组织学与胚胎学考试中学生参与命题的研究与实践

目的:探讨学生参与期末试卷出题,采用全过程形成性考核的效果。方法:将2015级临床本科班同学分为实验班(学生参与期末试卷的命题)和对照班,采用问卷调查和考试成绩分析进行效果评价。结果:实验班同学的考试成绩平均分为71.18±14.76分,不及格率为16.31%;对照班同学的平均分为68.52±16.88分,不及格率为23.07%;80~100分的高分数段同学百分率实验班为33.16%明显高于对照班的26.70%,0~50分的低分数段同学百分率实验班为8.42%明显低于对照班的14.5%。但二者均无统计学意义。结论:我们采用全过程形成性考核模式,定量和定性评价相结合,而且学生参与期末笔试试卷的命题。这有助于检测学生的整个学习过程,培养同学思考问题和解决问题的能力,提高同学的综合能力;而且帮助教师发现教学死角,开拓出题思路,提高学生学习效果和教师教学效果。

SAHA靶定组织蛋白酶V诱导乳腺癌MDA-MB-231细胞自噬

目的探讨组织蛋白酶V(cathepsin V,CTSV)在辛二酰苯胺异羟肟酸(suberoylanilide hydroxamic acid,SAHA)诱导乳腺癌MDA-MB-231细胞自噬中的作用机制。方法以人乳腺癌MDA-MB-231细胞为研究对象,Muse细胞分析仪检测SAHA对细胞活力的影响;Real-time PCR和Western blot检测SAHA对CTSV的mRNA和蛋白的作用;CTSV-siRNA转染细胞,Real-time PCR和Western blot检测CTSV的mRNA和蛋白的情况;细胞免疫荧光法检测SAHA对LC3B表达的影响;Real-time PCR和Western blot检测SAHA诱导自噬相关ATG分子和LC3的mRNA和蛋白的变化;Bafilomycin A1抑制自噬,随后Western blot测定p62蛋白水平,Muse细胞分析仪检测SAHA对细胞活力的作用。结果SAHA在抑制MDA-MB-231细胞增殖的同时促进CTSV的表达。CTSV-siRNA转染细胞后,CTSV的mRNA和蛋白水平均明显降低。SAHA促进LC3免疫荧光点的增加,与CTSV-siRNA联合作用后可以恢复由CTSV-siRNA干扰引起的细胞自噬减弱。SAHA增强了Beclin1的表达,并伴有LC3B升高和mTOR降低。CTSV-siRNA的加入逆转了SAHA的效应。Bafilomycin A1阻断自噬后,被SAHA抑制的p62蛋白的表达和细胞活力明显增加。结论SAHA靶定CTSV诱导乳腺癌MDA-MB-231细胞自噬。

新医科建设战略背景下基础医学教师教学模式的探索实践

依托“六卓越一拔尖”计划2.0提出的“四新建设”,“新医科”在新一轮科技革命和产业变革的背景下,提出了由治疗为主延展到预防治疗、康养结合的医学的新理念。这是高校进行医学教育新模式的重要举措,也是推动医学高等教育进入内涵式发展的有效切入点。在“新医科”建设战略背景下,高等医学院校基础医学教育势必面临着变革,不但要全面提高医学高校人才的培养质量,还要提升服务于经济社会发展的能力。这要求基础医学教师在人才培养上面临的一些问题需要逐步探索去解决,以期基础医学教学与“新医科”和互联网+等人工智能技术进行深度结合。文章以基础医学中组织学与胚胎学教学为例,分别从理论教学和实验教学两方面,面对新医科提出的要求,把互联网+和人工智能切入具体的教学过程中,以期提高人才培养质量,推动医学高等教育蓬勃发展。

