9种近海鱼重金属污染状况及食用安全性评价

为探究近海鱼重金属污染状况及其食用健康风险,采用电感耦合等离子体质谱法、液相色谱-原子荧光光谱法和原子荧光光谱法对蓝圆鲹、蓝点马鲛等9种近海鱼的头、尾、皮、骨、鱼肉和内脏中铅(Pb)、镉(Cd)、铬(Cr)、总砷(As)、无机砷和总汞(Hg)的含量进行测定,并采用污染指数法和目标危害系数法等方法进行评价。结果表明:54组样品中有9组Cr含量超过国家标准(GB 2762—2017《食品中污染物限量》),超标率16.67%;7组样品Cd含量超标,超标率12.96%;2组样品Pb含量超标,超标率3.70%;无机As、总Hg含量均未超标。分析近海鱼不同部位重金属含量,54组样品中有7组鱼内脏重金属含量超标,超标率12.96%;鱼头、鱼尾各有3组重金属含量超标,超标率5.56%;鱼肉中重金属含量均未超标。单因子污染评价结果显示,Cr污染最为严重,Cd次之,之后是Pb。无机As及总Hg相对污染指数最低。综合污染指数评价显示,沙丁鱼内脏最高,达到3.877,处于重度污染级别。蓝圆鲹、蓝点马鲛、鲭鱼和金线鱼的内脏的综合污染指数属于中度污染级别。所有鱼肉组织的单一和多种重金属复合风险系数均小于1。由此可见,近海鱼中内脏重金属污染较严重,但鱼肉食用均安全。本研究将为近海鱼类的日常食用及其下脚料综合开发提供安全指导。

红树植物桐花树叶抗炎镇痛活性部位研究

目的:筛选与确证桐花树叶抗炎镇痛作用的有效部位。方法:萃取法获得桐花树叶75%乙醇提取物的石油醚部位、二氯甲烷部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位、水部位(醇沉)等5个部位,经醋酸致小鼠扭体试验筛选出抗炎镇痛作用较强的乙酸乙酯部位,进一步通过醋酸致小鼠扭体试验、小鼠热板试验、角叉菜胶致足肿胀试验、二甲苯致小鼠耳肿胀试验等全面评价桐花树叶乙酸乙酯部位的抗炎镇痛作用;分光光度法测定角叉菜致足肿胀小鼠肝匀浆的T-SOD活性与MDA含量。结果:桐花树叶乙酸乙酯部位高剂量(200 mg/kg)灌胃给药后可显著减少醋酸致小鼠扭体次数、增大热板小鼠痛阈值、抑制角叉菜胶致小鼠足肿胀度与二甲苯致小鼠耳肿胀度(P<0.01);不同剂量(100、150、200 mg/kg)的桐花树叶醇提物乙酸乙酯部位灌胃给药3 d后,可使角叉菜致足肿胀小鼠肝脏T-SOD活性显著升高、MDA含量显著降低(P<0.01)。结论:桐花树叶醇提物乙酸乙酯部位具有显著的抗炎镇痛作用,抗氧化可能是其抗炎作用机制之一。

桐花树叶醇提取物乙酸乙酯部位对大鼠皮肤抗氧化与抗衰老能力的影响

萃取法获得桐花树叶75%乙醇提取物的石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇和水部位(醇沉),从中筛选出多酚与总黄酮含量均较高、DPPH自由基清除能力较强的乙酸乙酯部位作为辅料试配成膏状体,并通过对SD大鼠背部皮肤进行连续外涂实验,测定其皮肤组织匀浆的总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性、羟基自由基清除能力、丙二醛(MDA)含量、羟脯氨酸(HYP)和胶原蛋白含量。结果表明:2.0%桐花树叶乙酸乙酯部位膏状体处理组的皮肤组织T-SOD活性、羟基自由基清除能力、HYP和胶原蛋白含量均极显著高于,但MDA含量极显著低于阴性对照组(仅含化妆品基质的膏状体)、阳性对照组(2.0%熊果苷膏状体)与1.0%、0.5%乙酸乙酯部位膏状体处理组(P<0.01)。说明桐花树叶乙酸乙酯部位是一种潜在的抗氧化或抗衰老化妆品辅料,2.0%乙酸乙酯部位含量是试配该化妆品的有效添加剂量。增强T-SOD活性、提高自由基清除能力、降低MDA含量、促进胶原蛋白合成可能是桐花树叶乙酸乙酯部位预防或延缓皮肤衰老的作用机制。

