对非内分泌科护士进行血糖监测知识培训前后的调查与分析

目的了解非内分泌科护士对糖尿病血糖监测知识的掌握程度，以及培训后改善情况，为更好地实施糖尿病健康教育提供依据，并对存在问题找出对策。方法在血糖监测知识培训前后分别发放内容相同的调查问卷，通过对比所得成绩对非内分泌科护士进行调查分析。结果培训后达到良好的有43份（71．7％），较培训前提高了48．4％；差仅1份（1．7％）较培训前降低了30％。结论非内分泌科护士对糖尿病知识掌握得不够理想，整体得分较低，经过血糖监测知识培训成绩大幅提升，非内分泌科护士应主动学习新知识，保证患者就医安全。

内分泌科护理给药安全隐患分析与管理对策

内分泌失调是一种常见疾病,该系统能够对人身体的生长状况和新陈代谢情况进行综合性的调节。内分泌系统与人身体内部的神经系统保持着同步,在分泌的过程中能够确保身体机能处于稳定的环境中,对人的生殖产生着重要的影响和控制。

淫羊藿苷调控mTOR/Akt/CREB通路对高糖诱导的足细胞自噬及凋亡的影响

目的 探讨淫羊藿苷对高糖诱导的足细胞自噬、凋亡及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(Akt)/环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)通路的影响。方法 将小鼠足细胞MPC5分为5组:正常对照组(5.5 mmol·L^(-1)葡萄糖)、高糖组(30 mmol·L^(-1)葡萄糖)、淫羊藿苷组(30 mmol·L^(-1)葡萄糖+5μmol·L^(-1)淫羊藿苷)、GDC-0349组(30 mmol·L^(-1)葡萄糖+50μmol·L^(-1)GDC-0349)、淫羊藿苷+GDC-0349组(30 mmol·L^(-1)葡萄糖+5μmol·L^(-1)淫羊藿苷+50μmol·L^(-1)GDC-0349)。培养48 h后,噻唑蓝法检测MPC5细胞活力;吖啶橙染色观察MPC5细胞自噬情况;流式细胞术检测MPC5细胞凋亡;蛋白印迹法检测MPC5细胞自噬[微管相关蛋白1轻链3(LC3)Ⅱ、LC3Ⅰ、自噬相关蛋白(Beclin-1)]、凋亡[Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)]和mTOR/Akt/CREB通路相关蛋白的表达。结果 与正常对照组比较,高糖组MPC5细胞活力、Bcl-2、磷酸化mTOR(p-mTOR)/mTOR、磷酸化Akt(p-Akt)/Akt、磷酸化CREB(p-CREB)/CREB蛋白表达水平显著降低(P<0.05),自噬能力增强,自噬体表现出橙色荧光,细胞凋亡率、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1、Bax蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。与高糖组比较,淫羊藿苷组MPC5细胞活力、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1、Bcl-2、p-mTOR/mTOR、p-Akt/Akt、p-CREB/CREB蛋白表达水平显著升高,自噬能力进一步增强,自噬体数量增多,自噬体呈现出砖红色荧光(P<0.05),细胞凋亡率、Bax蛋白表达水平显著降低(P<0.05);GDC-0349组MPC5细胞活力、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1、Bcl-2、p-mTOR/mTOR、p-Akt/Akt、p-CREB/CREB蛋白表达水平显著降低,自噬能力减弱,自噬体数量减少,自噬体表现出橙色荧光(P<0.05),细胞凋亡率、Bax蛋白表达水平显著升高(P<0.05);淫羊藿苷+GDC-0349可逆转淫羊藿苷对高糖诱导MPC5细胞的作用效果(P<0.05)。结论 淫羊藿苷通过激活mTOR/Akt/CREB通路促进高糖诱导的足细胞自噬抑制细胞凋亡。