组蛋白去乙酰化酶抑制剂调控p21^(WAF1/CIP1)启动子乙酰化水平影响乳腺癌MCF-7细胞周期

目的研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitor,HDACI)调控p21^(WAF1/CIP1)启动子乙酰化水平,调节乳腺癌MCF-7细胞周期的分子机制。方法采用实时定量PCR、Western blot和DNA-Ch IP方法测定SAHA对乳腺癌MCF-7细胞周期调控系统的影响;应用染色质免疫沉淀(chromatin immunoprecipitation,Ch IP)技术探究SAHA调控p21^(WAF1/CIP1)启动子乙酰化水平的情况。结果 SAHA明显影响乳腺癌细胞周期相关调控因子的表达;在针对p21^(WAF1/CIP1)基因功能的筛查中发现,SAHA可明显诱导p21^(WAF1/CIP1)mRNA和蛋白的表达,并且可调节p21^(WAF1/CIP1)启动子乙酰化水平。结论 SAHA通过影响p21^(WAF1/CIP1)启动子乙酰化程度调节乳腺癌MCF-7细胞周期的进程。

多巴胺D2受体在创伤后应激障碍样大鼠伏隔核内的表达

目的：研究创伤后应激障碍（PTSD）样大鼠伏隔核神经元内多巴胺D2受体表达变化.方法：用连续单一刺激（SPS）方法刺激大鼠制作PTSD模型,取SPS后12h、1d、7d大鼠脑组织;非刺激的脑组织为对照组,分别用免疫组织化学和免疫印迹进行各组伏隔核中神经元多巴胺D2受体表达的观察.结果：免疫组织化学和免疫印迹结果显示,经SPS处理后,伏隔核神经元多巴胺D2受体表达于刺激后12h低于正常组,1d时可见高于正常,7d时仍处于较高水平.结论：大鼠经SPS处理后,伏隔核内多巴胺D2受体表达先降低后升高,提示该受体表达与PTSD血浆糖皮质激素变化有关,进而促进PTSD的精神症状的产生.

黄芪延缓小鼠皮肤衰老的实验研究

目的:从形态学角度研究黄芪延缓小鼠皮肤衰老的作用。方法:小鼠随机分成3组,空白组(C)灌胃生理盐水20ml/kg,黄芪低剂量组(L)和黄芪高剂量组(H)分别灌胃黄芪提取液4g/kg、16g/kg,每次20ml/kg。30天后做组织学切片检测。结果:与C组比较,L组和H组皮肤组织中真皮厚度和胶原纤维面积增加(P<0.01)。H组与L组比较,真皮厚度和胶原纤维面积显著增加(P<0.05)。结论:高剂量黄芪可使真皮厚度和胶原纤维面积明显增加,具有延缓小鼠皮肤衰老的作用。

绞股蓝皂苷在小鼠皮肤衰老中的抗氧化损伤作用研究

目的:探讨绞股蓝皂苷对衰老小鼠皮肤的抗氧化保护作用。方法:60只小鼠随机分成3组,青年组(A)、老年对照组(B)和老年给药组(C);A、B组灌胃生理盐水20ml/kg,C组灌胃绞股蓝皂苷提取液8g/kg,每天1次。30天后取皮肤组织,检测丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果:与A组比较,B组、C组皮肤组织中MDA含量增加,SOD、CAT、GSH-Px活性降低(P<0.05);与B组比较,C组皮肤组织中MDA含量减少,SOD、CAT、GSH-Px活性增加(P<0.05)。结论:灌胃绞股蓝皂苷可减轻衰老小鼠皮肤的氧化损伤,具有延缓小鼠皮肤衰老的作用。

不同骨骼肌桥接兔正中神经缺损的实验形态学研究

用游离自然变性背最长肌和肱三头肌内侧头为肌桥,分别缝接18只兔的右、左肢正中神经缺损2cm。经术后7天、14天、28天、45天、60天和180天的连续形态学观察,得知再生神经纤维是通过两肌桥变性残留的管而达靶器官。背最长肌桥的神经再生效果明显优于肱三头肌内侧头,可能由于前者较后者肌纤维长和配列规则所致。

