创伤性骨关节炎患者血清SOST、SFRP5水平变化及其对预后的预测价值

目的探讨创伤性骨关节炎(PTOA)患者血清骨硬化蛋白(SOST)、分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)水平变化及其对预后的预测价值。方法选取2020年1月至2022年1月该院收治的84例PTOA患者作为疾病组,另选取同期在该院体检的健康者84例作为健康组。采用酶联免疫吸附试验检测疾病组和健康组血清SOST、SFRP5水平。对疾病组随访1年并采用Lysholm膝关节功能评分评估PTOA患者预后情况。采用Spearman相关性分析法分析PTOA患者血清SOST、SFRP5水平与Lysholm膝关节功能评分的相关性;采用多因素Logistic回归分析PTOA患者预后影响因素;并采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清SOST、SFRP5水平对PTOA患者预后不良的预测价值。结果与健康组比较,疾病组血清SOST、SFRP5水平均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关性分析结果表明,疾病组血清SOST、SFRP5水平均与Lysholm膝关节功能评分呈正相关。多因素Logistic回归分析结果显示,体重指数>25 kg/m^(2)、入院时凯尔格伦-劳伦斯分级为Ⅲ/Ⅳ级、软骨Outerbridge分级为Ⅲ/Ⅳ级均为PTOA患者预后不良的独立危险因素(P<0.05);术后长期锻炼、SOST、SFRP5水平为保护因素(P<0.05)。ROC曲线分析表明,血清SOST、SFRP5水平联合预测PTOA患者预后不良的ROC曲线下面积(AUC)均高于SOST、SFRP5水平单独预测PTOA患者预后不良的AUC(Z=2.316,P=0.021;Z=2.356,P=0.019)。结论PTOA患者血清SOST、SFRP5水平较健康者降低,二者均与PTOA患者的不良预后相关,对患者预后具有一定的预测效能。

粉防己碱减轻IL-1β诱导的体外人关节软骨细胞损伤

目的 粉防己碱(Tet)对白细胞介素1β(IL-1β)诱导原代人关节软骨细胞损伤的影响。方法 将人关节软骨细胞分为对照组、IL-1β组、低氧诱导因子-1α(HIF-1α)抑制剂[二甲氧基雌二醇(2-ME2)]组、Tet低、中、高浓度组,每组设置6个重复。MTT法检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡;ELISA检测细胞中炎性相关因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、基质金属蛋白酶3(MMP-3)、诱导性一氧化氮合酶(iNOS)、环氧合酶-2(COX-2)的水平以及抗氧化因子超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)的活性;Western blot检测细胞中HIF-1α、VEGF蛋白的表达。结果 与对照组相比,IL-1β组细胞的凋亡率、TNF-α、MMP-3、iNOS、COX-2的水平以及HIF-1α、VEGF蛋白表达均升高,细胞存活率、SOD和GPx活性均降低,差异有统计学意义(P<0.05);与IL-1β组相比,2-ME2组和Tet低、中、高浓度组细胞的凋亡率、TNF-α、MMP-3、iNOS、COX-2的水平以及HIF-1α、VEGF蛋白表达均降低,细胞存活率、SOD和GPx活性均升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 粉防己碱减轻IL-1β诱导的人关节软骨细胞损伤。

3D打印数字规划在髋关节翻修术中的临床实践

目的探讨3D打印数字规划在髋关节翻修中的临床实际应用效果。方法选取2020年1月至2022年8月海南医学院第一附属医院关节外科收治的7例髋关节翻修患者,男2例,女5例;年龄49~71岁,平均(63.71±8.30)岁。术前通过3D打印技术构建模型、完成重建及实施术前规划。记录术中出血量,采用髋关节Harris功能评分及疼痛视觉模拟评分(visual analogue scale,VAS)评价患髋关节功能。结果7例患者均随访12个月。术后3个月、6个月、12个月Harris评分均较术前升高,差异有统计学意义(P<0.01)。术后3个月、6个月、12个月VAS评分均低于术前,差异有统计学意义(P<0.01)。术后6个月患者疼痛已基本消失,术后12个月患者疼痛已完全消失。随访期间所有患者双下肢均等长,未见假体关节感染、脱位、假体周围骨折等并发症。结论在面对翻修术中大型髋臼骨缺损时,利用3D打印技术可充分了解骨缺损情况,提高手术的可视化和精确性,为术者提供可靠的术前指导。本研究中使用3D打印数字规划进行髋关节翻修的患者,髋关节功能得到明显改善,具有良好的早期疗效及安全性。