2型糖尿病合并肥胖患者血清肌联素水平与胰岛素抵抗的相关性

目的 观察2型糖尿病(T2DM)合并肥胖患者血清肌联素(myonectin)水平的变化,探讨血清myonectin水平的影响因素及其与胰岛素抵抗的相关性。方法 选择2020年11月至2022年6月在河北北方学院附属第一医院内分泌科住院的186例T2DM患者,根据体重指数(BMI)分为糖尿病正常体重组(60例)、糖尿病超重组(65例)和糖尿病肥胖组(61例)。另选取同期于医院体检且BMI正常的健康者作为正常对照组(60例)。测定各组血清myonectin、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、糖化血红蛋白(HbA1c)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平,计算BMI及稳态胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。比较各组血清myonectin水平,并分析血清myonectin水平与胰岛素抵抗的相关性。结果 与正常对照组比较,糖尿病正常体重组、糖尿病超重组和糖尿病肥胖组的血清myonectin水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与糖尿病正常体重组比较,糖尿病超重组和糖尿病肥胖组的myonectin水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与糖尿病超重组比较,糖尿病肥胖组的myonectin水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。多元逐步回归分析表明,影响T2DM患者BMI的主要因素为myonectin、HOMA-IR、LDL-C、HDL-C、HbA1c。影响HOMA-IR的主要因素为myonectin、BMI、HbA1c、HDL-C。结论 血清myonectin水平在T2DM合并肥胖患者中显著降低,myonectin与胰岛素抵抗密切相关,与糖脂代谢共同参与了肥胖及糖尿病的发生、发展。

姜黄素对糖尿病并发抑郁症模型大鼠的改善作用及机制

目的基于环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)/脑源性神经营养因子(BDNF)信号通路,研究姜黄素对糖尿病并发抑郁症模型大鼠的改善作用及潜在机制。方法采用高脂高糖饲料喂养+腹腔注射链脲佐菌素+慢性不可预测性应激致郁的方法构建糖尿病并发抑郁症模型大鼠。将造模成功的大鼠随机分成模型组,阳性对照组(0.18g/kg二甲双胍和1.8mg/kg氟西汀,灌胃),姜黄素低、高剂量组(30、60mg/kg,灌胃)和姜黄素高剂量+CREB抑制剂组[60mg/kg姜黄素(灌胃)+5mg/kgCREB抑制剂666-15(腹腔注射)],每组12只。另选取12只健康大鼠作为正常组。各组大鼠给予相应干预4周后,检测大鼠空腹血糖并对其抑郁症状进行评估;检测大鼠血清中皮质酮(CORT)、炎症因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6]水平和海马组织中去甲肾上腺素(NE)、5-羟色胺(5-HT)水平;观察大鼠海马组织病理学变化并检测神经元凋亡情况;检测大鼠海马组织中CREB、BDNFmRNA及蛋白的表达水平。结果与正常组相比,模型组大鼠海马组织损伤严重,神经元分散;空腹血糖,强迫游泳不动时间和悬尾不动时间,血清中CORT、TNF-α、IL-1β和IL-6水平,神经元凋亡指数均显著升高或延长(P<0.05);海马组织中NE、5-HT水平,存活神经元数以及CREB、BDNFmRNA及蛋白表达水平均显著降低或减少(P<0.05)。与模型组相比,阳性对照组和姜黄素各剂量组大鼠海马组织损伤有所减轻,各定量指标均显著改善(P<0.05),且姜黄素高剂量组的改善效果显著优于低剂量组(P<0.05);CREB抑制剂可显著逆转高剂量姜黄素对模型大鼠的改善作用(P<0.05)。结论姜黄素可改善糖尿病并发抑郁症模型大鼠的抑郁症状,减轻神经元损伤和炎症反应,其作用可能与激活CREB/BDNF信号通路有关。

circLRP6调节miR-31-5p/HMGA1轴对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响

目的分析circLRP6调节miR-31-5p/高迁移率族蛋白A1(HMGA1)轴对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响。方法体外培养人肾小管上皮HK-2细胞,分为对照组、高糖组、高糖+si-NC组、高糖+si-circLRP6组、高糖+si-circLRP6+miR-NC组、高糖+si-circLRP6+miR-31-5p inhibitor组、高糖+si-circLRP6+miR-31-5p inhibitor+si-NC组、高糖+si-circLRP6+miR-31-5p inhibitor+si-HMGA1组,对照组置于含5.5 mmol/L葡萄糖的DMEM培养基内培养,其余各组置于含25 mmol/L葡萄糖的DMEM培养基内培养,并通过Lipofectamine 2000将相应质粒转染至HK-2细胞内,实时定量PCR测定细胞circLRP6、miR-31-5p、HMGA1 mRNA水平,试剂盒测定细胞上清液白细胞介素-6(IL-6)水平、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平、乳酸脱氢酶(LDH)活性以及丙二醛(MDA)含量;流式细胞仪观察细胞凋亡;Western blotting测定细胞HMGA1、Bax、Bcl-2蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验分析miR-31-5p与circLRP6、HMGA1的靶向关系。结果与对照组相比,高糖组HK-2细胞circLRP6水平升高,细胞增殖抑制率、IL-6、TNF-α、LDH、MDA、细胞凋亡率、Bax蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达降低(均P<0.05);与高糖组相比,高糖+si-circLRP6组HK-2细胞增殖抑制率、IL-6、TNF-α、LDH、MDA、细胞凋亡率、Bax蛋白表达降低,Bcl-2蛋白表达升高(均P<0.05);与高糖+si-circLRP6组相比,高糖+si-circLRP6+miR-31-5p inhibitor组HK-2细胞增殖抑制率、IL-6、TNF-α、LDH、MDA、细胞凋亡率、Bax蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达降低(均P<0.05);与高糖+si-circLRP6+miR-31-5p inhibitor组相比,高糖+si-circLRP6+miR-31-5p inhibitor+si-HMGA1组HK-2细胞增殖抑制率、IL-6、TNF-α、LDH、MDA、细胞凋亡率、Bax蛋白表达降低,Bcl-2蛋白表达升高(均P<0.05)。miR-31-5p与circLRP6、HMGA1均具有靶向关系。结论沉默circLRP6可能通过上调miR-31-5p,抑制HMGA1表达,对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤发挥保护作用。

