微波消融在潜在可切除的结直肠癌伴同时性多发肝转移中的临床应用

目的分析微波消融在初始评估为潜在可切除的结直肠癌伴同时性多发肝转移中的临床效果。方法选取2018年10月1日至2020年10月1日河北北方学院附属第一医院普通外科、北京中医药大学东直门医院中西医肿瘤微创医学中心、河北医科大学第四医院外二科收治的潜在可切除的结直肠癌伴同时性多发肝转移患者,统计其一般资料、病理特征、治疗方式和临床疗效,根据治疗方式,分为转化治疗+腹腔镜结直肠癌根治术+肝病灶切除组(手术切除组)和转化治疗+腹腔镜结直肠癌根治术+肝病灶微波消融组(微波消融组),比较两组患者相关手术指标(手术时间、术后肛门首次排气时间、住院时间等)和术后并发症(吻合口狭窄、吻合口出血、切口感染等),同时进行生存期随访,包括总生存期和无疾病生存期,绘制生存曲线,分析两种治疗方式的临床疗效。结果共纳入潜在可切除的结直肠癌伴同时性多发肝转移患者198例,经FOLFOX或FOLFIRI方案行新辅助化疗成功后66例,其中,手术切除组30例,均达到了根治效果,微波消融组36例,共消融57个肿瘤;54个肿瘤在第1次消融后达到完全消融(94.74%),后经再次消融后均达到无疾病证据;微波消融组患者手术时间、术中出血量、术后首次排气时间、进流质饮食时间、住院时间及住院费用均显著少于手术切除组(P均<0.001);微波消融组患者术后视觉模拟评分法疼痛评分显著低于手术切除组(P<0.001),切口感染(P=0.740)、吻合口漏(P=1.000)、吻合口狭窄(P=1.000)等并发症两组比较差异均无统计学意义;总生存时间(P=0.191)和无疾病生存时间(P=0.934)两组患者差异无统计学意义;结论对于初始评估为潜在可切除的结直肠癌伴同时性多发肝转移患者,经转化治疗后两组均安全、有效,且有着相似的生存结局,但微波消融组在术后恢复、经济及耐受性方面更具优势,建议临床推广。

SOX7通过靶向调控SHP-2/Wnt/β-catenin/ROS通路抑制结直肠癌细胞增殖、侵袭和迁移

目的研究SOX7调控SHP-2/Wnt/β-catenin/ROS通路从而影响结直肠癌细胞增殖、侵袭和迁移的分子机制。方法将20只裸鼠皮下移植瘤模型随机分为SOX7 NC组(n=5)、SOX mimic组(n=5)、SOX7 NC+PHPS1组(n=5)和SOX7 mimic+PHPS1组(n=5),观察肿瘤生长情况。通过脂质体法将人结直肠癌细胞系SW480细胞转染后,将细胞分为6组,分别为SOX7 NC组、SOX7 mimic组、SOX7 NC+H_(2)O_(2)组、SOX7 mimic+H_(2)O_(2)组、SOX7 NC+PHPS1组、SOX7 mimic+PHPS1组。通过Western blot实验检测各组SW480细胞SHP-2/Wnt/β-catenin/ROS通路相关蛋白的表达,通过细胞划痕实验和Transwell侵袭迁移实验检测SW480细胞的侵袭迁移能力,通过CCK-8检测SW480细胞的增殖。结果小鼠体内实验显示:SOX7 mimic组肿瘤体积明显小于SOX7 NC组(P<0.01),经过PHPS1干预的肿瘤体积明显增大,SOX7 mimic+PHPS1组肿瘤体积和SOX7 NC+PHPS1组的差异无统计学意义。体外实验发现:SOX7 mimic抑制了SW480细胞Wnt、β-catenin、NOX2、NOX4、PI3K、P-PI3K、AKT、P-AKT蛋白表达(P<0.01),促进了p-SHP-2蛋白表达(P<0.01);加入H_(2)O_(2)和SHP-2抑制剂后SOX7 mimic组和SOX7 NC组的Wnt、β-catenin、NOX2、NOX4、PI3K、P-PI3K、AKT、P-AKT的蛋白表达水平升高,但差异无统计学意义,SHP-2、p-SHP-2蛋白的表达水平降低,但差异无统计学意义;细胞划痕、Transwell侵袭迁移实验和CCK-8实验结果表明SOX7通过氧化应激和SHP-2通路抑制了SW480细胞的迁移、侵袭和增殖(P<0.01)。结论SOX7可通过靶向SHP-2/Wnt/β-catenin/ROS通路抑制结直肠癌增殖、侵袭和迁移。

SHP-2在肿瘤相关巨噬细胞中的研究进展

肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)是肿瘤免疫微环境(TIME)中的优势细胞群,是TIME中免疫系统抑制和肿瘤细胞增殖最重要的调节细胞。Src同源2蛋白酪氨酸磷酸酶2(SHP-2)是一种非受体蛋白酪氨酸磷酸酶,该磷酸酶在从细胞表面到细胞核的信号传递中发挥重要作用,且是介导细胞增殖和分化的关键细胞内调节因子,参与多种生长因子和细胞因子的信号通路。最近的研究表明,SHP-2是决定TAMs功能的一个关键酶,但是由于其功能多变,在不同的实体瘤微环境中发挥不同甚至是相反的作用。基于此,本文综述了SHP-2在TAMs功能及在相关实体瘤中的作用,为肿瘤的免疫和靶向治疗提供坚实的科学依据。