桐花树根多糖的提取、理化性质及其抗酪氨酸酶活性研究

旨在探究桐花树根多糖的理化性质和抗酪氨酸酶活性。以水提法、酸提法、碱提法连续提取桐花树根多糖,经脱脂脱色、脱蛋白、透析等方法得到初步纯化的多糖,紫外检测与显色反应分析其理化性质;探究多糖对酪氨酸酶活性的影响。结果表明：桐花树根水提物的多糖（中性多糖）含量为34.02%,酸提物多糖（酸性多糖）含量为27.18%,碱提物的多糖（碱性多糖）含量为51.21%。在浓度0.2～1.0 mg/m L时,桐花树根中性多糖、碱性多糖对酪氨酸酶活性具有双向调节作用,当浓度小于0.4 mg/m L时,对酪氨酸酶活性具有抑制作用,当浓度大于0.6 mg/m L时,表现为激活作用;但酸性多糖对酪氨酸酶活性仅表现为激活作用。

桐花树果实乙酸乙酯部位体外抗氧化活性研究

为了研究桐花树果实乙酸乙酯部位的抗氧化作用,考察了乙酸乙酯部位对DPPH自由基,羟自由基的清除效果,测定了其总还原力以及对H2O2诱导小鼠氧化溶血和对小鼠肝匀浆MDA生成的抑制作用。结果表明：桐花树果实乙酸乙酯部位对DPPH自由基和羟自由基的清除率随着样液质量浓度的增加而升高。0.01、0.05、0.1 mg/m L桐花树果实乙酸乙酯部位对H2O2对小鼠红细胞溶血抑制的抑制率分别为47.64%、67.09%、81.99%。与阴性对照组相比,0.5-2.0 mg/m L桐花树果实提取物均可极显著地抑制小鼠肝匀浆自发的产生MDA（P〈0.01）。可见,桐花树果实乙酸乙酯部位具有明显的抗氧化活性。

桐花树叶乙酸乙酯部位提取物对α-葡萄糖苷酶抑制活性作用

研究桐花树叶乙酸乙酯提取物对α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用。桐花树叶70%醇提取物经萃取获得石油醚部位、二氯甲烷部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位、水部位5个部位。对各部位进行多酚含量、总黄酮含量、DPPH·清除活性测定,从中筛选出活性物质含量高、自由基清除活性较强的桐花树叶乙酸乙酯提取物,对其用α-葡萄糖苷酶进行体外活性抑制作用试验,通过酶促动力学方法与绘制Lineweaver-Burk曲线,推断桐花树叶乙酸乙酯提取物的酶抑制类型,所得的结果与阿卡波糖进行比较。结果表明:桐花树叶乙酸乙酯部位和桐花树叶水部位对α-葡萄糖苷酶均有抑制作用,且抑制作用均优于阿卡波糖,其半抑制浓度(IC50)分别为40.59μg/m L和60.79μg/m L。桐花树叶乙酸乙酯提取物抑制类型为混合Ⅱ型抑制,对游离酶(E)的抑制常数(Ki)为0.245 mg/m L,对酶-底物络合物(ES)的抑制常数(Kis)为0.023 mg/m L。