老年全膝关节置换术后康复训练依从性现状及其影响因素

目的调查老年全膝关节置换术(TKA)患者术后康复依从性现状及其相关影响因素。方法将2020年1月至2022年1月海南医学院第一附属医院收治的150例行TKA治疗的老年患者纳为研究对象,调查其出院后随访6个月内家庭康复训练依从性,并分析居家康复训练依从性对患者膝关节功能的影响。根据居家康复训练依从性量表得分,将患者分为高、中、低三个等级,并将高、中等级得分者纳为依从性良好组,低等级得分者纳为依从性不佳组。采用二元logistic回归模型分析影响老年TKA患者居家康复训练依从性的相关因素。采用SPSS 20.0软件进行数据分析。根据数据类型,组间比较分别采用t检验、单因素方差分析及χ^(2)检验。结果共回收有效问卷133份,有效问卷回收率为88.67%。74例(55.64%)进行了下肢关节活动范围训练,51例(38.35%)进行了下肢肌肉力量训练,19例(14.29%)患者未进行家庭康复训练;11例(8.27%)患者未坚持训练1个月,67例(50.38%)患者坚持家庭康复训练1个月以上,26例(19.55%)患者坚持训练3个月以上,仅10例(7.52%)患者坚持训练6个月。高、中、低等级患者6个月后HSS量表得分均较出院时升高(P<0.05)。6个月后,不同依从性等级患者美国特种外科医院膝关节(HSS)得分比较,差异均有统计学意义(P<0.05);其中依从性优等者HSS得分高于中等者及差等者,依从性中等者HSS得分进一步高于差等者,差异均有统计学意义(P<0.05)。行二元logistic回归分析观察到,婚姻状况(OR=1.738,95%CI 1.224~2.469)、康复训练重要性认同感(OR=3.747,95%CI 1.228~11.430)、害怕疼痛(OR=2.330,95%CI 1.650~3.290)、社会支持水平(OR=0.263,95%CI 0.091~0.759)、无人指导康复训练(OR=6.679,95%CI 4.417~10.100)、出行不方便(OR=3.501,95%CI 2.417~5.071)是影响其康复训练依从性的相关因素(P<0.05)。结论老年TKA患者术后家庭康复训练依从性普遍不高,婚姻状况、康复训练重要性认同感、害怕疼痛、社会支持水平、无人指导康复训练、出行不方便是影响其康复训练依从性的相关因素。

髋关节镜技术应用于人工全髋关节置换术后关节内疑似感染的病例报告

目的:应用髋关节镜技术诊治人工全髋关节置换术后关节内疑似感染的病例。方法:股骨侧假体周围感染灶清除处理后,重新消毒铺巾,再应用髋关节镜探查人工全髋关节置换术后的关节腔,并放置引流管。结果:经髋关节镜观察到人工全髋关节置换术后关节腔内大量疤痕增生,无明显感染迹象。结论:髋关节镜技术对于早期诊断人工全髋关节置换术后关节腔内是否感染具有重要意义,值得进一步推广。

桡骨小头置换术后肘关节僵硬微创全关节镜下松解1例

桡骨小头置换术是治疗桡骨小头粉碎性骨折较为常见的术式,但该术式有时出现肱桡关节填塞,导致肘关节屈伸功能障碍,影响患者满意度^([1])。以往此类患者采用传统大切口进行开放松解,损伤大,感染概率高,术后易再次黏连。鉴于此,笔者采用微创全关节镜下松解1例,疗效满意。1病例报告1.1一般资料患者,男,28岁,主因"右肘关节术后僵硬约3个月"入院。3个月前因训练时高处坠落,伤及右肘部及腕部。在就近医院行X线片及CT检查。

