病理组织大切片技术在消化系统肿瘤中应用的研究进展

消化系统肿瘤是人体常见的疾病之一,随着工业化进程和人们生活水平的提高及饮食结构的改变,其整体发病率呈年轻化且有上升趋势,但其病变特点、发生和发展机制尚不完全清楚。病理诊断是肿瘤诊断的金标准,HE切片是病理诊断的重要检测指标。术后病理对疾病的精确诊断和临床治疗起关键作用。病理组织大切片可以正确记录肿瘤大小、病变分布、疾病范围和手术切缘等情况,有助于更全面地了解肿瘤的复杂形态并作出综合性评估,也是沟通影像学和病理学相关性的最佳工具。该文旨在对病理组织大切片技术在消化系统肿瘤中应用的研究进展作一综述。

腹腔异位脾的临床及病理特征分析:13例报告

目的总结分析腹腔异位脾的临床表现、疾病诊断及病理特点。方法回顾性分析海军军医大学附属长海医院2013年1月-2018年12月确诊为腹腔异位脾患者的临床、病理特征以及随访资料。结果共确诊腹腔异位脾13例,其中因体检发现7例(53.8%)。13例中,术前诊断为异位脾的仅1例,其余术前诊断主要考虑为肿物邻近脏器肿瘤。13例腹腔异位脾中位于胰腺的共6例,均位于胰腺尾部。所有手术标本大体病理均表现为边界清楚的结节状肿物,镜下均可见脾实质结构。术后病理检查2例未见脾小梁及明显中央小动脉,其余11例均可见多少不一的脾小梁、中央小动脉及次级滤泡结构。13例随访结果中仅1例因胃癌进展去世,1例失访,其余11例均存活。结论腹腔异位脾缺乏特异性临床表现,须与腹腔肿瘤行鉴别诊断。脾组织植入与副脾可能具有不同病理特征,副脾与正常脾脏结构类似,脾组织植入可能缺乏典型脾脏白髓结构。

胃肝样腺癌17例临床病理分析

目的探讨胃肝样腺癌的临床病理学特征、治疗及预后。方法回顾性分析17例胃肝样腺癌患者的临床病理学特征、免疫表型、治疗及预后等,并复习相关文献。结果患者男性15例,女性2例,平均年龄63.59岁(47~76岁)。10例伴血清AFP升高。镜下均由多角形嗜酸性肝细胞样肿瘤细胞组成,至少表达一项肝样腺癌免疫组化标志物(SALL4、Glypican-3、AFP、Hep Par-1)。9例发生淋巴结转移,9例发生肝转移,14例检出脉管癌栓。随访1~82个月,5年无进展生存率为49.5%,5年总生存率为42.3%。淋巴结转移以及胃肿瘤中无其他组织学类型腺癌是总生存期的潜在风险因素。结论肝样腺癌是胃腺癌的特殊亚型,生物学行为不良,预后差。术前应常规筛查AFP以协助诊断,确诊需结合组织学形态和免疫表型。根治性手术是获得良好预后的有效方式。

“和谐使命-2017”医疗任务中病理工作回顾分析

回顾性分析“和谐使命-2017”海外医疗援助中医院船病理医疗任务的完成情况,分析工作存在的问题及针对医院船任务特点改进病理工作的成效。在医疗服务期间,病理标本送检率为58.86%;病理诊断新增耳鼻喉科标本和小标本检查及诊断;改进冰冻制片和染色过程,有效地缩短病理操作时间;为提升医院船上病理诊断质量,建立并验证海陆远程会诊及后方基地三级病理检诊的工作成效;并对改善医院船病理工作室环境提出整改措施。

结构化肿瘤病理诊断报告书应用体会及优化建议

结构化肿瘤病理诊断报告书顺应新时期医学模式的要求,具有格式统一、要素完整、便于书写、提高效率、方便检索和统计分析等优点,也为今后无纸化操作和更大范围的选择性信息传递提供了便利。同时也存在重规范而缺个性、易检索而难阅读、易复制而存隐患等问题。随着软硬件技术和全流程设计的不断改进和完善,结构化病理诊断报告书的数字化和临床应用会更加方便高效。