桐花树叶乙酸乙酯部位抗氧化、抗过敏活性组分的筛选

为了筛选桐花树叶75%乙醇提取物乙酸乙酯部位的抗氧化与抗过敏活性组分,通过硅胶柱层析、薄层层析分离出该部位的组分,采用DPPH自由基清除体系、还原力测定体系检测各组分的抗氧化活性,体外透明质酸酶抑制实验检测各组分的抗过敏活性.结果表明:相比于其他组分,组分Fr.3具有较强的DPPH自由基清除能力与还原力,DPPH自由基的半抑制浓度IC_(50)为0.09mg/mL,远小于人工合成抗氧化剂2,6-二叔丁基对甲酚(BHT)的IC_(50)(0.30mg/mL);还原力的半效应浓度EC50为0.25mg/mL,明显小于维生素C的EC50(0.91mg/mL).组分Fr.2、Fr.5、Fr.9具有较强的透明质酸酶抑制活性,IC_(50)分别为0.53,0.16,0.25 mg/mL,强于或等效于甘草酸二钾的IC_(50)(0.54mg/mL).可见,桐花树叶乙酸乙酯部位柱层析组分Fr.3是其强抗氧化活性组分,Fr.2、Fr.5、Fr.9组分是其强抗过敏组分.

海藻铁钉菜抗氧化活性部位研究

以DPPH自由基清除能力、TEAC值与主要化学成分含量为指标,从福建省围头海域的10种海藻中筛选出总酚含量较高、抗氧化活性较强的海藻及其抗氧化活性部位.进一步对该海藻的抗氧化活性部位进行DPPH自由基清除能力、还原力与总抗氧化能力的测定,初步分析金属离子对其抗氧化活性的影响.结果表明:10种海藻中,铁钉菜甲醇提取物具有较高含量的多酚、TEAC值与较强的DPPH自由基清除能力,乙酸乙酯部位是其主要的抗氧化活性部位.铁钉菜乙酸乙酯部位对DPPH自由基清除的半效应浓度EC_(50)为0.17 mg/m L,小于BHT EC_(50)0.23 mg/m L;还原力的EC_(50)为0.30 mg/m L,远远小于维生素C EC_(50)0.91mg/m L;总抗氧化能力约为13.16 U/mg.金属离子对铁钉菜乙酸乙酯部位的DPPH自由基清除的影响表现为K^+、Cu^(2+)、Zn^(2+)、Ca^(2+)、Fe^(3+)等的增效作用与Na^+、Mn^(2+)、Mg^(2+)等的降效作用.

余甘子总黄酮超声波辅助提取工艺的优化

以余甘子干粉为材料,利用超声波辅助提取余甘子总黄酮。单因素试验分析液料比、乙醇浓度、超声时间、超声功率对余甘子总黄酮提取率的影响,在此基础上,利用响应面分析法对提取工艺进行优化。结果表明,余甘子总黄酮最佳提取条件为:液料比82:1(V/W)、乙醇浓度45%、超声时间41 min、超声功率210 W,在此条件下余甘子总黄酮的实际提取率为6.12%。

围头湾5种海藻提取物AChE抑制活性与DPPH·清除能力的比较

对福建省围头海域5种海藻提取物及萃取部位的乙酰胆碱酶抑制活性与DPPH·清除能力进行比较研究,并分别测定其总酚与总黄酮含量.结果表明:裙带菜与羊栖菜提取物具有较高含量的总酚与总黄酮;裙带菜的乙酸乙酯部位、二氯甲烷部位和羊栖菜石油醚部位、二氯甲烷部位在10mg/mL质量浓度时表现出较强的乙酰胆碱酶抑制活性,并且裙带菜乙酸乙酯部位、二氯甲烷部位以及羊栖菜二氯甲烷部位的DPPH·清除能力均明显高于其他提取物或萃取部位.

