病理生理学网络互动辅助教学平台建设与思考

病理生理学是基础医学与临床医学之间的桥梁学科,主要从功能和代谢的角度研究疾病发生、发展规律及其机制,医学生在本学科的学习中第一次系统地接受各种疾病的知识。目前病理生理学教学模式主要为传统的讲授加入影音、图片、动画的多媒体课堂教学模式。这种教学模式主要是教师的单方面向同学灌输信息,缺乏有效的互动交流。为增强师生间的互动,我教研室进行了网络互动辅助教学平台的建设,搭建了教研室门户网站和学习论坛并不断完善应用,使教学过程信息化、学生学习自主化、学生眼界开阔化、师生交流互动化、教学方式多元化,为师生之间搭建了有效沟通的桥梁,在很大程度上提高了教学质量和教学效率。但随着教学平台的应用,一些问题逐渐凸显,如校园网络环境建设、师生教学理念更新、教学内容的更新及趣味化、网络发展的学科局限性与多学科综合发展的矛盾等问题有待进一步解决。

病理生理学实验课教学的改革与探索

实验课教学在医学生的教学培养中发挥着极其重要的作用,在高校扩大招生导致实验条件相对不足的条件下,需要对实验课教学进行改革和调整,以保证病理生理学实验课教学质量稳步提高。

我校承办中国生理学会心血管生理学术研讨会

12月8日至11日,中国生理学会心血管生理学术研讨会暨河北省生理科学会2023年学术年会在我校召开。河北省科学技术协会副主席蒋栋、科学技术创新部部长陆松,中国生理学会循环专委会前任主委杜杰教授,中国生理学会循环专委会候任主委陈丰原教授,中国生理学会循环专委会副主委张春祥教授,我校党委常委、副校长闫宝勇教授,河北省生理科学会理事长、我校党委常委、副校长武宇明教授出席开幕式。来自43所院校的215位代表参加会议。

肾上腺髓质素对肺循环病理与生理调节作用的研究进展

肾上腺素质素 (Adm)作为一种新的循环激素和局部激素 ,通过旁分泌、自分泌和胞内分泌的方式 ,直接与间接地参与机体多种生理和病理生理过程的调节。该文对Adm及其受体的生物学特性、肺内分布与代谢及其在肺循环病理生理调节作用的研究进展作一综述。

过氧亚硝基阴离子的细胞代谢及病理损伤作用

过氧亚硝基阴离子（ＯＮＯＯ－）是ＮＯ和Ｏ２－·结合或进一步反应生成的。新近研究发现ＯＮＯＯ－是ＮＯ产生病理损伤作用的主要环节。ＯＮＯＯ－可使酶氧化失活，可导致脂质过氧化，与核酸作用引起ＤＮＡ裂解，作用于线粒体使能量生成障碍。ＯＮＯＯ－是某些疾病情况下导致细胞损伤、能量耗竭和细胞死亡的重要因素。有关ＯＮＯＯ－生成和代谢及其病理损伤作用的研究，已引起广泛关注。

C9orf72介导的自噬及其在肌萎缩侧索硬化与额颞叶痴呆中的作用

肌萎缩侧索硬化(amyotrophic lateral sclerosis,ALS)和额颞叶痴呆(frontotemporal dementia,FTD)是两种具有相似特征的神经退行性疾病,主要表现为神经系统不同部位的神经元的退行性变。近年研究发现,C9orf72基因5端非编码区的六核苷酸重复序列(GGGGCC)扩增是导致ALS和FTD疾病发生的最常见遗传因素,而C9orf72介导的自噬可能在这一病理过程中发挥着重要作用。本文以自噬为切入点,对C9orf72在ALS和FTD中的作用进行综述,以期为神经退行性疾病的基因靶向治疗提供新的研究思路。