基于cBioPortal数据库的TP53突变型和野生型结直肠腺癌的临床病理和基因突变谱差异性研究

目的研究抑癌基因TP53突变型和野生型结直肠腺癌的临床病理和基因突变谱差异。方法从cBioPortal数据库下载TCGA结直肠腺癌数据资料(GDAC Firehose),根据抑癌基因TP53突变状态将其分为突变型和野生型2种亚型。统计分析2种亚型的临床病理特征差异和基因突变谱差异,并分析差异基因及差异基因蛋白的相互作用。结果220例结直肠腺癌中有120例肿瘤存在TP53基因突变,突变率为54.5%。临床病理特征分析结果显示,TP53基因突变多发于左半结肠和直肠,基因组变异片段>5%的例数显著增多,而高突变负荷的肿瘤比例显著减少(P<0.05)。LRP1B、FAT4、FBXW7、PIK3CA等25个基因在TP53野生型结直肠癌中的突变率明显增高,String分析表明基因EP300、KMT2A、CREBBP、NOTCH之间存在紧密连接,基因BRAF、PIK3CA、PDGFRA、VAV1之间存在紧密连接。基因本体(GO)功能注释和京都基因和基因组百科全书(KEGG)通路富集分析发现,差异基因主要与DNA结合、转录调控等分子功能相关,并主要富集在PDGFR、EGFR、VEGFR、PI3K等信号通路。结论除发生部位外,TP53突变型和野生型结直肠腺癌存在相似的临床病理形态学特征。但TP53突变型结直肠癌更容易发生染色体不稳定性;而TP53野生型结直肠癌突变负荷增高,可通过产生新的基因突变,激活非p53信号通路促进肿瘤生长。

维多利亚蓝弹性纤维染色常见问题分析与质量控制

特殊染色技术在日常病理诊断中具有重要意义[1-2],弹性纤维染色对评估疾病组织中弹性纤维变化、恶性肿瘤的血管侵犯及某些肿瘤的鉴别诊断有重要价值[3-4]。经典的Verhoeff弹性纤维染色法只能显示粗大的弹性纤维[5];维多利亚蓝弹性纤维染色步骤相对较少,可显示细小弹性纤维,颜色清新;与Van-Gieson复染组合,可对结缔组织成分做出良好的评估。为了普及和提高该染色技术,上海市临床病理专科委员会联合上海市临床病理质量控制中心,对上海市50家医院病理科进行了维多利亚蓝弹性纤维染色技术室间质量控制测评。本文对测评中出现的染色缺陷的关键问题进行分析,并探讨其主要原因及解决方案,现报道如下。

十二指肠型滤泡性淋巴瘤22例回顾性分析

目的探讨十二指肠型滤泡性淋巴瘤(duodenal-type follicular lymphoma,FL-D)的临床病理学特征。方法回顾性分析22例FL-D的临床特点、病理学特征、内镜表现和治疗,并进行随访。结果22例FL-D中男性12例,女性10例,男女比为1.2∶1,中位年龄53岁(年龄29~82岁)。起病时表现为轻微的消化道症状,内镜下表现为小息肉或黏膜粗糙,镜下为黏膜腺体减少,大量中心细胞及少量中心母细胞增生,中心母细胞不超过15个/HPF,部分区域呈滤泡样结构,部分区域弥漫分布。肿瘤细胞弥漫表达CD20、Pax-5及BCL-2,CD21表现为生发中心中央部分区域缺失,边缘出现浓集现象。15例未治疗,4例病变自愈,11例病变无变化。3例仅行利妥昔单抗治疗,病变均消失。4例行化疗和利妥昔单抗治疗,病变均消失。结论FL-D属于惰性淋巴瘤,即使未经治疗,也很少快速发展或向高级别转化,部分患者可自愈,最合适的方法为随访观察。

胃癌中FOXM1调控相关分子的表达及其临床意义

目的探寻FOXM1调控的候选关键基因及其在胃癌中的表达,并分析其临床价值。方法在前期构建的高表达FOXM1和敲降FOXM1的胃癌细胞株中检测TWIST、ANXA1、SNAT1和S100A6的mRNA表达,挑选改变显著的分子,应用组织芯片和免疫组化法研究其在135例胃癌和癌旁组织中的表达,用Kaplan⁃Meier法和Cox regression模型分析其预后的价值。结果FOXM1的敲减和过表达效率为对照组的5倍左右。敲降FOXM1下调TWIST、ANXA1和S100A6等的表达,反之亦然。FOXM1、TWIST、ANXA1和S100A6在胃癌组织中的阳性表达率分别为56.3%、49.6%、58.5%和63.7%,其阳性表达与胃癌的进展、转移和不良预后密切相关。结论FOXM1通路在胃癌中发挥了重要作用,阻断该通路有望为胃癌的治疗带来新的途径。

