盐酸刺激量对家蚕卵酯酶A4活性的影响及其与蚕卵活化的关系

将产卵后 2 4～ 96h( 2 5℃ )的蚕卵 ,用相同或最佳盐酸刺激量 (浸酸后点青最快、点青卵率最高 )浸酸处理 ,卵龄越大 ,蚕卵点青越迟。蚕卵的点青时间在一定范围内随盐酸刺激量增大而提前 ,超过这一范围 ,则随刺激量增大而延迟。卵龄增大 ,蚕卵酯酶A4和ATPase特征性活性峰出现时间延迟 ;蚕卵经盐酸处理 ,该时间明显提前。产卵后 96h盐酸处理蚕卵 ,酯酶A4的活性峰出现时间随盐酸刺激量增大而提前。随着浸酸卵龄和盐酸刺激量的改变 ,蚕卵酯酶A4的活性峰出现时间与蚕卵点青时间发生一致的变化。盐酸刺激量能够影响蚕卵的活化 (或滞育发育期 )和发育速度。

家蚕中肠酸性磷酸酶细胞化学的研究

应用超微结构酶细胞化学技术研究了家蚕幼虫中肠ＡＣＰａｓｅ 活性的亚细胞分布，结果表明ＡＣＰａｓｅ 主要分布在圆筒形细胞的细胞核内，核周围的内质网及溶酶体中，杯形细胞的细胞核、细胞底部的内褶膜上也有少量的酶活性存在。不同数量性状的蚕品种间圆筒形细胞细胞核内的ＡＣＰａｓｅ 活性分布有显著差异。

体外25℃家蚕卵酯酶A4的ATP酶活性变化及其与滞育性的关系

从家蚕卵纯化出EA4酶蛋白 ,调查了温度对EA4的ATP酶最高活性和其出现时间的影响以及与蚕卵滞育性的关系。EA4的酶活性反应温度为 2 5℃时比 5℃时提高约 1 0倍。从滞育性卵和盐酸处理卵纯化EA4 ,或者用EA4的活性抑制多肽 (PIN)体外处理酶蛋白质 ,2 5℃中EA4的最高活性出现时间比 5℃中显著提早。随纯化时卵龄或PIN处理时间的改变 ,2 5、5℃中EA4的最高活性出现时间以及与蚕卵 5℃冷藏时滞育发育时间有相同趋势的变化。体外 2 5℃和体外 5℃一样 。

桑蚕来源致病性微孢子虫的分类学地位

综述了桑蚕来源微孢子虫微粒子虫属 (Nosema bombycis)、具褶孢虫属 (Pleistophora)、泰罗汉孢虫属 (Thelohania)、变形孢虫属 (Vairimorpha)和内网虫属 (Endoreticulatus)对桑蚕的病原性以及这些微孢子虫的分类学特征和地位 .

家蚕耐氟性差异的细胞化学研究

对不同蚕品种的耐氟性、ACPase的氟敏感性、蚕品种耐氟性机理的研究表明 ,在供试蚕品种中以浙农 1号的耐氟性最强 ,杭 8的耐氟性最弱 ;家蚕Bombyxmori血淋巴ACPase活性与蚕品种的耐氟性无明显关系 ;氟对蚕的血淋巴和中肠组织细胞的ACPase活性都有抑制作用 ,并随着氟添食浓度的增加ACPase活性降低 ,但超过一定浓度的氟添食 ,血淋巴ACPase活性反而有一个回升的过程 ,这个转折点出现可能的浓度及回升的幅度与蚕品种的耐氟性有关 ;细胞化学研究发现此转折点的出现是由于高浓度氟引起细胞结构的破坏而导致蚕体组织细胞内的ACPase大量向血腔释放的结果 ;氟敏感性蚕品种杭 8在很低氟量添食即可引起中肠组织细胞的ACPase大量向血腔释放 ,使血淋巴中的ACPase活性大幅度上升 ,随后ACPase活性受到完全的抑制 ;耐氟性较强的蚕品种浙农 1号则在较高的氟含量添食时才向血腔释放ACPase,且血淋巴中ACPase增高的幅度小 ,在很高的氟量添食时全面抑制中肠ACPase活性。氟对不同品种ACPase活性影响的差异被认为是家蚕品种耐氟性差异机理之一。

提高芳草品种蚕种繁育系数的研究

芳草×晨星是浙江大学蚕学系选育并经浙江省农作物品种审定委员会审定通过的新夏秋蚕品种，１９９６年起在生产上试繁推广．从试繁情况看，芳草Ａ系原种不产卵蛾和少产卵蛾较多，影响蚕种繁育系数．芳草选育过程中，曾建立了Ａ、Ｂ两个品系，使用双系杂交原种是提高芳草繁...

