EGFR基因突变与肺腺癌主要病理分型及标本类型的关系

背景与目的随着基因突变技术及靶向药物治疗如火如荼的开展,对肺腺癌的精准治疗越来越受到关注,目前肺腺癌中研究最多的是表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)。对于EGFR突变和病理分型的关系在不同标本中是否一致,目前不甚明了。本研究比较肺腺癌活检标本和手术切除标本中EGFR基因突变与病理分型的关系是否一致,探讨EGFR基因突变与肺腺癌病理分型的关系以及标本类型对EGFR基因检测的影响。方法收集肺腺癌手术切除标本(楔形肺切除、肺叶切除标本)163例,肺腺癌活检[粘膜活检、肺穿刺、支气管内超声引导针吸活检术(endobronchial ultrasound-guided transbronchial needle aspiration,EBUSTBNA)标本]173例,按照2015年世界卫生组织(World Health Organization,WHO)肺腺癌分型标准对其主要组织学分型确认(贴壁型、腺泡型、乳头型、微乳头型、实体型),行EGFR基因检测[基因测序法及突变扩增阻滞系统(amplification refractory mutation system,ARMS)]。分别对活检标本和手术切除标本进行统计。结果163例的肺腺癌手术切除标本中,102例EGFR基因突变,突变率为62.58%,173例的活检标本中,114例EGFR基因突变,突变率为65.9%。两组标本中EGFR突变率没有统计学差异(P>0.05)。两组标本中女性的EGFR突变率均明显高于男性(P<0.05)。手术切除标本中60岁以上患者的EGFR突变率明显低于60岁以下(P<0.05),而活检标本中EGFR突变与年龄无关(P>0.05)。在EGFR突变的两组标本中病理分型构成比不同(χ2=8.040,P<0.05)。手术切除标本肺腺癌中EGFR突变的102例中,腺泡型占54.9%(56例),贴壁型占23.53%(24例),乳头型占17.65%(18例),实体型占3.9%(4例),其中腺泡型所占比例最高,其次是贴壁型和乳头型,实体型则比例最少。19、21外显子单独突变最多,21外显子突变在贴壁型较其他两型高(P<0.05),19外显子突变在乳头型较贴壁型高(P<0.05)。腺泡型和乳头型比较,19、21外显子突变无统计学意义。活检标本肺腺癌中EGFR突变的114例中腺泡型占48.25%(55例),贴壁型占26.32%(30例),乳头型占11.4%(13例),微乳头型占4.39%(5例),实体型占9.65%(11例)。腺泡型所占比例最高,其次是贴壁型,乳头状、微乳头状和实体型最少。同样是19、21外显子单独突变最多,但不同病理分型中,19、21外显子突变均无显著差异(P>0.05)。结论肺腺癌中手术切除标本和活检标本EGFR突变率没有差异,且突变与性别有关,均为女性突变率高于男性。手术切除标本中EGFR突变与年龄有关,年龄越大突变率越低,而在活检标本中则与年龄无关。两组标本的病理分型构成比不同。19、21外显子单独突变最多。手术切除标本中EGFR突变类型与主要病理分型有关,21外显子单独突变中贴壁型最多,19外显子单独突变中乳头型最多。EGFR突变活检标本中,19、21外显子单独突变与主要病理分型无明显相关。

结核分枝杆菌分子病理学诊断技术进展

结核病的正确诊断是患者获得及时治疗的关键,长期以来,结核病的诊断主要依赖细菌学涂片和培养。近年来,随着分子生物学技术的迅速发展,为结核病的诊治提供了新方法。文章着重介绍结核分子病理学诊断技术的新进展,并对其应用的可行性予以客观分析。

老年肺癌458例临床病理分析

老年肺癌４５８例临床病理分析朱春贤，张学忠，薛晓英，徐明堂，侯成兰，崔书平，王孟山，张文河北省胸科医院病理科，河北省胸科医院内科，河北省胸科医院放射科（石家庄０５００４１）我院从１９８７～１９９２年间，经病理和细胞学诊断的１２５２例肺癌中，老年人占４...