circFAT1调节miR-211-5p/CCND2轴对糖尿病心肌病大鼠心肌损伤的影响

目的探讨circFAT1对糖尿病心肌病(DCM)大鼠心肌损伤的影响及对miR-211-5p/细胞周期蛋白D2(CCND2)轴的调节机制。方法利用高糖高脂饲料联合链脲佐菌素建立DCM大鼠模型,并随机分为DCM组、circ-NC组、circFAT1组、circFAT1+激动剂-NC组和circFAT1+miR-211-5p激动剂组,以喂食普通饲料的大鼠作为对照组,每组20只。实时PCR检测心肌组织中circFAT1、miR-211-5p、CCND2水平;Western blotting检测心肌组织CCND2蛋白表达;生化分析仪检测大鼠空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)水平;心脏超声检测大鼠心功能;HE和Masson染色观察心肌组织病理形态;TUNEL染色检测心肌细胞凋亡情况;ELISA法检测白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;双荧光素酶报告基因实验验证circFAT1、miR-211-5p、CCND2之间的靶向关系。结果与对照组相比,DCM组circFAT1、CCND2 mRNA及蛋白表达,左心室射血分数(LVEF)、左心室缩短分数(LVFS)水平降低(P<0.05),FBG、TC、TG、左心室舒张末期直径(LVEDd)、左心室收缩末期直径(LVEDs)、胶原容积分数(CVF)、细胞凋亡率、IL-1β、IL-6、TNF-α水平均升高(P<0.05);与DCM组相比,circFAT1组circFAT1、CCND2 mRNA及蛋白表达,LVEF、LVFS水平升高(P<0.05),FBG、TC、TG、LVEDd、LVEDs、CVF、细胞凋亡率、IL-1β、IL-6、TNF-α水平降低(P<0.05);miR-211-5p激动剂逆转了circFAT1对DCM心肌损伤的缓解作用,且CCND2 mRNA及蛋白表达降低(P<0.05)。结论circFAT1通过调控miR-211-5p/CCND2轴减轻DCM大鼠心肌组织损伤。

17α-羟化酶缺陷症合并卵巢肿瘤1例

先天性肾上腺皮质增生症(congenital adrenal hyperplasia,CAH)是一种常染色体隐性遗传病,该病主要是因为催化肾上腺类固醇合成通路酶的缺陷而导致了皮质类固醇合成障碍。17α-羟化酶缺陷症(17α-hydroxylase deficiency,17-αOHD)是由于CYP17A1基因突变所致的罕见CAH,发病率为1/100000~1/50000,仅约占所有CAH的1%[1],早期无典型的临床表现,常以高血压、低钾血症及性发育异常就诊,约88%的患者至青春期才被确诊。

