家蚕微粒子病的PCR检测技术研究与应用

家蚕微粒子病检测技术是该病防治中的一项关键性技术,随着PCR技术的发展,使该项技术在家蚕微粒子病的检测中应用成为可能。综述了有关应用PCR技术检测家蚕微粒子病的研究,从模板核酸制备和引物设计等方面分析提高灵敏度和解决特异性问题的途径。提出蚕种生产单位承担母蛾的微粒子病检验,省级检验检疫机构承担蚕种(成品卵)的家蚕微粒子病的监督检验检疫,是PCR技术在蚕种生产质量检验中实用化的重要前提。

2种检测粮食中呕吐毒素的免疫技术比较

对检测粮食中呕吐毒素的2种免疫技术,免疫亲合柱(IAC)-HPLC)法和免疫色谱法(速测卡)进行了比较,结果表明I:AC-HPLC法的最低检测限可达到0.1 mg/kg,相对标准偏差为8.76%～9.82%,回收率87.3%～93.6%,方法灵敏、准确;免疫色谱法的最低检测限为0.5 mg/kg,操作快速、简便,适合初筛。

宁波马尾松中松材线虫形态变异研究

从采自宁波北仑的马尾松中分离到一种伞滑刃属线虫,经形态学观察、测量,以及ITS-RFLP图谱比对,鉴定为松材线虫。从原木中分离到的线虫雌虫未见尾端完全呈钝圆的个体,多数都有尾尖突,长约0.5～2.9μm,平均长度约为1.7μm。经实验室灰葡萄孢培养后,雌虫尾端均呈钝圆,其形态特征与相关描述一致。这表明寄主和环境因素对线虫的形态特征有较大影响,应在一致的培养环境下进行形态观察和描述,ITS-RFLP方法是伞滑刃属线虫鉴定有效的辅助手段。

三种百合线状病毒的外壳蛋白抗血清制备

设计3对表达引物分别扩增侵染了百合无症病毒(lily symptomless virus,LSV),百合斑驳病毒(lily mottle virus,LMoV)和百合X病毒(lily virus X,LVX)的外壳蛋白基因,并在大肠杆菌BL21(DE3)plysS中原核表达。目的蛋白切胶后免疫小鼠制备多克隆抗体。Western blot检测表明3种病毒抗血清分别与目的蛋白起特异性反应,但与阴性对照无反应。3种病毒间无交叉血清学反应。对田间栽种的百合样品间接ELISA检测表明,LMoV和LSV均有发生,但没有检测到LVX。

宁波马尾松中莱奴尔夫伞滑刃线虫鉴定

在宁波地区采集的7份马尾松病木中数次截获同一种伞滑刃线虫,经形态学观察、测量,鉴定该线虫为莱奴尔夫伞滑刃线虫,进—步描述了该线虫的形态特征,并与其它3种近似种进行了形态比较。

泽泻、葛根等6种中药提取物的急性毒性效应观察

目的:探讨泽泻、葛根等6种中药提取物的急性经口毒性。方法:根据霍恩氏法,共分21.50g/kgBW、10.0g/kg BW、4.64g/kg BW和2.15g/kg BW4个剂量组和1个空白对照组,采用经口染毒途径进行试验。结果:在给予泽泻、葛根等6种中药提取物染毒后,动物陆续出现了不同程度的腹泻症状且以最高剂量组最为严重。除清半夏提取物外,各中药提取物均有数量不等的动物死亡,且以雌性动物死亡为主。姜半夏高剂量组的14天增重与低剂量组和对照组比较,有显著性差异(P<0.05)。结论:泽泻、葛根等6种中药提取物的半数致死量(LD50)均大于21.50g/kg BW,属于无毒级。

鸭源禽副黏病毒1型YH_(99) V株的毒力测定和致病特性分析

从浙江省某麻鸭养殖基地的产蛋下降病鸭生殖器官内分离到1株致产蛋锐减、不致鸭死亡的病毒,经鉴定该病毒属于禽副黏病毒1型,命名为YH99V株。该毒株经动物回归试验能成功诱导鸭发病并回收同样的病毒,通过SPF鸡胚盲传至第9代时致病性突然增强,第11代出现血凝特性,第15代血凝价趋于稳定,鸡胚半数致死量EF15ELD50为10-4.8。MDT、ICPI和IVPI毒力学指标测定以及毒力相关基因序列结构分析表明,分离株的MDT为112h,ICPI为0.225,IVPI为0.41;YH99 V株F0蛋白裂解位点(112～117位)区域氨基酸推导序列为Gly-Arg-Gln-Gly-Arg-Leu,与弱毒株相一致。证明该毒株为新城疫弱毒株。

2010-2012年长兴县禽流感H5N1(re-5、re-4株)免疫抗体检测结果分析

高致病性禽流感是危害养禽业的主要传染病之一，被世界动物卫生组织列为A类动物传染病，我国列为一类动物疫病。2010年初，