45例胆固醇性肺炎的临床病理及影像学观察

目的比较原发性和继发性胆固醇肺炎的临床病理及影像学特征,探讨胆固醇性肺炎的发病特点,为临床认识和诊疗该疾病提供理论依据。方法比较8例原发性胆固醇性肺炎和37例继发性胆固醇性肺炎的影像学表现,结合光镜下诊断、临床表现等总结病变特征。结果原发性和继发性胆固醇性肺炎临床表现为咳嗽咳痰偶有痰中带血、发热、胸闷气短等,2组差异无统计学意义(P>0.05)。原发性胆固醇性肺炎女性比例高于继发性胆固醇性肺炎,差异有统计学意义(P<0.05)。2组年龄>50岁比例和发病部位差异无统计学意义(P>0.05)。2组影像学表现构成比、环靶征、支气管充气充液征、伴胸膜增厚、伴纵膈淋巴结肿大差异均无统计学意义(P>0.05)。2组肿物最大径>3cm比例差异无统计学意义(P>0.05)。原发性和继发性胆固醇性肺炎光镜下均可见肺泡腔内出现泡沫细胞聚集、胆固醇裂隙多核巨细胞、间质淋巴细胞增生、肺泡上皮立方状增生。结论不同类型胆固醇性肺炎不能通过临床和影像学表现区分,其确诊仍需病理学诊断。胆固醇性肺炎影像学中结节肿块影、伴随表现环靶征和胸膜增厚均较多见以及光镜下泡沫细胞聚集等,可为临床诊疗提供理论依据。

子宫内膜样腺癌中mTOR和eIF4E蛋白表达及临床意义

目的探讨mTOR和eIF4E蛋白在子宫内膜样腺癌发生中的作用和临床意义。方法采用免疫组化EliVision方法分别检测17例增殖期宫内膜、64例子宫内膜增生性病变和44例子宫内膜样腺癌中mTOR和eIF4E蛋白的表达情况。结果 mTOR在增殖期子宫内膜和单纯性增生宫内膜中均无强阳性表达,复杂性增生宫内膜和子宫内膜样腺癌中mTOR强阳性表达率分别为23.40%和52.27%,明显高于增殖期子宫内膜和单纯性增生宫内膜(P<0.05)。子宫内膜样腺癌中mTOR的强阳性表达率明显高于复杂性增生宫内膜和复杂性非典型增生中的宫内膜(P<0.05)。子宫内膜样腺癌中mTOR强阳性表达与肿瘤分化程度密切相关,Ⅱ、Ⅲ级子宫内膜样腺癌的强阳性表达率明显高于Ⅰ级(72.41%vs13.33%,P<0.05)。而与TNM分期和淋巴结转移均无相关性(P>0.05)。eIF4E蛋白在增殖期宫内膜,单纯性增生宫内膜,复杂性增生宫内膜,子宫内膜样腺癌中的阳性表达率分别为52.94%,73.68%,85.11%和90.91%。复杂性增生宫内膜和子宫内膜样腺癌中eIF4E蛋白的阳性表达均明显高于其它各组(P<0.05),但两者差异无显著性(P>0.05)。eIF4E与子宫内膜样腺癌分化程度、TNM分期和有无淋巴结转移均无相关性(P>0.05)。结论 mTOR、eIF4E蛋白在复杂性增生宫内膜和子宫内膜样腺癌中表达明显增强,提示两者可能在子宫内膜样腺癌发生中发挥一定作用。

基因芯片技术检测结核分枝杆菌对利福平和异烟肼耐药性的研究

目的探讨基因芯片技术在检测结核分枝杆菌利福平和异烟肼耐药性的应用。方法收集21例临床诊断结核病患者体液标本经培养得到的分离菌液,进行基因芯片检测,包括利福平的rpoB基因位点和异烟肼的KatG和inhA基因位点,从而判断其耐药性。结果 21例样本中,利福平rpoB基因有10例突变,总突变率为47.6%,其中9例为531位点的(C-T)突变,1例526位点的(C-G)突变。与药敏试验的符合率为81.0%。异烟肼基因突变有6例,总突变率为28.6%,其中4例为KatG 315(G-C)突变,2例为inhA-15(C-T)突变。与药敏试验的符合率为90.5%。利福平的11例耐药株中,基因芯片检测8例为突变型,突变率为72.7%,在利福平的10例敏感株中,基因芯片检测2例为突变型,突变率为20.0%。在异烟肼的6例耐药株中,基因芯片检测5例为突变型,突变率为83.3%,在异烟肼的15例敏感株中,基因芯片检测1例为突变型,突变率为6.7%。结论基因芯片技术检测结核分枝杆菌对利福平和异烟肼的耐药性具有较高的特异性和敏感性,快速准确,可以应用于结核分枝杆菌耐药性的检测。