血清CitH3、RANTES对重症急性胰腺炎合并腹腔感染患者预后不良的预测价值

目的探讨血清瓜氨酸组蛋白H3(CitH3)、调节激活正常T淋巴细胞表达和分泌的细胞因子(RANTES)对重症急性胰腺炎(SAP)合并腹腔感染患者预后不良的预测价值。方法选取2021年7月至2023年7月河北北方学院附属第一医院收治的96例SAP合并腹腔感染患者为感染组,并根据预后情况将其分为生存组和死亡组。另选取同期河北北方学院附属第一医院收治的108例未合并腹腔感染的SAP患者为未感染组。比较感染组和未感染组及生存组和死亡组的临床资料。采用Pearson相关分析SAP合并腹腔感染患者血清CitH3、RANTES水平与APACHEⅡ评分的相关性。采用多因素Logistic回归分析SAP合并腹腔感染患者预后不良的危险因素。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清CitH3、RANTES对SAP合并腹腔感染患者预后不良的预测价值。结果感染组患者APACHEⅡ评分及血清CitH3、RANTES水平高于未感染组,差异均有统计学意义(P<0.05)。随访结果显示,生存组有69例患者,死亡组有27例患者。死亡组患者血清CitH3、RANTES水平及APACHEⅡ评分高于生存组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,SAP合并腹腔感染患者血清CitH3、RANTES水平与APACHEⅡ评分均呈正相关(r=0.461、0.442,P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,APACHEⅡ评分及血清CitH3、RANTES水平升高为SAP合并腹腔感染患者预后不良的危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,2项指标联合预测的AUC为0.959,大于CitH3、RANTES单独预测的AUC(Z_(联合-CitH3)=2.009,P=0.045;Z_(联合-RANTES)=2.213,P=0.027)。结论在SAP合并腹腔感染患者中,血清CitH3、RANTES水平均升高,且2项指标联合检测对SAP合并腹腔感染患者预后不良具有较高的预测价值。

SHP2在消化系统肿瘤中的研究进展

目前恶性肿瘤已经成为威胁人类身体健康的主要疾病之一,致残率、致死率在逐年上升。Src同源性2的蛋白酪氨酸磷酸酶2(src homology 2 domain-containing protein tyrosine phosphatase 2,SHP2)是蛋白酪氨酸磷酸酶(proteintyrosine phosphatase,PTP)家族中重要的一员,是一种功能广泛的酪氨酸磷酸酶,其在多种实体肿瘤中的表达量升高,在侵袭、转移、增殖、凋亡、耐药性等方面发挥着重要调控作用。已有大量研究表明,SHP2在许多实体瘤的发生和发展中起着非常重要的作用,但现在尚无系统的报道SHP2在消化系统肿瘤中的作用。基于此该文综述了SHP2在7种消化系统中不同肿瘤的生物学功能及临床意义,探讨其在不同癌症发展阶段的作用与机制,并总结与展望SHP2抑制剂的发展,进一步寻找有效的早期诊断和基因治疗的潜在靶点,这对癌症患者生存率的提高具有十分重要的意义。

EZH2对结直肠肿瘤行为学的影响及其机制

目的 探究EZH2对结直肠肿瘤行为学的影响及其作用机制。方法 (1)将40只BALB/c-nu裸鼠随机分为4组:EZH2-NC组、EZH2-OE组、EZH2-NC+PD1抑制剂组、EZH2-OE+PD1抑制剂组。按照LipofectamineTM2000转染法将SW480细胞稳定转染EZH2空载体质粒或EZH2过表达载体,取转染成功SW480细胞溶液分别注入小鼠右侧腋窝皮下构建皮下移植瘤模型,然后EZH2-NC+PD1抑制剂组和EZH2-OE+PD1抑制剂组小鼠尾静脉注射PD1抑制剂(150μg/mL),21 d后观察肿瘤体积。(2)SW480稳转细胞分为4组:EZH2-NC组、EZH2-OE组、EZH2-NC+PD1抑制剂组(转染成功后加入1.5 ng/mL PD1抑制剂)、EZH2-OE+PD1抑制剂组(转染成功后加入1.5 ng/mL PD1抑制剂)。将以上4组SW480细胞和THP-1细胞进行共培养,应用CCK-8实验、划痕实验、Transwell实验分别检测SW480细胞增殖、迁移和侵袭能力。应用Western blot实验检测THP-1细胞中XBP-1、Cat K、Cat L、IL-6和Arg-1的蛋白表达水平和SW480细胞中的EZH2、p-STAT3、PD-1蛋白的表达水平。结果 (1)裸鼠成瘤结果显示,与EZH2-NC组相比,EZH2-OE组肿瘤体积增大(P<0.01);与EZH2-NC+PD-1组相比,EZH2-OE+PD-1抑制剂组肿瘤体积差异无统计学意义。(2)将SW480细胞和THP1细胞进行共培养后,与EZH2-NC组相比,EZH2-OE组SW480细胞增殖、迁移、侵袭能力增强(P<0.01);与EZH2-NC+PD-1抑制剂组相比,EZH2-OE+PD-1抑制剂组SW480细胞增殖、迁移、侵袭能力差异无统计学意义。与EZH2-NC组相比,EZH2-OE组THP-1细胞中IL-6和Arg-1蛋白水平升高(P<0.05);与EZH2-NC组相比,EZH2-NC+PD1抑制剂组IL-6和Arg-1蛋白水平下降(P<0.01);与EZH2-OE组相比较,EZH2-OE+PD1抑制剂组IL-6和Arg-1蛋白水平下降(P<0.01)。与EZH2-NC组相比,EZH2-OE组THP-1细胞中XBP-1、Cat K和Cat L蛋白水平升高(P<0.01);与EZH2-NC组比,EZH2-NC+PD-1抑制剂组XBP-1、Cat K和Cat L蛋白水平下降(P<0.01);与EZH2-OE组相比,EZH2-OE+PD-1抑制剂组XBP-1、Cat K和Cat L蛋白水平下降(P<0.01)。与EZH2-NC组相比,EZH2-OE组SW480细胞中EZH2、p-STAT3和PD-1蛋白水平升高(P<0.01);与EZH2-NC+PD-1抑制剂组相比,EZH2-OE+PD-1抑制剂组EZH2和p-STAT3蛋白水平升高(P<0.05)。结论 EZH2通过上调STAT3/PD-1通路进而影响肿瘤相关巨噬细胞产生对结直肠癌进展发挥促进作用。

