HIV感染者的血液学改变及其临床意义

目的探讨HIV感染者的血液学改变及其临床意义。方法对HIV感染者进行治疗前的血常规及骨髓细胞形态学检查。结果HIV感染者外周血细胞减少,白细胞分类表现出淋巴细胞减少、中性粒细胞核左移,成熟红细胞缗钱样排列。骨髓细胞形态学有粒系在晚幼粒阶段成熟障碍;单核细胞、浆细胞和组织细胞增多等明显的异常。结论HIV感染者的异常血液学改变,对于早期诊断HIV感染者,提供了一条有用的线索。

为提升IPTR患者血小板输注后CCI值建立分级规避HLA抗体对应抗原方法及HLAMatchmaker的应用研究

目的:建立分级规避HLA抗体MFI阈值对应抗原方法,联合应用HLAMatchmaker表位计算法,选择供患者表位最小错配评分值,评估两种方法为免疫性血小板输注无效(Immune platelet transfusion refractoriness,IPTR)患者选择HLA相容性血小板供者,在提升血小板输注后校正增加值(CCI)的应用价值。方法:采用SPRCA法完成51例IPTR患者的7807次血小板交叉配型实验,判断其免疫反应阴/阳性结果。采用Luminex单抗原流式微珠法检测患者的HLA-I类抗体,获得不同特异性抗体对应HLA-I类抗原MFI值,并将其分组及分级,强阳性组(MFI>4000,1级)、中阳性组(1000中阳性组>弱阳性组)。强阳性和中阳性组与阴性对照组之间的SPRCA实验免疫反应阳性结果检出数存在统计学差异(P<0.001),弱阳性位组和阴性对照组之间的SPRCA实验免疫反应阳性结果检出数无统计学差异(P>0.05)。设置强阳性组为相应特异性HLA位点对应抗原1级规避阈值,中阳性组为2级规避阈值,弱阳性组为3级规避阈值,在供者血小板紧缺情况下,可以不需要规避弱阳性组。规避1和2级HLA-I类抗体对应供者抗原及选择HLAMatchmaker表位错配评分数≤7血小板供者策略,24 h内CCI值均>4.5×109/L,均可获得临床血小板输注有效。结论:在为IPTR患者选择HLA-I类相容性供者时,分级规避HLA-I类抗体对应供者抗原,综合选择供受者HLAMatchmaker表位错配评分数≤7,经血小板交叉配型实验确认为阴性结果的供者选择策略,对提升IPTR患者血小板计数具有一定实际应用价值。

原发性血小板增多症按危险度分层治疗及效果

目的 探讨原发性血小板增多症 (ET)按照血栓形成危险因素进行分层治疗的临床应用。方法 回顾性分析 10例ET患者按照血栓形成危险因素进行分层治疗的情况。结果 8例为高危 ,其中 5例用细胞毒药物治疗 ,2例合用血小板分离术清除血小板 ,2例合用干扰素。 1例中危 ,用细胞毒药物治疗。 1例低危患者单用干扰素治疗。结论 以上病例中 8例符合分层治疗原则 ,2例不符合。在分层治疗原则中灵活掌握各种治疗方法仍有待进一步实践 。

K562/AS2细胞株对三氧化二砷耐药机制的初步研究

目的:研究K562/AS2细胞株对三氧化二砷(ATO)耐药的机制。方法:采用MTT法检测细胞毒性。细胞表面P-糖蛋白(P-gp)、细胞内柔红霉素(DNR)浓度采用流式细胞术检测。DNA聚合酶、拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)、多药耐药基因1(mdr1)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)以及肺耐药相关蛋白基因(lrp)表达水平的检测采用RT-PCR法。结果:K562和K562/AS2细胞表面P-gp任意荧光强度、K562/AS2细胞内DNR浓度均无显著差异(P>0.05)。K562/AS2细胞株MRP1和TopoⅡ表达明显高于K562细胞(P<0.05),DNA多聚酶,mdr1和lrp表达与敏感细胞株K562细胞相同(P>0.05)。结论:ATO耐药细胞K562/AS2高表达MRP1,并产生低倍数的多药耐药。K562/AS2细胞TopoⅡ基因表达增高,其意义有待进一步阐明。