骨碎补总黄酮对膝骨关节炎模型兔HIF-1α和VEGF表达的影响

目的:研究骨碎补总黄酮对膝骨关节炎(KOA)模型兔滑膜组织及软骨组织/细胞中低氧诱导因子1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:将30只家兔随机分为正常组、模型组和骨碎补总黄酮低、中、高剂量组(30、60、100 mg/kg),每组6只。除正常组外,其余各组家兔均切开左膝关节,剪断内侧副韧带和前后交叉韧带,完整切除内侧半月板,复制KOA模型。术后5周,各给药组家兔灌胃相应剂量的骨碎补总黄酮,正常组和模型组家兔灌胃等容生理盐水,每天3次,连续14 d。末次给药后,采用酶联免疫吸附测定法检测家兔滑膜组织中HIF-1α和VEGF的含量,并考察两者的相关性;以苏木精-伊红染色观察家兔滑膜组织的形态学变化;采用免疫组化法检测家兔软骨组织中HIF-1α和VEGF阳性表达的情况;采用蛋白质印迹法检测家兔软骨细胞中HIF-1α和VEGF蛋白表达的情况。结果:与正常组比较,模型组家兔滑膜组织中HIF-1α和VEGF的含量均显著升高,差异均有统计学意义(P<0.01);滑膜表层出现裂隙,细胞层次不清晰且排列无序;软骨组织中HIF-1α和VEGF阳性细胞数增加,软骨细胞中HIF-1α和VEGF蛋白的相对表达量均显著升高,差异均有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,骨碎补总黄酮各剂量组家兔滑膜组织中HIF-1α和VEGF的含量均显著下降,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01),且两者呈正相关(r=0.923,P<0.01);滑膜表面裂隙减少,细胞排列较为均匀,损伤程度减轻;软骨组织中HIF-1α和VEGF阳性细胞数减少,软骨细胞中HIF-1α和VEGF蛋白的相对表达量均显著下降,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:骨碎补总黄酮可减轻KOA模型兔滑膜及软骨的损伤程度,这种作用可能与下调滑膜组织及软骨组织/细胞中HIF-1α和VEGF的表达有关。

玻璃酸钠联合复方倍他米松对比玻璃酸钠治疗膝关节骨性关节炎疗效的Meta分析

目的:系统评价玻璃酸钠联合复方倍他米松对比玻璃酸钠治疗膝关节骨性关节炎(KOA)的疗效,为临床用药提供循证参考。方法:计算机检索Cochrane图书馆、PubMed、Embase、Web of Science、中国知网数据库、万方数据库、维普数据库、百度学术数据库,收集玻璃酸钠联合复方倍他米松(观察组)对比玻璃酸钠(对照组)治疗KOA的随机对照试验(RCT)。筛选文献、提取资料后采用Jadad量表对纳入文献质量进行评价,采用Rev Man 5.3软件进行Meta分析。结果:共纳入24项RCT,共计2 929例患者。Meta分析结果显示,观察组患者总有效率[OR=5.33,95%CI(3.85,7.38),P<0.000 01]、美国特种外科医院膝关节评分[SMD=1.63,95%CI(1.32,1.93),P<0.000 01]、膝关节功能评分[SMD=1.22,95%CI(0.84,1.59),P<0.000 01]均显著高于对照组,视觉模拟评分[SMD=-1.44,95%CI(-1.76,-1.11),P<0.000 01]显著低于对照组。结论:玻璃酸钠联合复方倍他米松治疗KOA的疗效显著优于单用玻璃酸钠,且能显著改善膝关节功能。

