱发小鼠的毛发生长速度,增加了毛囊数量和胶原蛋白含量,显著提高了毛囊增殖细胞标记物Ki67和毛囊干细胞标记物Sox9的阳性表达(P<0.05),且酵素组效果更明显。代谢组学结果表明黑枸杞原浆发酵后11种花色苷类代谢物上调。富含花色苷的黑枸杞本草酵素可能通过调控小鼠背部毛囊生长、胶原蛋白积累、毛囊增殖细胞和毛囊干细胞标记物的阳性表达,来缓解脂溢性脱发对小鼠毛发的生长,具备开发为功能性发酵食品的发展潜力。

乙醇降解乳酸菌的筛选、鉴定及解酒防醉功效评价

该研究采用传统培养分离法从传统发酵食品奶疙瘩样品中分离乳酸菌,通过体外降解乙醇试验筛选高效降解乙醇功能的菌株,通过形态学观察、生理生化实验及分子生物学技术对其进行菌种鉴定,并对其进行安全性评价、耐逆性试验,以及体内小鼠防醉解酒功效试验。结果表明,筛选鉴定出一株乙醇降解率高(13.38%)、乙醇耐受能力强(耐受体积分数12%乙醇)的乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici)RH2712,其对氨苄西林、青霉素、亚胺培南、氯霉素敏感,溶血性安全;对酸和胆盐耐受力强,在pH 3.0的条件下活菌对数值几乎不变,延迟时间为2 h,在1.5%胆盐含量下培养4 h后活菌对数值达到8.72,延迟时间仅为0.5 h,在人工模拟胃液条件下处理3 h后活菌对数值仍能达到7.14。乳酸片球菌RH2712在小鼠试验中表现出明显的防醉解酒的功效,且活菌数为1×10^(8)~1×10^(9)CFU/m L时解酒功能强于美他多辛。

一种玫瑰本草酵素的制备及其抗皮肤衰老功能的研究

以重瓣红玫瑰、桑椹和玫瑰茄为原料,利用植物乳植杆菌、罗伊氏粘液乳杆菌和鼠李糖乳酪杆菌发酵制备玫瑰本草酵素。为了探究玫瑰本草酵素发酵过程中抗氧化活性的变化规律及其对肤质的改善功效,首先对其理化成分含量进行测定,接着对其在发酵过程中的抗氧化能力及其酶活进行分析,最后利用人群试验评价该酵素对志愿者的肤色、淡斑、肌肤纹理及肌肤弹性等指标的影响。结果表明:该酵素的多酚、前花青素、乳酸、γ-氨基丁酸、游离氨基酸含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性分别为38 mg/g、244 mg/kg、5.5×10~3 mg/kg、562 mg/kg、0.68 mg/g、33.2 U/mL。发酵过程中,该酵素对1,1-二苯基-2-三硝基肼自由基(DPPH·)和羟基自由基(·OH)的清除效率与SOD酶活和总酚含量变化呈正相关;同时,SOD酶活和总酚含量水平与该酵素发酵过程中纤维素酶和果胶酶的酶活密切相关。通过30 d人群实验发现,服用该酵素可有效改善肤色及淡斑。本研究为开发一种新型玫瑰本草酵素提供了一定的理论依据。

益生菌老姜酵素改善大鼠寒凝血瘀的作用研究

本文研究了以姜、红糖、大枣和低聚异麦芽糖为原料生产的老姜酵素对缓解由寒凝血瘀引起的不良反应的作用效果。通过建造寒凝血瘀大鼠模型,同步灌胃老姜酵素,分为低剂量组、中剂量组和高剂量组,观察大鼠的体重等基本特征、扭体反应,测定服用前后的子宫、卵巢和肾脏的脏器指数,血液流变学特性,分析其PGF_(2α)和PGE_(2)数值变化,Ca^(2+)超载量和氧化应激反应。结果表明,与模型组相比,老姜酵素的低剂量组、中剂量组和高剂量组均改善大鼠的体重和基本指标,高剂量组的大鼠扭体反应次数明显下降,血液黏度降低,说明老姜酵素有助于缓解寒凝血瘀引起的不良反应且对健康没有影响。高剂量组大鼠的PGF_(2α)、PGE_(2)比值与模型组相比显著下降,改善Ca^(2+)超载量,提升SOD酶活性。表明老姜酵素对寒凝血瘀症有一定的改善作用。

