家蚕微粒子病的PCR检测技术研究与应用

家蚕微粒子病检测技术是该病防治中的一项关键性技术,随着PCR技术的发展,使该项技术在家蚕微粒子病的检测中应用成为可能。综述了有关应用PCR技术检测家蚕微粒子病的研究,从模板核酸制备和引物设计等方面分析提高灵敏度和解决特异性问题的途径。提出蚕种生产单位承担母蛾的微粒子病检验,省级检验检疫机构承担蚕种(成品卵)的家蚕微粒子病的监督检验检疫,是PCR技术在蚕种生产质量检验中实用化的重要前提。

农药对家蚕的毒性和安全性评价研究

农药对家蚕的毒性和安全性评价研究是预警蚕区农药使用对养蚕生产存在的潜在危害风险的一项基础性工作。回顾近20多年来该领域的研究进展,重点介绍当前桑园及周围农作物常用农药对家蚕的急性、慢性毒性以及农药残毒期的测定方法,比较参比法、毒性比法和定级法等毒性分级方法的特点和适用范围,针对农药对家毒的毒性和安全性评价中的测定目标全面性、测定方法规范性和评价指标综合性等提出改进和完善意见,并就建立该领域的协作研究网络,制定试验规程与综合评价技术体系,预防家蚕农药中毒的综合减灾措施等提出改进意见和建议。

家蚕微粒子病防控技术研究的发展现状与趋势

家蚕微粒子病是养蚕业的毁灭性病害之一。对家蚕微孢子虫(Nosema bombycis)进入饲养家蚕群体的路径、在家蚕个体内繁殖扩散和在饲养家蚕群体中的扩散规律3个方面的研究进展,以及与此相关的家蚕微粒子病防控技术的发展进行了概述。提出在防止家蚕微孢子虫进入饲养家蚕群体方面,必须根据生产实际并掌握病害流行规律构建因地制宜的防控技术体系;在家蚕个体抗病能力提升方面,家蚕微孢子虫与家蚕的互作机制解明,新型育种技术和微生态技术的应用等非常值得期待;在控制微粒子病在家蚕群体中扩散方面,解明感染个体在蚕座内传播的基本规律,构建新型检疫体系与研发检测技术是迫切需要解决的关键问题。

蚕病检测中免疫学技术的研究与应用

本文介绍了有关应用免疫学技术蚕病进行检测的研究。根据已有研究和养蚕业的特点,认为家蚕微粒子病的检测是一项非常值得研究的技术。家蚕微粒子病检测的技术根本是解决基于实际应用条件下的灵敏度和特异性问题。

基于抗性指数的家蚕对核型多角体病抗性评价研究

为更加有效地评价蚕品种对家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nuclear polyhedrosis virus,BmNPV)病的抗性,采用Reed-Muench法对69个(次)蚕品种的BmNPV多角体的半数致死浓度(LC 50)进行了测定。结果证实,同一蚕品种在相同实验室的不同测定期别或同期试验,以及不同实验室的数据间存在差异。为减少这种蚕品种抗性评价中的困惑,通过不同数量参照蚕品种LC 50值校正待测蚕品种LC 50值的比较,提出以2对常用蚕品种正反交为参照的抗性指数评价方法,提高不同来源LC 50测定数据间的可比性,以期为新品种的育成和新品种的推广提供参考。

一种快速高效制备家蚕微孢子虫基因组DNA和总蛋白的方法

家蚕微孢子虫孢子壁坚厚不易破碎,并对许多化学物质有很强的抵抗性,使用常规的核酸和蛋白抽提方法效果不够理想。研究建立玻璃珠破碎法快速制备家蚕微孢子虫基因组DNA和总蛋白的方法,采用琼脂糖凝胶电泳和SDS-PAGE分析所得DNA的完整性和所得总蛋白的差异性,并对提取蛋白进行双向电泳试验。结果表明:使用玻璃珠破碎法对微孢子虫孢子壁的破碎率可达到90%以上,基因组DNA得率约为7.65 fg/粒,总蛋白得率约为788.3 fg/粒,均显著高于常用的发芽法和液氮冻融研磨法的得率。双向电泳结果显示玻璃珠破碎法能有效提取家蚕微孢子虫总蛋白,经考马斯亮蓝染色可检测到约350个蛋白点,蛋白信息丰富,可进一步用于质谱分析。

