SOX4通过靶向调节miR-17表达水平对结直肠癌细胞免疫逃逸及细胞迁移的影响

目的探究性别决定区Y框蛋白4(SOX4)通过靶向调节微小RNA(miR)-17表达水平对结直肠癌细胞免疫逃逸及细胞迁移的影响。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应检测正常结直肠黏膜上皮细胞及4种结直肠癌细胞中SOX4、miR-17表达水平。取结直肠癌细胞将其分为结直肠癌细胞(CC)组、结直肠癌细胞+SOX4-NC(SN)组、结直肠癌细胞+SOX4激动剂(SM)组、结直肠癌细胞+SOX4抑制剂(SI)组、结直肠癌细胞+miR-17-NC(MN)组、结直肠癌细胞+miR-17激动剂(MM)组、结直肠癌细胞+miR-17抑制剂(MI)组、结直肠癌细胞+SOX4抑制剂+miR-17抑制剂(II)组。采用免疫印迹法检测程序性死亡受体-1(PD-1)及PD-1配体(PD-L1)表达水平,小室法检测细胞迁移数量,双荧光素酶报告基因检测各组细胞荧光素酶活性。结果4种结直肠癌细胞中SOX4、miR-17 mRNA表达水平明显高于FHC正常结直肠黏膜上皮细胞,差异均有统计学意义(P<0.05)。CC组与SN组PD-1、PD-L1蛋白表达水平及细胞迁移数量比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。SM组PD-1、PD-L1蛋白表达水平及细胞迁移数量均明显高于SN组,SI组PD-1、PD-L1蛋白表达水平及细胞迁移数量均明显低于SM组,差异均有统计学意义(P<0.05)。CC组与MN组PD-1、PD-L1蛋白表达水平及细胞迁移数量比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。MM组PD-1、PD-L1蛋白表达水平及细胞迁移数量均明显高于MN组,MI组PD-1、PD-L1蛋白表达水平及细胞迁移数量均明显低于MM组,差异均有统计学意义(P<0.05)。SI组与MI组PD-1、PD-L1蛋白表达水平及细胞迁移数量比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。II组PD-1、PD-L1蛋白表达水平及细胞迁移数量均明显低于MI组,差异均有统计学意义(P<0.05)。双荧光素酶报告基因检测结果显示,转染SOX4后miR-17-3′-UTR-WT的荧光素酶活性明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),miR-17-3′-UTR-MUT的荧光酶活性无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05)。结论抑制SOX4表达水平可有效抑制结直肠癌细胞免疫逃逸,并抑制细胞迁移,其作用机制可能与抑制miR-17表达水平有关。

参与外科临床试验对右半结肠癌患者手术安全性及预后的影响

目的探索参与外科临床研究对右半结肠癌患者术后安全性及预后的影响。方法采用回顾性队列研究的方法。以北京协和医院结直肠专业组腹腔镜完整结肠系膜切除术(CME)对比D2根治切除术治疗右半结肠癌的随机对照研究(RELARC研究)为例,选择2016年1月至2019年12月期间年龄18~75岁、活检病理提示结肠腺癌、肿瘤位于盲肠和横结肠右侧1/3之间、胸腹盆增强CT提示肿瘤分期为T2~4N0M0或TanyN+M0而接受根治性手术治疗患者的临床资料,排除合并多原发结直肠癌、术前评估肿瘤分期为T1N0期或中央淋巴结肿大、肿瘤累及周围器官需行联合器官切除术、明确远处转移或无法行R0切除术、近5年内有任何其他恶性肿瘤病史、合并肠梗阻或肠穿孔及消化道出血等需要急诊手术者以及术前评估不适合腹腔镜手术者。将其中参与RELARC研究者作为RELARC组,对满足入组条件、但拒绝参加RELAEC研究的患者纳入对照组。主要观察指标为患者的基线资料、手术和围手术期情况、肿瘤病理特征及辅助治疗情况以及术后随访(包括术后3年内平均复查频率)和生存情况[包括术后3年无病生存率(DFS)和3年总生存率(OS)]并比较RELARC组与对照组间的差异。结果共计290例患者纳入研究,其中RELARC组173例,82例接受CME手术(RELARC⁃CME组),91例接受D2手术(RELARC⁃D2组);对照组117例,72例接受CME手术(CME对照组),45例接受D2手术(D2对照组)。除RELARC⁃CME组超重(体质指数≥24 kg/m^(2))患者比例显著高于CME对照组[67.1%(55/82)比33.3%(24/72),χ^(2)=17.469,P<0.001]外,其余组间基线资料比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。CME两组及D2两组患者在手术时间、术中出血量、中转开腹比例、联合脏器切除、术中输血和术中并发症发生率的比例差异均无统计学意义(均P>0.05)。术后发生Claiven⁃DindoⅡ级以上并发症的比例,RELARC⁃CME组[24.4%(20/82)]高于CME对照组[18.1%(13/72)],但差异无统计学意义(χ^(2)=0.914,P=0.339);RELARC⁃D2组[25.3%(23/91)]与D2对照组[24.4%(11/45)]比较,差异也无统计学意义(χ^(2)=0.011,P=0.916)。RELARC组术后中位随访复查间隔时间明显短于对照组,差异均有统计学意义[RELARC⁃CME组4.5(4.5,4.5)个月比CME对照组7.2(6.0,9.0)个月(Z=−10.608,P<0.001);RELARC⁃D2组4.5(4.5,4.5)个月比D2对照组8.3(6.6,9.0)个月(Z=−10.595,P<0.001)]。RELARC⁃CME组3年DFS(91.5%)和OS(96.3%)高于CME对照组(84.7%和90.3%),RELARC⁃D2组3年DFS(87.9%)和OS(96.7%)也高于D2对照组(81.8%和88.6%),但差异均无统计学意义(均P>0.05);病理分期的亚组分析中,RELARC⁃D2组中pN0期患者3年OS显著优于D2对照组(100%比88.9%,P=0.008),其余亚组间生存率差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论参与具有规范的质量控制及严密随访的外科临床研究,能保障患者围手术期的安全,并且可能有助于改善患者的预后。