非小细胞肺癌组织Ki-67与PD-L1表达的相关性及其对患者预后的影响

目的:探讨NSCLC患者癌组织中Ki-67与PD-L1表达的相关性及两者对患者预后的影响。方法:选取符合纳入标准的2012年1月至2018年8月在海军军医大学附属长海医院,手术确诊为NSCLC并进行免疫组化PD-L1和Ki-67检测的患者401例,收集其临床病理资料,定期生存随访,应用统计学方法分析Ki-67与PD-L1表达的相关性及两者对患者术后DFS和化疗后PFS的影响。结果:NSCLC组织中PD-L1和Ki-67表达阳性率分别为37.9%(152/401)和96.3%(386/401),单因素分析显示Ki-67为PDL1表达相关的影响因素(OR=0.33,95%CI=0.28～0.39,P<0.0001),曲线拟合分析显示Ki-67与PD-L1表达显著正相关,阈值效应分析、分段多因素Logistic和ROC曲线分析表明14%是Ki-67较适宜与PD-L1联用的阈值。Kaplan-Meier分析显示,术后DFS,Ki-67高表达组显著短于Ki-67低表达组[(21.88±11.25) vs (41.22±16.25)个月,P<0.0001],PD-L1阳性组显著短于PD-L1阴性组[(24.75±14.59) vs (38.27±16.75)个月,P<0.0001],Ki-67高表达/PD-L1阳性组与其余3组相比术后DFS最短[(20.57±11.33) vs(24.11±10.79) vs (36.00±16.79) vs (42.91±15.77)个月,P<0.0001];化疗PFS,Ki-67高表达组显著长于Ki-67低表达组[(7.70±3.01) vs(5.80±2.99)个月,P=0.016],PD-L1阳性组与阴性组相比差异无统计学意义[(7.04±3.21) vs (6.33±3.06)个月,P=0.22],Ki-67与PDL1联合测评,Ki-67高表达两组的PFS显著长于Ki-67低表达两组[(7.74±3.25) vs (7.43±2.38) vs(4.91±1.97) vs (6.02±3.19)个月,P=0.041]。结论:NSCLC组织中Ki-67与PD-L1表达呈正相关,Ki-67 14%是适宜与PD-L1联用的阈值,Ki-67和PD-L1均为患者预后不良的预测因子,两者联合对预后不良的预测有"叠加效应",同时Ki-67高表达患者对化疗的敏感性较好。

乳腺癌中雄激素受体的作用及其研究进展

乳腺癌是一类异质性肿瘤,其不同类型对治疗方案的选择和反应不尽相同。三阴型乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)是一组ER、PR、HER-2均阴性的乳腺癌亚型,TNBC因缺乏受体的表达不能采用靶向治疗,而且常规的化疗效果也不佳,因此相较于其它类型的乳腺癌,TNBC的临床预后最差。雄激素受体(androgen receptor,AR)在TNBC中有一定的表达,虽然其表达与TNBC预后关系存在争议,但已有大量的体、内外试验证明AR抑制剂在阻断TNBC肿瘤细胞增殖时显示的有效性,尤其是在高表达AR的腺腔雄激素受体亚型中,这些研究都提示AR可能作为TNBC潜在的治疗靶位。

6种不同染色方法在检测肺组织中新型隐球菌的应用比较

目的探讨6种检测肺组织中新型隐球菌(cryptococcus neoformans,CN)不同的染色方法及其意义。方法采用常规HE染色法、PAS染色法、六胺银染色法、阿尔辛蓝染色法、亚甲蓝染色法、改良Hale胶体铁组合染色法,对20例病理诊断为肺隐球菌病的石蜡样本进行染色。结果 6种方法均可显示肺组织中有CN,其中在HE染色中CN孢子着色不佳,轮廓不清晰,较难辨认; PAS法检测的CN细胞壁呈紫红色,胞质呈浅红色;六胺银法检测的CN呈黑褐色,菌壁四周深黑,菌体中间空白;阿尔辛蓝法检测的CN荚膜呈蓝色,细胞核呈红色;亚甲蓝法检测的CN呈蓝色,菌壁四周浅蓝色,菌体中间透亮,对比和背景较差;改良Hale胶体铁组合染色法检测的CN在肺泡腔、肺间质的结缔组织中成堆或散在分布,呈深蓝色,圆形或卵圆形,轮廓清晰,单核细胞及多核巨细胞中亦可见较多吞噬的CN,细胞核呈红褐色,胶原纤维呈紫红色,背景淡黄色,镜下极易辨认。结论改良Hale胶体铁组合染色法是检测CN效果最佳的染色方法。