PPARα保护小鼠胃黏膜免于乙醇诱导的氧化应激损伤的作用研究

背景乙醇作为外源性侵袭因素,若持续与胃黏膜接触可引起胃内大量活性氧物质产生进而造成氧化应激损伤.而过氧化物酶体增殖物激活受体α(peroxisome proliferators-activated receptorα,PPARα)对氧化应激具有重要调控效应,在多种相关疾病模型中发挥防治作用.目的探究PPARα对乙醇诱导的慢性胃黏膜损伤是否具有保护作用.方法将小鼠随机分为野生型单纯乙醇饮食(wild-type with ethanol diet,WT-EtOH)组、PPARα敲除型单纯乙醇饮食(PPARα-knockout with ethanol diet,KO-EtOH)组、PPARα敲除型乙醇饮食联合维生素E(PPARα-knockout with ethanol diet combined vitamin E,KO-EtOH+VE)组.喂养16wk后,观察小鼠胃组织病理学改变,检测血清和胃组织中还原型谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH)、氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione,GSSG)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量,胃组织中4-羟基壬烯醛(4-hydroxynonenal,4-HNE)的表达,胃组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和过氧化氢酶(catalase,CAT)的活性和mRNA相对表达水平.结果PPARα的缺失加重了乙醇诱导的小鼠胃黏膜病理学损伤,引起血中和胃组织中GSH和GSH/GSSG比值的显著降低,血清和胃组织中MDA的含量及4-HNE的阳性表达上升,并导致胃组织中SOD和CAT的活性以及SOD的mRNA相对表达水平显著降低.应用维生素E后改善了组织病理改变以及CAT的活性和mRNA相对表达水平.结论PPARα缺失引起乙醇诱导的胃黏膜氧化应激损伤加重.

C9orf72蛋白介导的自噬在脑缺血预处理诱导脑缺血耐受中的作用

缺血性卒中是一种高发病率的多因素疾病,致死率和致残率较高。脑缺血预处理(cerebral ischemic preconditioning, CIP)可以通过激活内源性保护效应来保护神经元免受后续的严重缺血性损伤,建立脑缺血耐受。自噬是衰老损伤细胞自我降解和回收细胞内成分的过程。适度激活自噬有利于促进细胞生存和维持细胞稳态,适当地激活溶酶体-自噬功能对建立脑缺血耐受至关重要,适度上调自噬可以改善缺血性损伤,提示自噬-溶酶体系统是缺血性脑卒中的潜在治疗靶点。C9orf72是一种与膜转运和细胞自噬有关的基因,研究揭示,C9orf72蛋白可作为Rab1a效应子与起始复合物ULK1相互作用参与自噬起始的调节,或与 Smith-Magenis 综合征染色体区域 8 (SMCR8) 和含有 WD 重复序列的蛋白 41 (WDR41) 构成一种蛋白复合体调节自噬。本文探讨了C9orf72蛋白可能通过影响自噬参与脑缺血耐受的建立和脑缺血损伤的修复。

内源性一氧化碳减轻大鼠双侧后肢缺血再灌注所致的肺损伤(英文)

通过观察血红素氧化酶 (HO)阻断剂锌原卟啉 (ZnPP)对肺组织、肺泡间质多形核白细胞数目、肺组织丙二醛含量和湿重干重之比的影响 ,并对肺组织HO活性和血内碳氧血红蛋白水平 (COHb)进行检测 ,以探讨内源性HO/一氧化碳 (CO)在肢体缺血再灌注 (I/R)所致肺损伤中的作用。结果发现 ,大鼠双侧后肢I/R可导致急性肺损伤 ,同时使肺组织中HO活性和血内COHb水平显著升高 ;应用ZnPP预处理可使HO活性和COHb水平显著降低 ,但肺损伤却进一步加重。上述实验结果表明 ,肢体I/R致肺损伤时 ,肺组织中HO活性和内源性CO生成增多可减轻大鼠肢体I/R所致的肺损伤。