基于养蚕环境样本检测的流行病学调查方法

家蚕病害流行规律是蚕病防控的技术基础和依据。根据家蚕病原微生物为归因危险度极高流行因子的特点,设计了分层抽样法和光学显微镜检测方案,对12 059个养蚕环境样本进行病原微生物检测和流行病学的过程性分析。结果表明:病原微生物的检出率在不同蚕区和不同蚕室环境样本间存在较大差异,不同养蚕技术水平农户部分蚕室环境样本间的差异显著(P<0.05);在养蚕前的清洁消毒方面,养蚕技术水平较高的农户与养蚕技术水平较低的农户间并不存在明显差异;在家蚕饲养过程及上蔟后的病源物扩散管理方面,养蚕技术水平较高的农户比养蚕技术水平较低的农户具有更高的管理水准。由此认为:病源物扩散控制是目前家蚕病害防治中需要得到进一步重视的工作,重视家蚕饲养过程中的病害防控技术实施可以减少病害流行。桑树害虫、蚕沙坑、蚕室内地面和蚕室前地面是病源物扩散控制及清洁消毒技术实施的重要靶标或范围。

家蚕微粒子病检验技术综述

家蚕微粒子病检验技术是防控该传染性病害流行的关键技术,该技术的建立和实施在我国家蚕微粒子病流行控制中发挥了重要的作用,如何改进与发展该技术对养蚕业的可持续发展具有重要意义。本文在综述家蚕微粒子病检验技术发展过程及存在主要问题的基础上提出:厘清技术管理体系,明确蚕种质量检验和监管主体与责任,构建良性竞争体系是基础;构建技术性和经济性符合生产实际的检测技术及配套抽样技术是关键;解明家蚕微粒子病蚕座内流行规律,以及科学设置风险评估参数是核心。

不同分子类型家蚕病原性白僵菌的分离及致病性试验

基于家蚕白僵病在部分蚕区季节性流行较为严重的现象,为了解家蚕病原性白僵菌在养蚕生产中是否存在菌种多样性或存在主流菌种,从浙江省淳安县(CA)、桐乡市(TX)、临安市(LA)和桐庐县(TL)蚕区采集的86份白僵病蚕或病蛹样品中分离得到53个菌株;通过核糖r DNA内部转录间隔区(ITS)序列分析和形态学观察确认,有47个分离菌株为球孢白僵菌属,3个为蜡蚧属,3个为拟青霉属;对ITS序列存在差异的7个分离菌株进行家蚕致病力试验,结果显示,不同菌株对家蚕的致病力存在一定差异,家蚕致病力依次为CA-12(球孢白僵菌属,76.67%)>CA-15(球孢白僵菌属,53.33%)>TX-1(蜡蚧属,28.33%)>CA-1(球孢白僵菌属,16.67%)>CA-6(拟青霉属,10.00%)>TX-12(蜡蚧属,0)=TX-13(0,蜡蚧属),球孢白僵菌株对家蚕的致病力最强,病势也最急,其他菌株对家蚕的致病力有高有低;推测家蚕白僵病致病性菌种呈多样性,试验结果为进一步研究家蚕白僵病的防控提供了参考依据。

破碎法提取家蚕微孢子虫孢子核酸的PCR检测灵敏度试验

蚕微粒子病检测技术是该病防治中的一项重要技术,本文在通过破碎法提高模板核酸获取量的基础上,对纯化家蚕微粒子虫孢子的PCR检测灵敏度进行了测试。提取核酸-模板稀释测试12对引物的灵敏度中有4对引物达到0.05粒(102粒/mL)、4对引物5粒(104粒/mL)、1对引物50粒(105粒/mL)、2对引物500粒(106粒/mL)和1对引物5000粒(107粒/mL)。两对灵敏度较高的引物(NbZS004F/NbZS004R和NbZS007F/NbZS007R)灵敏度临界值(0.05粒和0.005粒)的PCR重复检测率均为90%。纯化家蚕微粒子虫孢子稀释后提取核酸再进行PCR检测试验中,NbZS004F/NbZS004R和NbZS007F/NbZS007R的灵敏度分别为:5粒(104粒/mL)和0.5粒(103粒/mL)。