惠安产赤楠叶挥发油的化学成分与体外抗氧化活性评价

以GC-MS-DS联用技术分析惠安产赤楠叶挥发油的化学组成,采用还原铁离子体系、二苯代苦肼自由基(DPPH·)清除体系、羟自由基清除体系及抑制脂质体过氧化测定体系体外评价赤楠叶挥发油的抗氧化活性.结果表明:惠安产赤楠叶挥发油分以石竹烯氧化物(30.04%)为主要成分,该挥发油具有较强的抗氧化能力,还原力、清除DPPH·自由基、清除羟自由基、抑制脂质体过氧化的半效应浓度分别为4.19mg/m L、39.91mg/m L、9.71mg/m L、19.37mg/m L.可见,赤楠叶挥发油具有作为天然抗氧化剂的开发应用价值.

赤楠叶二氯甲烷部位、乙酸乙酯部位抗氧化活性的比较研究

通过测定1,1-二苯基-2-苦基肼(1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率、还原力、金属离子对其抗氧化活性的影响及总酚质量分数等比较赤楠叶二氯甲烷部位、乙酸乙酯部位的抗氧化活性。结果表明:赤楠叶二氯甲烷部位、乙酸乙酯部位清除DPPH的EC50为0.63、0.10 mg/m L;还原力的EC50分别为0.87、0.09 mg/m L。除Al^(3+)、Fe^(3+)外,K^+、Na^+、Mn^(2+)、Mg^(2+)、Cu^(2+)、Zn^(2+)、Ca^(2+)等金属离子对赤楠叶乙酸乙酯部位的DPPH清除作用为抑制作用;除Cu^(2+)、Ca^(2+)外,K^+、Na^+、Mn^(2+)、Mg^(2+)、Al^(3+)、Zn^(2+)、Fe^(3+)等金属离子对赤楠叶二氯甲烷部位的DPPH清除能力有促进作用。赤楠叶二氯甲烷部位、乙酸乙酯部位的总酚质量分数分别为9.23%与59.17%。可见,赤楠叶乙酸乙酯部位具有较强的抗氧化活性与总酚含量,但其抗氧化活性较易受金属离子的拮抗作用。

抗氧化紫球藻胞外多糖酶解物制备工艺优化

以紫球藻胞外多糖为原料,·OH清除率为评价指标,依据单因素试验,利用Box-Behnken中心组合试验和响应面分析法,对EPS粗品的酶解工艺进行优化,并评价EPS粗品酶解前后的抗氧化活性。结果表明,EPS粗品酶解最佳工艺参数为:酶解时间6.3h,酶解pH 8.0,酶解温度63℃,酶添加量(酶/底物)2.7 U/mg,酶解液对·OH的清除率达到(70.64±0.38)%;优化酶解条件下酶解产物的抗氧化活性显著提高,酶解产物对·OH、DPPH·、ABTS^+·和O_2^-·的半数清除浓度(IC_(50))分别为(1.67±0.58),(1.08±0.01),(0.64±0.01),(4.16±0.01)mg/mL。

羊栖菜多糖提取物及其润肤霜的保湿和抗氧化活性

采用超声细胞破碎辅助水提-醇沉法提取羊栖菜多糖(FSF),测定其抗氧化活性和保湿性能,并用其制备润肤霜,体外评价该润肤霜的保湿性能,使用皮肤外涂实验考察该润肤霜对小鼠皮肤抗氧化活性的影响。结果表明:羊栖菜多糖提取物(EFSF)具有较强的自由基清除能力,保湿性能优于甘油;该润肤霜同样具有较好的保湿性能,在干燥环境下198 h的失水率为4.33%,在相对湿度43%环境下198 h的失水率为2.36%;皮肤外涂实验表明,与阴性对照组(仅含基质的润肤霜)、阳性对照组(0.3%熊果苷润肤霜)相比,该润肤霜均可显著增强小鼠皮肤的羟自由基清除能力(403.65 U/mgprot)、超氧阴离子自由基清除能力(810.52 U/gprot)、总抗氧化能力(11.58 U/mgprot)和T-SOD活性(81.11 U/mgprot),显著提高羟脯氨酸含量(43.49 mg/L)以及降低MDA含量(2.12 nmol/mgprot)。