八肽胆囊收缩素对脂多糖诱导大鼠肺组织NF-κB活性增高的抑制作用

目的与方法 :为探讨八肽胆囊收缩素 (CCK - 8)防治内毒素引起急性肺损伤的分子作用机理 ,用电泳迁移率变动分析技术 (EMSA) ,观察CCK - 8对脂多糖 (LPS)诱导核转录因子κB(NF -κB)活性变化的影响 ,用光密度扫描电泳谱带峰面积积分值表示NF -κB活性 ,观察肺组织的病理学变化。结果 :LPS入血可以明显引起大鼠肺组织的NF -κB活性 16 39 92± 198 6 3(P <0 0 1) ,显著高于对照组 (5 93 5 6± 89 34) ,此作用为预先静脉注入CCK - 8部分逆转 ,NF -κB活性低至 82 3 91± 97 32 (P <0 0 1) ,CCK - 8可减轻LPS引起的肺组织病理学变化。结论 :CCK -8对LPS激活肺组织NF

CCK-8抑制LPS作用下大鼠肺间质巨噬细胞NF-κB活性的cAMP-PKA通路研究

目的:用cAMP激动剂forskolin和PKA抑制剂H-89,探讨八肽胆囊收缩素(CCK-8)抑制LPS作用下大鼠肺间质巨噬细胞(PIM s)核因子-κB(NF-κB)活性的cAMP-PKA信号通路机制。方法:分离纯化大鼠PIM s。用电泳迁移率改变分析(EMSA)法检测大鼠PIM s中NF-κB活性,用W estern b lotting分析IκB-α蛋白水平。结果:正常对照组大鼠PIM s核内未检测到与特异性寡核苷酸探针相结合的NF-κB,LPS组细胞内NF-κB活性明显高于正常对照组(P<0.01),胞浆中IκB-α水平显著低于正常对照组(P<0.01)。CCK组和Fsk组细胞内NF-κB活性和胞浆中IκB-α含量均无明显差异(P>0.05)。CCK+LPS组和Fsk+LPS组,细胞内NF-κB活性均低于LPS组(P<0.05),IκB-α含量均高于LPS组(P<0.01)。LPS+CCK+H-89组NF-κB活性高于CCK+LPS组(P<0.01),而IκB-α蛋白水平低于CCK+LPS组(P<0.01)。结论:cAMP-PKA信号通路的活化可抑制LPS诱导的大鼠PIM s细胞内NF-κB活性升高和IκB-α蛋白水平的降低,CCK-8的抗炎作用是通过激活cAMP-PKA信号通路进而抑制NF-κB活性来实现的。

IL-10抗内毒素气管内滴注致急性肺损伤作用的实验研究

目的：探讨中性粒细胞（ＰＭＮ）在急性肺损伤（ＡＬＩ）发生中的作用及ＩＬ－１０对ＡＬＩ的拮抗作用。方法：用 ＬＰＳ（１００ μｇ／只）或 ＬＰＳ＋ ＩＬ－１０（１μｇ／只）向ＳＤ大鼠气管内滴注复制ＡＬＩ模型，检测支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中ＰＭＮ数目、蛋白质及丙二醛（ＭＤＡ）含量，并进行组织学观察。结果：ＬＰＳ气管内滴注可引起ＢＡＬＦ中ＰＭＮ数目明显增加，伴有蛋白质及 ＭＤＡ含量的增高，光镜观察显示肺组织间隙弥漫性炎细胞浸润。 ＬＰＳ＋ＩＬ－１０组则ＢＡＬＦ中ＰＭＮ数目、蛋白质及ＭＤＡ含量显著低于ＬＰＳ组，肺组织中ＰＭＮ浸润程度也明显轻。结论：ＰＭＮ在ＡＬＩ发病中具有重要作用。ＩＬ－１０能够拮抗ＬＰＳ所致ＡＬＩ的发生。