硼替佐米为主化疗方案治疗初治与复发难治多发性骨髓瘤近期疗效分析

目的:分析硼替佐米为主化疗方案治疗初治与复发难治多发性骨髓瘤(MM)患者的临床疗效和不良反应。方法:初治MM患者11例,复发、难治MM患者7例均采用VD方案化疗:硼替佐米1.0～1.3mg/m2第1、4、8和11天快速静脉注射,地塞米松20mg第1～4天(7例复发难治予地塞米松40mg)静脉滴注,3周为1疗程,所有患者分别接受1～6个疗程的治疗,继以沙利度胺100mg/d口服维持治疗,另有2例初治患者联用脂质体阿霉素60mg,d 1。根据EBMT标准观察疗效,按NCI-CTCAE(第3版)标准判断不良反应。结果:平均随访8(2～15)个月,11例初治患者对治疗均有反应,其中CR/nCR 5例(45%),PR 5例(45%),MR 1例(10%)。7例复发难治患者中,CR 1例(13%),PR 2例(29%),MR 2例(29%),PD 2例(29%),初治组总体缓解率(CR/nCR加PR)高于复发难治组,P<0.05。不良反应主要表现为乏力、胃肠道症状和周围神经病变。初治组3/11例出现腹胀、腹泻,5/11例发生Ⅰ～Ⅱ级周围神经病变;复发难治组4/7例出现腹胀(1例伴腹痛)、腹泻,3/7例发生Ⅱ级周围神经病变。结论:硼替佐米联合地塞米松与沙利度胺治疗初治MM起效快,总体反应率及完全缓解率高;该方案用于复发、难治性MM亦有较高治疗反应率,但疗效逊于初治患者,其远期疗效有待进一步观察评价。不良反应程度轻微,可控制和预测,总体耐受性良好。

亚砷酸联合全反式维甲酸、化疗治疗急性早幼粒细胞白血病

目的 :观察总结三氧化二坤 (As2 O3 )、全反式维甲酸 (ATRA)和化疗联合治疗急性早幼粒细胞白血病(APL)的疗效和副作用。方法 :对 5 2例初治或复发APL患者分别采用ATRA、化疗和As2 O3 诱导缓解 ,完全缓解(CR)后采用化疗和As2 O3 序贯维持治疗。结果 :3 3例初治患者CR率 10 0 % ,19例复发患者CR率 78 95 % ,3年生存率 81 82 %。结论 :APL患者CR后采用As2 O3 与化疗序贯性维持治疗疗效好 ,长期生存率高。复发患者As2

混合系白血病基因重排的检测方法及其临床意义

为了研究混合系白血病(MLL)基因重排在急性白血病(AL)中的发生率、融合基因类型及其临床意义,用荧光原位杂交技术检测60例急性白血病(AL)患者MLL基因重排,对于MLL基因重排阳性的患者,用巢式RT-PCR方法检测MLL基因重排形成的6种常见融合基因类型。结果表明:7例AL患者有MLL基因重排,发生率为11.67%,其中2例为急性髓细胞白血病M5(AML-M5),融合基因均为MLL/AF9;另5例为B细胞系急性淋巴细胞白血病(B-ALL),其中2例融合基因为MLL/ENL,1例MLL/AF4,2例未扩增出融合基因产物。结论:荧光原位杂交技术是检测ALMLL基因易位重排的快速、特异、灵敏的方法,巢式RT-PCR是检测MLL基因重排产生的融合基因类型的简便可行的方法;MLL基因重排的检测对急性白血病预后判断和治疗方案的选择具有重要意义。