辅助生殖期间超长促性腺激素释放激素激动剂方案对子宫腺肌病患者妊娠结局的影响

目的比较在辅助生殖期间采用超长促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-ant)方案和长GnRH-ant方案对子宫腺肌病患者妊娠结局的影响。方法选取2018年2月至2022年10月河北北方学院附属第一医院收治的302例接受辅助生殖周期(共356个周期)的子宫腺肌病患者作为研究对象,进行回顾性队列研究。根据不同治疗策略将其分为超长GnRH-ant方案组(213个周期)和长GnRH-ant方案组(143个周期)。比较两组的着床率、临床妊娠率、活产率和流产率等。结果超长GnRH-ant方案组人绒毛膜促性腺激素(hCG)当日黄体生成素和雌二醇水平低于长GnRH-ant方案组,获得的卵母细胞数量少于长GnRH-ant方案组(P<0.05)。超长GnRH-ant方案组新鲜胚胎移植取消率低于长GnRH-ant方案组(P<0.05)。超长GnRH-ant方案组临床妊娠率、活产率高于长GnRH-ant方案组(P<0.05),孕早期流产率低于长GnRH-ant方案组(P<0.05)。超长GnRH-ant方案组弥散型子宫腺肌病患者的临床妊娠率和活产率显著高于长GnRH-ant方案组(P<0.05)。结论与长GnRH-ant方案相比,在辅助生殖期间采用超长GnRH-ant方案可更好地改善子宫腺肌病患者的妊娠结局,尤其是有利于弥散型子宫腺肌病患者。

SOX7靶向ERK1/2/PD-L1通路抑制结直肠癌血管生成

目的探讨性别决定区Y框蛋白7(SOX7)对结直肠癌血管生成的影响及潜在作用机制。方法应用免疫荧光检测结直肠癌患者组织样本中SOX7表达水平,之后通过裸鼠、转染SOX7 mimic的人结直肠癌细胞系SW480细胞和人脐静脉内皮细胞(HUVEC)共培养进一步研究。用Western-blot验证SOX7与ERK1/2/PD-L1对结直肠癌细胞的相关蛋白表达的影响。用CCK8检测SOX7与ERK1/2/PD-L1对HUVEC增殖的影响。通过体外内皮细胞成管实验测定SOX7与ERK1/2/PD-L1对肿瘤血管生成的影响。结果SOX7在人结直肠癌组织中表达被抑制(P<0.01),同时SOX7的过表达抑制了小鼠体内肿瘤生长(P<0.01)。SW480细胞中SOX7的过表达抑制了ERK1/2、c-Jun的表达,并在ERK1/2的激动剂Senkyunolide I的作用下上调了SW480细胞的ERK1/2、c-Jun蛋白表达(P<0.01),逆转了SOX7对SW480细胞中ERK1/2、c-Jun蛋白表达的影响(P<0.01)。HUVEC中SOX7抑制了PD-L1、V-EGFR2、p-PI3K、HIF-1α的蛋白表达,Senkyunolide I上调了HUVEC的PD-L1、V-EGFR2、p-PI3K、HIF-1α的蛋白表达,并逆转了SOX7对HUVEC中上述相关蛋白表达的影响(P<0.01)。PD-1/PD-L1 Inhibitor 3抑制了PD-L1、V-EGFR2、p-PI3K、HIF-1α的蛋白表达,SOX7过表达在PD-1/PD-L1 Inhibitor 3的影响下并没有表现出抑制作用。CCK8实验结果显示SOX7过表达显著抑制了HUVEC的增殖能力,Senkyunolide I作用下的两组HUVEC增殖能力较SOX7 NC组与SOX7 mimic组明显上升,PD-1/PD-L1 Inhibitor 3作用下的两组HUVEC增殖能力较SOX7 NC组与SOX7 mimic组明显下降,以上均有明显统计学差异(P<0.01)。成管实验结果显示SOX7过表达抑制了HUVEC的血管生成,Senkyunolide I强烈加速了血管生成,而PD-1/PD-L1 Inhibitor 3血管生成则被显著抑制,以上均有明显统计学差异(P<0.01)。结论SOX7通过ERK1/2/PD-L1通路抑制结直肠肿瘤的增殖和血管生成,SOX7可能是晚期CRC患者临床治疗中潜在的抗血管生成靶点。