功能性颈淋巴结清扫术治疗颈部淋巴结核的疗效观察

目的探讨功能性颈淋巴结清扫术治疗颈部淋巴结核的疗效。方法选择2012年6月—2016年5月在河北省胸科医院胸外科收治的颈淋巴结核病例80例,按随机数字表法分为研究组和对照组,每组各40例,研究组采用功能性颈淋巴结清扫术治疗,对照组采用颈淋巴结核病灶清除术治疗,比较两者在术后住院时间、术后引流时间、清除淋巴结数目、淋巴结核阳性率、切口一期愈合率、术后复发率及术后颈肩部功能情况,比较手术前后炎性因子变化。结果研究组术后住院时间、引流时间均明显低于对照组(t/P=16.015/0.000, t/P=12.360/0.000),清除淋巴结数目明显多于对照组(χ~2/P=27. 990/0. 000),淋巴结结核阳性率研究组低于对照组(χ~2/P=14. 160/0. 000);切口一期愈合率研究组明显优于对照组(χ~2/P=6. 050/0. 014);2组术后15d血清炎性细胞因子(CRP、IL-6、ESR)水平均高于术前,但研究组各指标水平低于对照组(t/P=10.456/0. 001,χ~2/P=7. 255/0. 001,χ~2/P=4. 979/0. 001);随访1年研究组术后复发率低于对照组(χ~2/P=5. 165/0.023),2组颈肩部功能障碍比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论功能性颈淋巴结清扫术治疗颈部淋巴结核,术后引流时间、住院时间短,术后复发率低,不影响颈肩部功能。

恶性间皮瘤p53基因点突变和蛋白表达

ｐ５３基因是在人类多数肿瘤中发生高频突变的肿瘤相关性最强的抑癌基因，其突变特征为８０％的点突变均集中在进化的高保区内，即对应的第５－８外显子部位．恶性间皮瘤是一种与接触石棉有明确关系的间叶源性肿瘤．为深入阐明ｐ５３基因在人恶性间皮瘤发生发展中的作用，应用聚合酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）和免疫组化技术研究了３４例恶性间皮瘤ｐ５３基因的点突变情况．结果表明：５６％（１９／３４）的病例存在ｐ５３基因的点突变，突变率在不同的组织学类型之间有一定的差异；在所发现的２２次突变中有１６次均发生在第７外显子，表明第７外显子是本组恶性间皮瘤的突变热点所在；免疫组化染色：２３％（８／３４）的病例Ｐ５３蛋白免疫组化染色为阳性，阳性率低于基因突变率．以上资料提示ｐ５３基因突变可能在恶性间皮瘤的癌变机制中起着重要作用．

结核感染T细胞检测在骨关节结核中的诊断价值

目的评价结核感染T细胞检测(tuberculous infection of T cells spot test,T-SPOT.TB)在疑似骨关节结核病中的诊断价值。方法选取80例确诊为骨关节结核患者和44例排除结核患者。分别进行抗酸染色、结核菌培养、实时荧光定量PCR检测及T-SPOT.TB,比较并分析检测结果。结果 T-SPOT.TB的敏感度、特异度和准确度分别为82.5%、75.0%、79.8%。T-SPOT.TB的阳性检出率显著高于抗酸染色、结核分枝杆菌培养(P<0.05),而在不同疾病部位(脊柱、四肢关节)及不同病程分组间阳性检出率差异无统计学意义(P>0.05)。结论 TSPOT.TB可以作为骨关节结核病的重要辅助诊断方法。

耐多药脊柱结核的临床应对措施

目的探讨脊柱结核耐药规律、耐药菌株对脊柱结核疗效影响及临床应对措施。方法对2007—2009年临床送结核菌培养的204例确诊为脊柱结核患者进行回顾性分析,总结结核菌的耐药规律、了解耐药菌株对临床疗效的影响,探讨耐药菌株脊柱结核的治疗方法。结果 204份标本中,培养出人型结核分枝杆菌102例,牛型结核分枝杆菌8例,总计培养阳性110例,阳性率53.9%。阳性结果中,耐药菌株26例,耐药发生率占培养阳性的23.6%。耐药菌株中符合耐多药标准的13例,占耐药菌株的50.0%。204例患者中发生术后早期骨病灶未愈4例,新发病灶3例,总计7例,其中6例为耐药结核菌感染,6例行2次手术治疗痊愈,1例行3次手术治疗后痊愈。本组193例随访1年,随访病例骨病灶全部愈合。结论结核菌培养及药物敏感性测定在脊柱结核诊断与治疗中有重要意义。耐多药结核菌株对脊柱结核疗效有明显影响。对耐药结核菌株感染要依据药物敏感测定报告制定个体化治疗方案。对耐药脊柱结核早期病灶未愈和新发病灶及时配合合理手术有助于骨病灶愈合。