基于斑马鱼模型及网络药理学研究植物乳植杆菌HCS03-001抗细菌炎症的作用

过度炎症严重危害人体健康,为了验证植物乳植杆菌HCS03-001的抗炎功效并探讨其抗炎机理,以转基因中性粒细胞绿色荧光斑马鱼为模型,使用细菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导炎症发生,以吲哚美辛为阳性对照,探究10、20、40 mg·mL-1植物乳植杆菌HCS03-001的抗细菌性炎症功效。通过SwissTargetPrediction、GeneCards和DisGeNET数据库获取植物乳植杆菌代谢产物的主要成分和炎症靶点。靶点取交集后通过STRING数据库构建蛋白质-蛋白质相互作用(the protein-protein interaction,PPI)网络;使用Cytoscape 3.9.0构建菌株代谢产物“成分-靶点-炎症”网络;利用DAVID平台工具对共有靶点进行GO富集分析及KEGG通路富集分析。斑马鱼实验结果显示,不同剂量的HCS03-001均能降低斑马鱼卵黄囊中性粒细胞数量,其中高剂量(40 mg·mL-1)的效果与模型组相比达到显著水平(P<0.05)。网络药理学结果发现,植物乳植杆菌代谢产物缓解炎症的过程中,作用较强的活性成分主要是异吡啶硫胺素、吲哚乙醛和麦角硫因等,可能作用于甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)、环氧合酶2(prostaglandin endoperoxide synthase 2,Ptgs2)、过氧化物酶体增生激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor gamma,PPARγ)等核心靶点,富集结果显示影响最显著的生物学过程是对LPS的反应,涉及的细胞组分为细胞膜,影响最显著的通路为癌症通路。结果表明,植物乳植杆菌HCS03-001具有显著的抗细菌性炎症功效,其具体机制可能是代谢成分异吡啶硫胺素、吲哚乙醛和麦角硫因等通过抑制细菌LPS与机体细胞膜的结合,以及通过调控GAPDH、Ptgs2、PPARγ等关键靶点影响癌症相关通路实现的。

罗伊氏粘液乳杆菌HCS02-001缓解高尿酸血症及痛风功能的研究

为探究罗伊氏粘液乳杆菌HCS02-001缓解高尿酸血症及痛风的功能,将罗伊氏粘液乳杆菌HCS02-001接种于含有肌苷、鸟苷培养液并培养一定时间后,通过测定反应液中肌苷与鸟苷含量变化来确认其体外嘌呤核苷的分解能力。将63例高尿酸血症患者随机分为对照组和干预组,2组均在基础治疗上给予碱化尿液处理,干预组额外给予罗伊氏粘液乳杆菌HCS02-001冻干粉,疗程为30 d。体外功能试验结果发现,添加罗伊氏粘液乳杆菌HCS02-001培养1 h后,肌苷与鸟苷的降解率分别为62.07%、73.53%;培养2 h后,二者的降解率分别为61.29%和67.65%。人群实验结果发现,罗伊氏粘液乳杆菌HCS02-001可显著提高患者临床总有效率,降低血清尿酸、炎症因子血清C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)及总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglycerides,TG)和低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)的含量,提高高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)含量,同时改善患者关节骨侵蚀现象,且具有安全性。结果表明,罗伊氏粘液乳杆菌HCS02-001可有效缓解高尿酸血症及痛风,且无不良反应。