Na^(+)/Ca^(2+)交换体抑制剂SN-6和维拉帕米降低肾上腺皮质癌细胞系NCI-H295R醛固酮合成酶表达

目的研究Na^(+)/Ca^(2+)交换体(NCX)抑制剂SN-6和钙通道阻滞剂(CCB)维拉帕米对钾离子(K^(+))刺激的肾上腺皮质癌细胞系NCI-H295R(H295R)醛固酮合成酶表达的影响。方法H295R细胞分为对照组、K^(+)(15 mmol/L)处理组、钙通道阻滞剂维拉帕米(verapamil)(10μmol/L)处理组、SN-6(10μmol/L)处理组、K^(+)+维拉帕米处理组、K^(+)+SN-6处理组、维拉帕米+SN-6处理组和K^(+)+维拉帕米+SN-6处理组,用实时荧光定量PCR检测醛固酮合成酶(CYP11B2)的mRNA表达,用FLIPR Calcium6检测细胞内钙离子水平。结果与对照组相比,K^(+)刺激醛固酮合成酶CYP11B2的mRNA表达(P<0.001);SN-6和维拉帕米均抑制K^(+)刺激的CYP11B2的mRNA表达(P<0.01);与K^(+)+SN-6组相比,K^(+)+SN-6+维拉帕米组更能显著抑制CYP11B2的mRNA表达(P<0.001)。SN-6和维拉帕米显著降低K^(+)刺激的细胞内钙离子水平(P<0.0001)。结论SN-6和维拉帕米均抑制K^(+)诱导的H295R细胞的醛固酮合成酶的表达;SN-6联合维拉帕米处理,抑制作用更显著。

非转移性黑素瘤糖蛋白B与糖尿病及糖尿病并发症的相关性研究进展

非转移性黑色素瘤糖蛋白B(Gpnmb)是一种在低转移潜能黑色素细胞系中发现的Ⅰ型跨膜糖蛋白,可减轻免疫系统的炎症反应、促进损伤脑组织的修复、增加成骨细胞活性,并与皮肤系统疾病及多种恶性肿瘤的发生密切相关。糖尿病已成为目前我国日益严峻的公共卫生问题,而Gpnmb可能与糖代谢、胰岛素抵抗及糖尿病相关并发症的发生发展密切相关。但目前与其相关的病理机制尚未完全阐明,仍需进一步大量前瞻性研究探寻Gpnmb与糖尿病及其并发症的相关性,为糖尿病的治疗及预后提供可靠依据。

不同BMI的特发性矮小症患儿应用重组人生长激素治疗的疗效及安全性分析

目的:分析不同体重指数(body mass index,BMI)的特发性矮小症(idiopathic short stature,ISS)患儿在重组人生长激素(recombinant human growth hormone,rhGH)治疗下的疗效差异及安全性。方法:选取于河北北方学院附属第一医院接受rhGH治疗的ISS患儿为研究对象,根据7岁以下儿童生长标准及中国6~18岁学龄儿童青少年性别、年龄、体质指数、超重与肥胖界值,将ISS患儿分为BMI正常组、超重组、肥胖组,测定三组患儿治疗前、治疗3个月及6个月后的身高(height,Ht)、BMI、生长速率(growth velocity,GV)、身高标准差积分(height standard deviation score,HtSDS)、胰岛素样生长因子-1(insulin like growth factor-1,IGF-1)、胰岛素样生长因子结合蛋白-3(insulin like growth factor binding-protein-3,IGFBP-3)、空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、甲状腺功能及肝功能。结果:三组ISS患儿在rhGH治疗后Ht、GV、HtSDS、IGF-1、IGFBP-3均较治疗前增加(P<0.05)。BMI正常组患儿Ht、GV和HtSDS增长量明显高于超重组及肥胖组(P<0.05),超重组与肥胖组相比无明显差异(P>0.05)。BMI正常组患儿在治疗6个月后BMI较治疗前增加(P<0.05),而超重组及肥胖组BMI均较前下降(P<0.05)。rhGH治疗对FBG、甲状腺功能、肝功能无明显影响。结论:rhGH能明显提高ISS患儿的Ht、HtSDS、GV、IGF-1、IGFBP-3水平,BMI正常的ISS患儿的疗效明显好于超重组及肥胖组,超重及肥胖ISS患儿疗效无明显差异,rhGH治疗具有较好的安全性。