膝骨关节炎患者血清IL-2、IL-6与血管内皮生长因子的相关性

目的探讨膝骨关节炎患者血清炎性因子与血管形成相关因子(VEGF)的关系。方法选择2015年1月至2017年1月南方医科大学附属南海医院关节外科收治的36例膝骨关节炎患者作为观察组,其中Kellgren-LawrenceⅡ级13例、Ⅲ级14例、Ⅳ级9例,另选择同期体检健康者36例作为对照组,检测并比较两组受试者的血清白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)和VEGF水平,采用Sperman相关性分析血清IL-2、IL-6与VEGF的相关性。结果观察组和对照组受试者的血清IL-2[(3.47±0.85)μg/L vs(0.96±0.56)μg/L]、IL-6[(223.78±26.54)ng/L vs(117.02±14.37)ng/L]、VEGF[(225.16±30.96)ng/L vs(136.71±20.18)ng/L]水平比较,观察组明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);观察组患者中,Ⅲ级患者的血清IL-2、IL-6和VEGF水平明显高于Ⅱ级,Ⅳ级患者的血清IL-2、IL-6和VEGF水平明显高于Ⅲ级,差异均有统计学意义(P<0.05);Sperman相关性分析结果显示,膝骨关节炎患者血清IL-2和IL-6与VEGF呈显著正相关(r=0.386、0.369,P<0.05)。结论炎性因子IL-2、IL-6可能参与了膝骨关节炎的发生和发展,而且与血管内皮因子之间可能存在一定的关系,进而影响新生血管形成。

不同入路人工全髋关节置换术对患者术后恢复的影响

目的探讨人工全髋关节置换术(THA)后外侧入路(PLA)和直接前方入路(DAA)的安全性及对患者术后恢复的影响。方法选取经PLA行THA的患者145例(PLA组),再选取同期经DAA行THA的患者153例(DAA组)。比较2组围术期指标、髋臼假体影像学结果、并发症及术后Harris评分等。结果与PLA组相比,DAA组手术时间更长(P<0.05),而术中出血量、切口长度、住院时间及住院费用均更优(P<0.05)。术后1 d,2组髋臼前倾角、外展角的角度及安全率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。2组并发症总发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。DAA组术后6个月Harris评分高于PLA组(P<0.05),而2组术前及术后1年Harris评分比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论与PLA比较,经DAA行THA具有创伤小、美观度高、费用低的优点,且安全性较好,短期内对THA患者术后恢复的促进作用更显著。

应用微信公众号平台标准化全髋关节置换延续护理的研究

目的:探讨微信公众号平台标准化全髋关节置换延续护理效果.方法:选取海南医学院第一附属医院关节创伤外科2017年6月至2018年10月收治的全髋关节置换患者120例,计算机随机分成对照组与观察组,每组60例.对照组患者接受出院延续性护理,观察组患者接受微信公众号平台标准化全髋关节置换延续护理.比较两组患者髋关节功能(Harris)评分、康复效果按时维护及并发症情况.结果:出院护理前两组患者Harris评分比较差异无统计学意义(P>0.05),出院护理后30d观察组患者Harris评分显著高于对照组(P<0.05).观察组患者康复有效率显著高于对照组(P<0.05).观察组患者完全遵医行为率显著高于对照组(P<0.05).观察组患者按时维护率显著高于对照组(P<0.05),并发症发生率显著低于对照组(P<0.05).结论:互联网微信公众号平台标准化全髋关节置换延续护理是提高出院患者认知程度、改善护患关系、提高护理质量、减少疼痛及并发症的有效方法,可推荐使用.

全髋关节置换治疗侏儒症合并双侧髋关节发育不良一例

对海南医学院第一附属医院关节外科2019年9月收治的1例侏儒症合并髋关节发育不良的女性患者的临床资料进行分析,总结治疗过程中的经验并结合目前国内外最新文献,分析目前最合理的侏儒症合并髋关节发育不良的临床诊疗方法。本例患者术后下肢功能得到改善,术后恢复效果满意,治疗方案有效。全髋关节置换是治疗侏儒症合并髋关节发育不良的有效术式,瓦格纳型生物型股骨假体(SL-Cone)可以获得较为满意的近期临床效果。