富血小板纤维蛋白超微结构观察及意义

目的探讨富血小板纤维蛋白(platelet rich fibrin,PRF)形态学超微结构及意义。方法选择10例健康志愿者,抽取静脉血制备PRF,对PRF分别行光学显微镜、扫描电子显微镜(scanning electron microscope,SEM)和透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM)观察。结果 PRF为淡黄色纤维蛋白凝胶,H-E染色见胶原纤维为染色均一的淡红色网状结构,在近细胞端纤维排列较致密,含大量血小板。吉姆萨染色见淡蓝色的胶原纤维为网状结构,近细胞端见染为蓝色的白细胞。SEM发现胶原纤维排列成疏松多孔网状支架结构,含大量静止或伸出伪足的血小板及白细胞。TEM发现血小板处于静止或激活状态,α-颗粒释放于细胞和纤维之间,在细胞之间见高密度区为血小板释放的颗粒。结论 PRF胶原纤维的网状立体结构和富含血小板激活释放生长因子,对生物学作用发挥有重要意义。

胰腺肿瘤大切片技术

胰腺癌是一种侵袭性强、恶性程度高、转移早、预后差且病死率高的恶性肿瘤,由于其起病隐匿且症状不典型,患者确诊时多已处于晚期阶段[1]。因此,胰腺肿瘤的精确诊断和全面评估对于临床治疗至关重要。病理大切片技术在胰腺肿瘤中的应用罕有报道,不仅因为掌握这项技术的单位较少,还因为胰腺肿瘤本身手术难度系数大、毗邻结构复杂且胰周脂肪组织较多导致制片困难等。传统胰腺手术切除标本因受包埋盒容积的限制,取材块数多且切片小,不但破坏了肿瘤的完整性、毗邻关系、切缘情况等,还给后续病理技师制片和病理医师阅片带来繁重的工作。本实验中胰腺肿瘤大切片能够最大程度地保留标本组织结构的完整性,为病理医师更准确和全面地观察肿瘤全貌并进行综合性评估提供便利,也为临床治疗提供参考,现报道如下。

硫酸-甲苯胺蓝-丽春红苦味酸染色法在显示组织肥大细胞中的应用

肥大细胞含有丰富的酶系和多种生物活性物质,这些物质作为机体重要的细胞成分,广泛参与机体的免疫调节、过敏反应、肿瘤发生发展等,由此可见肥大细胞在机体病理、生理等过程中起至关重要的作用。常规HE染色不能直观地辨别肥大细胞,最常用的显示肥大细胞的特殊染色方法为甲苯胺蓝染色,但其相关试剂配制的方法有多种。为对比清晰地显示人体组织中的肥大细胞,作者选用硫酸-甲苯胺蓝-丽春红苦味酸染色法进行组合染色,效果佳,现介绍如下。

AR和SKP2在三阴性乳腺癌中的表达及临床意义

目的分析雄激素受体(androgen receptor,AR)、S期激酶相关蛋白2(S-phase kinase-associated protein2,SKP2)在三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)中的表达及它们与临床病理特征的关系,并对AR、SKP2在TNBC中的表达进行相关性分析。方法采用免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)Envision法检测96例TNBC和35例乳腺腺病/纤维腺瘤中AR、SKP2的表达,采用Westernblot法和RT-PCR法分别检测20例TNBC和5例癌旁乳腺组织中AR、SKP2的表达,分析它们与各临床病理特征的关系。结果IHC结果显示TNBC中AR的阳性表达率较乳腺良性病变低(P<0.05),SKP2在TNBC中的阳性表达率较乳腺良性病变显著升高(P<0.05);AR、SKP2在TNBC中的阳性率分别为18.8%、43.8%,AR与淋巴结转移状态显著相关(P<0.05),无淋巴结转移的肿瘤组AR的阳性表达率较高,AR与年龄、肿瘤直径、组织学级别、神经/脉管受累情况无相关性(P>0.05),SKP2与组织学级别、神经/脉管受累情况显著相关(P<0.05),组织学级别较高、神经/脉管受累的肿瘤组SKP2的阳性表达率较高,SKP2与年龄、肿瘤直径、淋巴结转移状态无相关性(P>0.05)。AR、SKP2在TNBC中表达显著相关(P<0.05)。RT-PCR结果显示在20例TNBC中AR、SKP2的mRNA高水平表达的组织均为8例,其中AR、SKP2共同高水平表达的组织有3例;5例癌旁乳腺组织有3例AR高水平表达,SKP2均低水平表达。同时Westernblot法检测显示相似的结果。结论AR在TNBC中显示较好的预后特征,SKP2在TNBC中显示较差的预后特征,提示它们在TNBC中是否能作为潜在的治疗靶点具有进一步的研究意义。

