cMyc抑制剂10058-F4诱导白血病THP1细胞凋亡和DNA损伤的机制

目的研究cMyc抑制剂10058-F4对白血病THP1细胞的抑制作用及分子机制。方法体外培养人白血病THP1细胞,加入不同浓度(1、5、10、50、100μmol/L)的cMyc抑制剂10058-F4处理THP1细胞,CCK-8分析药物对细胞生长抑制作用;Calcein/PI和JC-1荧光染色分别检测细胞凋亡和线粒体膜电位的变化;流式细胞仪检测细胞周期;Western blot分析凋亡相关蛋白(Cleaved-Caspase-3、Bax)和DNA损伤应答相关蛋白(pATM和γH2AX)表达。结果不同浓度10058-F4处理THP1细胞后明显抑制细胞的增殖,并呈浓度依赖和时间依赖性;10058-F4呈浓度依赖地诱导THP1细胞凋亡,并且降低线粒体膜电位水平,差异具有统计学意义(P<0.05);10058-F4可诱导THP1细胞发生G2/M期阻滞,上调促凋亡蛋白(Cleaved-Caspase-3和Bax)以及DNA损伤应答相关蛋白(pATM和γH2AX)的表达水平,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论cMyc抑制剂10058-F4对白血病THP1细胞具有凋亡诱导作用,可能与其诱导细胞DNA损伤并激活相关信号途径有关。

急性髓系白血病中垂体肿瘤转化基因-1的表达及临床意义

目的研究垂体肿瘤转化基因-1(PTTG1)在急性髓系白血病(AML)中表达水平及其临床意义。方法收集初治和复发的AML患者骨髓标本,对照组收集非恶性血液肿瘤患者骨髓标本,荧光定量PCR方法检测PTTG1基因的表达水平,并分析其在不同临床特征、FAB分型和疾病分层的AML患者间的表达差异;根据AML患者外周血血细胞进行分类计数和骨髓幼稚细胞比例分组,分析不同组别间PTTG1的表达差异。结果PTTG1基因在AML患者骨髓细胞中表达水平明显高于对照组(P<0.05),初治AML和复发AML之间表达差异不具有统计学意义;不同FAB诊断分型中,M2型AML中PTTG1的表达水平最高,M1型中表达最低,但是差异无统计学意义(P>0.05);根据疾病危险分层分析,低危组中PTTG1的表达水平最高,高危组中PTTG1的表达水平最低,但组间差异无统计学意义(P>0.05);重度贫血和中度贫血AML患者中PTTG1的表达水平明显低于轻度贫血和正常AML患者,差异有统计学意义(P<0.05);根据外周血白细胞和血小板计数以及骨髓幼稚细胞比例设定的不同组别中,PTTG1的表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论PTTG1在AML患者骨髓细胞中表达水平明显高于对照组,其表达水平可能与患者的贫血程度有关。

雷公藤红素诱导多发性骨髓瘤H929细胞凋亡

目的:研究雷公藤红素对人多发性骨髓瘤H929细胞凋亡的诱导作用及分子机制。方法:体外培养H929细胞,加入不同浓度(0.5、1、5和10 mg/L)的雷公藤红素处理细胞,CCK8法分析药物对细胞活力的抑制率;annexin V-PE/7-AAD双染法检测雷公藤红素对H929细胞凋亡的影响;流式细胞术分析雷公藤红素处理的H929细胞中线粒体膜电位水平;彗星电泳实验分析雷公藤红素对细胞DNA损伤的诱导作用;Western blot分析不同浓度的雷公藤红素对H929细胞中凋亡相关分子P53、XIAP、cleaved PARP-1和cleaved caspase-3的蛋白水平以及线粒体细胞色素C释放的影响。结果:不同浓度雷公藤红素处理H929细胞后明显抑制细胞的活力,并呈浓度依赖和时间依赖性。雷公藤红素呈浓度依赖地诱导H929细胞凋亡,并且降低线粒体膜电位水平(P<0.05)。彗星电泳实验结果显示雷公藤红素可以诱导H929细胞的DNA损伤。Western blot实验结果显示雷公藤红素处理的H929细胞中,促凋亡蛋白P53、cleaved PARP-1和cleaved caspase-3的蛋白水平明显升高,而抗凋亡蛋白XIAP的表达水平明显降低(P<0.05)。雷公藤红素可以促进线粒体中细胞色素C的释放,并依赖于caspase-9而激活caspase-3。结论:雷公藤红素对多发性骨髓瘤H929细胞具有凋亡诱导作用,其机制可能与诱导DNA损伤、激活线粒体凋亡途径有关。