三氧化二砷耐药白血病细胞株K562/AS2的建立及其与多药耐药的关系

目的 :建立三氧化二砷 (As2 O3 )耐药白血病细胞株 ,用于研究其耐药机制。初步探讨该细胞系与多药耐药的关系。方法 :As2 O3 耐药白血病细胞株的建立通过逐步增加药物浓度方法。细胞毒实验采用MTT法 ,细胞周期测定采用碘化丙啶荧光染色法 ,细胞表面P -糖蛋白 (P -gp)、细胞内柔红霉素 (DNR)浓度、以及细胞免疫表型测定采用流式细胞术测定。结果 :As2 O3 耐药白血病细胞株K5 6 2 /AS2的细胞倍增时间和细胞周期与敏感细胞株K5 6 2相似。K5 6 2 /AS2对As2 O3 、DNR、足叶乙甙 (VP16 )和阿糖胞苷 (Ara -C)的耐药倍数分别为 (7 4、2 9、3 8和 1 1倍 )。多药耐药细胞K5 6 2 /A0 2对As2 O3 、DNR、VP16和Ara -C的耐药倍数分别为 (0 8、94、2 5和 0 9倍 )。K5 6 2细胞与K5 6 2 /AS2细胞之间的表面P -gp和细胞内DNR荧光强度无明显差异。结论 :建立一株对临床可获得药物浓度 (2μmol/L)的As2 O3 产生耐药的白血病细胞K5 6 2 /AS2。K5 6 2 /AS2对As2 O3 的耐药倍数是敏感株K5 6 2的 7 4倍。K5 6 2 /AS2对DNR和VP16部分耐药 ,其机制与多药耐药基因 1(mdr1)表达产物P

儿童特发性血小板减少性紫癜外周血Th细胞IFN-γ、IL-4表达分析

目的研究儿童特发性血小板减少性紫癜(ITP)体内Th1/Th2失衡及其与疾病关系。方法采用流式细胞仪对53例ITP患儿(急性32例,慢性21例)治疗前后和28例健康者外周血CD3+、CD8-细胞内IFN-γ和IL-4表达水平进行检测分析。结果急性ITP患儿起病时Th细胞中表达IFN-γ(Th1)阳性百分比高于正常人(P<0.05),而慢性ITP患儿Th1细胞较对照组显著降低(P<0.01),治疗缓解后急性ITP患儿Th1细胞与对照组无明显差别(P>0.05),慢性ITP患儿Th1细胞比例增高(P<0.05)。结论儿童急、慢性ITP呈现不同的Th1/Th2极化失衡,与疾病的活动、缓解有一定的关系,提示Th1/Th2极化在疾病发生中可能起了重要作用。

骨髓瘤细胞来源外泌体对NK细胞表面活化受体的影响

目的:考察多发性骨髓瘤细胞系来源外泌体对NK细胞表面活化受体的影响,从外泌体水平探讨骨髓瘤患者中NK细胞功能缺陷的机制。方法:采用超速离心法提取多发性骨髓瘤细胞系RPMI 8226、U266培养上清液中外泌体,并采用电子显微镜鉴定外泌体的大小;提取人原代NK细胞,将40μg/ml外泌体与NK细胞共培养后,于0、1、4和24 h用流式细胞术检测NK细胞表面活化受体NKp30、NKG2D和NKp46的表达。结果:在电子显微镜下外泌体呈现囊泡状,大小30-100 nm;骨髓瘤细胞来源外泌体与NK细胞共培养后,NK细胞表面活化受体表达均有不同程度下降。结论:多发性骨髓瘤来源外泌体可以抑制NK细胞表面活化受体的表达。

不同剂量沙利度胺联合化疗治疗多发性骨髓瘤24例观察

目的比较标准剂量沙利度胺和小剂量沙利度胺联合MP方案治疗多发性骨髓瘤的疗效和副作用。方法24例多发性骨髓瘤患者随机分成两组,均给予MP方案化疗,马法兰4mg/m2·d,口服,d1-7;强的松40mg/m2·d,口服,d1-7。每4周1次共6次。标准剂量组同时给予沙利度胺口服,从100mg/d起,晚上顿服,逐渐增加至400mg/d,持续至6个MP疗程;小剂量组沙利度胺以100mg/d开始口服,每晚顿服,持续至6个MP疗程。定期测定血常规、M蛋白、骨髓浆细胞数、肾功能、β2-微球蛋白和乳氢酸脱氢酶、扁骨X线片,观察常见不良反应。所得数据应用统计软件SPSS10.0分析。结果标准剂量组完全缓解率25%和总有效率83.3%,小剂量组完全缓解率16.7%和总有效率75%,两组数据无统计学意义(P>0.05),标准剂量组的便秘、恶心、腹胀、口鼻干燥、头昏、头痛、嗜睡、乏力等不良反应均高于小剂量组,总不良发应发生率高于小剂量组(P<0.05)。结论小剂量沙利度胺联合MP方案治疗MM与标准剂量沙利度案联合MP疗效相近,但不良反应少,更适合长期应用。