骨蜡减少全膝关节置换术术后失血的相关研究

目的评估骨蜡在减少全膝关节置换术患者术后失血量的有效性。方法回顾性分析佛山市南海区人民医院关节外科、海南医学院第一附属医院关节创伤外科、新疆自治区中医院关节外科2017年3月至2019年6月行单侧全膝关节置换术中应用骨蜡止血的50例患者(骨蜡组)和未使用骨蜡治疗的50例患者(对照组)的临床资料。比较两组患者术中失血量、术后引流量、隐形失血量、显性失血量、总失血量、输血比例、临床治疗效果(膝关节HSS评分)及术后并发症。结果两组患者的年龄、身体质量指数(BMI)、术前血红蛋白(Hb)、红细胞压积(Hct)、血小板(PLT)、美国特种外科医院膝关节评分(HSS评分)、手术时间、术中止血带时间、术中失血量比较差异均无统计学意义(P>0.05);骨蜡组患者术后24 h Hb水平下降(1.6±0.9)g/dL,明显少于对照组的(2.1±1.1)g/dL,而术后72 h Hb水平下降(2.7±1.1)g/dL,也明显少于对照组的(3.6±1.2)g/dL,差异均有统计学意义(P<0.05);骨蜡组患者术后72 h的总出血量为987.9 mL,明显少于对照组的1183.5 mL,差异有统计学意义(P<0.05);术后随访3个月,骨蜡组患者没有发生与使用骨蜡相关的不良事件。结论全膝关节置换术中应用骨蜡可以有效减少术后失血量,能维持较高的Hb水平,而且未增加术后并发症的风险。

非全程应用止血带对关节镜联合胫骨高位截骨术围手术期结果的影响

目的探讨关节镜联合胫骨高位截骨术中非全程使用止血带对临床效果的影响。方法回顾性分析2018年6月至2022年1月于海南医学院第一附属医院行关节镜联合胫骨高位截骨术患者资料,根据纳入与排除标准,纳入研究72例,分为全程使用止血带组38例,仅在关节镜探查阶段使用止血带组34例,比较两组患者的围手术期指标。结果两组患者手术时间、住院时间等无显著性差异(P>0.05);在术后血红蛋白、红细胞压积、引流量、失血量及输血例数等方面无显著性差异(P>0.05);非全程使用止血带组术后早期疼痛评分较低且术后第3天活动度更好(P<0.05);非全程使用止血带组大腿疼痛发生率更低(P<0.05);其他并发症两组患者无显著性差异(P>0.05)。结论胫骨高位截骨术中仅在关节镜探查阶段使用止血带不会增加术后失血量、手术时间及住院时间;且可以减轻术后早期膝关节及止血带部位疼痛,有利于术后早期膝关节功能锻炼,不会增加并发症发生率。

后外侧小切口全髋关节置换治疗中老年移位型股骨颈骨折临床疗效观察

回顾性观察分析中老年人移位型股骨颈骨折经后外侧小切口全髋关节置换术治疗后的临床效果。方法 收集2019年1月至2021年12月因单侧新发股骨颈骨折在我院骨科住院行手术治疗的中老年患者,共计115例,进行回顾性分析。所有病例均行全髋人工关节置换。按照病例手术部位的切口大小进行分组,分为小切口组和传统切口组,分别为37例和78例。比较两组病例基线数据、手术时间、术中出血量、髋臼假体位置、术后Harris评分及术后功能的优良率等观察指标。结果 两组病例在基线数据、术中出血量、Harris评分及功能优良率上均无明显统计学差异( P>0. 05)。两组病例在手术时间、髋臼假体位置上均存在明显统计学差异(P<0. 05)。结论 对于后外侧入路全髋人工关节置换技术而言,无论选择小切口或者传统切口治疗中老年移位型股骨颈骨折,两者临床疗效相当。建议术者根据自己的习惯和手术熟练程度进行选择,但小切口全髋关节置换术对术者技术水平要求较高,需要一定的学习曲线。