硫化氢与内毒素血症大鼠心肌损伤的关系

为探讨硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)与内毒素血症大鼠心肌损伤的关系,采用静脉注射脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)的方法制备内毒素血症大鼠模型,将雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、LPS组、LPS+炔丙基甘氨酸(propargylglycine,PPG,H2S代谢酶抑制剂)组、LPS+NaHS(H2S供体)组。观察给药后4h内大鼠平均动脉压(mean arterial pressure,MAP)的变化,测定血浆肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和H2S含量,光学显微镜观察心肌组织形态学变化并测定心肌组织中TNF-α、H2S含量及乳酸脱氢酶(lactatedehydrogenase,LDH)和髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)的活性。结果如下:(1)与正常对照组相比,LPS组大鼠血压迅速下降,血浆TNF-α、H2S含量显著增高,且血浆中H2S含量与血压呈显著负相关,LPS注射后1、2、4h时相关系数分别为-0.936、-0.913和?0.908(均P<0.05);心肌组织TNF-α、H2S含量及LDH、MPO活性也明显升高,并出现组织损伤;(2)给予PPG能显著抑制血浆TNF-α、H2S含量的增高,并可显著减轻LPS所致的血压下降(均P<0.05)和心肌组织损伤,降低心肌组织中TNF-α、H2S含量及LDH、MPO活性;(3)给予NaHS后,与LPS组相比,大鼠血浆TNF-α、H2S含量增高,血压明显下降(均P<0.05),心肌组织损伤加重,心肌组织中TNF-α、H2S含量及LDH、MPO活性增高。结果提示,内毒素血症大鼠低血压和心肌损伤的部分原因是由于H2S生成增多。

CCK-8对大鼠肺间质巨噬细胞cAMP-PKA信号通路的激活作用

目的探讨八肽胆囊收缩素(CCK-8)对大鼠肺间质巨噬细胞(PIMs)cAMP-PKA信号通路的激活作用。方法分离纯化大鼠PIMs,采用放射免疫分析法测定细胞内cAMP含量,放射激酶法测定PKA活性,受体拮抗剂的IC50值由对数-几率单位法求得。结果正常对照组大鼠静息状态下PIMscAMP含量和PKA活性分别为(2.04±0.13)nmol·g-1和(118.3±11.2)nmol·min-1·g-1。低浓度CCK-8[(10-12～10-10)mol·L-1]对细胞内cAMP含量和PKA活性没有影响(与正常对照组比较:P>0.05);高浓度CCK-8[(10-9～10-5)mol.L-1]可明显提高细胞内cAMP含量和PKA活性(与正常对照组比较:P<0.05)。10mg·L-1脂多糖(LPS)刺激大鼠PIMs,可明提高细胞内cAMP含量和PKA活性,分别为(5.15±0.12)nmol·g-1和(188.6±13.5)nmol·min-1·g-1。不同浓度的CCK-8与LPS共同孵育PIMs,细胞内cAMP含量和PKA活性的变化趋势与CCK-8作用于静息状态下大鼠PIMs的变化趋势完全相同。CCK受体拮抗剂丙谷胺、CR-1409、CR-2945可呈剂量依赖性地抑制CCK导致的cAMP含量的升高,它们的IC50值分别为(0.5×10-6、4.1×10-6、7.2×10-4)mol·L-1。丙谷胺、CR-1409、CR-2945也可明显减弱CCK-8所导致的PKA活性的升高;其中,丙谷胺的抑制作用最强,CR-1409次之,CR-2945的抑制作用最小。结论CCK-8可剂量依赖性地激活静息状态和LPS诱导的大鼠PIMscAMP-PKA信号转导途径,这可能是CCK抗炎作用的分子机制之一。CCK激活cAMP-PKA通路是通过CCK受体来实现的,且CCK-AR的作用比CCK-BR的作用更为明显。

