人RPE细胞培养、冻存、复苏及传代研究

目的：建立人视网膜色素上皮（retinalpigigmentepithelium,RPE）细胞体外培养模式，为研究RPE细胞及有关的眼底病防治提供细胞模型和细胞来源。方法：自眼球锯齿缘前2mm处环形剖开眼球，酶消化分离RPE细胞，20％DMEM培养液培养，细胞接近融合状态时进行传代，将处于对数生长期细胞以普通冰箱进行梯度降温后液氮保存，采用改良的速溶方法复苏，1％台盼蓝确定细胞活力，免疫组化染色鉴定细胞来源，作生长曲线观察细胞增殖。结果：原代细胞生长良好，免疫组化染色阳性率为100％，改进冻存复苏方法后，细胞存活率提高20％以上。结论：基本建立了人RPE细胞体外培养模式，改进传统的培养方法后，效果理想。