髓芯减压联合富血小板血浆对兔激素性股骨头坏死的疗效及对金属蛋白酶/基质金属蛋白酶组织抑制剂系统的影响

目的探讨髓芯减压联合富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)对激素性股骨头坏死模型兔的疗效及对其组织基质金属蛋白酶/基质金属蛋白酶组织抑制剂(matrix metalloproteinase/tissue inhibitor of metalloproteinase,MMP/TIMP)的影响。方法将42只实验兔随机分为单纯减压组、联合组和对照三组各14只,对单纯减压组及联合组建立双侧激素性股骨头(steroid induced femoral head,SANFH)坏死模型并对联合组制备PRP,造模方式:静脉注射10μg/kg大肠杆菌内毒素(lipopolysaccharide,LPS)2次,注射间隔为24 h,在第2次注射LPS后,臀肌注射醋酸泼尼松龙20 mg/kg,注射3次,每次注射间隔为24 h;而对照组则同期仅在模型兔臀肌位置注入与醋酸泼尼松龙等量生理盐水。SANFH动物模型修复方法:减压组单纯接收髓芯减压,联合组接收髓芯减压联合PRP移植,对照组不予处置。减压组、联合组于术后2、6、10周拍摄双侧髋关节X线片,并进行Lane-Sandhu X线评分,计算新生骨面积百分比。于第10周拍片完成后抽取三组模型兔静脉血,然后同时处死三组模型兔,取出双侧股骨头,右侧股骨头骨组织检测MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2的mRNA表达水平,左侧股骨头统一观察病理学变化。结果术后减压组MMP-2和MMP-9均显著高于联合组和对照组,而TIMP-1和TIMP-2则低于联合组和对照组,差异有显著性(P<0.05);而减压组的IL-6和骨陷窝空缺率也显著高于联合组和对照组,同时联合组上述两项指标也高于对照组(P<0.05);X线评分方面,术后6周和10周,联合组均高于减压组,差异有显著性(P<0.05);而新生骨面积百分比上,术后2周、6周、10周联合组均高于减压组,差异有显著性(P<0.05)。减压组骨头骨组织切片HE染色可见大量不连续的骨碎片及骨髓坏死,骨小梁有断裂征象;联合组仅轻度炎性细胞浸润,但已可见成熟骨小梁及骨髓组织。结论髓芯减压联合PRP在治疗SANFH模型兔中能够对MMP/TIMP起到积极的正性作用,能有效促进组织修复,其机制值得更深入的研究。

淫羊藿苷干预磷酸钙骨水泥/骨髓间充质干细胞复合体修复兔股骨缺损

背景:已有研究显示磷酸钙骨水泥与骨髓间充质干细胞复合物有助于修复软骨缺损。淫羊藿苷是一类黄酮类物质,其对细胞增殖和分化有明显促进作用。目的:观察淫羊藿苷干预下磷酸钙骨水泥/骨髓间充质干细胞复合体修复兔股骨缺损的效果。方法:取30只新西兰大白兔(海南医学院实验动物中心提供),随机分为3组并制作右侧股骨末端骨缺损模型:空白组股骨缺损不填充材料,对照组骨缺损处植入成骨诱导培养的骨髓间充质干细胞与磷酸钙骨水泥复合物,实验组股骨缺损处植入淫羊藿苷干预且经成骨诱导培养的骨髓间充质干细胞与磷酸钙骨水泥复合物。术后4,8,12周进行骨缺损部位影像学、生物力学分析。动物实验获得海南医学院第一附属医院伦理委员会批准。结果与结论:①术后4,8,12周Micro-CT显示,实验组成骨速度明显优于空白组和对照组;术后第12周,对照组中磷酸钙骨水泥有部分被新骨代替,骨痂未完全包绕,实验组股骨缺损区已完全有新骨生成,植入的磷酸钙骨水泥已完全降解;实验组和对照组术后12周的骨小梁模式因子、骨体积分数、骨小梁数量均明显高于空白组(P<0.05),并且实验组各项指标优于对照组(P<0.05);②实验组术后4,8,12周的骨密度高于对照组、空白组(P<0.05);③实验组术后12周的骨标本抗弯曲能力的最大应力、最大负荷力和破坏能量明显高于对照组、空白组(P<0.05);④结果表明,淫羊藿苷干预后的骨髓间充质干细胞/磷酸钙骨水泥复合物能有效促进新骨形成,加快骨修复。

珊瑚羟基磷灰石负载含BMP-2纳米缓释微球体系促进人间充质干细胞骨形成的研究

目的探讨珊瑚羟基磷灰石负载含骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)纳米缓释微球体系在促进人间充质干细胞(human mesenchymal stem cells,hMSCs)骨形成中的作用。方法从骨移植患者中收集hMSCs,分离培养后使用BMP-2纳米微球作为载体,装载到珊瑚羟基磷灰石(coral hydroxyapatite,CHA)支架上。将CHA-BMP-2-hMSCs与CHA-hMSCs分别植入两组小鼠的L4和L5横向软组织中,10周后检测小鼠碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,通过Western blot检测Runx2蛋白与骨桥蛋白表达水平,通过显微镜观察骨质生长情况。结果 CHA-BMP-2-hMSCs小鼠的支架上骨组织覆盖面积显著大于CHA-hMSCs小鼠,ALP活性显著高于非缓释组小鼠,骨钙素、Runx2蛋白与骨桥蛋白表达水平高于非缓释组小鼠。结论 CHA-BMP-2-hMSCs缓释系统有利于在较长时间内诱导骨形成。