中枢八肽胆囊收缩素对大鼠局部脑缺血/再灌注损伤的影响

目的 :探讨八肽胆囊收缩素 (CCK - 8)对局部脑缺血 /再灌注损伤的影响及其可能机制。方法 :采用线栓法大鼠局部脑缺血再灌注模型 ,观察侧脑室 (icv)注射CCK - 8或其受体拮抗剂 -丙谷胺对脑缺血 1h再灌注 2 4h大鼠脑梗死体积、局部脑血流量 (rCBF)、不同脑区一氧化氮 (NO)、丙二醛 (MDA)含量的影响。结果 :( 1)脑缺血前给予不同剂量的CCK - 8均可缩小脑梗死体积 ,但只有CCK - 8剂量为 1 0 μg、2 0 μg时这种差别才有显著性 (均P <0 0 5 )。预先给予丙谷胺可完全拮抗CCK - 8的作用 ;单纯给予丙谷胺可加重脑缺血损伤。 ( 2 )CCK - 8可显著抑制脑缺血 /再灌注损伤引起的梗死区、半暗区NO水平的升高 ;抑制梗死区MDA含量的增加 (P <0 0 5 ) ;再灌注 2 4h时 ,CCK - 8组rCBF显著高于正常值 (P <0 0 5 )。结论 :中枢内、外源性CCK - 8均具有减轻局部脑缺血 /再灌注损伤的作用 ,其机制可能和抑制脑缺血或再灌注时的自由基损伤及增加rCBF有关。

PKC抑制剂灯盏花素乙对甲醛炎性痛大鼠脊髓NOS表达及NO含量的影响

目的:观察蛋白激酶C(PKC)选择性抑制剂灯盏花素乙(CH)对甲醛炎性痛时大鼠自发痛反应、脊髓一氧化氮合酶(NOS)表达和一氧化氮(NO)含量的影响,探讨炎性痛时脊髓内NO产生是否受PKC调控。方法:采用右后掌足底注射甲醛复制炎性痛模型;计数缩足反射次数反映自发痛程度;应用NADPH-d组织化学法测定脊髓NOS表达;硝酸/亚硝酸还原法测定脊髓腰膨大部位NO2-/NO3-含量。结果:甲醛炎性痛大鼠L5脊髓后角浅层和中央管周围灰质NADPH-d阳性细胞的数目、阳性细胞胞体及纤维的染色深度均明显大于正常对照组,脊髓腰膨大部位NO2-/NO3-含量明显增高。预先鞘内给予CH,可明显抑制甲醛炎性痛诱导的大鼠第二相自发痛反应以及脊髓NOS表达和NO2-/NO3-的含量。结论:炎性痛时,脊髓伤害性感受神经元内PKC激活可以促进NOS表达和NO的产生。

内源性H_2S对LPS所致大鼠急性肺损伤时肺动脉高压的影响及其与一氧化氮的相互作用

目的:探讨硫化氢(H2S)对脂多糖(LPS)所致急性肺损伤时肺动脉高压(PAH)的影响及H2S/胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)体系和一氧化氮(NO)/一氧化氮合酶(NOS)体系在其发生机制中的相互作用。方法:将72只大鼠随机分为生理盐水(NS)对照组、LPS组、LPS+L-NAME组、LPS+PPG组,检测给药后2、4、6、8h的平均肺动脉压(mPAP),以及4、8h血浆H2S、NO含量和iNOS、cNOS活性、肺组织NO含量和iNOS、cNOS、CSE活性,免疫组化法测定肺组织iNOS蛋白表达,并结合肺光镜形态等指标综合评价肺损伤程度。结果:LPS组各时点的mPAP显著高于对照组,给药后4、8h,NO含量、iNOS活性和蛋白表达升高,cNOS活性及H2S含量、CSE活性降低,肺组织损伤较重。预先给予L-NAME可减轻LPS所致上述指标的改变。而预先给予PPG可加重LPS所致肺损伤,但对cNOS活性无明显影响。结论:LPS使内源性H2S减少导致mPAP升高;H2S/CSE体系与NO/NOS体系共同参与LPS所致急性肺损伤时PAH形成的调控机制,在其中呈相互的负性调节作用。