高锰酸钾甲苯胺蓝染色法对杯状细胞、肥大细胞、浆细胞、神经纤维的染色效果观察

肠道不仅是机体消化吸收营养物质、产生相关激素的重要场所,还是机体发挥免疫功能的关键部位。这些功能的发挥依赖于很多特定的细胞、细胞特定的活性、细胞与细胞之间的相互作用等。研究发现杯状细胞、肥大细胞、浆细胞和神经纤维等形态结构和成分的变化,与上述功能的发挥密切相关。实际工作中单独显示上述组织的染色方法较多,然而用一种特殊染色方法同时显现上述组织却罕有报道。本科室经反复摸索,探索出高锰酸钾-草酸-甲苯胺蓝-丽春红苦味酸组合染色法可以较好地同时显示上述组织结构,现报道如下。

直肠孤立性错构瘤性息肉2例并文献复习

目的探讨直肠孤立性错构瘤性息肉(solitary hamartomatous polyp,SHP)的临床病理学特征、诊断与鉴别诊断。方法对2例直肠SHP行HE及免疫组化EnVision两步法染色,并复习相关文献。结果2例患者临床均表现为排便异常,息肉均位于直肠,大小分别为环肠腔一周和占肠腔1/3,质地较软。光镜显示腺上皮及平滑肌组织增生,腺上皮轻~中度异型,腺体间夹杂平滑肌束,腺上皮和平滑肌排列较紊乱。免疫表型:SMA、Calponin、desmin标记平滑肌阳性,平滑肌在腺体之间排列紊乱。结论直肠SHP属于罕见的胃肠道息肉,依靠病理学检查可确诊,内镜下易误诊为恶性病变。

乳腺纤维上皮性肿瘤诊断上的困惑及其对策

临床病理实践中，常见类型的乳腺纤维腺瘤诊断通常简单明了。但在多数情况下，准确诊断乳腺叶状肿瘤（phyllodes tumors,PT）可能具有一定困惑，最常见的困惑主要是细胞性纤维腺瘤和PT的鉴别诊断以及PT的正确分级。这种诊断上的困惑很大程度上归结于组织学特征的重叠和评估组织学参数的主观性以及缺乏明确的客观指标等。此外，由于需要评估和整合多个参数，其相对加权的重要性在没有明确标准的情况下只能由病理医师主观上定夺。即使是恶性PT，对于粗针穿刺获得的标本如何与化生性癌或肉瘤等进行鉴别也同样困难［1］。

胰腺导管腺癌大切片中CD8的表达及预后分析

目的探讨胰腺导管腺癌(pancreatic ductal adenocarcinoma,PDAC)大切片中T淋巴细胞相关抗原CD8的表达与临床病理特征及预后的关系。方法收集57对术前未行新辅助治疗并经外科手术切除的PDAC石蜡样本大、小切片,采用免疫组化EnVision法检测CD8在大、小切片组的表达,分析其表达与PDAC临床病理特征和预后的关系。结果CD8在PDAC大、小切片组中均有表达,大切片组中CD8的表达显著高于小切片组(P<0.05)。大切片组CD8高表达与患者性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤直径、肿瘤分化程度、pTNM分期、是否有胰周淋巴结转移、总淋巴结转移数目、神经侵犯、脉管癌栓均无明显相关性(P>0.05),小切片组CD8高表达与肿瘤分化程度相关(P=0.036)。Cox多因素分析显示,影响PDAC预后的独立因素有4个:年龄(P=0.002)、肿瘤分化程度(P=0.012)、总淋巴结转移数(P=0.003)、胰腺癌大切片中CD8表达(P<0.001)。结论PDAC大切片中CD8高表达更能提示患者预后良好,CD8有望成为胰腺癌治疗的潜在靶标。