家蚕微孢子虫类的生物学性状研究

以Nosema bombycis为中心,论述了家蚕微孢子虫类孢子的形态结构、发芽机制与生理、感染与增殖等生物学特性,并根据其生物学特性及其发病规律,提出了当前我国防治家蚕微粒子病的技术措施要点。

缩皱与蚕茧解舒的关系

通过调查优良蚕品种在不同上蔟环境中结成的蚕茧缩皱,发现高温多湿环境中上蔟的蚕茧缩皱粗、乱、深,茧层丝胶溶失率较低,解舒率。适温适湿环境中上蔟的蚕茧缩皱细、齐、浅,丝胶溶失率高,解舒优。缩皱粗细与解舒率、解舒丝长呈极显著的正相关性。

方格蔟上蔟环境条件与蚕茧解舒的关系

湿度是影响蚕茧解舒的主因，多湿时蚕茧解舒劣，适湿时蚕茧解舒优；温度过高过低也会影响蚕茧解舒，而高温对蚕茧解舒的影响更大一些。在合理的上蔟环境中使用方格蔟时，才能获得解舒率高的优质蚕茧。

1999年浙江省原蚕种场春叶被害原因调查

位于杭州市小和山的浙江省农业厅原蚕种场，１９９９ 年春桑叶突然受到不明原因的危害，通过调查、原因分析及试验、检测。

Bt水稻“克螟稻”花粉对家蚕生长发育的影响

本试验以家蚕为供试对象研究Bt水稻“克螟稻”花粉对家蚕生长发育的影响。结果发现 ,与正常无花粉处理相比 ,无论是非Bt水稻花粉处理 ,还是Bt水稻花粉处理 ,对初孵家蚕幼虫的致死率无多大影响 ,而对家蚕的体重有较大影响 ,其中三龄期家蚕体重存在极显著差异。还发现Bt水稻花粉处理组家蚕在 3龄时期大小很不一致 ,最轻体重为 18.1mg ,而最重体重为 183 .8mg。这是由于采用人工抖粉桑叶上花粉浓度不均匀造成的。鉴于实际生态条件下桑叶上的花粉浓度可能远远低于试验条件 ,因此 ,在实际稻桑共作环境下 ,Bt水稻“克螟稻”花粉对家蚕生长发育可能不会造成太大的影响。

家蚕滞育性卵盐酸处理的靶物质

酯酶A4 (EA4 )是家蚕卵的滞育生物钟蛋白质。从家蚕C10 8品种产下后 4 8h的滞育性卵和盐酸活化处理卵分离纯化出EA4酶蛋白 ,使用合成的EA4活性多肽抑制因子PIN (氨基酸结构 :SIFMTKQHSQDDIIQHPLDYVEQQIHQQKQKLQKQTLN) ,研究了PIN对EA4酶蛋白的作用机制。滞育性卵的EA4酶蛋白和PIN在 2 5℃混合 2 4h后 ,用矩阵辅助激光解吸离子质谱法 ,检测到了二者的结合体 ,该结合体在盐酸处理后消失 ;盐酸活化处理蚕卵的EA4酶蛋白和合成PIN之间没有出现这种结合体。体外 2 5℃ ,滞育性蚕卵EA4的ATPase特征性活性峰在 6 5h后出现 ,而盐酸活化处理蚕卵的EA4在 1 5h后出现活性峰值。盐酸处理可能通过解除PIN对EA4的抑制作用 ,在短时间内激活EA4酶蛋白 ,从而活化滞育性蚕卵。

Bt转基因水稻米粉对家蚕生长发育及中肠亚显微结构的影响

以 3龄家蚕为供食对象 ,用洒过转苏云金杆菌 (Bacillusthuringiensis,Bt)基因水稻纯合品系KMD2生米粉或熟米粉的桑叶喂养 ,研究Bt抗虫水稻稻米对家蚕生长发育及中肠亚显微结构的影响 ,以明确生米粉与熟米粉之间的差异。结果发现 ,用前者喂养的家蚕体重、熟蚕数、结茧数、全茧量和茧层量均明显低于后者和对照 ,熟蚕整齐度明显迟于后者和对照 ;而后者与对照之间无明显差异。进一步的病理切片电镜分析表明 ,用前者喂养的家蚕 ,其中肠细胞亚显微结构发生了明显的变化 ,杯形细胞和圆筒形细胞的微绒毛明显变短、变粗 ,线粒体和粗面型内质网的数量显著下降 ;而后者与对照之间无显著差异。由此表明 ,经蒸煮后Bt水稻稻米中的杀虫蛋白发生变性 ,失去活性 ,进而丧失致毒能力。