SAHA-CTSV轴通过诱导过度自噬抑制乳腺癌MCF-7细胞的生长

目的研究SAHA-CTSV轴通过诱导过度自噬抑制乳腺癌MCF-7细胞生长的作用和机制。方法以人乳腺癌MCF-7细胞为研究目标,Muse细胞分析仪检测SAHA对细胞活力的作用;Real-time PCR和Western blot检测SAHA对CTSV的mRNA及蛋白表达的影响,同时检测利用siRNA干扰技术敲除CTSV后的细胞CTSV表达水平;细胞免疫荧光法检测SAHA对LC3II分子的作用;Real-time PCR和Western blot检测SAHA诱导自噬过程中相关ATG分子和LC3的mRNA和蛋白的变化;Bafilomycin A1抑制自噬,随后利用Western blot和Muse细胞分析仪分别检测p62蛋白水平和SAHA作用后的细胞活力。结果SAHA可以抑制MCF-7细胞的增殖,并促进CTSV的表达。CTSV-siRNA转染细胞后,CTSV的mRNA和蛋白水平均显著性降低。SAHA增加了LC3免疫荧光点的分布,与CTSV-siRNA共同作用可恢复由CTSV-siRNA敲减引起的细胞自噬减弱。SAHA在增强ATG4C和Beclin1表达的同时,LC3B也随之升高而mTOR则下降。抑制CTSV表达后也同时逆转了SAHA的效应。Bafilomycin A1阻断自噬后,被SAHA抑制的p62蛋白的表达和细胞活力显著增强。结论SAHA-CTSV轴通过诱导过度自噬抑制乳腺癌MCF-7细胞的生长。

翻转课堂与理实一体化相结合教学模式在组胚教学中的应用探讨

我国组胚教学实践中普遍采用的传统教学模式,即传递-接受模式。它本质上是以教师为中心,这种教学模式最大的弊端在于忽略学生的主动性、创造性和学生的认知主体作用。我们通过基于网络教学平台的翻转课堂模式将男性生殖系统理论内容与实验观察无缝连接起来。结果显示,满分32分的理论测试分值,理实一体化组的平均分为28.8分,明显高于传统教学组22.7分(p<0.05),理实一体化组该节课的平均实验成绩为8.9分,明显高于传统教学组的学生7.6分(p<0.05)。此教学模式激发了学生的学习兴趣,大大提高了教学效果。

p21^(WAF1)蛋白的表达与非小细胞肺癌增殖和预后的关系

目的:检测人非小细胞肺癌(nonsmallcelllungcancer,NSCLC)组织中的p21WAF1/CIP1表达水平,探讨NSCLC中p21WAF1/CIP1的表达与细胞增殖活性和预后的关系。方法:采用流式细胞术检测60例NSCLC中p21WAF1/CIP1的表达量及DNA含量;分析p21WAF1/CIP1表达水平与S期细胞比例、预后的关系。结果:正常肺组织中未见p21WAF1/CIP1的表达,60例NSCLC组织中p21WAF1/CIP1阳性率为60%(36/60),p21WAF1/CIP1阳性表达者的S期细胞比例(10.87±0.69)%低于阴性表达者(13.30±0.93)%,t=3.232,P=0.001。p21WAF1/CIP1的表达与患者的术后累积生存月数和5年生存率有关,p21WAF1/CIP1阳性表达者的术后平均生存月数(40个月)明显高于阴性表达者(25个月),t=2.885,P=0.003;5年生存率(29%)也高于阴性表达者(9%),t=2.712,P=0.004。结论:p21WAF1/CIP1表达是判断NSCLC预后的一个可参考指标。

用骨骼肌桥接神经缺损的国内研究概况

关于神经缺损的修复问题,虽经国内外学者多年研究,但迄今尚未取得一致结果。自体神经移植,供区神经受损害,而异体神经移植又出现难以克服的免疫排斥反应。由于自体骨骼肌具有与神经相似的结构,所以国内、外学者都在进行骨骼肌为肌桥缝接神经缺损的研究。国内自1986年孔吉明、钟世镇首次用骨骼肌桥接神经缺损获得神经再生成功以来。