副干酪乳酪杆菌HCS17-040的冻干工艺优化及脂肪分解功效研究

该研究优化了副干酪乳酪杆菌HCS17-040的冻干工艺,探究其脂肪分解功效。通过单因素试验和正交试验,优化副干酪乳酪杆菌HCS17-040冻干粉的生产工艺;同时利用斑马鱼试验,分析服用冻干粉后斑马鱼卵黄囊脂肪荧光强度的变化,探究脂肪分解功效。结果表明,优化后的最佳工艺为菌体与保护剂的配制比例1∶3.0g/g、预冻时间2.0h、预冻温度-25℃,在此条件下,冻干后的活菌数为5.4×10^(11)CFU/g;水溶给予副干酪乳酪杆菌HCS17-040浓度为1.25mg/mL时,斑马鱼卵黄囊脂肪荧光强度最低,显著低于空白组(P<0.05)。表明副干酪乳酪杆菌HCS17-040能够有效分解脂肪,可为开发其他减肥产品提供原料。

一株具有降血糖功能的鼠李糖乳酪杆菌RH0121筛选及其益生特性研究

以商业菌株鼠李糖乳酪杆菌LGG作为阳性对照,从婴儿粪便中筛选出具有良好抑制α-葡萄糖苷酶和较好耐逆性能力的菌株。结果显示,14株菌种中HCS0053、RH0121、RE2153、RH44844株菌对α-葡萄糖苷酶具有较高的抑制作用,其抑制率分别为29.46%、31.49%、30.10%、29.43%,其中菌株RH0121可同时抑制α-淀粉酶的活性。经过对菌株RH0121的形态特征、生理生化特性研究及16S rDNA检测,鉴定该菌株为鼠李糖乳酪杆菌(Lacticaseibacillus rhamnosus)。测定鼠李糖乳酪杆菌RH0121的耐逆性,其耐酸、耐胆盐及在胃液条件下有较高的存活率。鼠李糖乳酪杆菌RH0121为具有良好的胃肠液耐受能力的潜在降血糖功能菌株。

植物乳植杆菌HCS03-001冻干粉制备工艺优化及抗幽门螺杆菌的功效

为优化植物乳植杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)HCS03-001的冻干粉制备工艺,探究其抗幽门螺杆菌的功能效果,通过单因素试验、主因素分析和响应面试验优化植物乳植杆菌HCS03-001冻干粉的制备工艺,采用体外抑菌试验验证该益生菌的抗幽门螺杆菌功效。结果发现,优化后制备冻干粉的最佳工艺条件为:发酵温度37℃,发酵时间16 h,接种量5.2%,冻干时间44 h,在此条件下活菌数达到5.85×1011 CFU·g^(-1)。体外抑菌试验结果表明植物乳植杆菌HCS03-001的发酵上清液和菌悬液均能有效抑制幽门螺杆菌的生长,抑制率达到69.55%~78.78%。研究结果表明植物乳植杆菌HCS03-001具备抗幽门螺杆菌的功能。

罗伊氏粘液乳杆菌HCS02-001培养方法优化及改善睡眠功能研究

为了优化罗伊氏粘液乳杆菌(Limosilactobacillus reuteri)HCS02-001的培养方法,并探究其助睡眠功能,以γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)的产量为考察指标,通过单因素实验、响应面实验和小鼠实验进行条件筛选和功能评价。在培养温度37℃,培养时间24 h,初始pH 6.5时,罗伊氏粘液乳杆菌的GABA产量为5.58 g·L^(-1)。直接睡眠实验中小鼠均未出现直接睡眠现象,延长戊巴比妥钠催眠小鼠的睡眠时间实验中,高剂量组的小鼠睡眠时间有效延长,戊巴比妥钠阈下剂量催眠实验结果显示高剂量组的小鼠入睡率高达40%,巴比妥那睡眠潜伏期实验显示高剂量组的小鼠减少了睡眠潜伏期,可与巴比妥钠协同发挥作用。结果表明罗伊氏粘液乳杆菌HCS02-001具备助睡眠的作用。

药食同源植物酵素未来发展探析

酵素是近年来市场上较为火热的一种产品,起源于日本,后传至我国台湾,2000年后传入大陆。传统酵素发酵是以多种果蔬、食用菌加上白糖、赤砂糖等原辅料混合,经长时间自然发酵制成,本质上是一种发酵食品。为规范市场环境,中国生物发酵产业协会于2015年协调相关单位起草了《植物酵素》行业标准.