胆固醇性肺炎中TLR4、MyD88和NF-κB p65的表达及意义

目的检测Toll样受体4(Toll like receptor 4,TLR4)、髓样分化因子88(myeloid differentiation factor88,MyD88)和核因子-κB p65(nuclearfactor-kappaB p65,NF-κB p65)在胆固醇性肺炎泡沫细胞中的表达水平,探讨三者在胆固醇性肺炎发生中的作用、相互关系及临床意义。方法选择手术切除标本经病理证实为胆固醇性肺炎45例,普通型肺炎(对照组)25例,采用免疫组织化学方法检测2组TLR4、MyD88和NF-κB p65的表达水平。结果胆固醇肺炎泡沫细胞中TLR4蛋白阳性表达率、MyD88蛋白和NF-κB p65蛋白强阳性表达率明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。TLR4阳性表达率、MyD88和NF-κB强阳性表达率均与性别不相关(P>0.05)。年龄<50岁者胆固醇肺炎泡沫细胞中TLR4阳性表达率、MyD88和NF-κB p65强阳性表达率均明显高于年龄≥50岁者,差异有统计学意义(P<0.05)。TLR4与MyD88、TLR4与NF-κB p65、NF-κB p65与MyD88在胆固醇性肺炎的表达中均呈明显正相关(r=0.476、0.523、0.491,P<0.05)。结论 TLR4、MyD88和NF-κB p65的阳性表达可能与胆固醇性肺炎的发生发展有关,三者可能在胆固醇性肺炎的发病中起协同作用。随着年龄增长,三者表达的阳性率均降低。

病灶清除手术联合持续多管闭式引流法与单纯引流法治疗早期全膝关节结核的疗效比较

目的：观察病灶清除手术联合持续多管闭式引流法与单纯引流法治疗早期全膝关节结核的疗效。方法回顾性分析82例早期全膝关节结核患者病历资料。所有患者术前均常规应用抗结核药物治疗2~4周，红细胞沉降率控制在40mm/1h以下。均采用手术彻底清除病灶。根据处理方式将患者分为持续多管闭式冲洗引流组和单纯引流组。持续多管闭式冲洗引流组50例，闭式引流时间3~6周，平均3.8周；单纯引流组32例，闭式引流时间1~3周，平均1.8周；参考相关抗结核药敏试验结果，全身及局部应用敏感的抗结核药物治疗。均定期复查肝肾功能、血常规、红细胞沉降率及膝关节CT，依据结果合理调整用药方案。术后12~24个月判断膝关节结核的治疗效果，参考指标为膝关节活动度、Lysholm评分、切口愈合情况、干扰素γ、红细胞沉降率、C反应蛋白等。结果82例患者术后病理报告均符合结核诊断。随访24~48个月，平均41个月，术后8~12周干扰素γ、红细胞沉降率、C反应蛋白均正常，所有患者均无复发。持续多管闭式冲洗引流组窦道形成1例，单纯引流组窦道形成4例，经持续换药后愈合。术后12个月持续多管闭式引流组关节Lysholm评分为（89.2±8.4）分，高于单纯引流组的（75.6±7.8）分，差异有统计学意义。结论持续多管闭式引流法治疗早期全膝关节结核具有复发率低、保留关节运动功能、操作性强、费用少、应用简单的优点，临床效果好，值得临床推广应用。

石家庄市健康体检人群甲状腺结节性疾病及相关因素分析

近年来,甲状腺结节性疾病日益受到人们的关注。健康人群中可触诊到的甲状腺结节的发生率为4%～7%。超声等影像学检查时偶然发现的结节可达19%。结节中甲状腺癌的发病率5%～15%[1]。

氨甲苯酸联合乌司他丁对小儿VSD修补术的临床效果

目的比较氨甲苯酸单独使用与联合乌司他丁对小儿先心病室间隔缺损(VSD)修补术的血液保护效果。方法选择2012年2月至2015年3月于我院小儿心血管外科就诊并诊断为VSD的60例患儿进行回顾性分析,分为抑肽酶组(T组)、氨甲苯酸组(P组)和氨甲苯酸联合乌司他丁组(PU组),每组20例。三组患儿体外循环前给予不同药物预充液处理,记录所有患儿手术前后常规血液学指标、凝血功能指标,记录并比较术中出血量、术后输血量和术后6 h引流量。结果三组患儿术前、术后及组内术前、术后的PLT计数、血红蛋白和血细胞比容比较差异无统计学意义。三组患儿术前PT、APTT和FIB组间及组内术前、术后比较差异无统计学意义(P>0.05)。术后PU组PT显著低于T组和P组(P<0.05),APTT显著低于P组(P<0.05)。三组术后FIB比较差异无统计学意义(P>0.05)。PU组术中出血量显著低于T组和P组(P<0.05);三组术后输血量比较差异无统计学意义(P>0.05);术后6 h引流量PU组显著低于T组和P组(P<0.05)。结论在预充液中加入氨甲苯酸联合乌司他丁能更有效地对VSD修补术血液起到保护作用,可成为抑肽酶替代药物。