白血病MLL基因重排及其融合基因检测的临床意义

目的:研究白血病MLL(mixed lineage leukemia)基因重排及其融合基因的检测及其临床意义。方法:采用荧光原位杂交(FISH)检测70例白血病患者MLL基因重排,对于MLL基因重排的患者,用巢式RT-PCR方法检测常见6种MLL融合基因类型。结果:9例白血病有MLL基因重排,发生率为12.86,5例B细胞系急性淋巴细胞白血病(B-ALL),其中融合基因2例为MLL/ENL,1例MLL/AF4,2例未扩出融合基因产物;3例为急性髓细胞白血病M5(AML-M5),其中2例融合基因均为MLL/AF9,1例未扩出融合基因产物;1例为幼年型粒单核细胞白血病(JMML),其融合基因为MLL/ENL。结论:巢式RT-PCR是检测MLL基因重排及其融合基因类型简便有效的方法,MLL基因重排见于B-ALL、AML-M5、JMML,预后差。

血浆置换联合化疗治疗噬血细胞综合征五例疗效观察

目的观察血浆置换联合化疗治疗噬血细胞综合征的临床疗效。方法回顾性分析本院采用血浆置换联合化疗治疗5例噬血细胞综合征患者的临床资料。结果 5例患者中4例治疗后相关指标好转,生存期超过6个月,1例无效,2个月后死亡,平均生存期6.1个月。结论血浆置换联合化疗的方法对控制噬血细胞综合征的病情、延长患者的生存期有一定效果。

阻断SDF-1/CXCR4轴对多发性骨髓瘤细胞株耐药性的影响

目的探讨阻断SDF-1/CXCR4轴后多发性骨髓瘤细胞株耐药性的影响及机制。方法将耐药细胞株RPMI8226/DOX和RPMI8226/LP与骨髓基质细胞共培养,实验组同时加入抗CXCR4抗体12G5,未加入抗体者为对照组,测定培养细胞的上清液中的SDF-1α、IL-6、VEGF浓度。进行细胞-基质粘附试验测定实验组和对照组骨髓瘤细胞与基质细胞的粘附性;MTT比色法测定实验组和对照组对阿霉素或马法兰的敏感性。结果实验组中SDF-1α、IL-6、VEGF浓度均略高于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05)。实验组骨髓瘤细胞对基质细胞粘附率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。药物敏感性检测显示实验组骨髓瘤细胞对阿霉素或马法兰敏感性高于对照组。结论阻断SDF-1/CXCR4轴后可以部分逆转多发性骨髓瘤细胞株对化疗药物的耐药性,其机制与细胞因子无关,可能与下调骨髓瘤细胞与基质细胞的粘附性有关。

免疫固定电泳技术在多发性骨髓瘤单克隆免疫球蛋白检测中的应用

目的探讨应用免疫固定电泳技术检测多发性骨髓瘤单克隆免疫球蛋白(M蛋白)的意义。方法采用琼脂糖凝胶免疫固定电泳技术检测261份临床送检血清和尿液,其中76例为多发性骨髓瘤患者。结果76例多发性骨髓瘤患者血清M蛋白阳性76例,阳性率为100%;尿本周蛋白阳性53例,阳性率为70%。17例血清M蛋白为轻链型患者尿本周蛋白阳性率为94%。185例非多发性骨髓瘤患者均未检出M带。结论免疫固定电泳检测M蛋白的技术对诊断多发性骨髓瘤具有高度的敏感性和特异性,是M蛋白定性和分型的首选方法。