抑制阴道加德纳菌乳酸菌的筛选及安全性研究

为筛选具有较强抑制阴道加德纳菌(Gardnerella vaginalis)特性的乳酸菌菌株,该研究通过双层琼脂扩散法测定菌株抑制阴道加德纳菌的能力,从筛菌样品中筛选能力较强的乳酸菌,通过溶血性试验、动物致病性试验评价其安全性,并进行了耐酸耐胆盐能力试验。结果表明,筛选菌株中罗伊氏粘液乳杆菌(Limosilactobacillus reuteri)HCS02-001抑菌能力最强,发酵上清液抑菌圈直径为18.23 mm,发酵上清液经过3倍浓缩后抑菌圈直径可达21.58 mm。菌株HCS02-001无溶血性,无致病性,在pH 2.0条件下培养17 h活菌数对数值为7.97,存活率为85.52%,在1.5%胆盐条件下培养17 h活菌数对数值为8.48,存活率为90.99%。结果显示罗伊氏粘液乳杆菌HCS02-001具有较强的抑制阴道加德纳菌特性,初步判定其具备安全性。

葛根枳椇子洛神花本草酵素的解酒护肝作用研究

以葛根、枳椇子、洛神花为原料,通过益生菌发酵制备本草酵素。筛选菌种比例,分析酵素营养成分,并建立小鼠醉酒模型,考察小鼠醉酒后的醒酒时间、血液乙醇浓度、肝组织抗氧化酶活性含量的变化,探究酵素解酒护肝作用。结果表明,植物乳植杆菌(Lactobacillus plantarum)、罗伊氏粘液乳杆菌(Lactobacillus reuteri)、鼠李糖乳酪杆菌(Lactobacillus rhamnosus)以5∶4∶1比例进行发酵,本草酵素中总酸、粗多糖、游离氨基酸、γ-氨基丁酸、多酚、总黄酮含量分别为21.29 g/kg、12.95 mg/g、3.61 mg/g、86.66μg/g、4.32 mg/g、0.06 mg/g。酵素实验组小鼠醉酒时间和醒酒时间明显缩短;酒后3 h内小鼠血液乙醇浓度显著降低(P<0.05);对比模型组和未发酵提取液组,中、高剂量组小鼠肝组织匀浆中乙醇脱氢酶、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽水平均显著升高,丙二醛含量显著降低(P<0.05),表明葛根枳椇子洛神花本草酵素具有解酒护肝功能。

植物乳杆菌HCS03-001对龋病防治作用研究

牛津杯法检测植物乳杆菌HCS03-001发酵上清液体外抑菌效果。构建大鼠龋病模型,通过用蒸馏水、洗必泰、实验菌株上清液和菌悬液分别处理大鼠口腔,检测变异链球菌水平、Keyes记分值和龋齿降低率,评价不同处理方法对大鼠口腔内变异链球菌繁殖情况的影响及对龋病发生的抑制作用。结果表明:HCS03-001发酵上清液对致龋菌变异链球菌抑制效果明显,抑菌圈直径可达25.97 mm。与蒸馏水组对比,各实验组大鼠口腔内变异链球菌的水平均有不同程度降低,对大鼠龋病的发生与发展均表现出不同程度的抑制作用,其中该菌上清液和菌悬液对光滑面牙本质龋效果显著(龋齿降低率分别达到77.47%和87.36%)。因此,植物乳杆菌HCS03-001能够抑制大鼠口腔内变异链球菌的代谢繁殖,可有效防治大鼠磨牙龋病的发生与发展。