省力化养蚕技术对养蚕规模化的影响

本文以马村规模化养蚕发展为例,分析了省力化养蚕技术在提高生产效率、降低成本、改善饲育环境等方面对养蚕规模化的影响,指出了省力化养蚕技术推广存在的问题并提出建议,以期通过完善省力化养蚕技术体系促进养蚕的规模化发展。

养蚕中毒的原因分析和防范

养蚕的安全保障体系是养蚕业稳定发展的重要基础。本文通过对不同类型养蚕中毒的原因分析,提出了相应的防范措施。

家蚕对血液型脓病的抗性与防治策略

针对近年来家蚕血液型脓病发生和流行较为严重的现状,分析和讨论了家蚕对血液型脓病的抗性特点和规律。提出抗血液型脓病家蚕品种的培育是一项长期任务和目标;家蚕血液型脓病的防治重点是重视养蚕环境的洁净、严格执行家蚕饲养标准、规范消毒用药以及杜绝化学污染物或农药的危害。

蚕桑产业的现代化与可持续发展

蚕桑产业具有悠久的历史,世界范围至今尚未出现现代化的成功案例。在我国社会经济快速发展和农业现代化日趋加快的背景下,蚕桑产业必须融入社会、政治、经济、科技和人文的发展大潮,加快现代化体系建设,激活产业科技创新潜力,多元综合发展新兴产品,协同创新产业-商业模式,促进蚕桑产业现代化进程,实现可持续发展。

蚕用兽药的现状与应用

本文综述了我国目前蚕用兽药的种类和特点,认为消毒剂是养蚕必备的蚕用兽药,抗菌剂是辅助用蚕用兽药。同时,介绍了鉴别蚕用兽药的途径。

家蚕传染病的流行与控制

本文根据养蚕与家蚕传染病的特点,分析了影响家蚕传染病流行的宏观因素,提出了相应的防控措施及思考。

养蚕业分布与影响因素

养蚕业分布的变化是产业经济规律作用下的结果。本文在分析养蚕业分布的历史变化和我国现有分布的基础上,认为市场需求、养蚕业的经济地位、生态和社会环境,以及科技和文化等因素都会影响养蚕业的分布,其中市场因素是最为基本的因素,经济地位是最为核心的因素。

2011～2012年我国蜂胶市场的回顾与展望

2011年我国蜂胶市场分析2011年我国的蜂胶市场可谓喜忧参半。喜的是:蜂胶打假取得了一定的阶段性成果,政府主管部门的监管力度明显加强,假冒伪劣蜂胶产品在一定程度上得到遏制;蜂胶的研究开发得到加强,一些瓶颈技术取得突破,为蜂胶行业的发展提供了技术支撑。

以水杨苷为参照的蜂胶与杨树胶鉴别技术

1研究背景蜂胶是蜜蜂采集植物叶芽或树皮裂缝分泌的树脂并混入上颚腺分泌物和蜂蜡而成的芳香固体物。由于蜂胶具有预防创伤感染、调节免疫、抗氧化、抗肿瘤、降血脂、降血糖以及抗病原微生物等多种生物学作用,因而已成为近十年来国内外蜂产品研究和开发的热点。

“灭蚕蝇”临床效果的测定

蝇蛆病是养蚕业的重要病害,应用"灭蚕蝇"是目前生产中最为常用的防治方法。本试验从市场抽取"灭蚕蝇"样本,对其化学有效成分进行了测定,并进行了临床药效的测定。结果表明:目前市场上的"灭蚕蝇"存在有效成分含量严重不足的现象;推荐浓度的药效指数可达50.83;推荐减半浓度剂量将导致临床效果的极显著下降;推荐加倍浓度剂量不能显著增加临床效果,但会导致家蚕部分经济性状的下降;有效成分不足的"灭蚕蝇"虽然可以通过降低稀释倍数达到防治效果,但同时造成较为明显的副作用。基于有机磷农药对环境的不良作用和养蚕作业安全的需要,研究和开发取代"灭蚕蝇"的防治方法将是一项重要的工作。