腹腔镜全腹膜外腹股沟疝修补术在治疗急性绞窄性腹股沟疝中的应用分析

目的:探讨腹腔镜全腹膜外腹股沟疝修补术(Total extraperitoneal repair inguinal hernia repair,TEP)在急性绞窄性腹股沟疝应用价值分析。方法:选取2018年1月至2023年12月于我院诊断为急性绞窄性腹股沟疝的58例患者作为研究对象,随机分为腹腔镜组和开腹组,各29例。比较两组患者围手术期实验室检查指标、手术时间、术后排气时间、术后并发症发生率、术后引流管拔除时间、住院时间等指标。结果:术后第3 d,两组白细胞(White blood cells,WBC)、尿素氮(Urea nitrogen,BUN)、肌酐(Creatinine,Cr)、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)均明显下降,且腹腔镜组明显低于开腹组(P<0.05);白蛋白(Albumin,ALB)水平均明显升高,且腹腔镜组明显高于开腹组(P<0.05);腹腔镜组在术中出血量、术后排气时间、术后进食时间、引流管拔除时间、住院时间均明显少于开腹组(P<0.05);两组手术时间无明显差异(P>0.05);腹腔镜组的肺部感染、伤口感染的发生率明显低于开腹组(P<0.05)。结论:腹腔镜全腹膜外腹股沟疝修补术对治疗急诊绞窄性腹股沟疝是安全的、可行的,较开放手术有一定的优势。

ARHGAP8在中低位局部进展期直肠癌新辅助化疗疗效预测中的应用

目的分析ARHGAP8对中低位局部进展期直肠癌新辅助化疗疗效预测的敏感性,为进展期直肠癌的治疗提供精准依据。方法通过生物信息学分析筛选,获得差异基因ARHGAP8。选取68例原发性直肠癌患者的直肠癌组织及直肠组织标本,应用实时荧光定量PCR、Western blot和免疫组织化学方法分别对ARHGAP8的表达强度进行验证,并收集患者性别、年龄、分期、肿瘤大小、分化程度、病理类型等临床病理特征进行功能验证;选取44例行新辅助化疗的中低位局部进展期直肠癌患者,采用免疫组织化学方法检测新辅助化疗前后ARHGAP8的表达情况,分析ARHGAP8在新辅助化疗前后、不同疗效组之间的表达情况。结果生物信息学结果显示,ARHGAP8在癌组织及直肠组织中的表达差异有统计学意义(P<0.001),且ARHGAP8的表达水平与肿瘤分期(P=0.024)、淋巴结转移(P=0.007)、年龄(P=0.005)等临床特征相关。实时荧光定量PCR结果显示,ARHGAP8 mRNA在癌组织中的表达显著高于直肠组织(P<0.001);Western blot和免疫组织化学结果显示,ARHGAP8蛋白在癌组织中的表达显著高于直肠组织(P=0.011);ARHGAP8的表达与肿瘤大小(P=0.010)、病理分期(P=0.005)密切相关,而与肿瘤分化程度、淋巴结转移、肝转移、Ki-67、微卫星不稳定性的表达程度无相关性。44例接受新辅助化疗的患者中TRG 0级13例、1级8例、2级8例、3级15例,其中65.91%(29/44)的患者新辅助化疗有效,新辅助化疗有效患者治疗后ARHGAP8的表达显著下降(P<0.001),ARHGAP8蛋白低表达患者的有效率为92.86%,显著高于ARHGAP8蛋白高表达者(53.33%)(P=0.033)。结论ARHGAP8在直肠癌组织中高表达,ARHGAP8低表达的中低位局部进展期直肠癌患者对XELOX方案新辅助化疗更为敏感,ARHGAP8可作为直肠癌发生发展的潜在生物学指标,同时可作为中低位局部进展期直肠癌XELOX方案新辅助化疗疗效评估的重要参考指标。