决明子菊花本草酵素的制备及降血压作用研究

优化决明子菊花本草酵素发酵工艺,并探究其降血压功能。以ACE抑制率为响应值,以发酵时间、发酵温度、接种量为探究指标,通过单因素试验和Box-Behnken试验优化发酵工艺。利用大鼠灌胃试验、测定大鼠的体重、动脉的收缩压和舒张压变化,根据灌胃不同周期探究大鼠血压变化。结果表明:发酵工艺优化为发酵时间72h、发酵温度37℃、接种量7.5%,以此制备的酵素ACE抑制率可达49.34%。大鼠灌胃试验结果显示,决明子菊花本草酵素对大鼠体重不产生影响,未对正常大鼠有降血压作用,对自发性高血压大鼠的血压具有辅助下调作用。表明决明子菊花本草酵素具有辅助降血压作用,其开发和应用具有广阔的市场。

参杞酵素发酵工艺优化及调节免疫功能评价

目的:优化参杞酵素的发酵工艺,并研究参杞酵素对小鼠免疫功能的调节作用。方法:以总酸含量为响应值,以发酵时间、发酵温度、菌种比例、接种量为自变量,通过单因素实验和Box-Behnken试验优化发酵工艺。以80 mg/(kg·d)环磷酰胺诱导小鼠构建免疫低下小鼠模型,分别用低(5.0 mL/kg)、中(10.0 mL/kg)、高(15.0 mL/kg)剂量的试验酵素液免疫调节干预,模型组和正常组灌胃等体积的蒸馏水,测定血清中免疫球蛋白G(Immunoglobulin G,IgG)含量和白细胞介素-4(Interleukin-4,IL-4)、白细胞介素-10(Interleukin-10,IL-10)、干扰素-γ(Interferon-γ,IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)的相对表达量,利用碳廓清法检测小鼠吞噬细胞的吞噬能力及对脏器指数的影响。结果:优化得到发酵工艺为发酵时间72 h,发酵温度37℃,接种量5%,菌种比例5:4.5:0.5,总酸含量为1.23 g/100 g。试验酵素可显著(P<0.05)上调免疫抑制小鼠的血清中IFA-γ、TNF-α、IL-4及Ig G水平,下调IL-10水平,高剂量的小鼠血清IL-10质量浓度可恢复至72.26 pg/mL,小鼠血清IFN-γ质量浓度达到213.47 pg/mL,TNF-α质量浓度可达246.13 pg/mL,IgG的质量浓度可达119.89 ng/mL,接近或高于正常组,明显增强吞噬细胞的吞噬能力。结论:参杞酵素对小鼠免疫功能具有正向调节作用。

发酵粘液乳杆菌HCS08-005冻干粉制备工艺优化及其抗过敏功能

该研究以发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillus fermentum)HCS08-005为菌种,采用冷冻干燥技术制备冻干粉,通过单因素试验和响应面试验优化发酵粘液乳杆菌HCS08-005冻干粉的制备工艺,并通过斑马鱼试验验证该菌株对类胰蛋白酶表达水平的影响。结果表明,发酵粘液乳杆菌HCS08-005冻干粉的最佳制备工艺条件为:发酵温度37℃,发酵时间15 h,接种量5%,菌泥与冻干保护剂比例1∶3(kg∶L)。在此优化条件下,冻干粉活菌数为6.40×1011 CFU/g。斑马鱼对发酵粘液乳杆菌HCS08-005冻干粉的最大耐受质量浓度(MTC)为500μg/mL,且不同质量浓度的发酵粘液乳杆菌HCS08-005冻干粉均能极显著降低类胰蛋白酶表达水平(P<0.01)。因此,发酵粘液乳杆菌HCS08-005冻干粉具有抗过敏功效。