RADA-16自组装多肽的合成表征及负载BMP-2的细胞相容性研究

目的将RADA-16、珊瑚和BMP-2组成复合材料体系,研究其超微结构及与BMSCs细胞相容性。方法将RADA-16溶解于10%无菌蔗糖溶液中,浓度为1%(10 mg/mL,m/v),将RADA-16再用等体积细胞培养基DMEM/F12溶液触发多肽自组装,浸润珊瑚,进行电镜扫描。等比例混合RADA-16与BMP-2溶液后,把珊瑚在混合液中浸没,用相同体积的DMEM/F12培养基触发自组装的发生,扫描电镜检测。分离培养兔BMSCs,细胞活性染色观察细胞相容性。结果 RADA-16自组装能够形成凝胶,在50倍电镜下观察珊瑚呈多孔状结构,大小均匀,孔隙在200~500μm范围内,且孔隙紧密排布;130倍扫描电镜下观察,RADA-16自组装多肽凝胶均匀附着于珊瑚孔隙中;1 000倍扫描电镜显示,RADA-16自组装形成片层与网状结构,其直径从几微米到几十微米不等;10 000扫描电镜显示,在珊瑚孔隙中BMP-2黏附于RADA-16,成功合成复合材料体系(RADA-16、珊瑚、BMP-2),BMSCs培养过程中,实验1组(RADA-16、珊瑚、BMP-2)、实验2组(RADA-16、珊瑚)与对照组(珊瑚)中BMSCs都未见明显死亡细胞,差异无统计学意义(P>0.05)。结论多肽RADA-16在特定的条件下可以自组装复合材料体系(自组装多肽、珊瑚、BMP-2),与BMSCs有良好的相容性,可以作为骨修复组织工程的生物支架材料。

功能性纳米自组装多肽KLPP凝胶修复软骨缺损的实验研究

目的探讨功能性纳米自组装多肽KLPP凝胶对关节软骨缺损的修复作用。方法培养人骨髓间充质干细胞(BMSCs),将BMSCs分为BMSCs-KLD-12组(BMSCs与KLD-12凝胶共培养)和BMSCs-KLPP组(BMSCs与KLPP凝胶共培养),分别行软骨诱导分化培养,MTT法检测细胞的增殖活性。将人软骨组织分为软骨-KLPP组(制作软骨缺损区并填充KLPP凝胶进行培养)、软骨-KLD-12组(制作软骨缺损区并填充KLD-12凝胶进行培养)、软骨组(仅制作软骨缺损区)。Calcein-AM/PI双染法检测BMSCsKLD-12组及BMSCs-KLPP组的细胞毒性。培养49 d后,收集软骨组、软骨-KLD-12组、软骨-KLPP组的软骨组织进行切片,并行阿尔新蓝染色。Western blot法检测各组中Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、Ⅱ型胶原(Col-Ⅱ)、Ⅹ型胶原(Col-Ⅹ)的表达。结果与BMSCs-KLD-12组比较,BMSCs-KLPP组培养1 d、3 d、7 d的细胞增殖率均明显增加(P<0.05),且Col-Ⅰ、Col-Ⅱ、Col-Ⅹ的相对表达水平明显增加(P<0.05)。Calcein-AM/PI双染色检测表明BMSCs-KLPP组和BMSCs-KLD-12组细胞活性基本一致,KLPP凝胶无细胞毒性。与软骨-KLD-12组比较,软骨-KLPP组软骨修复作用更明显(P<0.05),且Col-Ⅰ、Col-Ⅱ、Col-Ⅹ的相对表达水平更高(P<0.05)。结论功能性纳米自组装多肽KLPP凝胶对关节软骨缺损具有良好的修复作用。