泛素样蛋白质2在结直肠癌中的表达及其对癌细胞增殖作用

目的探讨泛素样蛋白质2(UBQLN2)在结直肠癌中的表达及其对结直肠癌细胞增殖的影响。方法选取2020年1月至2021年1月河北北方学院附属第一医院治疗的90例病人为研究对象,根据术中手术获取组织情况,分为正常组、癌旁组和肿瘤组。免疫组织化学法和免疫荧光评估UBQLN2在肿瘤组织、远端组织和正常组织中表达;分析UBQLN2与病人临床病理特征以及预后的相关性;蛋白质印迹法和实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测UBQLN2在结直肠癌细胞系HT29、SW620、SW480、LOVO、HCT116以及人正常肠上皮细胞HIEC细胞中的表达;分别过表达和干扰UBQLN2在结肠癌细胞中的表达,随后CCK-8检测干扰前后细胞增殖能力变化。结果UBQLN2在结直肠癌癌旁组织中阳性面积(32.57±12.44)%显著高于肿瘤组织(12.68±9.79)%;UBQLN2 mRNA表达在转移阴性病人肿瘤组织中0.98±0.15显著高于转移阳性病人肿瘤组织0.33±0.08;UBQLN2的表达与结直肠癌病人预后呈正相关;UBQLN2在人正常肠上皮细胞中表达显著高于结直肠癌细胞,且在HCT116中表达最低;HCT116过表达UBQLN2培养36 h后,与pcDNA3.1-NC组细胞增殖能力0.78±0.23比较,pcDNA3.1-UBQLN-2组细胞0.52±0.18增殖能力显著降低;SW480细胞敲减UBQLN2培养36 h后,与si-NC细胞0.65±0.37增殖能力比较,si-UBQLN-2组细胞0.89±0.36增殖能力显著增加。结论UBQLN2在结直肠癌肿瘤组织和细胞中明显低表达并与转移呈负相关,UBQLN2可抑制结直肠癌增殖并与病人预后呈正相关。

结直肠癌组织中淋巴增强子结合因子1(LEF1)高表达及其临床意义

目的:探讨结肠癌患者癌组织中淋巴增强子结合因子1(lymphatic enhancer binding factor 1,LEF1)的表达水平及其临床意义。方法:免疫组化染色法结合Western blot观察结肠癌患者癌组织和癌旁组织中LEF1的表达情况,并对癌组织中LEF1的表达与结肠癌患者临床病理特征的相关性进行统计学分析。Kaplan-Meier生存分析LEF1的表达与结肠癌患者预后的关联,多因素COX回归分析影响结肠癌患者生存预后的危险因素。进一步分析TCGA数据库结肠癌患者癌和癌旁组织中LEF1的表达水平,及其表达与患者预后以及淋巴结转移的相关性。此外,细胞水平采用Western blot检测结肠癌细胞系中LEF1的蛋白表达情况,并通过转染LEF1 siRNA观察对结肠癌HCT116细胞生物学功能的影响。结果:结肠癌组织中LEF1的表达较癌旁组织显著增加(P<0.05),且其表达水平与肿瘤病理分期、分化程度和淋巴结转移呈正相关(P<0.05),与患者年龄、病理类型无关(P>0.05)。LEF1高表达结肠癌患者的生存期明显低于低表达患者(P<0.05)。多因素COX回归分析结果显示,LEF1高表达、肿瘤病理分期、肿瘤分化程度以及淋巴结转移是结肠癌患者不良预后的危险因素(P<0.05)。TCGA数据库分析结果显示,结肠癌组织中LEF1的表达水平显著高于癌旁组织(P<0.05),且其表达水平与患者预后呈负相关(P<0.05),而与患者淋巴结转移呈正相关(P<0.05)。此外,细胞实验结果显示,人结肠癌细胞系中LEF1的表达水平显著高于正常结肠上皮细胞(P<0.05),敲减LEF1可有效降低结肠癌HCT116细胞的迁移和侵袭能力,并抑制Wnt/β-catenin信号通路活性(P<0.05)。结论:LEF1高表达与结肠癌患者的短生存期和不良预后密切相关,可作为结肠癌患者术后复发和转移以及临床预后的重要生物标志物。

结肠癌中UBQLN2的表达情况及其免疫调控作用

目的探讨UBQLN2基因在结肠癌中的表达及其免疫调控功能。方法收集2021年1月至2023年6月在河北北方学院附属第一医院手术切除的32例结肠癌及匹配的癌旁组织。采用转录组测序检测UBQLN2表达,qRT-PCR检测UBQLN2 mRNA表达水平,免疫组织化学检测UBQLN2蛋白表达水平。分析UBQLN2表达与结肠癌患者临床病理及预后的关系。采用多色免疫荧光检测UBQLN2与TGF-β的共表达情况,利用单细胞转录组测序和TCGA数据库验证UBQLN2在结肠癌中的表达情况及其与免疫抑制因子、TGF-β和结肠癌预后的关系。结果转录组分析显示,结肠癌组织中UBQLN2基因高表达,其mRNA表达水平高于癌旁组织(P<0.01)。通过TCGA数据库纳入275例结肠癌组织及41例癌旁组织,结肠癌组织中的UBQLN2 mRNA相对表达量也高于癌旁组织(P<0.001)。免疫组织化学检测结果显示,UBQLN2蛋白主要在细胞质中表达,且结肠癌组织中UBQLN2蛋白阳性表达强度明显高于癌旁组织。qRT-PCR检测结果显示,结肠癌组织中UBQLN2 mRNA表达显著高于癌旁组织(P<0.001)。通路富集分析显示,UBQLN2高表达组肿瘤增殖通路显著上调,免疫激活通路显著下调;而且与UBQLN2低表达组相比,UBQLN2高表达组免疫逃逸评分更高(P<0.05),CD8^(+)T细胞特异性标志物、免疫趋化因子及免疫杀伤因子表达更低(均P<0.05),而免疫耗竭分子表达更高(均P<0.05)。在UBQLN2高表达组中TGF-β、IL10和ARG1等免疫抑制细胞因子的表达高于UBQLN2低表达组(均P<0.05),且UBQLN2与TGF-β表达呈正相关(r=0.280,P<0.0001),UBQLN2与TGF-β在肿瘤中共表达。TGF-β和UBQLN2均高表达组较两者均低表达组患者的的预后更差(P=0.004)。单细胞转录组测序显示UBQLN2阳性结肠癌高表达TGF-β且微环境呈免疫抑制状态。结论UBQLN2在结肠癌中高表达且与预后较差相关,UBQLN2高表达的结肠癌可能通过释放TGF-β细胞因子抑制CD8^(+)T细胞的杀伤活性,实现免疫逃逸。UBQLN2可能是结肠癌的潜在治疗靶点。