具有分解嘌呤核苷能力的益生菌菌株筛选

目的 在不同的肠道菌群及奶制品样品中筛选益生菌菌株,对其耐酸和耐胆盐能力、分解嘌呤核苷能力进行评价,为后续研发治疗高尿酸血症益生菌制剂提供依据。方法 采集内蒙古地区及巴马长寿村的健康婴儿肠道菌群或奶豆腐、奶疙瘩制品,通过选择性培养基划线培养、镜检及16S rDNA测序的方式筛选益生菌菌株。通过耐酸、耐胆盐试验,模拟胃液和模拟肠液筛选出对胃肠道环境耐受能力强的菌株并通过电镜观察其形态。再进一步通过分解嘌呤核苷能力检测确定分解能力最优的菌株。结果 在8个样本中筛选出23株益生菌,对其胃肠耐受能力进行检测后发现筛选出了8株耐受能力较强的益生菌菌株,分别为鼠李糖乳酪杆菌RH01103,罗伊氏粘液乳杆菌HCS02-001,植物乳植杆菌RH03010,动物双歧杆菌乳亚种RH04020,发酵粘液乳杆菌RH08050,副干酪乳酪杆菌HCS17-040,乳酸片球菌RH27102和戊糖片球菌RH34011。通过对分解嘌呤核苷能力检测,发现与未接种益生菌的空白对照组相比,罗伊氏粘液乳杆菌HCS02-001和副干酪乳酪杆菌HCS17-040对肌苷和鸟苷的分解能力最显著(P=0.000 2, P<0.000 1)。结论 8个样本筛选出的23株益生菌中罗伊氏乳杆菌HCS02-001和副干酪乳杆菌HCS17-040的胃肠耐受能力最强,分解嘌呤核苷效率最高。

具有抗幽门螺杆菌能力的乳酸菌菌株筛选

目的在8株乳酸菌中筛选能够抗幽门螺杆菌感染的乳酸菌菌株,为后续研发治疗幽门螺杆菌感染的益生菌制剂提供依据。方法在8株乳酸菌菌株中,通过对幽门螺杆菌抑菌率的检测及构建人胃腺癌细胞感染模型检测8株乳酸菌对幽门螺杆菌的抑制作用,以及对尿素酶活性的检测判断8株菌的抗幽门螺杆菌的能力。结果在抑菌试验中,植物乳植杆菌HCS03-001(t=2.938,P=0.008)和副干酪乳酪杆菌HCS17-040(t=3.864,P=0.006)上清液的抑菌作用较强;植物乳植杆菌HCS03-001、罗伊氏粘液乳杆菌RH02100、副干酪乳酪杆菌HCS17-040能够降低幽门螺杆菌对AGS细胞的黏附能力;通过幽门螺杆菌菌悬液与乳酸菌菌悬液共培养,发现植物乳植杆菌HCS03-001(t=6.257,P<0.001)、副干酪乳酪杆菌HCS17-040(t=5.873,P=0.005)抑制尿素酶活性的作用更强。结论植物乳植杆菌HCS03-001和副干酪乳酪杆菌HCS17-040具有抗幽门螺杆菌感染的能力。

鼠李糖乳酪杆菌RH0121冻干工艺优化及降血糖作用的研究

目的优化鼠李糖乳酪杆菌(Lacticaseibacillus rhamnosus)RH0121的冻干工艺,探究其辅助降血糖作用。方法通过单因素试验和响应面试验,优化鼠李糖乳酪杆菌RH0121冻干粉的生产工艺;同时利用小鼠实验,探究服用冻干粉后小鼠的体质量、口服葡萄糖耐量和血清生化指标水平的变化。结果优化后的工艺为发酵时间9 h,发酵温度37℃,接种量4%,冻干时间50 h。经验证,冻干粉活菌数为5.5×10^(11) CFU/g。灌胃冻干粉样品后的小鼠体质量缓慢回升,小鼠灌胃后120 min血糖水平低于灌胃前(P<0.05)。灌胃后,样品组小鼠血清TC、TG、LDL和TNF-α水平均低于模型组,INS水平高于模型组(均P<0.05)。结论鼠李糖乳酪杆菌RH0121具有辅助降血糖作用,可为开发其他降血糖产品提供原料。