雷公藤多苷对高糖诱导人肾小管上皮细胞凋亡及CXCL10/CXCR3轴的影响

目的 探讨雷公藤多苷(TG)对高糖诱导人肾小管上皮细胞HK-2凋亡及CXC趋化因子配体10(CXCL10)/CXC趋化因子受体3(CXCR3)轴的影响。方法 体外培养人肾小管上皮细胞HK-2,并分为对照组(含5.5 mmol/L葡萄糖培养基)、高糖组(含25 mmol/L葡萄糖培养基)和12.5、25、50 mg/L TG组(分别用12.5、25、50 mg/L的TG和25 mmol/L葡萄糖培养基)。四甲基偶氮唑盐比色法检测HK-2细胞活力;流式细胞术检测HK-2细胞凋亡情况;2’,7’-二氯二氢荧光素二乙酸酯法检测HK-2细胞活性氧(ROS)水平;黄嘌呤氧化酶法检测HK-2细胞超氧化物歧化酶(SOD)水平;酶联免疫吸附试验检测HK-2细胞炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β1(TGF-β1)水平;蛋白免疫印迹法检测HK-2细胞凋亡蛋白[胱天蛋白酶(Caspase)-3、Caspase-9]以及CXCL10、CXCR3蛋白表达。结果 与对照组比较,高糖组HK-2细胞活力、SOD水平显著降低,凋亡率、ROS、TNF-α、TGF-β1水平及Caspase-3、Caspase-9、CXCL10、CXCR3蛋白表达升高(P<0.05);与高糖组比较,12.5、25、50 mg/L TG组HK-2细胞活力、SOD水平升高,凋亡率、ROS、TNF-α、TGF-β1水平及Caspase-3、Caspase-9、CXCL10、CXCR3蛋白表达降低,且高剂量效果更好(P<0.05)。结论 TG可抑制高糖诱导的HK-2细胞凋亡、氧化应激和炎症反应,其机制可能与抑制CXCL10/CXCR3轴有关。

认知行为治疗辅助舍曲林对2型糖尿病伴抑郁患者的影响

目的 探讨认知行为治疗辅助舍曲林对2型糖尿病伴抑郁患者的影响。方法 选取2019年1月至2020年12月河北北方学院附属第一医院收治的2型糖尿病伴抑郁患者60例,根据随机数学表法将其分为对照组(30例)和试验组(30例)。对照组口服盐酸舍曲林片,试验组在对照组的基础上辅助认知行为治疗,疗程为8周。比较两组临床疗效;比较两组治疗前后心率变异性(HRV)、空腹胰岛素(FINS)、空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、C反应蛋白(CRP)、汉密尔顿抑郁量表(HAMD)总分。结果 对照组脱落4例,试验组脱落2例。试验组临床疗效优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组HRV变化的间期总体标准差(SDNN)、副交感神经活动的连续窦性R-R间期差值均方根(rMSSD)、副交感神经调节能力的相邻间期的差值标准差(SDSD)、副交感神经调节能力的高频段功率(HF)高于治疗前,交感神经活性为主的低频段功率(LF)、LF/HF低于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05);试验组SDNN、r MSSD、SDSD、HF高于对照组,LF、LF/HF低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组FINS、FBG、HOMA-IR、HAMD总分、CRP低于治疗前,且试验组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗前后Hb A1c比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 认知行为治疗辅助舍曲林对2型糖尿病伴抑郁患者临床效果更佳,同时对HRV、血糖、胰岛素功能、CRP改善更理想。

紫草素对体外模拟糖尿病并发抑郁症环境大鼠海马神经元凋亡的影响

目的研究紫草素对模拟糖尿病并发抑郁症(DD)环境大鼠海马神经元凋亡的保护作用。方法取大鼠胎鼠海马神经元进行体外原代培养,并以葡萄糖联合皮质酮干预的方法构建体外模拟DD环境海马神经元细胞模型。噻唑蓝法检测不同浓度紫草素对模拟DD环境海马神经元细胞活力的影响。取传代的大鼠胎鼠海马神经元细胞,随机分为对照组、模型组、紫草素(2μmol/L)组、C16-PAF[有效的丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)激活剂,4μmol/L]组、紫草素+C16-PAF(2μmol/L+4μmol/L)组,药物干预、建模后,检测神经元细胞活力、细胞损伤、凋亡率、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-18(IL-18)水平和凋亡相关蛋白[半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(caspase-9)、B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(Bax)]及MAPK信号通路蛋白表达。结果不同浓度紫草素可增强体外模拟DD环境大鼠海马神经元活力(P<0.05),并在一定浓度范围内随浓度升高而作用增强。与对照组比较,模型组神经元细胞尼氏小体数减少,细胞明显损伤,细胞活力降低(P<0.05),凋亡率、TNF-α、IL-6、IL-18水平和caspase-9、Bax、磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)/p38 MAPK蛋白表达升高(P<0.05);与模型组比较,紫草素组神经元尼氏小体数增加,损伤减轻,细胞活力升高(P<0.05),凋亡率、TNF-α、IL-6、IL-18水平和caspase-9、Bax、p-p38 MAPK/p38 MAPK蛋白表达降低(P<0.05);C16-PAF可逆转紫草素对模拟DD环境海马神经元细胞模型的作用效果(P<0.05)。结论紫草素可抑制MAPK信号激活,减少炎性细胞因子表达合成,减轻模拟DD环境大鼠海马神经元炎症损伤,抑制其凋亡,起到保护作用。