体外盐酸处理与PIN对酯酶A4活性影响的关系

从家蚕Ｃ１０８ 品种产下后２ｄ 的滞育性卵纯化酯酶Ａ４ 及其活性抑制多肽ＰＩＮ，体外调查了盐酸处理与ＰＩＮ 对酯酶Ａ４ 的ＡＴＰａｓｅ 活性影响的关系。结果表明：盐酸处理不仅迅速消除了ＰＩＮ 对酯酶Ａ４ 的ＡＴＰａｓｅ 活性抑制作用；盐酸处理使蚕卵酯酶Ａ４ 的ＡＴＰａｓｅ 活性峰提早出现的时间还反映了蚕卵的滞育发育时间。

大豆粉中家蚕忌避因子的阻食机理及理化性质研究

从大豆粉的乙醇抽提物中分离到６ 种组分，其中１ 种（ 编号为ｅ） 是对家蚕摄食抑制作用最强的成分。该提取物通过刺激下颚瘤状体 Ｓ ＳⅡ中的 Ｒ 细胞兴奋而产生阻食作用，而对 Ｓ ＳⅠ无影响。对该提取物的理化性质测定表明，其具有皂甙的一般性质，初步确定是几种大豆皂甙的混合物。

肠球菌在家蚕消化道中的分布

用ＡＰＩ２０ ＳＴＲＥＰ（Ｖ５０） 系统对从健康家蚕消化道来源的８９ 株肠球菌菌株进行数值分类学研究的结果表明：在分离菌株中分布着Ｅｎｔ．ｃａｓｓｅｌｉｆｌａｖｕｓ、Ｅｎｔ．ｆａｅｃａｌｉｓ、Ｅｎｔ．ａｖｉｕｍ 、Ｅｎｔ．ｄｕｒａｎｓ 和Ｅｎｔ．ｇａｌｌｉｎａｒｕｍ 等菌种，其分布频率分别为３２６ ％ 、２５９％ 、１５７ ％ 、３４ ％ 和２２ ％ 。其余１８ 个菌株未能被该系统所分类。Ｅｎｔ．ｃａｓｓｅｌｉｆｌａｖｕｓ 和Ｅｎｔ．ｆａｅｃａｌｉｓ 是家蚕消化道内的主要肠球菌菌丛。Ｅｎｔ．ｃａｓｓｅｌｉｆｌａｖｕｓ 在５ 龄初和末的分布频率较高，Ｅｎｔ．ｆａｅｃａｌｉｓ 在５ 龄第４ 和第５ 天的分布频率较高。

家蚕滞育生物钟蛋白质Ease A4的纯化及其分子结构分析

ＥａｓｅＡ４是家蚕卵的一种滞育生物钟蛋白质．产下后２ｄ的家蚕Ｃ１０８品种滞育性卵，经过丙酮脱脂、８５℃热处理、硫酸铵沉淀和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２５凝胶过滤层析初步分离，进一步经过Ｓｅｐ－ＰａｋＣ１８脱盐浓缩，ＨＰＬＣ（柱为ＹＭＣ－ＰａｃｋＰｒｏｔｅｉｎ－ＲＰ）分离，通过ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和ＭＡＬＤＩＭＳ方法鉴定，纯化得到ＥａｓｅＡ４蛋白质．从１０ｇ蚕卵最终得到了１１．８μｇＥａｓｅＡ４．ＥａｓｅＡ４由从Ｈｉｓ到Ｔｙｒ的１５５个氨基酸残基构成，蛋白质部分的分子量为１６６０１．其２２位氨基酸残基Ａｓｎ处有一个Ａｓｎ－Ｘ－Ｔｈｒ糖基化场所，并有糖基结合在该部位，糖基的分子量约为７６０．ＥａｓｅＡ４的６１位和１５０位的两个Ｃｙｓ氨基酸残基之间存在二硫键．糖基和二硫键的存在不仅有利于酶蛋白的分离。

家蚕多肽抑制因子对酯酶A4的ATP酶活性影响

从产下后２ｄ的家蚕Ｃ１０８品种滞育性卵精制酯酶Ａ４和其多肽抑制因子ＰＩＮ，体外调查了ＰＩＮ对酯酶Ａ４的ＡＴＰ酶活性影响。酯酶Ａ４和ＰＩＮ５℃混合２５～１３ｄ，除去ＰＩＮ后５℃保护，ＡＴＰ酶活性峰都在１２～１４ｄ后出现；２５℃混合时，除去ＰＩＮ后，ＡＴＰ酶活性峰出现时间为混合时间再加１２～１４ｄ。利用ＭＡＬＤＩＭＳ方法，首次检测到纯化的酯酶Ａ４和合成ＰＩＮ的结合体。