己糖激酶结构域成分1基因敲除对人结直肠癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力的影响

目的 探讨己糖激酶结构域成分1(HKDC1)对人结直肠癌细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响。方法 HT-29、SW480细胞进行瞬时转染,设置HKDC1-si RNA组、阴性对照组及空白组。同时收集2020年3月至2022年5月河北北方学院附属第一医院接受手术的50例患者的结直肠癌组织和癌旁正常组织。RT-q PCR实验检测HKDC1 m RNA表达;Western blot实验检测HKDC1蛋白表达;CCK-8实验、划痕实验和Transwell实验检测细胞增殖、迁移和侵袭能力。结果 HT-29细胞HKDC1 m RNA的表达量高于SW480细胞(P<0.05),故选取HT-29细胞株用于后续实验。结直肠癌组织中HKDC1 m RNA、光密度值高于癌旁正常组织(P<0.05)。空白组与阴性对照组HKDC1 m RNA、蛋白表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);HKDC1-si RNA组HKDC1 m RNA、蛋白表达水平低于阴性对照组(P<0.05)。空白组与阴性对照组光密度值比较,差异无统计学意义(P>0.05);HKDC1-si RNA组光密度值低于阴性对照组(P<0.05)。空白组与阴性对照组细胞迁移率比较,差异无统计学意义(P>0.05);HKDC1-si RNA组细胞迁移率低于阴性对照组(P<0.05)。空白组与阴性对照组细胞迁移数目比较,差异无统计学意义(P>0.05);HKDC1-si RNA组细胞迁移数目低于阴性对照组(P<0.05)。结论 HKDC1在结直肠癌组织及细胞中高表达,可促进结直肠癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力,有望成为结直肠癌基因治疗的新靶点。

术前血小板与中性粒细胞比对可切除同时性结直肠癌肝转移患者的预后价值

目的:探讨术前外周血血小板与淋巴细胞比(PLR)对同时性结直肠癌肝转移患者的预后价值。方法:回顾性收集2010-2017年于河北北方学院第一附属医院行同期肝切除的74例结直肠癌肝转移患者的临床病理资料。利用X-tile软件计算PLR预后的最佳界值,并将患者分为低PLR组31例,高PLR组43例。探讨两组患者的一般临床病理资料及预后差异。结果:PLR预后的最佳界值为188,PLR>188为高PLR组,PLR<188为低PLR组。高PLR组相比于低PLR组患者的肿瘤分期较晚、淋巴结转移率较高且肝转移数目更多(均P<0.05)。低PLR组和高PLR组患者的中位生存时间分别为33个月和11个月(P=0.001)。Cox模型多因素分析显示pT分期(HR=2.199,95%CI为1.156~4.182,P=0.016)、癌胚抗原≥3.4 ng/ml(HR=1.834,95%CI为1.079~3.117,P=0.025)及PLR≥188(HR=1.885,95%CI为1.022~3.477,P=0.042)是同时性结直肠癌肝转移患者预后的独立危险因素。根据生存分析结果构建了预后预测模型,有效性验证曲线和受试者操作特征曲线均示模型拟合度和准确度较好。结论:术前PLR与同时性结直肠癌肝转移患者的不良预后密切相关,术前PLR水平≥188的患者预后更差。基于PLR、T分期及癌胚抗原构建的生存预测模型的准确度较高,可用于指导临床。