环状RNA ITCH对高糖诱导的心脏成纤维细胞活化的影响与机制研究

目的 探讨环状RNA ITCH(Circ-ITCH)对高糖诱导的心脏成纤维细胞(CF)活化的影响及其机制。方法 体外培养人CF(HCF),按照处理方法的不同分为对照组、高糖组、过表达载体阴性对照(OV-NC)组、Circ-ITCH过表达载体(OV-Circ-ITCH)组;模拟物阴性对照[微小RNA(miR)-NC]组、miR-212-3p模拟物(miR-212-3p mimics)组、抑制物阴性对照(inhibitor-NC)组、miR-212-3p抑制物(miR-212-3p inhibitor)组;Circ-ITCH过表达载体+模拟物阴性对照(OV-Circ-ITCH+miR-NC)组、Circ-ITCH过表达载体+miR-212-3p模拟物(OV-Circ-ITCH+miR-212-3p mimics)组、Circ-ITCH过表达载体+小分子干扰RNA阴性对照(OV-Circ-ITCH+si-NC)组和Circ-ITCH过表达载体+Samd同源物7小分子干扰RNA(OV-Circ-ITCH+si-Smad7)组,除对照组外,其余各组转染12 h后采用30 mmol/L D-葡萄糖处理进行高糖诱导,检测Circ-ITCH、miR-212-3p、Smad7表达、细胞活力及胶原纤维沉积,并验证miR-212-3p与Circ-ITCH、Smad7靶向关系。结果 与对照组比较,高糖组Circ-ITCH、Smad7 mRNA和蛋白表达降低(0.45±0.05 vs 0.99±0.07,0.51±0.06 vs 0.99±0.08,0.68±0.05 vs 1.16±0.07,P<0.05),miR-212-3p表达升高(2.17±0.12 vs 1.01±0.08,P<0.05),Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达及细胞活力升高(P<0.05),胶原纤维沉积增多。Circ-ITCH过表达升高高糖诱导的HCF细胞中Smad7表达,降低miR-212-3p、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、α-SMA表达及细胞活力,减少胶原纤维沉积。miR-212-3p过表达抑制高糖诱导的HCF细胞中Smad7表达,而抑制miR-212-3p表达则相反。miR-212-3p过表达或抑制Smad7表达均减弱Circ-ITCH过表达对高糖诱导的HCF细胞增殖、胶原纤维沉积的影响。HCF细胞中miR-212-3p与Circ-ITCH、Smad7存在靶向关系。结论 Circ-ITCH靶向抑制miR-212-3p并上调Smad7表达,抑制高糖诱导的HCF细胞活化。

基于mTOR/S6K1通路探究CXCR3对糖尿病肾病足细胞损伤、凋亡、自噬的影响

目的 探究趋化因子受体(CXCR)3对糖尿病肾病足细胞损伤、凋亡、自噬的影响及其作用机制。方法 将分化成熟的小鼠肾脏足细胞MPC-5分为对照组,模型组,si-NC组和si-CXCR3组,噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞24 h、48 h和72 h细胞活力,流式细胞法检测各组细胞凋亡水平,Western印迹检测细胞凋亡关键蛋白B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱天冬氨酸蛋白酶(Caspase)3表达水平,ELISA法检测各组细胞白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-8,肿瘤坏死因子(TNF)-α水平,qPCR及Western印迹检测各组细胞自噬相关蛋白(beclin)1、人自噬相关蛋白(ATG)5及ATG7表达水平,同时检测哺乳动物雷帕霉素靶蛋白/蛋白核糖体S6蛋白激酶(mTOR/S6K1)信号通路关键蛋白的蛋白表达水平及其磷酸化修饰水平。结果 与对照组相比,模型组和si-NC组细胞增殖受到显著抑制,并且随着时间增加抑制能力增强,与模型组和si-NC组相比,si-CXCR3组细胞增殖显著提高(P<0.05);与对照组相比,模型组和si-NC组细胞凋亡均显著增加(P<0.05);与模型组和si-NC组相比,si-CXCR3组细胞凋亡显著降低(P<0.05)。与对照组相比,模型组和si-NC组细胞炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8及TNF-α释放显著增加(P<0.05);与模型组和si-NC组相比,si-CXCR3组细胞炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8及TNF-α显著降低,但仍高于对照组(P<0.05)。与对照组相比,模型组和si-NC组细胞自噬相关蛋白Beclin1、ATG5及ATG7表达水平显著降低,而与模型组和si-NC组相比,si-CXCR3组显著升高(P<0.05);与对照组相比,模型组和si-NC组细胞mTOR、S6K1蛋白表达水平显著升高,其磷酸化修饰也相应增加,而与模型组和si-NC组相比,si-CXCR3组细胞mTOR,S6K1蛋白表达水平显著降低,磷酸化修饰也相应降低(P<0.05)。结论 沉默CXCR3可以提高小鼠肾足组细胞活性,降低细胞凋亡,减少炎症因子释放,对肾足细胞具有保护作用,其机制可能通过增强自噬,调控mTOR/S6K1信号通路活性及磷酸化修饰相关。