联合应用化疗药物对三氧化二砷耐药白血病细胞的毒性实验研究

目的:探讨化疗药物联合应用对三氧化二砷(As2O3)耐药白血病细胞(K562/AS2)的毒性作用。方法:细胞毒实验采用MTT法,二药合用时细胞毒性作用采用ChouTalalay联合指数法分析,细胞表面P糖蛋白(Pgp)和细胞内柔红霉素(DNR)浓度测定采用流式细胞术测定。结果:K562/AS2细胞对三氧化二砷、柔红霉素、鬼臼乙叉苷(VP16)、三尖杉酯碱(H)、米托蒽醌(NVT)和阿糖胞苷(AraC)的耐药倍数分别为7.4、2.9、3.8、3.6、2.8和1.1。K562细胞和K562/AS2细胞的细胞表面Pgp或细胞内任意荧光强度无显著的统计学意义(P>0.05)。As2O3与DNR、VP16、H或NVT联合应用时,对K562、K562/AS2和Pgp表达的白血病细胞(K562/A02)细胞的联合指数均大于1。异搏定与DNR联合应用时,对K562和K562/AS2细胞的联合指数均大于1,但是对K562/A02细胞的联合指数均小于1。结论:K562/AS2细胞对As2O3、DNR、VP16和NVT耐药,其机制与Pgp表达无关。异搏定联合应用DNR可以逆转K562/A02对DNR的耐药性,不能逆转DNR对As2O3耐药细胞的耐药性。As2O3与DN、VP16、H和NVT联合应用时,对K562、K562/AS2和K562/A02细胞的毒性均为拮抗作用。

白细胞单采术治疗高白细胞急性白血病26例临床观察

目的探讨白细胞单采术治疗高白细胞急性白血病的疗效。方法回顾性分析本院收治的26例高白细胞急性白血病患者的临床资料,观察化疗前行白细胞单采术治疗的效果。结果 26例患者中,25例临床症状缓解,外周血白细胞数显著下降,有效率达96.1%。结论白细胞单采术能迅速降低患者外周血中白血病细胞数目,减少体内白血病细胞负荷,有效防止肿瘤溶解综合征的发生,是治疗高白细胞急性白血病的有效方法。

无关供者55例外周血造血干细胞动员和采集护理

目的:探讨外周血造血干细胞(PBSC)动员和采集对无血缘关系造血干细胞供者的影响和相关的护理措施。方法:对55例PBSC无关供者采用重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)皮下注射3~5 d,使用CS-3000 p lus型血细胞分离机采集PBSC,在动员和采集过程中给予相应的身心护理。结果:55例供者均顺利完成PBSC动员和采集,不良反应较少而且可预见、可控制,所有供者采集物单个核细胞数(MNC)和CD+34细胞数均达到移植要求。结论:良好的身心护理、充分的技术准备、娴熟的操作技巧以及严密的术中监测,在最大限度减轻供者躯体不适,消除其心理疑虑的同时,保障了PBSC动员和采集顺利完成。

内皮细胞损伤标志物在妊高征患者中的变化

目的 探讨孕妇血浆中内皮细胞损伤标志物内皮素 (ET - 1)、血栓调节蛋白 (TM)、血管性假血友病因子(vWF)水平变化与妊高征 (PIH)发病的关系。方法 应用放射免疫吸附法和酶联免疫吸附法 ,分别测定 6 6例妊高征患者 (轻度 2 0例 ,中度 2 4例 ,重度 2 2例 )和 2 4例正常晚期孕妇 (对照组 )血浆中的ET - 1、TM、vWF水平。结果 PIH各组ET - 1水平明显高于对照组 (P <0 0 1) ,轻度PIH患者TM、vWF水平与对照组比较 ,差异无显著性 (P >0 0 5 ) ,中度PIH患者TM、vWF水平与对照组比较 ,差异有显著性 (P <0 0 5 ) ,重度PIH患者TM、vWF水平与对照组比较 ,差异有非常显著性 (P <0 0 1)。结论 血管内皮细胞损伤是妊高征的重要发病机制。 3个分子标志物水平升高越显著妊高征患者病情就越重 ,检测其水平对妊高征的诊断、观察病情及防止子痫的发生均有意义。