红毛菜抗氧化肽的分离纯化及其活性评价

依次通过切向流超滤(TFU)和羟丙基葡聚糖凝胶Sephadex LH-20柱层析技术对红毛菜(Bangia fuscopurpurea(Dillw.) Lyngb.)酶解物进行分离纯化,以谷胱甘肽(GSH)为阳性对照,以氧自由基的吸收能力(ORAC)及对羟自由基(OH·)、ABTS自由基(ABTS·+)、DPPH自由基(DPPH·)的清除率和细胞抗氧化活性(CAA)为指标评价各级分的活性,制备高抗氧化活性的红毛菜多肽(Bangia fuscopurpurea polypeptide,BP).结果表明,经TFU后获得具有不同相对分子质量的BPI(相对分子质量<2 ku)和BPII(相对分子质量2~10 ku)两个级分,BPI经柱层析后获得BPIS1和BPIS2两个级分.就ORAC值大小而言,BPI>GSH>BPII.当质量浓度为8 mg/mL时,BPI和BPII的CAA值分别为26.71±2.01和64.43±5.98.经TFU后,BPI的总抗氧化活性较强,且对细胞内活性氧(ROS)水平升高有更强的抑制作用.经柱纯化后,BPIS2的综合抗氧化活性最强,ORAC值为(999.65±23.15)μmol TE/g,优于GSH的效果.当质量浓度为8 mg/mL时,BPIS2的CAA值为23.76±0.17.

微拟球藻对营养盐的响应及其多糖酶解物抗氧化活性

为探讨在温度、光照一定时,NaNO_3和NaH_2PO_4对微拟球藻(Nannochloropsis sp.,N.sp.)生长的影响,为其规模化培养提供实验数据;同时研究微拟球藻胞内多糖(Intracellular polysaccharide from Nannochloropsis sp.,NSP)及其酶解物的抗氧化活性,以探究N.sp.在食品、医药行业中的应用价值.利用分光光度法对经不同浓度NaNO_3和NaH_2PO_4处理的微拟球藻的生物指标进行测定.运用水提醇沉法获得NSP粗品,并用紫贻贝酶(Enzyme from Mytilus edulis Linnaeus)对NSP粗品进行酶解,以羟基自由基(·OH)、1,1-二苯基-2-苦味酰基自由基(DPPH·)、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐自由基(ABTS·+)、超氧阴离子自由基(O_2^-·)和2,2'-偶氮-双-(2-脒基丙烷)氯化二氢(AAPH)的清除能力为指标,评价NSP粗品及其酶解物的抗氧化活性.结果表明,微拟球藻生长的最适NaNO_3和NaH_2PO_4浓度分别为0.1125 g/L和0.0075 g/L;NSP粗品对·OH、DPPH·、ABTS·+、O_2^-·和AAPH均具有一定的清除能力.NSP酶解物对DPPH·的清除能力与NSP粗品的无显著差异,对·OH、ABTS·+和O_2^-·的清除能力均强于NSP粗品,其中对·OH和ABTS·+的半清除浓度(IC_(50))值分别为(0.9206±0.0147)mg·m L^(-1)和(0.0751±0.0093)mg·m L^(-1),NSP酶解物对O_2^-·的清除率是酶解前效果的约2倍.NSP酶解物的ORAC值为(940.1±7.5)μmol TE/g,是酶解前的4.7倍左右.