三七总皂苷通过抑制RAGE/MAPK信号通路减轻糖尿病性骨质疏松大鼠的炎症损伤

目的探究三七总皂苷(PNS)调控晚期糖基化终产物受体(RAGE)/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路对糖尿病性骨质疏松症(DOP)大鼠炎症损伤的影响。方法将SD大鼠分成对照组、模型组、二甲双胍(MET)组(100 mg/kg)、PNS低剂量组(PNS-L组,10 mg/kg PNS)、PNS高剂量组(PNS-H组,20 mg/kg PNS)、PNS-H+空载体质粒组(20 mg/kg PNS+15μL空载体质粒)、PNS-H+RAGE过表达组(20 mg/kg PNS+15μL RAGE过表达质粒);除对照组外,其余各组大鼠通过高糖高脂饲料喂养及腹腔注射链脲佐菌素进行DOP模型构建;造模成功后各组进行相应给药处理。采用双能X线骨密度检测仪检测大鼠股骨骨密度(BMD);血糖测试仪及酶联免疫吸附法检测空腹血糖(FBG)、血清空腹胰岛素(FINS)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)、碱性磷酸酶(ALP)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;三点弯曲实验和苏木精-伊红染色分别检测股骨生物力学及病理形态变化;蛋白印迹法检测RAGE/MAPK通路蛋白表达。结果与模型组比较,MET组、PNS-L组、PNS-H组大鼠股骨骨小梁增多且间距减小,断裂减轻,股骨BMD、FINS、ALP、股骨最大载荷及刚度显著升高,FBG、TRACP、IL-6、TNF-α、股骨组织RAGE、p-p38 MAPK/p38 MAPK蛋白表达水平显著降低(P<0.05);RAGE过表达可逆转PNS-H对DOP大鼠的改善效果(P<0.05)。结论PNS通过抑制RAGE/MAPK信号通路减轻DOP大鼠炎症损伤。

雷帕霉素对劳力型热射病大鼠下丘脑损伤的保护作用及其机制

目的探讨雷帕霉素(Rapa)对劳力型热射病大鼠下丘脑损伤的保护作用及其机制。方法80只Wistar雄性大鼠随机分为对照组、Rapa组、劳力型热射病(EHS)组及EHS+Rapa组,每组20只。Rapa组及EHS+Rapa组大鼠分别于建模前连续4 d腹腔注射Rapa(1 mg/kg,1次/d),对照组及EHS组给予同体积生理盐水。将EHS组及EHS+Rapa组大鼠置于温度(39.5±0.3)℃、湿度55%±5%的气候舱中跑步,建立EHS模型;对照组及Rapa组大鼠置于相同室温下,进行与EHS组同等强度的跑步。在模型建立过程中,观察各组大鼠的一般状态,测量核心温度并绘制大鼠生存曲线(n=11)。EHS组及EHS+Rapa组大鼠于入舱80 min后,从舱中取中,并观察300 min。对各组大鼠实施麻醉,取腹主动脉血及下丘脑等组织,HE及尼氏染色观察下丘脑的组织病理学改变;免疫荧光法测定神经元凋亡情况;Western blotting法检测大鼠下丘脑组织中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化mTOR(pmTOR)、自噬效应蛋白(Beclin-1)、泛素结合蛋白(p62)及自噬标志物微管相关蛋白1轻链3(LC3)的表达,并计算pmTOR/mTOR及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠血清中神经元特异性烯醇化酶(NSE)、脑活性肽100β蛋白(S100β)、白细胞介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平。结果在入舱后80 min时,与对照组相比,EHS组的核心温度明显升高;与Rapa组相比,EHS+Rapa组的核心温度明显升高(P<0.001)。与EHS组相比,EHS+Rapa组大鼠的生存率升高(P<0.01)。下丘脑组织HE及尼氏染色显示,EHS组大鼠下丘脑神经元病理损伤更重,而EHS+Rapa组大鼠下丘脑神经元病理损伤较EHS组明显减轻(P<0.001)。免疫荧光检测结果显示,EHS组大鼠下丘脑组织中细胞凋亡率较对照组显著增高,而与EHS组相比,EHS+Rapa组大鼠下丘脑组织中细胞凋亡率显著降低(P<0.05)。Western blotting结果显示,与对照组相比,EHS组大鼠下丘脑组织中pmTOR/mTOR及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值升高,Beclin-1表达增加,p62表达减少(P<0.01);与EHS组相比,EHS+Rapa组大鼠下丘脑组织中pmTOR/mTOR比值降低,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值升高,Beclin-1的表达增加,p62表达减少(P<0.05)。ELISA结果显示,与对照组相比,EHS组血清中NSE、S100β、IL-6及TNF-α的表达水平均增高(P<0.05);与EHS组相比,EHS+Rapa组血清中NSE、S100β、IL-6及TNF-α表达水平均降低(P<0.05)。结论雷帕霉素可减轻劳力型热射病引起的下丘脑损伤,改善脑细胞功能,降低炎性因子水平,减少组织细胞凋亡,可能与其抑制mTOR信号通路、增强下丘脑的自噬水平有关。