紫檀芪调控核转录因子E2相关因子2对体外结肠癌细胞凋亡的影响

目的探讨紫檀芪对人结肠癌细胞LoVo的作用,并研究核转录因子E2相关因子2(Nrf2)在紫檀芪作用LoVo细胞过程中的调控机制。方法应用不同浓度的紫檀芪(5、10、20、40、60、80、100μmol/L)处理LoVo细胞。CCK-8检测细胞活力,划痕实验检测细胞迁移,Transwell实验检测细胞侵袭,TUNEL染色检测细胞凋亡,JC-1检测线粒体膜电位水平,2’,7’-二氯荧光素二乙酸酯检测活性氧水平,Western blot检测细胞内Nrf2、磷酸化的Nrf2、血红素加氧酶-1及凋亡蛋白(Bcl2、Bax)的蛋白表达。此外,联合应用Nrf2特异性激动剂萝卜硫素后,重复检测细胞活力、细胞凋亡率及Nrf2的蛋白表达。结果与对照组相比,40、60、80、100μmol/L紫檀芪均可显著降低细胞活性(P=0.014,P<0.001,P<0.001,P<0.001)。5、10、20μmol/L紫檀芪对LoVo细胞活性无影响,但可显著抑制细胞迁移(P=0.008,P<0.001,P<0.001)和侵袭(P均<0.001)。TUNEL染色、JC-1、2’,7’-二氯荧光素二乙酸酯染色结果显示40、60、80μmol/L紫檀芪增加LoVo细胞凋亡(P=0.014,P<0.001,P<0.001),使线粒体膜电位去极化(P=0.026,P<0.001,P<0.001)并增加细胞内活性氧聚积(P均<0.001)。40、60、80μmol/L紫檀芪下调了LoVo细胞中磷酸化的Nrf2(P=0.030,P<0.001,P<0.001)、血红素加氧酶-1(P=0.015,P<0.001,P<0.001)、Bcl2(P=0.039,P<0.001,P<0.001)的蛋白表达;60、80μmol/L紫檀芪降低了Nrf2的蛋白表达(P=0.001,P<0.001),增加了Bax的蛋白表达(P均<0.001)。应用萝卜硫素联合处理后,紫檀芪抑制细胞活性(P<0.001)、增加细胞凋亡(P<0.001)及下调Nrf2表达(P=0.022)的作用明显减弱。结论紫檀芪是一种有效抑制结肠癌细胞的化合物,其抗癌机制与抑制Nrf2通路有关。

结直肠癌患者血清总蛋白、白蛋白、血红蛋白与Th1/Th2免疫平衡及调节性T细胞、辅助性T细胞17相关性分析

目的探究结直肠癌患者血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、血红蛋白(Hb)与其辅助性T细胞(Th)1/Th2免疫平衡及Treg、Th17相关性。方法使用主观全面评定量表中营养状态评分对2018年12月至2021年10月河北北方学院附属第一医院收治的结直肠癌患者500例进行营养评估,根据患者营养评估结果随机抽取其中营养状态优者162例,营养状态良者161例,营养状态差者177例。使用简单随机抽样法,选取营养状态优组(40例)、轻中度营养不良组(40例)、重度营养不良组(40例)。观察不同组别患者营养指标,Th1/Th2、Treg/Th17免疫平衡相关指标并进行相关性分析。结果营养状态优组TP、ALB、Hb、白细胞介素(IL)-2、γ-干扰素、肿瘤坏死因子-α、Th1细胞表达、Th1/Th2显著高于轻中度营养不良组及重度营养不良组(P<0.05),轻中度营养不良组显著高于重度营养不良组(P<0.05);营养状态优组运铁蛋白(TF)、IL-6、IL-10、IL-5、Th2细胞表达低于轻中度营养不良组及重度营养不良组(P<0.05),轻中度营养不良组显著低于重度营养不良组(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,TP与患者IL-2、TNF-α水平及Th1细胞表达、Th1/Th2呈正相关(r=0.500、0.471、0.413、0.332,P<0.05),与IL-6、IL-10、IL-5水平及Th2、Treg、Th17细胞表达呈负相关(r=-0.443、-0.442、-0.396、-0.213、-0.422、-0.419,P<0.05);ALB与患者IL-2、IFN-γ、TNF-α水平及Th1细胞表达、Th1/Th2呈正相关(r=0.493、0.338、0.393、0.336、0.321,P<0.05),与IL-6、IL-10、IL-5水平及Th2、Treg、Th17细胞表达呈负相关(r=-0.360、-0.313、-0.269、-0.231、-0.369、-0.306,P<0.05);TF与患者IL-6、IL-10、IL-5水平及TH2、Treg、Th17细胞表达呈正相关(r=0.577、0.490、0.345、0.394、0.507、0.490,P<0.05),与IL-2、IFN-γ、TNF-α水平及Th1细胞表达、Th1/Th2呈负相关(r=-0.665、-0.401、-0.590、-0.540、-0.432,P<0.05);Hb与患者IL-2、TNF-α水平及Th1细胞表达呈正相关(r=0.280、0.392、0.194,P<0.05),与IL-6、IL-10、IL-5水平及Th2、Treg、Th17细胞表达呈负相关(r=-0.284、-0.188、-0.308、-0.210、-0.266、-0.327,P<0.05)。结论结直肠癌患者营养学指标与其Th1/Th2免疫平衡及Treg、Th17相关性具有相关性,随着结直肠癌患者营养学指标变化会引起其Th1/Th2免疫平衡及Treg、Th17表达水平改变,营养状态较差患者Th1/Th2免疫平衡向Th2漂移,Treg、Th17升高,抗肿瘤免疫能力减弱。