单一延长应激对Wistar大鼠海马Calcineurin表达的影响

目的探讨创伤后应激障碍模型-单一延长应激对Wistar大鼠海马钙调神经磷酸酶(Calcineurin,CaN)表达的影响。方法将Wistar大鼠(n=30)随机分为单一延长应激组(n=15)和对照组(Control,n=15)。前者对大鼠实施国际公认的创伤后应激障碍(posttraumatic stress disorder,PTSD)动物模型方法-单一延长应激(Single-Prolonged Stress,SPS)暴露,对照组不给予任何处理。14 d后断脑取海马,通过ELISA、Western blot、免疫组化等方法检测两组大鼠海马CaN的表达改变。结果 ELISA结果显示单一延长应激暴露后大鼠海马组织匀浆CaN水平明显降低(P <0. 05);Western blot检测示单一延长应激组大鼠海马CaN Aα蛋白表达显著低于对照组(P <0. 01);免疫组化表明单一延长应激后CaN Aα蛋白在海马CA1、CA3区表达明显减少(P <0. 01),而齿状回区(DG)无明显差异(P> 0. 05)。结论单一延长应激可致CaN下调,CaN表达减少可能是PTSD海马损伤的重要分子机制之一。

组织蛋白酶V对乳腺癌MCF-7细胞增殖抑制作用的研究

目的探讨组织蛋白酶V(CTSV)对乳腺癌MCF-7细胞增殖的抑制作用。方法以人乳腺癌MCF-7细胞为研究对象,分为正常对照组和SAHA(0.5、1、2、5、10、20和50μmol/L)组。MUSE自动细胞分析仪检测辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)对MCF-7细胞活力的影响,实时荧光定量PCR技术检测MCF-7细胞中微管相关蛋白1轻链3 A(LC3A)和CTSV mRNA表达变化的情况,Western blot检测CTSV蛋白的表达水平。结果 MUSE自动细胞分析仪结果显示,与正常对照组比较,经过SAHA处理后MCF-7细胞活力明显下降(P<0.01)。实时荧光定量PCR结果表明,LC3A和CTSV mRNA水平在SAHA的作用下增加(P<0.01)。Western blot结果发现,SAHA可以促进CTSV蛋白表达增加(P<0.05)。结论 CTSV在SAHA诱导的乳腺癌细胞增殖抑制过程中起到重要的调控作用。

Cx43基因敲除减轻LPS腹腔注射后胶质细胞的活化和脑内炎症反应

目的考察缝隙连接蛋白43(connexin43,Cx43)基因敲除对脂多糖(lipopolysacchiride,LPS)腹腔注射后胶质细胞的活化和脑内炎症反应的影响。方法采用腹腔LPS注射方法制作外周免疫激活小胶质细胞模型,实验动物共分为4组。Cx43基因敲除小鼠LPS腹腔注射组(Cx43KO-LPS组),Cx43基因敲除小鼠生理盐水对照组(Cx43 KO-NS组),野生小鼠LPS腹腔注射组(WT-LPS组)和野生小鼠生理盐水对照组(WT-NS组)。通过免疫荧光染色的方法观察小胶质细胞(Iba1)和星形胶质细胞(GFAP),通过Western blot方法考察脑内炎症介质IL-1β的变化。结果免疫荧光染色结果提示,Iba1和GFAP的荧光光密度在Cx43 KO-LPS组显著高于Cx43 KO-NS组,WT-LPS组显著高于WT-NS组,WT-LPS组显著高于Cx43KO-LPS组。IL-lβ水平在腹腔注射LPS的2组均高于2个生理盐水对照组,但在WT-LPS组具有最高的表达。结论 Cx43基因敲除能够减轻LPS腹腔注射后脑内炎症介质IL-1β的表达升高,减轻小胶质细胞和星形胶质细胞的活化。

维生素D对分化中期c2c12细胞的胰岛素信号通路的影响研究

目的：探讨维生素D（VitD）对分化中期的骨骼肌细胞c2c12的胰岛素信号通路的影响。方法用VitD10 nm或是100 nm刺激分化4 d的骨骼肌细胞c2c121 d，细胞回收前进行或不进行5 min的50 nm胰岛素的刺激。Western印迹法测定胰岛素信号通路中细胞外信号调节激酶（ERK）和丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（AKT）的磷酸化水平。结果 VitD单独处置能够提高ERK的磷酸化水平，并且呈剂量依赖性。其与胰岛素联合处置引起的ERK磷酸化为加和效应；VitD单独处置没有改变AKT的磷酸化水平，与胰岛素联合应用也没有改变胰岛素引起的AKT的磷酸化水平。结论在分化中期的骨骼肌细胞c2c12中，VitD通过加和效应提高了胰岛素信号通路中ERK的磷酸化，但没有影响AKT的磷酸化水平。