沉默Salusin-β对糖尿病大鼠内皮功能障碍的影响及机制研究

目的分析短发夹RNA(shRNA)沉默心血管调节肽(Salusin-β)对糖尿病(DM)大鼠内皮功能障碍的影响及其潜在的机制。方法52只SD大鼠随机抽取12只为正常对照组(NC组),其余大鼠采用喂食高糖高脂饲料和腹腔注射链脲佐菌素的方法制备DM模型。将36只建模成功的大鼠分为DM组、Ad-Scr shRNA组和Ad-Salusin-βshRNA组,每组12只。Ad-Scr shRNA组大鼠尾静脉注射腺病毒空载体(Ad-scramble shRNA),Ad-Salusin-βshRNA组大鼠尾静脉注射编码Salusin-βshRNA的腺病毒载体(Ad-Salusin-βshRNA)。每2周注射1次,NC组和DM组注射等量生理盐水。4周后,检测大鼠空腹血糖(FBG)和血清Salusin-β水平以及胸主动脉血管舒张功能;酶联免疫吸附试验检测大鼠胸主动脉肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-1β、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平;二氢乙锭(DHE)染色检测胸主动脉中活性氧(ROS)水平;苏木精-伊红染色观察大鼠胸主动脉组织病理学变化;荧光定量PCR检测大鼠胸主动脉Salusin-β和还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶2(NOX2)mRNA表达水平;Western blot法检测大鼠胸主动脉NOX2、核因子κB p65(NF-κB p65)蛋白表达。结果与NC组相比,DM组大鼠FBG、血清Salusin-β水平升高,胸主动脉TNF-α、IL-6、IL-1β、MDA、ROS水平升高,胸主动脉内膜-中膜厚度增厚,Salusin-βmRNA、NOX2 mRNA和蛋白、细胞核NF-κB p65蛋白水平升高,Ach诱发的内皮依赖性血管舒张功能下降,胸主动脉SOD和细胞质NF-κB p65蛋白表达水平降低(P<0.05)。与DM组和Ad-Scr shRNA组相比,Ad-Salusin-βshRNA组大鼠FBG和血清Salusin-β表达下降,胸主动脉TNF-α、IL-6、IL-1β、MDA、ROS表达下降,胸主动脉内膜-中膜厚度变薄,Salusin-βmRNA、NOX2 mRNA和蛋白、细胞核NF-κB p65蛋白表达水平降低,Ach诱发的内皮依赖性血管舒张功能升高,胸主动脉SOD和细胞质NF-κB p65蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论shRNA沉默Salusin-β可减轻DM大鼠内皮功能障碍,其作用机制可能与抑制NOX2/ROS/NF-κB信号通路活化有关。

老年糖尿病相关性衰弱的影响因素

衰弱被视为糖尿病的新型并发症,对糖尿病患者的躯体功能、心理健康和生活质量等方面产生负面影响的同时,也加重了患者和看护者的负担,产生巨大的医疗、经济、社会负担。本文对老年糖尿病相关性衰弱的影响因素方面进行综述,以增进大众对老年糖尿病患者衰弱的影响因素的认识与重视,并为老年糖尿病患者伴衰弱的早期识别、制定合理的衰弱评估工具以及探讨合并衰弱的老年糖尿病患者的个体化管理方案提供思路。