异基因半相合CIK细胞治疗晚期非小细胞肺癌临床分析

目的探讨异基因半相合细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine induced killer cell,CIK)治疗晚期非小细胞肺癌的临床疗效。方法 25例晚期非小细胞肺癌患者接受CIK细胞治疗。采用患者子女的外周血(异基因半相合)分离单个核细胞置于CD3 Mc Ab和Retro-Nectin包被细胞培养瓶后,悬浮细胞用干扰素-γ、白介素-1α(interleukin-1α,IL-1α)、IL-2细胞因子诱导CIK细胞。14天后锥虫蓝染色检测活性,流式细胞仪检测CIK细胞表面标志物。患者回输CIK细胞后,检测患者外周血的细胞表型变化。参照WHO的实体瘤疗效评价标准评估疗效。结果 CIK细胞培养到第14天时为10.7×109个,锥虫蓝染色检测活性为(98.2±1.0)%。流式细胞仪检测到CD56+CD16+CD3+细胞较培养前显著增加[(30.2±1.5)%vs(6.0±2.0)%,P<0.05]。患者回输后外周血CIK细胞第10天、第20天较回输前显著增加(P<0.05)。CIK细胞回输后临床评估CR 10例,PR 8例,NC 5例,PD 2例,总有效率(CR+PR)为72.0%,中位缓解期为10.1月,中位生存期为12.0月,1年生存率为64.0%(16/25)。患者无骨髓抑制、脱发、静脉炎和消化道反应。结论异基因半相合CIK细胞治疗晚期非小细胞肺癌能延长患者生存期,提高生存质量,不良反应轻。

结核感染干扰素释放试验中的QFT-G试验在肺结核诊断中的应用评价

目的探讨结核感染干扰素释放试验中的QFT-G试验在肺结核诊断中的应用评价。方法采用QFT-G检测外周血结核特异性γ-干扰素的含量,同时与FQ-PCR检测痰中结核分枝杆菌核酸结核菌素、纯化蛋白质衍生物(PPD)皮试进行平行比较分析。结果 QFT-G、FQ-PCR和PPD三种方法的敏感度分别为:91.4%、84.2%、78.9%,特异性分别为86.9%、80.8%和54.8%,阳性预测值分别为91.0%、92.2%和71.1%,阴性预测值分别为66.2%、75.4%和46.3%,准确性分别为87.8%、85.0%和59.6%。结论 QFT-G较FQ-PCR和PPD有较高的敏感度、特异性和准确性,是一种诊断肺结核的有价值的检测方法。

两种γ-干扰素释放试验检测结核菌感染的对比研究

目的比较结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)和结核杆菌特异性细胞免疫反应(A.TB)在结核诊断中的敏感性和特异性,分析两者的一致性。方法选取70例临床患者的外周血标本,分别采用T-SPOT.TB试剂盒和A.TB试剂盒进行γ-干扰素释放试验,比较两者在结核诊断中的敏感性、特异性及一致性。结果 T-SPOT.TB的特异性稍高于A.TB,二者的敏感性差异无统计学意义(P<0.05),两种方法的一致性较强(P=1.000,κ=0.819)。结论两种γ-干扰素释放试验的方法具有较好的一致性,可以根据临床需要选择不同的方法。

结核感染T细胞检测在儿童骨关节结核病中的诊断价值

目的本研究通过比较结核感染T细胞斑点试验(tuberculosis infection of T cells spot test,T-SPOT.TB)、抗酸染色、结核菌培养、实时荧光定量PCR检测及结核菌素纯蛋白衍生物(purified protein derivative,PPD)试验,评价T-SPOT.TB在儿童骨关节结核病中的诊断价值。方法选取36例诊断为骨关节结核的患儿,分别进行抗酸染色、结核菌培养、实时荧光定量PCR检测、结核菌素PPD试验及T-SPOT.TB,比较并分析检测结果。结果T-SPOT.TB阳性检出率显著高于抗酸染色、结核菌培养(P<0.05)。不同病变部位(脊柱、四肢关节)及不同年龄段间阳性检出率差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 T-SPOT.TB可以作为儿童骨关节结核病的重要辅助诊断方法。