TRIM59调控肿瘤相关巨噬细胞功能促进结直肠癌进展

目的 探讨TRIM59促进结直肠癌进展的分子机制。方法 收集28例行手术治疗的人结直肠肿瘤组织样本及临床资料,采用免疫荧光双染技术分析癌与癌周正常组织样本肿瘤相关巨噬细胞中TRIM59的表达,应用流式分选技术分选出CD68^(+)的肿瘤相关巨噬细胞,Western blot方法检测TRIM59的表达。培养人巨噬细胞THP-1细胞系,随机分为sh-TRIM59组和NC组,分别转染sh-TRIM59以及阴性对照,并与人结肠癌细胞SW480进行共培养,应用Western blot方法检测两组THP-1细胞中PI3K/AKT/mTOR通路相关蛋白p-PI3K、p-AKT、p-mTOR及TRIM59、VEGF、COX-2、MMP-9蛋白的表达情况;应用划痕实验检测SW480细胞的迁移能力;应用Transwell检测SW480细胞的侵袭和迁移能力。将HUVEC细胞与上述两种细胞共培养进行血管形成实验,观察两组细胞血管形成能力。结果 免疫荧光实验结果显示:结直肠癌组织肿瘤相关巨噬细胞中TRIM59的表达明显高于癌周正常组织(P<0.01);Western blot结果显示:与癌周正常组织相比,癌组织中肿瘤相关巨噬细胞TRIM59的表达明显升高(P<0.01)。与NC组相比,sh-TRIM59组THP-1细胞中PI3K/AKT/mTOR通路相关蛋白p-PI3K、p-AKT、p-mTOR及TRIM59、COX-2、VEGF、MMP-9表达明显降低(P<0.01);与NC组相比,sh-TRIM59组SW480细胞划痕距离明显增大,细胞愈合率明显减小(P<0.01);与NC组相比,sh-TRIM59组HUVEC细胞新生血管数量明显增加(P<0.01)。结论 TRIM59通过激活结直肠癌肿瘤相关巨噬细胞中PI3K/AKT/mTOR通路促进COX-2、VEGF、MMP-9的分泌,增强癌细胞的浸润、侵袭和内皮细胞的血管生成能力,从而加速肿瘤的进展。

结肠癌叉头框蛋白P3、促泛素结合衔接子p62及核因子-κB与癌旁肿瘤沉积形成相关性分析

目的探究结肠癌患者叉头框蛋白P3(Foxp3)、促泛素结合衔接子(p62)及核因子κB(NF-κB)表达及与癌旁肿瘤沉积形成相关性。方法选取河北北方学院附属第一医院普通外科2019年1月至2022年1月收治的结肠癌患者80例,根据其是否合并癌旁肿瘤沉积分为对照组(36例),沉积组(44例)。使用实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)检测患者Foxp3、p62、NF-κB mRNA表达,使用免疫组化检测患者Foxp3、p62、NF-κB阳性细胞表达,使用蛋白质印迹法检测两组患者病灶组织中Foxp3、p62、NF-κB mRNA相对蛋白表达量。并使用多因素Logistic回归分析以上指标与患者癌旁肿瘤沉积形成相关性。结果比较两组基线资料,差异无统计学意义。沉积组Foxp3、p62、NF-κB mRNA表达显著高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);沉积组Foxp3、p62、NF-κB免疫组化阳性细胞占比表达显著高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);沉积组Foxp3、p62、NF-κB蛋白相对表达显著高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);多因素Logistic回归分析结果显示,Foxp3、p62、NF-κB mRNA,Foxp3、p62、NF-κB阳性细胞占比,Foxp3、p62、NF-κB蛋白相对表达均与患者癌旁肿瘤沉积发生具有显著相关性,其高表达均是患者发生癌旁肿瘤沉积的独立危险因素(P<0.05)。结论合并癌旁肿瘤沉积结肠癌患者病灶Foxp3、p62、NF-κB mRNA,Foxp3、p62、NF-κB阳性细胞占比及Foxp3、p62、NF-κB蛋白相对表达均升高,且其高水平表达是结直肠癌患者癌旁肿瘤沉积形成独立危险因素,在患者实际治疗中,应重视以上指标表达,有助于评估及预测患者病情进展。

TRUS诊断在直肠癌患者术前分期中的应用价值

目的探讨在直肠癌手术患者术前分期中采取经直肠超声检查(TRUS)诊断的价值。方法河北北方学院附属第一医院在2020至2021年收治的直肠癌手术患者中选取70例,均在术前采取MRI、TRUS方法对病情进行分期,金标准为手术病理分期结果,对两种方法在术前分期诊断中的基本和完全符合率以及灵敏度、特异度、准确率等作比较。结果术前MRI分期结果与金标准相比,完全符合率为65.71%(46/70),基本符合率为80.00%(56/70),术前TRUS分期结果与金标准相比,完全符合率为78.57%(55/70),基本符合率为94.29%(66/70),TRUS检查方法在直肠癌术前分期中的灵敏度高于MRI,但差异无统计学意义(P>0.05)、TRUS检查特异度、准确率相比于MRI方法更高,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论在直肠癌术前分期诊断中,TRUS方法分期基本符合率接近病理分期结果,与MRI方法分期诊断结果相比特异度、准确率更高,因此可大力应用在直肠癌术前分期诊断中,为临床治疗提供参考依据。