裙带菜乙醇洗脱组分对α-葡萄糖苷酶活性的影响

探讨养殖型褐藻裙带菜水提醇沉上清部分洗脱组分对α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用及其反应动力学.采用AB-8大孔吸附树脂柱,依次用去离子水、25%乙醇、50%乙醇、75%乙醇、100%乙醇梯度洗脱裙带菜水提醇沉上清部分,获得相应洗脱组分.采用PNPG法测定α-葡萄糖酶活性,并与阳性对照阿卡波糖作比较.随后,对其中抑制α-葡萄糖苷酶活性较强的组分进行酶抑制动力学分析,推断酶抑制类型.结果表明:相比于裙带菜水提醇沉上清部分与其他洗脱组分,50%乙醇洗脱组分具有较强的α-葡萄糖苷酶抑制活性,半效应浓度IC50为0.77mg/mL,远小于阿卡波糖IC506.63 mg/mL,其酶抑制类型属于混合I型抑制,主要通过与游离酶(E)的亲和来起到抑制作用.因此,裙带菜水提醇沉上清部分50%乙醇洗脱组分具有作为新型α-葡萄糖苷酶抑制剂材料的开发价值.

红毛藻抗氧化肽的菠萝蛋白酶酶解制备工艺优化及其活性评价

以红毛藻(Bangia fuscopurpurea (Dillw.) Lyngb.)蛋白为原料,经菠萝蛋白酶水解制备抗氧化肽,为红毛藻的深加工提供理论依据.以酶解液对DPPH·的?清除率为响应值,考察酶解温度、酶解时间、酶解pH、酶底比对酶解液抗氧化活性的影响.在单因素试验基础上,通过L_9(3~4)正交试验优化红毛藻抗氧化肽的酶解制备工艺,并以酶解产物对O_2~ˉ·的清除能力和还原力为指标评价酶解产物的抗氧化活性.结果表明,用菠萝蛋白酶酶解红毛藻蛋白制备抗氧化肽的最优工艺参数为:酶解温度45℃、酶解时间90 min、酶解pH7.5、酶底比1200U/g.在最优酶解工艺条件下,红毛藻蛋白的水解度达到(10.74±0.13)%,酶解液中多肽浓度为(6.98±0.07) mg/mL,酶解产物对DPPH·和O_2~ˉ·的半数清除浓度(IC_(50))值分别为(0.4403±0.0142) mg/mL和(4.2600±0.0180) mg/mL,且具备一定的还原力.

浒苔分离产物体外抗菌及其抗氧化活性研究

对浒苔石油醚相提取物进行柱层析分离的基础上,对分离组分进行抗菌活性和抗氧化活性研究.结果表明,浒苔柱分离组分对所选取4种受试菌(枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、八叠球菌)均具较强的抑菌能力.对4种菌的最低抑菌浓度(MIC)进行研究发现,柱分离组分Fr3对八叠球菌和大肠杆菌具有较好的抑菌效果,MIC值分别达到4.2 mg∙mL^-1和8.0 mg∙mL^-1;柱分离组分Fr8,Fr14对枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的MIC值分别可达到5.0 mg∙mL^-1和8.8 mg∙mL^-1.分离组分体外抗氧化活性表明,分离组分具有较好的抗氧化性能,其中,分离组分Fr15对DPPH自由基(DPPH·)的IC50达到0.4632 mg∙mL^-1.

永春芦柑不同部位抗氧化能力的研究

以永春芦柑为原料,采用2,6-二氯靛酚法分别测定芦柑果肉、果皮、种子中维生素C含量,采用分光光度法分别测定芦柑果肉、果皮、种子对羟自由基、超氧阴离子自由基、DPPH自由基的清除能力并通过IC_(50)来评价不同部位的抗氧化能力。实验结果:芦柑果肉、果皮、种子中维生素C含量分别为:21.72±0.13、19.43±0.18、17.87±0.16mg/100g;芦柑这三个不同部位对自由基均有一定的清除能力,且清除能力随着浓度的增加而增强;其中对羟自由基清除能力最强的是果肉,对超氧阴离子和DPPH自由基清除能力最强的是果皮。根据自由基清除能力筛选出芦柑不同部位来开发相应的功能性食品。