诱导型一氧化氮合酶对肺纤维化形成的促进作用

目的 :研究纤维化肺内诱导型一氧化氮合酶上调及其与肺纤维化形成的关系。方法 :气管内滴注平阳霉素 (BLMA55mL/kg) ,观察注后 7、14、30d肺组织诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)阳性细胞数和Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维的变化 ;用氨基胍 (AG)阻断iNOS合成NO后 ,观察出肺血中NO-2 /NO-3 和肺组织中羟脯氨酸含量以及肺组织形态结构的变化。结果 :①注BLMA57d、14d和 30d组大鼠肺间质iNOS阳性细胞数明显多于对照组 (P <0 .0 1) ,并且 ,BLMA57d组和BLMA514d组还多于BLMA530d组 (P <0 .0 1)。BLMA514d和 30d组大鼠肺间质胶原纤维的出现多于对照组 ,BLMA514d组以Ⅲ型胶原纤维增多为主 ,BLMA530d组以Ⅰ型胶原纤维增多为主。②AG缓解出肺血NO-2 /NO-3和肺组织中羟脯氨酸含量的升高 ;AG还阻止肺间质或纤维细胞和巨噬细胞的增多。结论 :在肺纤维化形成过程中 ,肺内iNOS上调 ,大量生成NO ,有促肺纤维化的作用。

Wistar大鼠海马CA1区、CA3区和齿状回区的解剖分割

目的:在体视显微镜下分割Wistar大鼠海马CA1区、CA3区和齿状回(DG)区。方法:24只健康Wistar大鼠,分组如下:①6只大鼠取脑后硫堇染色,观察海马各区细胞形态;②6只大鼠分离出海马,体视显微镜下观察海马形态并分割CA1区、CA3区和DG区,各区分别切片后硫堇染色;③12只大鼠检测海马各区HSP 70的表达。结果:①大脑冠状切片硫堇染色清晰显示出海马CA1区、CA3区和DG区;②体视显微镜下,在海马腹侧面,沿着CA1区和DG区之间的海马沟可分割开CA1区和DG区,沿着CA3区和DG区之间的裂隙可分割开CA3区和DG区;分割后的海马各区细胞形态结构与整体大脑冠状切片上相对应区域的细胞形态结构一致;③Western blot结果显示:与对照组相比,脑缺血组HSP 70的表达在海马CA3+DG区明显上调、而在CA1无明显变化,这一结果与免疫组织化学结果一致。结论:上述方法可比较明确地分割Wistar大鼠海马CA1区、CA3区和DG区,分割得到的各区组织可用于蛋白质表达的检测。

硫化氢在脂多糖所致大鼠急性肺损伤中的作用

目的探讨硫化氢(H2S)在脂多糖(LPS)所致大鼠急性肺损伤(ALI)中的作用及可能的机制。方法将64只SD大鼠随机分为对照组、LPS组(经气管内滴注LPS复制ALI)、NaHS+LPS组和炔丙基甘氨酸(PPG)+LPS组。给药后4 h或8 h处死,测定肺系数;光镜观察肺组织形态学改变;化学法检测血浆H2S和CO含量、肺组织丙二醛(MDA)含量、胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)和血红素加氧酶(HO)活性;用免疫组织化学法检测肺组织HO-1蛋白表达及吸光度值。结果气管内滴注LPS可引起肺组织明显的形态学改变;肺系数和肺组织MDA含量增加;血浆H2S含量和肺组织CSE活性下降;肺组织HO活性和HO-1蛋白表达增强;血浆CO含量增加。预先给予NaHS可显著减轻LPS所致上述指标的改变。而预先给予PPG可加重LPS所致肺损伤,但对CO含量、HO活性和HO-1蛋白表达无明显影响。结论H2S/CSE体系的下调在LPS所致ALI的发病学中有一定作用,而外源性给予一定量的NaHS对肺组织具有保护作用,该作用可能与其抗氧化效应和上调CO/HO-1体系有一定关系。